高中生物基因工程的基本操作程序試題

1、.課時(shí)跟蹤檢測(cè)(二)基因工程的根本操縱順序(總分值：50分時(shí)刻：25分鐘)一、選擇題(每題2分，共20分)1以下對(duì)于基因工程的表白，準(zhǔn)確的選項(xiàng)是A目標(biāo)基因跟受體細(xì)胞均可來(lái)主動(dòng)、動(dòng)物或微生物()B限度酶跟DNA銜接酶都能識(shí)不特定的堿基序列，是兩類常用的東西酶C人胰島素原基因在年夜腸桿菌中表白的胰島素原存在生物活性D載體上的抗性基因有利于挑選含重組DNA的細(xì)胞跟增進(jìn)目標(biāo)基因的表白2應(yīng)用外源基因在受體細(xì)胞中表白，可消費(fèi)人類所需求的產(chǎn)品。以下各項(xiàng)中能闡明目的基因?qū)崿F(xiàn)了在受體細(xì)胞中表白的是()A棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲基因B年夜腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNAC山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人成長(zhǎng)激

2、素D酵母菌細(xì)胞中提取到人攪擾素卵白DNA序列3以下對(duì)于PCR技巧的表白，準(zhǔn)確的選項(xiàng)是(APCR技巧樹破在對(duì)擴(kuò)增的目標(biāo)基因序列完整曾經(jīng)明白的根底上B該技巧需求解旋酶跟熱波動(dòng)的DNA聚合酶)C該技巧需求一對(duì)特異性的引物，請(qǐng)求一對(duì)引物的序列是互補(bǔ)的D該技巧運(yùn)用體內(nèi)DNA雙鏈復(fù)制道理，也需求模板、質(zhì)料、能量、酶等前提4以下對(duì)于基因表白載體的表白，不準(zhǔn)確的選項(xiàng)是(A基因表白載體的構(gòu)建是基因工程的中心)B其上的啟動(dòng)子跟停止子基本上有特別構(gòu)造的C普通用抗生素抗性基因作為標(biāo)志基因DNA片斷D盡管基因工程中的受體細(xì)胞有所差別，但構(gòu)建的基因表白載體基本上一樣的5右圖是基因工程中基因表白載體的形式圖，假定構(gòu)造X是表

3、白載體所必須的，那么X最能夠是(A熒光卵白基因B啟動(dòng)子)C限度酶DDNA銜接酶6以下對(duì)于基因表白載體導(dǎo)入微生物細(xì)胞的表白中，不準(zhǔn)確的選項(xiàng)是()A常用原核生物作為受體細(xì)胞，是因?yàn)樵松锓毖芸欤叶酁閱渭?xì)胞，遺傳物資相對(duì)較少B受體細(xì)胞所處的一種能接收四周情況中DNA分子的心理形態(tài)稱為感觸態(tài)word范文.C感觸態(tài)細(xì)胞接收DNA分子需求適合的溫度跟酸堿度D感觸態(tài)細(xì)胞接收重組表白載體DNA分子的液體只要調(diào)理為適合的pH即可，沒(méi)須要用緩沖液7(廣東高考)應(yīng)用基因工程技巧消費(fèi)羧酸酯酶(CarE)制劑的流程如以下列圖所示，以下敘述準(zhǔn)確的選項(xiàng)是(雙選)()A進(jìn)程需運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄酶B進(jìn)程需運(yùn)用解旋酶跟PCR獵取目標(biāo)

4、基因NaCl溶液制備C進(jìn)程運(yùn)用的感觸態(tài)細(xì)胞可用D進(jìn)程可應(yīng)用DNA分子雜交判定目標(biāo)基因能否已導(dǎo)入受體細(xì)胞8以下甲、乙兩圖表現(xiàn)從細(xì)菌細(xì)胞中獵取目標(biāo)基因的兩種辦法，以下說(shuō)法中過(guò)錯(cuò)的選項(xiàng)是()A甲辦法可樹破該細(xì)菌的基因組文庫(kù)B乙辦法可樹破該細(xì)菌的cDNA文庫(kù)C甲辦法要以脫氧核苷酸為質(zhì)料D乙辦法需求逆轉(zhuǎn)錄酶參加9右圖表現(xiàn)細(xì)胞膜上乙酰膽堿(一種神經(jīng)遞質(zhì))受體基因的克隆技巧操縱進(jìn)程，以下相干剖析中準(zhǔn)確的選項(xiàng)是()A取得該mRNA的最準(zhǔn)確資料是受精卵B構(gòu)建基因表白載體最能夠運(yùn)用的載體是年夜腸桿菌C實(shí)現(xiàn)進(jìn)程必弗成少的酶分不是逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶D探針挑選的目標(biāo)是鐫汰被沾染的細(xì)菌，取得未被沾染的細(xì)菌10藍(lán)藻擬核

