氮測定標(biāo)準操作規(guī)程

1、氮測定標(biāo)準操作規(guī)程1 簡述1.1 氮測定法（中國藥典2005年版二部附錄 D）使用于含氮有機物的含氮量測定。1.2 本法系將供試品在硫酸及催化劑作用下，經(jīng)強熱分解使有機氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨，再經(jīng)強堿堿化使氨餾出并吸收于硼酸液，最后用硫酸滴定液滴定，求出氮含量。簡述為消化、蒸餾及滴定三步。1.3 氮測定法分第一法與第二法，應(yīng)按中國藥典該品種項下的規(guī)定選用。2 儀器與試藥2.1 儀器2.1.1 常量定氮儀由500ml凱氏燒瓶、氮氣球和冷凝管組成。2.1.2 半微量定氮儀由1000ml圓底燒瓶、連有氮氣球的蒸餾器和直形冷凝管等組成。2.1.3 分析天平 感量為0.1mg的天平，適用于精密稱取0.1g以上者

2、；感量為0.01mg的天平，適用于精密稱量0.1g以下者。2.1.4 消化與蒸餾可用電爐或煤氣加熱。2.1.5 蒸餾連接用的乳膠管或橡膠管，應(yīng)用氫氧化鈉試液煮20分鐘，洗去堿液后用水煮沸，洗凈，晾干。2.2 試藥2.2.1 試劑均為化學(xué)純。2.2.2 滴定液的配制和標(biāo)定應(yīng)符合中國藥典附錄規(guī)定。硫酸滴定液（0.005mol/L）用硫酸滴定液（0.05mol/L）定量稀釋制成。2.2.3試液、指示液的配制均+應(yīng)符合中國藥典附錄規(guī)定。2.2.4 硫酸銅用作消化催化劑；硫酸鉀用以提高硫酸的沸點，也可將硫酸鉀與硫酸銅按10:1比例混合研勻使用。3 操作方法3.1 第一法（常量法）3.1.1 稱樣 取供試

3、品適量（約相當(dāng)于含氮量2530mg），精密稱定，置干燥的500ml凱氏燒瓶中。供試品如為固體或半固體，可用定量濾紙包裹加入，也可直接稱入。3.1.2 消化 在凱氏燒瓶中依次加入硫酸鉀（或無水硫酸鈉）10g和硫酸銅0.5g，再沿瓶壁緩緩加入硫酸20ml；若瓶頸上有少量供試品黏附，可用硫酸沖下，加玻璃珠或沸石23粒，在瓶口置一小漏斗并使燒瓶成45斜置，用直火（加熱部位保持在液面之下）緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點以下，等泡沸停止，消化液由黑色漸變棕色時，強熱至沸，俟溶液成澄清的綠色時，繼續(xù)加熱30分鐘，放冷，沿瓶壁緩緩加水250ml，搖勻，放冷。3.1.3 蒸餾 沿瓶壁加40%氫氧化鈉溶液75m

4、l，使流至瓶底自成一液層，加鋅粒數(shù)粒，用氮氣球?qū)P氏燒瓶與冷凝管連接（氮氣球可防止堿液濺入硼酸吸收液）。另取2%硼酸溶液50ml，置500ml錐形瓶中，加甲基紅-溴甲酚綠指示液10滴，將冷凝管尖端浸入硼酸溶液的液面下；輕輕搖動凱氏燒瓶，搖勻（防止溫度驟然變化引起硼酸接受液倒吸），加熱蒸餾，蒸至接受液的總體積約為250ml時，將冷凝管尖端提出液面，使蒸汽沖洗約1分鐘，用水淋洗尖端，停止蒸餾。3.1.4 滴定 餾出液用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定至溶液由藍綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，即得。每1ml的硫酸滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于1.401mg的N。3.2 第二法（半

