細(xì)菌生理消毒

1、第二章 細(xì)菌的生理1第一節(jié) 細(xì)菌的理化性狀一、細(xì)菌的化學(xué)組成1.水：占細(xì)胞總重量的75%90% 2.固形成分：蛋白質(zhì)（50%80% ）、糖類（10%30% ） 、有機(jī)物：碳、氫、氮、氧、磷、硫等無(wú)機(jī)離子：鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、氯原核微生物特有的化學(xué)組成：肽聚糖， 胞壁酸，磷壁酸等2二、細(xì)菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)半透明表面積 體積小、表面積大(利于物質(zhì)交換，致代謝旺、繁殖快)帶電現(xiàn)象革蘭陽(yáng)性菌 pI 23革蘭陰性菌 pI 45半透性細(xì)胞壁、細(xì)胞膜有半透性(利于吸收和排泄)滲透壓中性環(huán)境帶負(fù)電荷革蘭陽(yáng)性菌 20-25大氣壓革蘭陰性菌 5-6 大氣壓等電點(diǎn)：蛋白質(zhì)或兩性電解質(zhì)(如氨基酸)所帶凈電荷為零時(shí)溶

2、液的pH3二、細(xì)菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)半透明表面積 體積小、表面積大(利于物質(zhì)交換，致代謝旺、繁殖快)帶電現(xiàn)象革蘭陽(yáng)性菌 pI 23 革蘭陰性菌 pI 45半透性細(xì)胞壁、細(xì)胞膜有半透性(利于吸收和排泄)滲透壓中性環(huán)境下帶負(fù)電荷革蘭陽(yáng)性菌 20-25大氣壓革蘭陰性菌 5-6 大氣壓等電點(diǎn)：蛋白質(zhì)或兩性電解質(zhì)(如氨基酸)所帶凈電荷為零時(shí)溶液的pH，此時(shí)蛋白質(zhì)或兩性電解質(zhì)在電場(chǎng)中的遷移率為零。4一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類型自養(yǎng)菌 異養(yǎng)菌以簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)物為原料，合成菌體成分必須以多種有機(jī)物為原料，合成菌體成分并獲得能量化能自養(yǎng)光能自養(yǎng)腐生型寄生型第二節(jié) 細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與生長(zhǎng)繁殖5二、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)6營(yíng)養(yǎng)：水 碳源 氮源

3、 無(wú)機(jī)鹽 生長(zhǎng)因子 酸堿度：最適pH7.0-7.6 溫度: 攝氏37度氣體: 根據(jù)對(duì)氧氣的需要不同分為： 專性需氧菌（obligate aerobe）： 有完善的呼吸酶系統(tǒng) 微需氧菌（microaerophilic bacterium） 低氧壓時(shí)生長(zhǎng)最好，高時(shí)抑制 兼性厭氧菌（facultative anaerobe） 大多數(shù)病原菌 專性厭氧菌（obligate anaerobe） 缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng) 對(duì)CO2的要求： 5%三、細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的影響因素7繁殖方式：二分裂方式,無(wú)性繁殖繁殖速度 : 代時(shí)：細(xì)菌繁殖一代所需時(shí)間。 細(xì)菌的代時(shí)：約為20-30分鐘結(jié)核分枝桿菌: 約18-20小時(shí)四.

4、細(xì)菌群體生長(zhǎng)規(guī)律與生長(zhǎng)曲線8 細(xì)菌群體的生長(zhǎng)規(guī)律生長(zhǎng)曲線(growth curve)：一定量細(xì)菌接種在適宜的液體培養(yǎng)基中，經(jīng)適宜的溫度培養(yǎng)，細(xì)菌生長(zhǎng)形成規(guī)律。以活菌數(shù)的對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，生長(zhǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，繪出的曲線。遲緩期 (lag phase) ， 對(duì)數(shù)期 (logarithmic phase)穩(wěn)定期 (stationary phase) ，衰退期 (decline phase)9遲緩期 lag phase 1-4小時(shí)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期 logarithmic phase 4-12小時(shí)（最典型時(shí)期）穩(wěn)定期 stationary phase 12-18小時(shí)（毒素，抗生素的產(chǎn)生） 衰亡期 decline p