5、DNA上有操縱葉綠素分解的ch1L基因。某迷信家經(jīng)過(guò)構(gòu)建該種生物缺掉ch1L基因的變異株細(xì)胞，以研討ch1L基因?qū)θ~綠素分解的操縱，技巧道路如以下列圖所示，以下相干表白過(guò)錯(cuò)的選項(xiàng)是()word范文.A進(jìn)程應(yīng)運(yùn)用差其余限度性內(nèi)切酶B進(jìn)程都要運(yùn)用DNA銜接酶C停止暗碼子是基因表白載體的主要構(gòu)成局部D假定操縱勝利，可用含紅霉素的培養(yǎng)基挑選出該變異株二、非選擇題(共30分)11(10分)(江蘇高考)圖1表現(xiàn)含有目標(biāo)基因D的DNA片斷長(zhǎng)度(bp即堿基對(duì))跟局部堿基序列，圖2表現(xiàn)一種質(zhì)粒的構(gòu)造跟局部堿基序列?，F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、SmaCCGG、GGATCC、GATC、種限度性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)不

6、的堿基序列跟酶切位點(diǎn)分不為CCCGGG。請(qǐng)答復(fù)以下咨詢題：(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間順次由_銜接。(2)假定用限度酶Sma完整切割圖1中DNA片斷，發(fā)生的末了是_末了，其產(chǎn)品長(zhǎng)度為_。(3)假定圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被TA堿基對(duì)交換，那么基因D就漸變?yōu)榛騞。從雜合子中不離出圖1及其對(duì)應(yīng)的DNA片斷，用限度酶Sma完整切割，產(chǎn)品中共有_種差別長(zhǎng)度的DNA片斷。(4)假定將圖2中質(zhì)粒跟目標(biāo)基因D經(jīng)過(guò)同種限度酶處置落后展銜接，構(gòu)成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限度酶是_。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了挑選出含重組質(zhì)粒的年夜腸桿菌，般需求用增加_的培養(yǎng)基進(jìn)展培養(yǎng)。經(jīng)檢測(cè)，局部含有重組質(zhì)粒的年夜

7、腸桿菌菌株中目一的基因D不克不及準(zhǔn)確表白，其最能夠的緣故是_。12(10分)上面是口蹄疫疫苗消費(fèi)進(jìn)程表現(xiàn)圖，請(qǐng)據(jù)圖答復(fù)以下咨詢題：word范文.(1)起首從口蹄疫病毒中提取局部分解病毒卵白的RNA，而不是用口蹄疫病毒的全體RNA，緣故是分解病毒卵白的RNA操縱分解的病毒卵白質(zhì)，存在_特征，又不會(huì)使動(dòng)物致病。以分解病毒卵白的_。RNA發(fā)抱病毒卵白的DNA，需用到的東西酶是_?；虮戆纵d體除目標(biāo)基因_細(xì)胞。(2)構(gòu)建基因表白載體所需求的東西酶是外，還應(yīng)包含_。(3)導(dǎo)入年夜腸桿菌前需先將年夜腸桿菌處置為(4)為檢測(cè)目標(biāo)基因能否導(dǎo)入受體細(xì)胞，經(jīng)常要借助載體上_作探針與基因組DNA雜交。最初還要檢測(cè)目

8、標(biāo)基因_。_的表白，更精確的辦法是應(yīng)用噴射性同位素標(biāo)志的能否翻譯成了病毒卵白質(zhì)，應(yīng)用的技巧是13(10分)菊天牛是菊花的要緊益蟲之一。科研職員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花，培養(yǎng)出抗蟲菊花。以下列圖是取得轉(zhuǎn)基因菊花的技巧流程，請(qǐng)據(jù)圖答復(fù)：重組含重組質(zhì)農(nóng)桿菌侵染離體菊花愈傷葉片構(gòu)造構(gòu)造分化再生檢測(cè)植株構(gòu)建R抗蟲基因含Kan質(zhì)粒,)質(zhì)粒粒的泥土轉(zhuǎn)基因抗蟲植株R注：卡那霉素抗性基因(Kan)作為標(biāo)志基因，菊花葉片對(duì)卡那霉素高度敏感。(1)為了增進(jìn)泥土農(nóng)桿菌接收重組質(zhì)粒，可用_處置泥土農(nóng)桿菌，使其處于感觸態(tài)。(2)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入泥土農(nóng)桿菌的目標(biāo)是應(yīng)用農(nóng)桿菌能夠_的特色，_上，終極構(gòu)成轉(zhuǎn)基因植株。_的培養(yǎng)基中，在適

