經(jīng)典色譜法液相

1、經(jīng)典色譜法液相第1頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二第1節(jié) 液-固吸附柱色譜(LSC)（一）分離原理（二）常用吸附劑（三）色譜條件的選擇 (四) 操作方法第2頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 各組分與流動相分子爭奪吸附劑表面活性中心， 利用吸附劑表面的活性吸附中心對不同組分的吸附 能力差異而實現(xiàn)分離，吸附能力大小用吸附平衡常數(shù)K表示（一）分離原理1.吸附與吸附平衡第3頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二2.吸附等溫線：一定溫度下，某一組分固定相和流動相之間達到平衡時，以Cs為縱坐標，Cm為橫坐標得到的曲線。類型：線性、凸形、凹形

2、等溫線第4頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二吸附等溫線色譜柱內(nèi)溶液濃度的分布流出曲線第5頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二當吸附等溫線是線性時,流出曲線是對稱的,當吸附等溫線是凸型或凹型時，流出曲線形成拖尾峰或前延峰，克服方法：減少進樣量或樣品濃度，利用等溫線的直線部分，防止超載。第6頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（二）、吸附劑對吸附劑的要求：（1）具有較大的表面積和一定的吸附能力（2）顆粒要有一定的細度(d=75-150m，即100-200目)，且粒度均勻（3）與洗脫劑及樣品不起反應(yīng)，不溶解于洗脫劑常用：硅膠、氧化鋁、聚酰

3、胺、活性炭、大孔樹脂第7頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二吸附機制： 表面的硅醇基，與物質(zhì)形成氫鍵適用范圍：微酸性（pH=45）， 適于酸性和中性物質(zhì)失活：水與硅醇基結(jié)合使其失去活性活化：105-110加熱30min粒度：100-200目1. 硅膠（SiO2H2O）中等極性吸附劑第8頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 堿性氧化鋁 pH 910 適于分析堿性、中性物質(zhì) 如：生物堿 中性氧化鋁 pH 7.5 適于分析酸性、堿性和中性物質(zhì) 如：生物堿、揮發(fā)油、萜類、甾體及在酸堿中不穩(wěn)定的苷類、酯、內(nèi)酯等化合物 酸性氧化鋁 pH 45 適于分析酸性、中性物質(zhì)

4、 如：酸性色素、氨基酸、對酸穩(wěn)定的中性物質(zhì)2. 氧化鋁：吸附力較強第9頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二硅膠、氧化鋁的含水量與活性關(guān)系 硅膠含水量%活度級氧化鋁含水量%005315625103815活度測定法：Brockmamn法結(jié)論：含水量越低，活度級別越小，吸附力越強。第10頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二3、聚酰胺商品名：錦綸、尼龍-6不溶于水和有機溶劑，易溶于濃無機酸分離機制：主要是氫鍵吸附適用對象：黃酮類、鞣質(zhì)、醌粒度：20200目氫鍵能力強組分越后出柱 第11頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二4、大孔樹脂是一種具有

5、大孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑。不溶于酸、堿及有機溶劑 分類：非極性和中等極性特點：在水中吸附力較強，在有機溶劑中吸附力較弱適用對象：皂苷類、黃酮苷類化合物粒度：2060目第12頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（三）色譜條件的選擇：1. 被測組分性質(zhì)（極性大小）： 烷烴烯烴醚硝基化合物二甲胺酯酮醛胺酰胺醇酚羧酸依據(jù)被測組分、吸附劑和流動相的性質(zhì)第13頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二2. 吸附劑的選擇： 吸附劑的活性大，對被測組分的吸附能力強 強極性物質(zhì)選擇弱吸附劑 弱極性物質(zhì)選擇強吸附劑酸性成分：硅膠 堿性成分：氧化鋁 黃酮類：聚酰胺第14頁，共89

6、頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 “相似相溶”原則 ：分離極性大的物質(zhì)應(yīng)選用極性大的溶劑作流動相，分離極性小的物質(zhì)應(yīng)選用極性小的溶劑作流動相3、流動相的選擇流動相極性順序：石油醚 環(huán)已烷苯甲苯乙醚三氯甲烷乙酸乙酯丙酮正丁醇乙醇甲醇水常用：混合溶劑 如：不同配比的甲醇-水或甲醇 親脂性成分用氯仿、乙酸乙酯第15頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二4. 三者關(guān)系： 組分 吸附劑 流動相極性大 活性小 極性非(弱)極性 活性大 非極性或弱極性第16頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（四）、操作方法2、上樣3、洗脫1、色譜柱的制備 要求：填裝均勻