5、hase10一、培養(yǎng)基 culture medium人工配制而成的，適合微生物生長(zhǎng)繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)物基質(zhì)。第三節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng)按成分不同劃分天然培養(yǎng)基：由天然有機(jī)物組成合成培養(yǎng)基：由化學(xué)成分完全確定的物質(zhì)配制而成11液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基：2%3%瓊脂粉半固體培養(yǎng)基：0.2%0.7%瓊脂粉根據(jù)物理狀態(tài)劃分液體培養(yǎng)基 固體斜面培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基12按用途劃分1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基3 鑒別培養(yǎng)基4 選擇培養(yǎng)基2 營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基5 厭氧培養(yǎng)基13固體培養(yǎng)光滑性菌落（S型）粗糙型菌落（R型）二、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象14液體培養(yǎng)沉淀生長(zhǎng)混濁生長(zhǎng)表面生長(zhǎng)15半固體培養(yǎng)混濁生長(zhǎng)沿穿刺線線狀生長(zhǎng)有鞭毛細(xì)菌無(wú)

6、鞭毛細(xì)菌動(dòng)力試驗(yàn)16三、人工培養(yǎng)細(xì)菌的用途獸醫(yī)中的應(yīng)用：疾病的診斷、細(xì)菌學(xué)研究、生物制品的制備；工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用：制造各種產(chǎn)品、處理垃圾、制造菌肥農(nóng)藥等；基因工程中的應(yīng)用：表達(dá)重組DAN制備產(chǎn)品。17第四節(jié) 細(xì)菌的新陳代謝分解代謝合成代謝 18常見(jiàn)的生化反應(yīng)：對(duì)糖的發(fā)酵對(duì)蛋白質(zhì)的發(fā)酵枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈嚕∟）甲基紅試驗(yàn)（MR）吲哚試驗(yàn)(色氨酸）硫化氫試驗(yàn)（含S氨基酸）單糖發(fā)酵試驗(yàn)VP試驗(yàn)其他試驗(yàn)（一）對(duì)細(xì)菌有鑒別意義的代謝產(chǎn)物及其檢查方法 - + 尿素酶試驗(yàn)19（二）合成代謝產(chǎn)物及其在醫(yī)學(xué)上的意義利用分解代謝的產(chǎn)物和能量，合成新的物質(zhì)合成產(chǎn)物熱原質(zhì)毒素與侵襲性酶色素抗生素細(xì)菌素維生素20

7、熱原質(zhì)毒素和侵襲性酶色素： 細(xì)菌鑒別細(xì)菌素：細(xì)菌分型、流行病學(xué)調(diào)查抗生素維生素致病性治療 21第三章 消毒滅菌與實(shí)驗(yàn)室生物安全22主要內(nèi)容概念物理消毒滅菌法化學(xué)消毒滅菌法影響消毒滅菌效果的因素實(shí)驗(yàn)室生物安全23一、概念消毒（disinfection）：殺死物體上或者環(huán)境中病原微生物并不一定殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。滅菌（sterilization）：殺死物體上所有微生物的方法（芽胞，病原微生物，非病原微生物）。抑菌（bacteriostasis）：抑制人體內(nèi)部或外部細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。防腐（antisepsis）：體外防止或抑制細(xì)菌繁殖的方法。24無(wú)菌（asepsis）：不存在任何活菌

8、。無(wú)菌操作：防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其他物品的操作技術(shù)。清潔：能減少微生物附著在無(wú)機(jī)物體表面的數(shù)量的方法。凈化：能顯著減少或破壞一定空間中微生物數(shù)量和生物活性的方法。25二、消毒滅菌方法： 1.物理消毒滅菌法 2.化學(xué)消毒滅菌法 熱力紫外線電離輻射過(guò)濾除菌干燥低溫26 高溫殺滅細(xì)菌 干熱滅菌法 dry heat 濕熱滅菌法 moist heat 焚燒 巴氏消毒法 燒灼 煮沸法 干烤 高壓蒸氣滅菌法 紅外線 物理消毒滅菌法一、熱力滅菌法蛋白變性核酸降解細(xì)胞膜破壞27焚燒最徹底的滅菌方法燒灼直接用火焰滅菌的方法干烤加熱至160-170 2小時(shí)紅外線只能表面產(chǎn)生熱效應(yīng)干熱滅菌法28濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌法

