高效液相色譜法測定婦樂糖漿中大黃素與大黃酚含量

1、高效液相色譜法測定婦樂糖漿中大黃素與大黃酚含量【關(guān)鍵詞】婦樂糖漿大黃素大黃酚高效液相色譜法DeterinatinfthententsfEdinandhrysphanlinFuleSyrupbyHPLGuangxiInstitutefrFdandDrugntrl,Nanning,530001,hinaAbstrat：bjetiveTdeterinethententsfedinandhrysphanlinFuleSyrupbyHPL.ethdsTheKrasil18lun2504.6，5asused,thebilephaseasethanl-0.1%phsphriaid(8515),thedete

2、tiveavelengthasat254n，theflrateas1.0lin-1.ResultsThelinearrangesfedinandhrysphanlereat0.0210.53gand0.0190.35grespetively,theaveragereveries(n=9)ere100.9%and101.1%ithRSD2.4%and1.6%respetively.nlusinThisethdissensitiveandaurate.Keyrds：FuleSyrup；Edin；hrysphanl；HPL婦樂糖漿由忍冬藤、大血藤、大黃制等10味藥組成，具有清熱涼血，消腫止痛之功，用

3、于盆腔炎、附件炎、子宮內(nèi)膜炎等引起的帶下、腹痛。由婦樂沖劑改變劑型而成。原劑型質(zhì)量標準簡單，無含量測定項。我們參照有關(guān)文獻1，對方中大黃所含有效成分大黃素和大黃酚的含量進展了試驗研究。1儀器與試藥1.1儀器美國aters2695高效液相色譜儀；2996二極管陣列檢測器；Eper色譜工作站；ILLI-PRA純水處理器。1.2試藥大黃素對照品批號：110756-200110，供含量測定用、大黃酚對照品批號：0796-200005，供含量測定用，對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供，甲醇為色譜純，水為高純水，其它試劑均為分析純。婦樂糖漿：由貴港市冠峰制藥提供。2方法與結(jié)果2.1色譜條件Krasil1

4、8色譜柱2504.6，5。流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液(8515)；柱溫：35；流速為1lin-1，進樣量20l；檢測波長254n；要求理論板數(shù)不低于3000。在此條件下，大黃素、大黃酚與其他組分完全別離。2.2對照品溶液的制備精細稱取大黃素和大黃酚對照品用甲醇配制成含大黃素和大黃酚各3gl-1的混合溶液。2.3供試品溶液的制備取本品1g，精細稱定，置具塞錐形瓶中，參加10%鹽酸溶液乙醇3120l，超聲處理功率400，頻率42kHz3in，再加三氯甲烷20l，加熱回流60in，立即冷卻，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，30l/次

5、，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘渣加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至10l量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。2.4缺大黃陰性對照品溶液按處方及制備工藝制備不含大黃的陰性對照樣品，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。2.5專屬性實驗照上述色譜條件分別精細汲取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液各20l注入色譜儀得到供試品在與大黃素和大黃酚對照品保存時間一樣的位置上有一樣特征的色譜峰，而陰性對照品溶液在此保存時間無色譜峰。如圖13。2.6線性關(guān)系考察2.6.1精細稱取大黃素對照品10.61g，置100l量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。精細汲取貯備液0.5l，置25

6、l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用；再精細汲取貯備液0.3，0.5，1.0，2.0，3.0，5.0l，分別置10l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。2.6.2精細稱取大黃酚對照品9.40g，置100l量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。精細汲取貯備液0.5l，置25l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用；再精細汲取貯備液0.3，0.5，1.0，2.0，3.0，5.0l，分別置10l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。2.6.3分別精細汲取以上對照品溶液各10l，注入液相色譜儀進展測定。以對照品進樣量為橫坐標X，峰面積積分值為縱坐標Y繪制標準曲線，那么回歸方程為：大黃素

7、對照品的回歸方程：Y=3.724106X5.230103，r=1.0000，大黃酚對照品的回歸方程：Y=7.4933103X-54.919，r=0.9999,結(jié)果說明大黃素在0.0210.53g范圍內(nèi)時，與大黃素峰面積呈良好的線性關(guān)系；大黃酚在0.0190.35g范圍內(nèi)時，與大黃酚峰面積呈良好的線性關(guān)系。2.7精細度實驗精細汲取供試品溶液批號2022010320l，重復(fù)進樣5次，按上述色譜條件測定峰面積。大黃素峰面積均值為370461，RSD為0.5%，大黃酚素峰面積均值為353876，RSD為0.3%。2.8重復(fù)性實驗取同批批號20220103樣品5份，按“2.3項下方法制備，進樣20l，測

8、定。大黃素平均含量為22.5gg-1，RSD2.2%，大黃酚平均含量為21.7gg-1，RSD2.0%。2.9穩(wěn)定性實驗分別于0，2，4，8，12，24h精細汲取供試品溶液批號2022010320l，按上述色譜條件測定峰面積，大黃素峰面積均值為371802，RSD為0.5%，大黃酚峰面積均值為355220，RSD為0.4%，結(jié)果說明大黃素和大黃酚在24h內(nèi)穩(wěn)定。2.10回收率實驗采取加樣回收法。精細稱取含量的供試品批號202201036份，參加一定量的大黃素和大黃酚對照品，按“2.3項下方法制備供試品溶液，按上述色譜條件測定。大黃素的平均回收率為100.6%，RSD2.5%；大黃酚的平均回收率為100.1%，RSD1.5%。2.11樣品測定取樣品，按“2.3項下方法制備供試品溶液，精細量取20l測定，按外標法計算含量，結(jié)果見表1。表1婦樂糖漿中大黃素和大黃酚含量測定結(jié)果略3討論將大黃素和大黃酚的對照品溶液分別于200400n掃描其紫外吸收，大黃素在290n有最大吸收，大黃酚在258n有最大吸收，但兩者均在258n處有較大吸收，同時參照有關(guān)文獻1，應(yīng)選擇254n為測定波長。供試品制備時對不