毛細(xì)管電泳法的特點和的構(gòu)造

1、毛細(xì)管電泳法的特點和的構(gòu)造第1頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四1.毛細(xì)管電泳具備如下優(yōu)點：（1） 高效 塔板數(shù)目在105-106 片/m 間，當(dāng)采用CGE 時 毛細(xì)管電泳色譜圖，塔板數(shù)目可達(dá)107 片/m 以上； （2） 快速 一般在十幾分鐘內(nèi)完成分離； （3） 微量 進(jìn)樣所需的樣品體積為nL 級； （4） 多模式 可根據(jù)需要選用不同的分離模式且僅需一臺儀器； （5） 經(jīng)濟 實驗消耗不過幾毫升緩沖溶液，維持費用很低； （6） 自動 CE 是目前自動化程度較高的分離方法。 第2頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四2.毛細(xì)管電泳的缺點 （1） 由于進(jìn)樣量

2、少，因而制備能力差； （2） 由于毛細(xì)管直徑小，使光路太短，用一些檢測方法（如紫外吸收光譜法）時，靈敏度較低； （3） 電滲會因樣品組成而變化，進(jìn)而影響分離重現(xiàn)性。第3頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四3.與傳統(tǒng)電泳技術(shù)相比，具備的特點（1）分離效率高（2）分離模式多：毛細(xì)管區(qū)帶電泳、毛細(xì)管凝膠電泳、膠束電動毛細(xì)管色譜、毛細(xì)管等電聚焦 、毛細(xì)管等速電泳等。（3）應(yīng)用范圍廣：既能分析有機和無機小分子，又能分析多肽和蛋白質(zhì)大分子；既能用于帶電離子的分離，又能用于中性分子的測定。（4）最小檢出限低（5）分析成本低（6）樣品用量少（7）儀器簡單（8）環(huán)境友好第4頁，共17頁，20

3、22年，5月20日，7點26分，星期四4.與高效液相色譜相比，具備的特點 毛細(xì)管電泳高效液相色譜 流體流動形式 平流，峰展寬小 層流，峰展寬大 組分分子移動電滲流和電泳流的共同作用 有壓力流帶動 組分分子的擴散擴散小，不存在傳質(zhì)阻力，柱效高 有擴散，存在傳質(zhì)阻力，柱效低 組分分離 依據(jù)遷移速率的差異依據(jù)分配系數(shù)的差異 生物大分子的分離 適合 不適合 第5頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四毛細(xì)管電泳(CE)與質(zhì)譜(MS)聯(lián)用技術(shù)(CE-MS)第6頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四能快速分離微體積樣品中的化合物，及其高效分離和基于分子量鑒定化合物的能力，

4、使它成為分析復(fù)雜生物樣品的一種非常有價值的方法。另外，在各種廣泛的諸如毛細(xì)管區(qū)域電泳，毛細(xì)管等電點調(diào)焦，和在線等速電泳等技術(shù)已經(jīng)和MS結(jié)合。這些優(yōu)點使得CE-MS在分析復(fù)雜生物混合物中廣泛使用。CE-MS已經(jīng)成功地廣泛應(yīng)用于復(fù)雜化合物地分析包括氨基酸，蛋白質(zhì)消化，蛋白質(zhì)混合物，單個細(xì)胞，寡核苷酸，和各種小分子相關(guān)的制藥工業(yè)。第7頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四CE-MS的分類第8頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四CE-MS在線結(jié)合的儀器主要包括三個部分:即CE系統(tǒng)，CE-MS接口和MS檢測器。 目前，成功地應(yīng)用于CE-MS接口中的離子化技術(shù)有連續(xù)流

5、-快原子轟擊（CF-FAB）、離子噴霧（IS）、電噴霧（ESI）、大氣壓化學(xué)電離、基質(zhì)輔助激光解吸離子化和等離子體解吸離子化技術(shù)等。其中電噴霧電離是最常用、最成熟的技術(shù)。 第9頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四CE-MS的結(jié)構(gòu)第10頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四電噴霧技術(shù)用來產(chǎn)生MS分析的所需的離子技術(shù)，特別適用于與大分子的質(zhì)譜分析，采用ESI，大分子在離子化過程中不會碎裂。第11頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四電噴霧技術(shù)的優(yōu)點第12頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四接口技術(shù)接口技術(shù)是實現(xiàn)CE-MS

6、聯(lián)用的關(guān)鍵所在。CE-MS聯(lián)用分為在線聯(lián)用和離線聯(lián)用。CE-MS離線聯(lián)用的關(guān)鍵是對已分離樣品的有效收集,并不涉及真正意義上的聯(lián)用接口技術(shù);而且與離線聯(lián)用相比, CE-MS在線聯(lián)用具有樣品損失少、自動化程度高、分析速度快等優(yōu)點,其應(yīng)用要比離線聯(lián)用廣泛得多。CE-MS在線聯(lián)用需要設(shè)計合適的接口,能夠?qū)⒁逊蛛x的樣品全部轉(zhuǎn)移到質(zhì)譜儀中,同時實現(xiàn)樣品快速高效的離子化，同時接口對技術(shù)要求很高。第13頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四CE-ESI-MS接口主要分為鞘液接口和無鞘液接口兩種。第14頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四鞘液接口技術(shù)鞘液接口技術(shù)是最早出現(xiàn)，

7、其優(yōu)點在于通過提高樣品流速使得噴霧更加穩(wěn)定,有利于形成穩(wěn)定的電流回路,同時可改變CE運行緩沖液的組成, 使其滿足ESI源的檢測要求。主要有低流速( low-flow )鞘液接口，多通道的CE-ESI-MS聯(lián)用鞘液接口。Chang等設(shè)計了低流速鞘液接口,他們將毛細(xì)管末端套在裝有鞘液的離心管中,鞘液低速流出與CE 流出物混合,離心管中插入一鉑絲作為電極以構(gòu)成電流回路; 低流速可以降低鞘液的稀釋作用,同時鉑絲構(gòu)成電流回路可以避免因流速低所造成的斷流。第15頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四無鞘液接口技術(shù)無鞘液接口技術(shù)由于不存在任何稀釋效應(yīng)而逐漸受到研究者的青睞。液接型接口是無鞘液接口技術(shù)中比較特別的一種。與其他無鞘液接口相比, 液接型接口可以通過液接液體來改變CE運行緩沖液的組成, 使其滿足電噴霧離子源的要求。與鞘液接口相比, 液接型接口不存在鞘液的稀釋作用，但這種接口會存在液體死體積問題。第16頁，共17頁，2022年，5月20日，7點26分，星期四芯片CE與ES