9、最有效的滅菌方法 121.3 1520分鐘煮沸消毒法水煮100 5分鐘（繁殖體）2小時(shí)（芽胞）流動(dòng)蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法水蒸氣100 1530分鐘（繁殖體）反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（71.7 1530s）殺滅致病菌29濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱存在30高壓蒸汽滅菌法：一種最有效的滅菌方法?？蓺绨?xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。常用于培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械和敷料等耐高溫、耐濕熱物品的滅菌，是醫(yī)院使用最廣的滅菌方法。 立式電自動(dòng)高壓滅菌器手提式高壓滅菌鍋31二

10、、輻射殺菌法紫外線殺菌機(jī)理：干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄波長(zhǎng)200300nm的紫外線具有殺菌作用不耐熱物品的表面消毒特 點(diǎn)： 紫外線穿透力較弱應(yīng)用范圍：空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室32殺菌機(jī)理：產(chǎn)生游離基，破壞DNA應(yīng)用范圍：一次性醫(yī)用塑料制品的消毒電離輻射包括高速電子、X射線和射線等食品的消毒不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分33三、過(guò)濾除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去，以達(dá)到無(wú)菌目的。濾菌器含有微細(xì)小孔0.22微米，只允許液體或氣體通過(guò)，而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過(guò)。適用范圍血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。34四、超聲波殺菌法 超聲波通過(guò)水時(shí)發(fā)生空（腔）化作用，造成液體壓力改變，裂解細(xì)

11、菌、細(xì)胞等。適用范圍:用于粉碎細(xì)胞，提取細(xì)胞抗原等35五、干燥及低溫抑菌法冷凍真空干燥法：在低溫狀態(tài)下真空抽去水分36化學(xué)消毒滅菌法一、消毒劑的主要種類按殺菌能力分高效消毒劑、中效消毒劑、低效消毒劑按殺菌機(jī)制分促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固、干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝、損傷細(xì)菌細(xì)胞膜按化學(xué)結(jié)構(gòu)分酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑、烷化劑37類別作用機(jī)制常用種類酚類蛋白變性，細(xì)胞膜損傷石炭酸醇類蛋白變性乙醇重金屬鹽蛋白變性、酶活性喪失紅汞、硫柳汞氧化劑氧化、酶活性喪失過(guò)氧乙酸、碘酒等表面活性劑細(xì)胞膜損傷新潔爾滅烷化劑烷化、酶活性喪失甲醛染料干擾氧化、抑制繁殖龍膽紫類別作用機(jī)制常用種類常用消毒劑種類

12、38各種消毒劑的應(yīng)用種類使用濃度用途石炭酸3%5%地面、器具表面、皮膚消毒乙醇70%75%皮膚、體溫計(jì)消毒高錳酸鉀0.1%皮膚、尿道、蔬菜、水果消毒紅汞2%皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒硫柳汞0.1%皮膚消毒、手術(shù)部位消毒過(guò)氧乙酸0.2%0.3%塑料、玻璃器材消毒碘酒2%2.5%皮膚消毒新潔爾滅0.05%0.1%手術(shù)洗手、浸泡手術(shù)器械龍膽紫2%4%淺表創(chuàng)傷消毒39影響消毒滅菌效果的因素消毒劑細(xì)菌 環(huán)境性質(zhì)濃度作用時(shí)間種類有機(jī)物溫度、濕度酸堿度數(shù)量化學(xué)拮抗劑表面活性劑40選擇適當(dāng)?shù)南緞┑投緝r(jià)廉低破壞易貯藏方便有效41四 實(shí)驗(yàn)室生物安全biosafety病原微生物危害程度的分類第一類病原微生物指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物主要包括29種病毒，如克里米亞-剛果出血熱 病毒（新疆出血熱病毒）、埃博拉病毒、馬爾 堡病毒、 猴痘病毒等目前尚無(wú)疫苗可預(yù)防42第二類病原微生物 指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物主要包括51種病毒，朊粒，10種細(xì)菌，4種真菌部分已有疫苗可用第一類和第二類病原微生物又被稱為高致病性病原微生物43第三類病原微生物指能夠引起