保健食品原料用菌種安全性檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(2020年版)_第1頁(yè)
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加入5.2.3.1獲得的上清液，調(diào)整離心后的沉淀物使其酵母數(shù)達(dá)到2.5x108CFU/mL（上清液量不夠時(shí)可用空白培養(yǎng)基補(bǔ)齊）。濃縮菌懸液的制備按照5.2.2中獲得的酵母菌終濃度達(dá)到6.25x108CFU/mL所需要的生理鹽水體積，根據(jù)離心的培養(yǎng)物體積，按相同比例加入5.2.3.1獲得的培養(yǎng)上清液2.5倍濃縮液，調(diào)整離心后的沉淀物使其菌數(shù)達(dá)到6.25x108CFU/mL。灌胃小鼠不少于80只，雌雄各半，分別隨機(jī)分成8組（每組不少于10只），包括雄性小鼠培養(yǎng)基對(duì)照組、雄性小鼠菌懸液組、雄性小鼠2.5倍濃縮培養(yǎng)基對(duì)照組、雄性小鼠2.5倍菌懸液組；雌性小鼠培養(yǎng)基對(duì)照組、雌性小鼠菌懸液組、雌性小鼠2.5倍濃縮培養(yǎng)基對(duì)照組及雌性小鼠2.5倍菌懸液組。各組均以20mL/kg.BW的體積給小鼠灌胃1次，灌胃前應(yīng)禁食過(guò)夜（16心，灌胃后3h4h喂食。觀察動(dòng)物經(jīng)口灌胃后每天觀察1次，至少連續(xù)觀察21d,觀察指標(biāo)同附錄A中的5.1.4。6結(jié)果與報(bào)告對(duì)5.1和5.2的動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和綜合評(píng)價(jià)，內(nèi)容同附錄A中的條款6。26

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