豬口腔液樣品采集技術(shù)規(guī)范

1、豬口腔液樣品采集技術(shù)規(guī)范1 范圍的暫存與運輸?shù)燃夹g(shù)要求。瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬口蹄疫、豬圓環(huán)病毒病等動物疫病檢測。2 規(guī)范性引用文件文件。NY/T 獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范NY/T 3075 畜禽養(yǎng)殖場消毒技術(shù)3 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。豬口腔液 pigoral豬口腔中的唾液以及通過口腔黏膜和齒齦溝進入口腔的血清滲出液組成的混合液體。采樣 sampling按照規(guī)定的程序和要求從動物及其產(chǎn)品或環(huán)境取得樣品的過程。樣品保存液 samplepreservative solution檢測的準確性。4 采樣前準備采樣用品4.1.1 采樣用品準備采集繩、無菌自封袋、剪刀、離心

2、管（1.5mL以上規(guī)格）、樣品保存液等。4.1.2 樣品保存液的選擇（ProClin950 B化的具有保護核酸作用的樣品保存液。4.1.3 采集繩的選擇直徑1.5cm2.0cm1.0m1.2m擇符合上述要求的商品化的豬口腔液采集包，采集包內(nèi)包含一根無菌棉繩、一個無菌吸管、無菌手套、一管樣品保存液。4.1.4 采集繩數(shù)量4.1.4.1 豬飼養(yǎng)數(shù)量在 頭以內(nèi)的欄舍，懸掛一根棉繩。4.1.4.2 豬飼養(yǎng)數(shù)量大于 25頭的欄舍，每增加 15頭豬增加1根棉繩，繩子間的距離不低于 cm。4.1.5 滅菌或其他耐高溫、高壓容器中，121高壓蒸汽滅菌30min，65烘箱中烘干，將棉繩轉(zhuǎn)入無菌自封袋保存。商品化

3、采集包內(nèi)的棉繩無需滅菌。防護用品一次性口罩、手套、防護服、鞋套，消毒液、醫(yī)療廢棄物垃圾袋等。記錄用品油性記號筆、黑色中性筆、標簽紙、采樣登記表、樣品編號表或自動編號打印設(shè)備等。保存運輸用品樣品保存液、采樣運輸箱、冰袋、防震材料等。5 樣品采集技術(shù)采集時間宜在豬只較為活躍的上午且在采食前采集。采集步驟5.2.1 棉繩懸掛將棉繩懸掛于豬欄內(nèi)相對干凈的區(qū)域，遠離飼喂、飲水和排便區(qū)，不接觸墻壁和豬欄。5.2.2 棉繩固定棉繩上端打結(jié)固定，下端懸掛高度與豬身肩關(guān)節(jié)齊平。5.2.3 棉繩放置時間棉繩放置至少30min，但不超過45min，期間任豬自由咀嚼。5.2.4 口腔液樣品收集5.2.4.1 棉繩放置

4、規(guī)定時間后立即進行口腔液樣品收集，口腔液樣品采集量不少于 2。5.2.4.2 棉繩固定后脫落至地面或其他相對不干凈區(qū)域，需重新進行樣品采集。5.2.4.3 釋放口腔液至袋底。剪掉自封袋底部一角，自封袋中口腔液傾斜倒入含有樣品保存液的離心管中備用，口腔液與樣品保存液體積比為 1:11.5:1，裝入口腔液后蓋上管蓋后混勻，用封口膜固封。5.2.5 廢棄物處置行無害化處理。采樣注意事項5.3.1 個人安全防護和消毒操作按照 NY/T3075執(zhí)行。5.3.2 每采集一份樣品，更換一套一次性采樣用品，避免交叉污染。5.3.3 采樣后的廢棄物等按照醫(yī)療廢物管理條例進行無害化處理。5.3.4 若豬啃咬欲望不

5、強或不采食，可輔助采取其他采樣方式，如鼻肛拭子等。6 樣品標記與包裝用油性記號筆在離心管管蓋和管壁上作好標記，以阿拉伯數(shù)字標識，并在樣品編號表（見附錄 B）填寫樣品編號對應的欄舍編號，一式兩份。樣品名稱和數(shù)量等。必要時自封袋上貼封條，封條上加蓋采樣企業(yè)簽章及采樣人簽字，并注明貼封日期。7 樣品信息登記填寫豬口腔液采樣登記表（見附錄 ），一式兩份。另一份留存?zhèn)浒浮? 樣品的暫存與運輸口腔液樣品在 24h處于 8，加填防震材料避免樣品晃動。口腔液樣品 24h內(nèi)無法送達檢測實驗室的，迅速轉(zhuǎn)置-20以下溫度凍存。采樣運輸箱應完整無損，密封不漏液，必要時經(jīng)清潔、滅菌后使用，詳細按照 NY/T 541執(zhí)行

6、。樣品運送應符合生物安全要求，按照 NY/T 541附 錄 A（資料性）豬口腔液采樣登記表表A.1給出了豬口腔液采樣登記表。表A.1豬口腔液采樣登記表采樣單位： 采樣時間： 采樣人： 聯(lián)系電話：*場點名稱 *聯(lián)系人 *聯(lián)系電話地 址 區(qū) 街（鄉(xiāng)） 村 *地理坐標 經(jīng)度： 緯度：*場點類型 種豬場 商品代養(yǎng)豬場 散養(yǎng)戶 采樣數(shù)量基本情況*現(xiàn)存欄數(shù) 年出欄數(shù) 種公畜數(shù) 母畜數(shù)生產(chǎn)：后備： 序號 樣品編號（起止） 養(yǎng)殖階段 群體數(shù)量 備注樣品情況疫苗 是否免疫 疫苗類型 最后一次免疫時間 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗* 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗免疫情況豬瘟 是 否 脾淋苗 細胞苗偽狂

7、犬 是 否 弱毒苗 滅活苗豬繁殖與呼吸綜合征是 否普通型滅活苗 普通型弱毒苗高致病性滅活苗 高致病性弱毒苗其他 是 否 序號 樣品編號（起止） 養(yǎng)殖階段 群體數(shù)量樣品情況疫苗 是否免疫 疫苗類型 最后一次免疫時間 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗* 型口蹄疫 是 否 滅活苗 合成肽苗免疫情況豬瘟 是 否 脾淋苗 細胞苗偽狂犬 是 否 弱毒苗 滅活苗豬繁殖與呼吸綜合征是 否普通型滅活苗 普通型弱毒苗高致病性滅活苗 高致病性弱毒苗其他 是 否注：表內(nèi)帶“*”的地方必須填寫，地理坐標，要求填寫6位數(shù)。注：樣品編號：以例如110的簡單阿拉伯數(shù)字標識在采樣管上。注：養(yǎng)殖階段：哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、生產(chǎn)母豬、后備母豬、種公豬。注：該表格一式兩份。附 錄 B（資料性）樣品編號表表B.1給出了樣品編號表。表B.1樣品編號表場點名稱： 采樣人： 樣品編號 欄舍編號 樣品編號 欄舍編號 樣品編號 欄舍編號注：請詳細填寫表格，一式兩份。填表人簽字：參 考 文 獻1 Seddon,Y,Optimisingoralfluidcollectionfromgroupsofpigs:Effectofhousingsystemandprovision ropes.J. Vet