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1、高效液相色譜的特點(diǎn)與儀器ppt第1頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8一、液相色譜儀器 high performance liquid chromatograph第2頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8液相色譜儀(2)第3頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8液相色譜儀(3)第4頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8液相色譜儀(4)第5頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8二、高效液相色譜法的特點(diǎn) feature
2、 of HPLC 特點(diǎn):高壓、高效、高速 高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定有機(jī)及生化試樣的高效分離分析方法。第6頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8三、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC1.流程第7頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/82.主要部件(1) 高壓輸液泵主要部件之一,壓力:150350105 Pa。為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相(10m),液體的流動(dòng)相高速通過時(shí),將產(chǎn)生很高的壓力,因此高壓、高速是高效液相色譜的特點(diǎn)之一。應(yīng)具有壓力平穩(wěn)、脈沖小、流量穩(wěn)定可調(diào)、耐腐蝕等特性(
3、動(dòng)畫)第8頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8(2)梯度淋洗裝置外梯度: 利用兩臺(tái)高壓輸液泵,將兩種不同極性的溶劑按一定的比例送入梯度混合室,混合后進(jìn)入色譜柱。內(nèi)梯度: 一臺(tái)高壓泵, 通過比例調(diào)節(jié)閥,將兩種或多種不同極性的溶劑按一定的比例抽入高壓泵中混合。第9頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8(3) 進(jìn)樣裝置 流路中為高壓力工作狀態(tài), 通常使用耐高壓的六通閥進(jìn)樣裝置, 其結(jié)構(gòu)如圖所示:第10頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8(4) 高效分離柱 柱體為直型不銹鋼管,內(nèi)徑16 mm
4、,柱長(zhǎng)540 cm。發(fā)展趨勢(shì)是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。第11頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8(5) 液相色譜檢測(cè)器 a. 紫外檢測(cè)器 應(yīng)用最廣,對(duì)大部分有機(jī)化合物有響應(yīng)。 特點(diǎn): 靈敏度高; 線形范圍高; 流通池可做的很?。?mm 10mm ,容積 8L); 對(duì)流動(dòng)相的流速和溫度變化不敏感; 波長(zhǎng)可選,易于操作; 可用于梯度洗脫。 第12頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8b. 光電二極管陣列檢測(cè)器 紫外檢測(cè)器的重要進(jìn)展; 光電二極管陣列檢測(cè)器:1024個(gè)二極管陣列,各檢測(cè)特定波長(zhǎng),計(jì)算機(jī)快速處理,三維立體譜
5、圖,如圖所示。第13頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8第14頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8光電二極管陣列檢測(cè)器第15頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8c. 示差折光檢測(cè)器(differential refractive index detector) 除紫外檢測(cè)器之外應(yīng)用最多的檢測(cè)器; 可連續(xù)檢測(cè)參比池和樣品池中流動(dòng)相之間的折光指數(shù)差值。差值與濃度呈正比; 通用型檢測(cè)器(每種物質(zhì)具有不同的折光指數(shù)); 靈敏度低、對(duì)溫度敏感、不能用于梯度洗脫; 偏轉(zhuǎn)式、反射式和干涉型三種;
6、第16頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8示差折光檢測(cè)器第17頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8d. 熒光檢測(cè)器(fluorescence detector) 高靈敏度、高選擇性; 對(duì)多環(huán)芳烴,維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等有響應(yīng);第18頁(yè),共19頁(yè),2022年,5月20日,20點(diǎn)34分,星期四2022/9/8請(qǐng)選擇內(nèi)容第一節(jié) 高效液相色譜的特點(diǎn)與儀器feature and instrument of HPLC第二節(jié) 基本原理與主要分離類型basic principle and main separating type第三節(jié) 固定相與流動(dòng)相stationary phase and mobile phase 第四節(jié) 影響分離的因素與操作條件選擇factors influenced separation and choice of operation condition第五節(jié) 離子色譜法i
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