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1、水質(zhì)糞大腸菌群檢驗(yàn)紙片的詳細(xì)資料BD105 I 水質(zhì)(糞)大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片1份/包適用于湖水、水源水中大腸菌群的快速檢測(cè)。BD105II水質(zhì)(糞)大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片1份/包適用于河水、生活用水、醫(yī)療機(jī)構(gòu)處理后排污水、禽畜養(yǎng)殖業(yè)等排放廢水中大腸菌群的快速檢測(cè)。分BD105 I和BD105I兩個(gè)型號(hào),請(qǐng)注意選擇型號(hào)。1、適用范圍水質(zhì)(糞)大腸菌群的測(cè)定紙片快速法本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、生活污水、醫(yī)療機(jī)構(gòu)及禽畜養(yǎng)殖業(yè)等其他行業(yè)排放的廢水中(糞)大 腸菌群的快速篩查。本方法的檢出限為20MPN/L。2、規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容引用了下列文件或其中的條款。凡是不注明日期的引用文件,其有效版本適用于 本
2、標(biāo)準(zhǔn)。HJ/T91地表水和污水監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3、術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)??偞竽c菌群(total coliforms)在37r培養(yǎng),24h內(nèi)能發(fā)酵乳糖酸產(chǎn)氣的需氧及兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。糞大腸菌群(fecal coliforms)44.5r培養(yǎng),24h內(nèi)能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸氣的總大腸菌群,屬糞行來(lái)源,稱(chēng)為糞大腸菌群。4、方法原理將一定量的乳糖、指示劑(漠甲酚紫和2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及營(yíng)養(yǎng)成分等 吸附于一定面積的無(wú)菌濾紙上,當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖時(shí),產(chǎn)酸使PH值降低,漠甲酚紫指示劑由 紫色變黃色。同時(shí),產(chǎn)氣過(guò)程相應(yīng)的脫氫酶在適宜的PH范圍內(nèi),催化底物脫氫還原TTC
3、形成紅色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(diǎn)(或紅暈)。 通過(guò)上述指示劑的顏色變化就可對(duì)是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作出判斷,從而確定是否有(糞)大腸菌群 存在,再通過(guò)查MPN表就可得出相應(yīng)(糞)大腸菌群的濃度值。5、試劑和材料除非另有說(shuō)明,分析時(shí)均使用符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。5.1市售水質(zhì)總大腸菌群、糞大腸菌群測(cè)試片:10ml水樣量紙片按附錄A的方法進(jìn)行質(zhì)量鑒 定,達(dá)到要求后方可使用。5.2無(wú)菌水用新制備的去離子水或蒸餾水,按無(wú)菌操作要求,121C高壓蒸汽滅菌20min,備用。硫代硫酸鈉溶液:p (Na2S2O3)=0.10g/ml稱(chēng)取硫代硫酸鈉10g,溶于適量蒸餾水(或
4、去離子)中,稀釋至100ml,現(xiàn)配。乙二胺四乙酸二鈉(EDTA- Na2)溶液:p (C10H14N2O8Na2。2H2O)=0.15g/ml稱(chēng)取EDTA-Na2 15g溶于適量蒸餾水(或去離子水)中,稀釋至100ml,此溶液保質(zhì)期為30d。6、儀器和設(shè)備6.1恒溫培養(yǎng)箱:37C1C。6.2恒溫培養(yǎng)箱:44C0.5C。6.3高壓蒸汽滅菌器:121C、101.3kpa。冰箱:0-4C移液管:10.01ml、100.1ml。試管:中 15mmX 150mm.采樣瓶:500ml。注1:移液器、試管、采樣瓶等玻璃器皿實(shí)驗(yàn)前要按無(wú)菌操作要求包扎,121C高壓蒸汽滅 菌20min,烘干,備用。7、樣品用滅
5、菌器具,按照HJ/T 91的規(guī)定及無(wú)菌操作的要求,采集水樣400ml放入已滅菌的采樣瓶 中。如果是經(jīng)加氯處理的廢水,需在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉EDTA- Na2)溶 液(5.4) 1.2ml,以消除干擾。酸性樣品,需調(diào)節(jié)胖胖的PH值至7.0-8.00采樣后2h內(nèi)檢測(cè),否則,需10C以下冷藏并6h內(nèi)送檢,實(shí)驗(yàn)室接樣后,應(yīng)將樣品放入0-4C 冰箱并2h內(nèi)測(cè)定。注2:10mg硫代硫酸鈉可保證去除水樣中1.5mg余氯,硫代硫酸鈉用量克根據(jù)水樣實(shí)際余氯 量調(diào)整。8、分析步驟8.1接種量每個(gè)樣品按三個(gè)不同的接種量接種,每個(gè)接種量分別接種5張紙片,共接種15張紙片。根據(jù)水樣的污染程度確定接種量,應(yīng)
6、盡可能使5個(gè)接種量最大的紙片為陽(yáng)性、5個(gè)接種量最 小的紙片為陰性。清潔水樣的參考接種量分別為10 ml、1 ml、0.1 ml,受污染水樣參考接種量根據(jù)污染程度可 接種 1 ml、0.1ml、0.01 ml 或 0.1 ml、0.01 ml、0.001 ml 等。接種量小于1ml時(shí),水樣應(yīng)制成稀釋樣品后使用。接種量為0.1ml、0.01 ml時(shí),分別制成 1:10稀釋樣品、1:100稀釋樣品。其它接種量的稀釋樣品依次類(lèi)推。1:10稀釋樣品的制作方法為:吸取1ml水樣,注入盛有9 ml無(wú)菌水的試管中,混勻,制成 1:10稀釋樣品。其它稀釋度的稀釋樣品同法制作。8.2接種、培養(yǎng)水樣充分混勻,按無(wú)菌
7、操作制作稀釋水樣及接種水樣。清潔水樣,接種水樣總量為55.5ml,10 ml水樣量紙片5張,每張接種水樣10ml,1 ml水樣 量紙片10張,其中5張各接種水樣1ml,另5張各接種1:10的稀釋水樣1ml。受污染水樣, 接種3個(gè)不同稀釋度的1ml稀釋水樣各5張。接種水樣應(yīng)均勻涂布于紙片上,紙片充分侵潤(rùn)、吸收水樣,用手輕輕壓平,做好標(biāo)記。測(cè)總大腸菌群時(shí),在371C的條件下培養(yǎng)18-24h后觀(guān)察結(jié)果;測(cè)糞大腸菌群時(shí),在44.5 0.5C的條件下培養(yǎng)18-24h后觀(guān)察結(jié)果。注3:1、檢測(cè)糞大腸菌群時(shí),紙片接種后應(yīng)立即放置于44.5 0.5 C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),在常溫 下放置過(guò)久將影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2、紙片加入水樣后,短時(shí)間內(nèi)變黃或退色,表明水樣存在酸性物質(zhì)活氧化劑干擾,需按7 樣
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