5、微量法）3.2.1 稱樣 取供試品適量（約相當(dāng)于含氮量1.02.0mg），精密稱定，置干燥的3050ml凱氏燒瓶中。3.2.2 消化 在燒瓶中加硫酸鉀（或無水硫酸鈉）0.3g與30%硫酸銅溶液5滴，再沿瓶壁用吸管滴加硫酸2.0ml，并加玻璃珠12粒，在凱氏燒瓶口放一小漏斗，并使燒瓶成45斜置，用小火緩緩加熱使消化頁保持在沸點以下，并使小火保持在液面下，等泡沸停止，溶液由黑色變?yōu)樽攸S色時，逐步加大火力強熱至沸，俟溶液成成名綠色后，除另有規(guī)定外，繼續(xù)加熱10分鐘，放冷，加水2ml，放冷。3.2.3 蒸餾 按中國藥典附錄附圖連接蒸餾裝置，A 瓶中加水適量與甲基紅指示液數(shù)滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠

6、或沸石數(shù)粒。將連有氮氣球的蒸餾器和直形冷凝管用水加熱蒸氣淋洗，并使水自冷凝管尖端反沖洗滌23次，從加樣品口淋洗1次，洗滌液排出蒸餾管。取2%硼酸溶液10ml，置100ml錐形瓶中，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液5滴，將冷凝管尖端浸入液面下；將凱氏燒瓶中已消化的內(nèi)容物經(jīng)漏斗移入連有氮氣球的蒸餾器中，用水少量淋洗凱氏燒瓶及漏斗23次，每次約35ml，再加入40%氫氧化鈉溶液10ml，用水少量洗滌漏斗1次，關(guān)閉漏斗（加少量水封閉出口），進行蒸餾（蒸餾時不宜泡沸過高，以免濺至氮氣球），至硼酸液由酒紅色變?yōu)樗{綠色起，繼續(xù)蒸餾約10分鐘，將100ml錐形瓶下移至冷凝管尖端提出液面，使蒸氣繼續(xù)沖洗約1分鐘，用

7、水淋洗尖端后停止蒸餾。3.2.4 滴定 餾出液用硫酸滴定液（0.005mol/L）滴定至溶液由藍綠色變?yōu)榛易仙?，并將滴定結(jié)果用空白試驗（空白餾出液的容積應(yīng)與供試品所得餾出液的容積基本相等）校正。每1ml的硫酸滴定液（0.005mol/L）相當(dāng)于1.401mg的N。3.2.5 空白試驗 照供試品消化、蒸餾、滴定的全過程，以相同條件下作空白試驗，用硫酸滴定液（0.005mol/L）滴定至相同的終點，其讀數(shù)用于校正供試品滴定的讀數(shù)。4 注意事項4.1 蒸餾裝置連接后應(yīng)嚴密。4.2 消化時，若發(fā)現(xiàn)瓶壁上有黑點，可適當(dāng)轉(zhuǎn)動燒瓶，使硫酸回流時將黑點洗下，以保證消化完全。4.3 消化液應(yīng)放冷后，再沿瓶壁緩緩

8、加水，防止供試品液局部過熱爆沸，沖出瓶外。4.4 蒸餾過程中若無黑色CuO析出，說明加入堿量不足，應(yīng)補足堿量或重作實驗。4.5 配制40%氫氧化鈉溶液時，宜邊加振搖，避免未溶解部分沉積于容器底部而難于溶解。4.6 約80%以上的氨在最初12分鐘內(nèi)蒸出，初蒸速度不宜太快，以免氨蒸出后未能及時被吸收而逸失。4.7 錐形瓶加入硼酸溶液和指示劑后應(yīng)顯酒紅色；如顯綠色，說明錐形瓶有堿性物質(zhì)污染。蒸餾出的氨接受液應(yīng)盡快滴定，避免放置時間過長，影響測定結(jié)果。5 記錄與計算5.1 記錄 應(yīng)記錄天平型號及室溫和相對濕度，供試品與試藥的名稱、規(guī)格及取用量，滴定液的名稱（可用鹽酸滴定液）、F值及消耗量（ml）。計算含氮量 X % = TF（VSVO） 100% W式中 T為滴定度（mg/ml）； VS與VO分別為供試品與空白滴定時硫酸滴定液消耗的體積（ml）； F為滴定液的F值； W為供試品的重量（mg）。供試品應(yīng)測定2份