9、合前提使目標(biāo)基因進(jìn)入受體細(xì)胞中，并拔出到菊花細(xì)胞的(3)將愈傷構(gòu)造轉(zhuǎn)移到增加必定濃度動(dòng)物激素跟下進(jìn)展培養(yǎng)，挑選轉(zhuǎn)基因菊花。(4)用PCR辦法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花能否含有目標(biāo)基因時(shí)，需依照_為模板進(jìn)展第一輪擴(kuò)增。(5)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以恰當(dāng)比例混雜后飼喂菊天牛_的核苷酸序列計(jì)劃特異引物，以2齡幼蟲，試驗(yàn)后果如下表所示。word范文.組不逝世亡率(%)60.00轉(zhuǎn)基因植株1轉(zhuǎn)基因植株2對(duì)比組試驗(yàn)組53.3313.33對(duì)比組應(yīng)飼喂等量的_。據(jù)表剖析，_差別明顯，闡明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的鴆殺感化。謎底1選A目標(biāo)基因跟受體細(xì)胞均可來(lái)主動(dòng)、動(dòng)物或微生物；基因工程中常用的東西酶無(wú)限度

10、酶跟DNA銜接酶，前者能識(shí)不特定的堿基序列；年夜腸桿菌為原核生物，不含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)跟高爾基體等細(xì)胞器，不克不及對(duì)卵白質(zhì)進(jìn)展加工，其分解的胰島素原無(wú)生物活性；載體中的抗性基因?yàn)闃?biāo)志基因，其感化是有利于挑選含重組DNA的細(xì)胞，不克不及增進(jìn)目標(biāo)基因的表白。2選D基因的表白即操縱卵白質(zhì)的分解，只要分解了響應(yīng)的卵白質(zhì)才干證實(shí)目標(biāo)基因?qū)崿F(xiàn)了在受體細(xì)胞中的表白。3選DPCR技巧擴(kuò)增的目標(biāo)基因序列不必定是曾經(jīng)明白的，A過(guò)錯(cuò)；PCR技巧是經(jīng)過(guò)低溫來(lái)使DNA解旋的，不需求解旋酶，B過(guò)錯(cuò)；該技巧需求的一對(duì)引物，分不克不及與模板DNA的兩條鏈的末了堿基配對(duì)，其序列不是互補(bǔ)的，C過(guò)錯(cuò)。4選D因?yàn)槭荏w細(xì)胞有動(dòng)物、動(dòng)物、微生物

11、之分，目標(biāo)基因?qū)胧荏w細(xì)胞的辦法不同，因而，表白載體的構(gòu)建也有所差別。5選B一個(gè)完好的基因表白載體應(yīng)包含啟動(dòng)子、停止子、目標(biāo)基因跟標(biāo)志基因。6選D將基因表白載體導(dǎo)入微生物細(xì)胞時(shí)，需在必定前提(如適合的溫度、pH等)下，將基因表白載體跟感觸態(tài)的微生物細(xì)胞混雜培養(yǎng)，在培養(yǎng)進(jìn)程中，能夠會(huì)妨礙pH的變更，因而要參加緩沖液，以堅(jiān)持適合的pH。7選AD進(jìn)程是逆轉(zhuǎn)錄進(jìn)程，需求逆轉(zhuǎn)錄酶催化；從cDNA中獵取所需求的目標(biāo)基因，依照基因的核苷酸序列、基因的功用、基因在染色體上的地位或基因翻譯產(chǎn)品卵白質(zhì)等PCR；用CaCl溶液處置年夜腸桿菌，可使其成為感特征來(lái)獵取，不需求用解旋酶，也不需求2受態(tài)細(xì)胞；鑒不目標(biāo)基因能

12、否導(dǎo)入受體細(xì)胞可應(yīng)用DNA分子雜交技巧。8選C甲辦法是從細(xì)菌的DNA中直截了當(dāng)提取，故能夠樹破該細(xì)菌的基因組文庫(kù)；乙方法是由信使RNA逆轉(zhuǎn)錄的目標(biāo)基因，故能夠樹破該細(xì)菌的cDNA文庫(kù)。乙辦法需求逆轉(zhuǎn)錄酶跟脫氧核苷酸為質(zhì)料。word范文.9選C該受體基因在神經(jīng)細(xì)胞中表白，取得該mRNA的最準(zhǔn)確資料是神經(jīng)細(xì)胞。構(gòu)建基cDNA。DNA序列差別，故應(yīng)運(yùn)用差其余限度性內(nèi)切酶；DNA銜接酶的感化是銜接被切開的磷酸二酯鍵，使ch1L基因、紅霉素抗性因表白載體最能夠運(yùn)用的載體是質(zhì)粒。探針挑選的目標(biāo)是檢測(cè)能否存在10選C限度性內(nèi)切酶有特異性，進(jìn)程要切割的基因與質(zhì)粒聯(lián)合；基因表白載體由目標(biāo)基因、啟動(dòng)子、停止子、標(biāo)