7、、緊密，不能有氣泡。 裝柱時柱要垂直，表面平整。 固定相的用量適宜。 柱體：色譜柱 固定相：顆粒大小100-200目，用量 方法：干法裝柱、濕法裝柱4、檢視第17頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二第2節(jié) 液-液分配柱色譜法（LLC）一、基本原理 原理：利用不同組分在固定相中溶解度不同，而進行分離過程：第18頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二二、載體作用：支撐與分散固定液的作用要求：1）化學(xué)惰性，不易與其它物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)2）對被分離組分沒有吸附能力3）能吸留較大量的固定相液體常用載體：硅膠、硅藻土、纖維素等第19頁，共89頁，2022年，5月20日，18

8、點5分，星期二三、固定液、流動相及其選擇分類：正相分配色譜和反相分配色譜正相分配色譜：固定液極性大于流動相固定液：水、各種緩沖溶液、甲醇等強極性物質(zhì)流動相：石油醚、三氯甲烷等低極性物質(zhì)適合分離的物質(zhì)：極性物質(zhì)各種極性物質(zhì)流出順序：t非極性 t中極性 t強極性第20頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二反相分配色譜：固定液極性小于流動相固定液：硅油、液狀石蠟等極性小物質(zhì)流動相：水、與水相混溶的有機溶液適于分離物質(zhì)：中等極性至非極性物質(zhì)各種極性物質(zhì)流出順序：t極性 t中極性 t非極性第21頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二選擇原則： 固定液與流動相的選擇，要

9、根據(jù)被分離物中各組分在兩相中的溶解度之比即分配系數(shù)而定?？上仁褂脤Ω鹘M分溶解度大的溶劑為洗脫劑，再根據(jù)分離情況改變洗脫劑的組成，即在流動相中加入一些可調(diào)節(jié)溶解度的溶劑以改變各組分被分離的情況與洗脫速率。第22頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二四、操作方法1.固定液的涂布與裝柱： 裝柱前，首先將固定液與載體混合均勻 2.加樣與洗脫：加樣方法：試樣配成濃溶液 ； 試樣溶液用少量固定相吸附，待溶劑揮干后，加入柱內(nèi)； 用一塊比色譜柱內(nèi)徑略小的圓形濾紙吸附試樣溶液，待溶劑揮發(fā)后，加入柱內(nèi) 第23頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二洗脫：洗脫時流動相應(yīng)先與固定相互

10、相飽和，防止固定相流失應(yīng)用：適合各種類型化合物的分離第24頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二第3節(jié) 離子交換柱色譜法（IEC）1、離子交換樹脂：樹脂：母體骨架是苯乙烯和二乙烯苯聚合而成的球形網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子聚合物-SO3H、-COOH 陽離子交換樹脂 -N(CH3)3+、-NH2 陰離子交換樹脂 定義：利用離子交換劑對各組分交換性能的差異使其分離分析的方法第25頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二陽離子交換樹脂：強酸型弱酸型樹脂酸性強度次序交換與再生反應(yīng)第26頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二陰離子交換樹脂：強堿型 如弱堿型 如交

11、換與再生反應(yīng)第27頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二交聯(lián)度：交聯(lián)劑（如二乙烯苯）的用量，重量百分比表示陽離子交換樹脂交聯(lián)度以8，陰離子交換樹脂交聯(lián)度以4左右為宜。高交聯(lián)度樹脂緊密網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，交換速度慢，但選擇性好，反之，則具有較好的滲透性，選擇性差。2、性能第28頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二交換容量：每克干樹脂含有可交換基團的數(shù)目，單位以mmol/g表示。交換容量表示離子交換樹脂進行離子交換能力大小。實際交換容量與理論有所不同。溶脹：樹脂吸收水分后，引起的膨脹。溶脹程度取決于交聯(lián)度高低，交聯(lián)度高，溶脹小，反之，溶脹大。第29頁，共89頁，2022

