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1、三倍體的產(chǎn)生引言雙受精:卵細(xì)胞和極核(2個)同時和2個精子分別完成融合的過程,成為雙受精。*一個精核()與兩個極核(+) 受精結(jié)合為胚乳核(3),將來發(fā)育成胚乳(三倍體)*通過雙受精后發(fā)育成種子,種子的主要組成部分是胚,胚乳和種皮。胚和胚乳都是通過受精而形成的,但種皮或果皮,它們都是母本花朵的營養(yǎng)組織,與雙受精過程并沒有聯(lián)系。一個正常種子胚,胚乳和種皮的染色體數(shù)目分別為2,3和2為什么從胚乳著手三倍體研究?1.胚乳細(xì)胞是三倍體,由其形成的植株可能是三倍體。(可能性)2.胚乳細(xì)胞在離體條件下可以增生和進(jìn)行器官分化。(可行性)胚乳培養(yǎng)歷史1949, LaRue首次報道了由玉米未成熟胚乳建立能不斷生
2、長的愈傷組織。注意2個表格表7.1;7.2;前人的工作是后續(xù)工作的指導(dǎo)或警示。胚乳愈傷組織的建立大多數(shù)被子植物的胚乳都要經(jīng)歷愈傷組織階段才能分化植株。1.胚乳發(fā)育時期的影響胚乳的發(fā)育時期分為早期、旺盛生長期、成熟期。 旺盛生長期的胚乳在離體條件下最容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。此時期是胚乳培養(yǎng)取材的最適期。玉米和小麥:(授粉后)812天。水稻:47天。通常成熟期的胚乳不易誘導(dǎo)愈傷組織,但也有例外。水稻、大戟科、桑寄生科等。2.培養(yǎng)基與激素的影響常用培養(yǎng)基White(WT)、LS、MS*(促進(jìn)愈傷組織的產(chǎn)生和增殖)添加物:酪蛋白水解物(CH)、酵母浸提物(YE)等植物激素對愈傷組織的誘導(dǎo)和生長也很重要。
3、通常生長素和細(xì)胞分裂素的合理搭配在效果上要優(yōu)于單一組分。但是也有例外. 為什么?3.胚在胚乳培養(yǎng)中的作用處于旺盛生長期的未成熟胚乳,在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上無須原位胚的參與就能形成愈傷組織。完全成熟的胚乳則必須先借助原位胚的萌發(fā)使期活化。機(jī)理:胚在萌發(fā)時能產(chǎn)生“胚因子”(成分不明)。外源GA3能部分取代“胚因子”作用。類似于看護(hù)培養(yǎng)基。如果胚乳培養(yǎng)遇到困難,據(jù)你所學(xué),你將采取的措施會有那些?4.其它因素的影響蔗糖濃度通常:3%5%;小黑麥:8%胚乳愈傷組織生長的最適溫度為25左右。光照、pH值:不同植物有不同要求由胚乳愈傷組織再生植株1.器官發(fā)生途徑胚乳愈傷組織分化過程中,有些植物對激素種類的要求表現(xiàn)了
4、嚴(yán)格的選擇性。有機(jī)添加物作用因植物而異。大部分植物要經(jīng)過誘導(dǎo)生根才能得到完整的胚乳再生植株。2.胚胎發(fā)生途徑胚乳愈傷組織 胚狀體 再生植株各因素視植物而定。此兩條途徑為前人工作的總結(jié)。除了兩條途徑本身還要注意兩點。1)前人工作的具體條件、材料是否可以借鑒。2)各因素作用均有例外,應(yīng)具體問題具體分析。胚乳再生植株的染色體倍性變異多數(shù)胚乳愈傷組織及再生植株的染色體數(shù)常發(fā)生變化。影響胚乳細(xì)胞在培養(yǎng)中染色體穩(wěn)定性的因素:1)胚乳類型2)胚乳愈傷組織發(fā)生的部位3)外源激素的種類和水平4)繼代培養(yǎng)時間的長短胚乳培養(yǎng)的應(yīng)用三倍體植株的主要特征:種子敗育三倍體植株看重其他品質(zhì),或其不結(jié)種子的特性。(通常獲得三
5、倍體的方法是四倍體和二倍體雜交。)1)產(chǎn)生三倍體桉樹桉樹胚乳愈傷組織誘導(dǎo)的三倍體再生植株2n=223n=33來自李守嶺等,西北林學(xué)院學(xué)報,2008注意一個事實:羅田甜柿(Diospyros kaki Thunb.Luotiantianshi; 2n=6x=90)柿胚乳細(xì)胞為九倍體(2n=9x=135)(來自陳緒中等,園藝學(xué)報,2004)此研究結(jié)果有無疑問之處?再生植株的倍性。胚乳培養(yǎng),應(yīng)是去除胚的。不然結(jié)果可靠性降低。2)促進(jìn)幼胚生長3)研究某些天然產(chǎn)物的合成除了產(chǎn)生三倍體,胚乳培養(yǎng)還有什么作用?補(bǔ)充概念三體:在一般二倍體的體細(xì)胞染色體組內(nèi),某對染色體有三個,比正常的二倍體多一個,即2n1。 三體(2n1)可產(chǎn)生n和n1兩種配子,由于多余的一條染色體可能丟失,因而n1配子常常少于50。 非整倍體:以合
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