13、志基因構(gòu)成，停止暗碼子是mRNA上暗碼子的一種，表現(xiàn)一次翻譯的完畢；變異株中ch1L基因被重組基因交換，重組基因中有紅霉素抗性基因，故可用含紅霉素的培養(yǎng)基挑選出該變異株。11剖析：(1)一條脫氧核苷酸鏈中相鄰的兩個(gè)堿基之間是經(jīng)過(guò)“脫氧核糖磷酸脫氧核糖相連的。(2)從Sma的識(shí)不序列跟酶切位點(diǎn)可知，圖1中DNA片斷有兩個(gè)Sma的識(shí)不序列，故切割后發(fā)生的產(chǎn)品長(zhǎng)度為其切割后發(fā)生的是平末了，5343537(bp)、79633790(bp)跟6583661(bp)的三個(gè)片斷。(3)圖示方框內(nèi)發(fā)作堿基對(duì)的交換后，構(gòu)成的d基因得到了1個(gè)Sma的識(shí)不序列，故D基因、d基因用Sma完整切割所得產(chǎn)品中除原有D基因

14、切割后的3種長(zhǎng)度的DNA片斷外，還增加一種d基因被切割后呈現(xiàn)的長(zhǎng)度為5377901327(bp)的DNA片斷。(4)目標(biāo)基因的兩頭都有BamH的識(shí)不序列，質(zhì)粒的啟動(dòng)子后抗生素A抗性基因上也有BamH的識(shí)不序列，故應(yīng)選用的限度酶是BamH，如今將抗生素B抗性基因作為標(biāo)志基因，故挑選時(shí)培養(yǎng)基中要增加抗生素B。經(jīng)過(guò)同種限度酶切割后會(huì)發(fā)生一樣的末了，局部目標(biāo)基因與質(zhì)粒會(huì)反向銜接而招致基因無(wú)奈畸形表白。謎底：(1)脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖(2)平537bp、790bp、661bp(3)4(4)BamH抗生素B同種限度酶切割構(gòu)成的末了一樣，局部目標(biāo)基因D與質(zhì)粒反向銜接12剖析：(1)病毒由核酸跟卵白質(zhì)構(gòu)成

15、，其卵白質(zhì)外殼存在免疫特征，故口蹄疫疫苗RNA局部。以RNA為模板分解DNA的過(guò)(2)基因表白載體的構(gòu)成：目標(biāo)基因、啟動(dòng)子、停止子、標(biāo)消費(fèi)進(jìn)程只要提取口蹄疫病毒中操縱分解病毒卵白的程屬于逆轉(zhuǎn)錄，需求逆轉(zhuǎn)錄酶。記基因。構(gòu)建基因表白載體普通用必定的限度酶切割質(zhì)粒，使其呈現(xiàn)一個(gè)有黏性末真?zhèn)€瘦語(yǔ)，再用同種限度酶切割目標(biāo)基因，發(fā)生一樣的黏性末了。將切下的目標(biāo)基因片斷，拔出質(zhì)粒的瘦語(yǔ)處，在DNA銜接酶的感化下使質(zhì)粒與目標(biāo)基因聯(lián)合構(gòu)成重組質(zhì)粒。(3)將目標(biāo)基因?qū)?微生物細(xì)胞前，常用Ca處置使其成為感觸態(tài)細(xì)胞。(4)標(biāo)志基因的表白可檢測(cè)目標(biāo)基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，除此之外還能夠用DNA雜交法跟抗原抗體雜交技巧進(jìn)展檢測(cè)。謎底：(1)抗原逆轉(zhuǎn)錄酶(2)限度性核酸內(nèi)切酶跟DNA銜接酶啟動(dòng)子、停止子、標(biāo)志基因(3)感觸態(tài)(4)標(biāo)志基因病毒卵白基因(目標(biāo)基因)抗原抗體雜交技巧213剖析：(1)平日用Ca處置細(xì)菌，使之處于感觸態(tài)。(2)依照農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒中的T-DNA能夠整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上的特色，平日用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目標(biāo)基因?qū)胧躻ord范文.體細(xì)胞。(3)基因表白載體的構(gòu)建中，需求標(biāo)志基因，依照題意可知該標(biāo)志基因?yàn)榭敲顾乜剐曰?，因而需求在參加卡那霉素的培養(yǎng)基當(dāng)選擇出勝利轉(zhuǎn)入目標(biāo)基因的菊花。PCR技巧擴(kuò)增目標(biāo)基因時(shí)，需求依照目標(biāo)基因的脫氧核苷