12、年，5月20日，18點5分，星期二粒度：交換樹脂顆粒的大小，一般以溶脹狀態(tài)下通過的篩孔來表示。顆粒小，離子交換達到平衡快，但洗脫慢。第30頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二3、離子交換平衡平衡常數(shù)KA/B也稱離子選擇性系數(shù)，是衡量某樹脂交換能力大小的一種量度。K越大，保留時間越長。第31頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二4、影響選擇性系數(shù)的因素離子價數(shù)越高，水合離子半徑越小和離子交換樹脂的親和力越大，即選擇系數(shù)越大（1）強酸型陽離子交換樹脂不同價態(tài)的離子，電荷越高，親和力越強，選擇性系數(shù)越大，如Th4+ Al3+ Ca2+Na+ 一價陽離子的親和力順

13、序為Ag+ Tl+ Cs+ Rb+ K+ NH4+ Na+ H+Li+ 第32頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 （2）強堿型陰離子交換樹脂 陰離子的親和力順序為檸檬酸根SO42-CrO42-I-HSO4-NO3-Br-CN-NO2-Cl-HCOO-CH3COO-OH-F-第33頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二5、操作方法及應(yīng)用（1）樹脂處理和再生處理目的：除去雜質(zhì)、轉(zhuǎn)變?yōu)樗枰男问疥栯x子樹脂轉(zhuǎn)變?yōu)闅湫?，陰離子樹脂轉(zhuǎn)變?yōu)槁刃突蛄u基型。處理方法：樹脂再生：第34頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（2）裝柱處理好的樹脂加少量水攪

14、拌后倒入色譜柱中，注意防止氣泡進入。（3）洗脫洗脫劑一般為水，或弱酸弱堿溶液，必要時加入少量有機溶劑（4）應(yīng)用除去干擾離子，微量元素的富集、水的純化等第35頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二第4節(jié) 空間排阻柱色譜法（SEC）又稱為凝膠色譜法、分子排阻色譜法、分子篩色譜法和尺寸排阻色譜法分類：凝膠滲透色譜法（流動相為有機溶劑）凝膠過濾色譜法（流動相為水溶液）作用：用于大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、多糖的分離第36頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二一、基本原理分子篩效應(yīng)：分子排阻色譜是根據(jù)溶質(zhì)分子大小的不同即分子篩效應(yīng)而進行分離的。 大分子的流程短，移動速度快，先

15、流出色譜柱；小分子的流程長，移動速度慢，后流出色譜柱；而中等分子居兩者之間，可使分子大小不一樣的混合組分實現(xiàn)分離。第37頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二滲透系數(shù)K 溶膠孔穴內(nèi)外同等大小的溶質(zhì)分子處于擴散平衡狀態(tài)。 滲透系數(shù)K由溶質(zhì)分子的體積大小與孔穴的孔徑大小的相對關(guān)系決定，與流動相的種類無關(guān)。 K越大，保留時間越長第38頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二三、操作方法及應(yīng)用 （自學(xué)）二、凝膠的分類 （自學(xué)）第39頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 小結(jié)經(jīng)典液相柱色譜的主要用途： 色譜分析前樣品預(yù)處理、化學(xué)分離 熟悉各種柱的使用

16、 掌握常用吸附劑的性質(zhì) 掌握色譜條件的選擇 掌握洗脫規(guī)律第40頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二第5節(jié) 薄層色譜法（Thin Layer chromatography，TLC）1、定義：將固定相(吸附劑)均勻地鋪在具有光潔表面的薄板上形成薄層，在此薄層上進行色譜分離的方法。薄板：玻璃、塑料薄膜、鋁箔吸附劑：硅膠、氧化鋁第41頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二操作形式:平面流動相：展開劑操作：點樣、展開驅(qū)動力:毛細管力第42頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二特點：分析時間短 分離能力強，一次可分離多個組分靈敏度高檢視方便設(shè)備簡單分

17、類：1.按分離機理分：吸附、分配、離子交換、空間排阻色譜等。2.按薄層板的分離效率不同：經(jīng)典薄層色譜法和高效薄層薄層色譜法應(yīng)用：藥物的定性鑒別第43頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二一、基本原理及名詞術(shù)語1.分離過程：以吸附薄層色譜法為例由于各組分與吸附劑具有不同的吸附能力，展開劑對各組分的溶解能力不同，即各組分有不同的吸附平衡常數(shù)，因此在展開過程中，產(chǎn)生差速遷移，實現(xiàn)分離。第44頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二3、比移值（Rf）可用范圍：0.2-0.8 最佳范圍： 2、原點、溶劑前沿、展距分離的前提： k不同l0l第45頁，共89頁，2022年，

18、5月20日，18點5分，星期二1、Rf與K有關(guān)，即與組分性質(zhì)（溶解度）以及薄層板和展開劑的性質(zhì)有關(guān)2、色譜條件一定，Rf只與組分性質(zhì)有關(guān)，是薄層色譜基本定性參數(shù)，說明組分的色譜保留行為討 論第46頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二3. 相對比移值Rs 討論參考物與被測組分在完全相同條件下展開 可以消除系統(tǒng)誤差，大大提高重現(xiàn)性和可靠性；參考物可以是后加入純物質(zhì)，也可是樣品中已知組分相對比移值Rs與組分、參考物性質(zhì)及色譜條件有關(guān)，范圍可以大于或小于121LLRRRffs=中心的距離原點到參考物斑點質(zhì)量心的距離原點到組分斑點質(zhì)量中（參）（組）第47頁，共89頁，2022年，5月

19、20日，18點5分，星期二二、固定相常用的固定相：硅膠、氧化鋁、聚酰胺等粒度：200300目吸附劑的選擇：根據(jù)樣品的性質(zhì)如極性、酸堿性及溶解度來選擇如：氧化鋁一般適合堿性物質(zhì)和中性物質(zhì)的分離硅膠適用于酸性及中性物質(zhì)的分離第48頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二1.硅膠：硅膠H、硅膠G、硅膠HF254、硅膠GF254G：指含煅石膏(Gypsum)黏合劑H：不含黏合劑F254：含一種在254nm下能發(fā)出黃綠色熒光的無機熒光劑F365：含熒光劑，365nm紫外光照發(fā)光粒度：1040m(250300目）含熒光劑的硅膠適用于本身不發(fā)光又無適當顯色劑顯色的物質(zhì)第49頁，共89頁，20

20、22年，5月20日，18點5分，星期二三、展開劑展開劑選擇：主要根據(jù)被分離物質(zhì)的極性、吸附劑的活性及展開劑本身的極性來選擇 組分 吸附劑 流動相極性大 活性小 極性非(弱)極性 活性大 非極性或弱極性第50頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 制板 點樣 展開 檢視四、操作方法第51頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（一）制板（2）粘合劑：水或0.30.7%CMC-Na，用量1:3（3）涂鋪厚度：0.3mm，0.5mm（4）活化：自然晾干后，105烘1h（5）貯備：干燥器（1）載板的準備：多用玻璃板，要求表面光滑，平整清潔。常用規(guī)格：10cm10cm、

21、20cm20cm、載玻片等第52頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二薄層板的鋪制方法（1）手工涂鋪法（2）機械涂鋪法（半自動、全自動）（3）燒結(jié)玻璃法第53頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（1）樣品溶液的制備： 一般用溶解度大，低沸點、弱極性、易揮發(fā)的有機溶劑。不宜用水。（2）器具：毛細管、微量注射器、自動點樣器2、點樣（3）點樣量：110l操作要點：溶解樣品的溶劑、點樣量和正確的點樣方法第54頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二（4）點樣方法：垂直方向，不能用力太大（5）點樣后溶劑須揮干點樣斑點直徑2mm一般為圓點，或條帶狀1c

22、m1cm1cm第55頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二1) 展開裝置：展開槽（層析缸）3、展 開單槽雙槽第56頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二展距：815cm2）展開方式 a 上行法展開、近水平展開方式第57頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 b 單向多次展開：取展開一次后的薄層板，揮干溶劑，再用同一種展開劑，按同樣的展開方向進行多次展開，以達更好的分離效果。ABAB一次展開多次展開第58頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 c 單向多級展開：取一次展開后的薄層板，揮干溶劑，再改用另一展開劑，按同樣的展開方

23、向進行多次展開，以達更好分離效果。 d 雙向展開：取一次展開后的薄層板，揮干溶劑，將薄層板旋轉(zhuǎn)90，再改用另一種展開劑展開，以達更好分離效果。對象：極性相差較大的組分對象：復(fù)雜體系中極性相差較小的組分第59頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二3）注意事項 a 層析缸必須密閉良好 b 防止邊緣效應(yīng)邊緣效應(yīng)：同一物質(zhì)的色譜斑點在同一薄層板上出現(xiàn)的兩邊緣的Rf值大于中間部分的Rf值的現(xiàn)象。 第60頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二原因：色譜缸內(nèi)溶劑蒸氣未達飽和，造成展開劑的蒸發(fā)速率在薄層板兩邊與中間部分不等克服辦法： a “預(yù)飽和” b 層析缸內(nèi)壁貼浸濕的濾

24、紙條 c 點樣時不要太靠邊緣第61頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 c 在展開過程中注意恒溫恒濕相對濕度硫酸（ml）+水（ml）32%6810042%5710058%39.510065%3410072%27.510088%1.8100溫度和濕度的改變會影響Rf值和分離效果，降低重現(xiàn)性。 第62頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二對展開劑的基本要求： 不與組分或吸附劑存在化學(xué)反應(yīng) 使樣品各組分完全分離 使待測組分的Rf在0.30.5 展開后各斑點圓而集中，不拖尾 具有適中的沸點和小的粘度 臨用前配制4）展開劑第63頁，共89頁，2022年，5月20日，

25、18點5分，星期二展開劑的組成：單一溶劑、多元溶劑 單一溶劑：重現(xiàn)性好，分離能力差 多元展開劑：可改善分離效果，重現(xiàn)性差展開系統(tǒng)的優(yōu)化優(yōu)化原則：先調(diào)整展開劑極性使待測組分Rf值適中，保持這個極性不變，改變展開劑的選擇性，直至所有組分有合適的分離度第64頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二Stahl圖解法展開劑極性非極性V活性I吸附劑待測物非極性極性Rf值的決定因素：組分極性展開劑的極性 吸附劑的活性第65頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二 加入少量的酸堿常用酸：甲酸、冰醋酸常用堿：濃氨水、乙二胺 展開劑用量：展開劑浸沒薄板下端約0.5cm第66頁，共8

26、9頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二附：常用展開系統(tǒng)人參皂苷、黃芪甲苷：氯仿-甲醇-水（65：35：10，下層）正丁醇-醋酸乙酯-水（4：1：5，上層）黃酮苷：醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10：1：1：1）糖：正丁醇-冰醋酸-水（4：1：5，上層）中等極性：甲苯-醋酸乙酯-甲酸（10：3：0.5) 第67頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二苯醋酸乙酯甲醇異丙醇濃氨水（6：3：1.5：1.5：0.5）例：第68頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二1、定位方法：日光檢視4.檢 測熒光淬滅斑點2.紫外光下檢視（254 nm、365nm ）第69頁，共

27、89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二3、顯色檢視：利用顯色劑與待測物質(zhì)反應(yīng)，從而顯色。顯色劑分類：通用型顯色劑和專屬型顯色劑通用型顯色劑：對大部分物質(zhì)均顯色的試劑。如碘、硫酸乙醇等專屬型顯色劑：對某個或某一類化合物顯色的試劑。如茚三酮 ，三氯化鐵乙醇液等第70頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二常用顯色劑10%硫酸乙醇溶液 5%三氯化鐵乙醇液（酸性）：酚生物堿：改良碘化鉍鉀黃酮：5%三氯化鋁乙醇液蒽醌：氨氣 揮發(fā)油及低極性分子： 5%香草醛硫酸液第71頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二五、薄層色譜法的應(yīng)用定性分析限量分析含量測定：洗脫測定

28、法 薄層掃描法第72頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二依據(jù)：固定色譜條件下，相同物質(zhì)的Rf值相同對照品供試品 1 2定性分析第73頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二限量檢查如：附子中烏頭堿的限量檢查1. 烏頭堿對照品2，3，4. 樣品1 2 3 4第74頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二定量分析一、冼脫法二、薄層掃描法（TLCS）第75頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二75薄層掃描法定義：將一定波長的單色光照射展開后的薄層板，測定薄層色譜斑點的吸收度，根據(jù)其色譜峰積分面積與待測物濃度或量成正比的定量方法薄層

29、色譜掃描曲線hAL第76頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二常用：CS-9000雙波長飛點掃描儀 CAMAG SCANNER 光源單色器連續(xù)光單色光狹縫樣品點 I0I檢測器記錄儀器結(jié)構(gòu)：第77頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二單色器檢測器1薄層板光源A檢測器21. 基本原理：折射光吸光度反射光吸光度：第78頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二2. 掃描條件的選擇1）光學(xué)模式的選擇反射法：測量的是反射光的強度透射法：測量的是透射光的強度2）波長模式的選擇單波長模式：使用一種波長的光束對薄層進行掃描。分為單光束及雙光束兩種形式。第79頁，共89頁，2022年，5月20日，18點5分，星期二單光束單波長系統(tǒng)檢測器單色器檢測器薄層板光源A