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文檔簡介
1、試驗(yàn)一 母種培育基的制作一、本次試驗(yàn)的目的和要求的根本技能。母種培育基配制。工藝流程:培育基配方 培育基的配制 分裝試治理滅菌三、需用的儀器或試劑等漏斗、漏斗架、橡皮管、玻璃管。四、試驗(yàn)步驟培育基配方以 PDA 培育基為例,馬鈴薯去皮200g、葡萄糖 20g、瓊脂 20g、水1000ml KH2PO43g 、MgSO4.7H2O1.5g、VB110mg。培育基配制200 g,放入鋁鍋中用1000ml 20min 左右,煮至軟而不爛為止。用雙層濕沙布過濾,然后取濾液并補(bǔ)足蒸發(fā)損失的水分。再參加瓊脂連續(xù)加熱淚,待瓊脂溶化后,添加葡萄糖及其它成分,攪拌均勻后預(yù)備裝管。分裝試管 避開滅菌時(shí)被水蒸汽浸濕
2、。滅菌滅菌前將水加至鍋內(nèi)水位標(biāo)記高度。將試管放入鍋內(nèi),蓋上鍋蓋,對角旋緊鍋上螺旋,并閉排氣閥,開頭加熱,當(dāng)鍋內(nèi)蒸汽大量排出時(shí)再連續(xù)排汽min,關(guān)閉放氣閥。當(dāng)壓力表指針指到0.15 Kg/cm2 時(shí)滅菌所需壓強(qiáng)開頭計(jì)時(shí),連續(xù)維持該壓強(qiáng) 30min。滅菌完畢持壓力表指針自然回到”0”位時(shí)翻開放0”位時(shí)就放汽,以免試管內(nèi)的培育基向上沖浸濕棉塞,造成以后菌種的污染。5、擺斜面60時(shí),將試管斜面放在木棒上,使呈斜面,斜面的1/2為宜。冷卻后即成斜面培育基。五、教學(xué)方式六、考核要求過程與結(jié)果,評分方式為優(yōu)、良、中、及格、不及格。七、試驗(yàn)的報(bào)告要求要求有觀看記載數(shù)據(jù),完成試驗(yàn)報(bào)告與作業(yè)。試驗(yàn)二 菌種的分別與
3、培育母種的根本技能。二、試驗(yàn)內(nèi)容或原理毒 組織塊的切取 菌絲培育三、需用的儀器或試劑等試劑:75%酒精、高錳酸鉀、富爾馬林等。四、試驗(yàn)步驟菌種的分別與培育本試驗(yàn)以組織分別為例 種菇的選擇與消毒選擇出菇早,菇形正,菇蓋肥厚,具有該品種特征,無病蟲害、無雜菌污染,子實(shí)體八九分成熟的作為種菇。種菇選定后,用 75%酒精進(jìn)展外表消毒。組織塊的切取將斜面培育基放進(jìn)接種室、接種箱或超凈工作臺內(nèi),用紫外燈或化學(xué)藥品 進(jìn)展消毒 0.5h 以上,關(guān)閉紫外燈后 20min 后,再開頭進(jìn)入接種室內(nèi)進(jìn)展接種。接種是一項(xiàng)技術(shù)性很強(qiáng)的工作,需要在無菌的環(huán)境中以無菌操作方法進(jìn)展接種,才能削減污染。無菌操作是接種過程中最根本
4、的操作方法,要求操作熟 0.3-0.5cm2 的小方塊組織,將其移接到試管內(nèi)培育基的中心,將其移接到試管內(nèi)培育基的中心。菌絲培育接種后置于 252-3 天后可見組織塊四周發(fā)生白色絨毛狀菌絲,此時(shí)每天要檢查雜菌污染狀況。培育 7-10 天后,菌絲即可長滿mm-菌種塊直徑mm試管內(nèi)菌絲生長的速度= 菌落生長的時(shí)間d觀看母種菌絲的外表形態(tài)特征。通過鏡檢,觀看菌絲細(xì)胞核的變化規(guī)律及鎖狀聯(lián)合的形成。五、教學(xué)方式六、考核要求要求組織分別成功率在 50%以上。依據(jù)提交的試驗(yàn)報(bào)告、試驗(yàn)過程與結(jié)七、試驗(yàn)的報(bào)告要求要求有觀看記載數(shù)據(jù),完成試驗(yàn)報(bào)告。試驗(yàn)三 原種與栽培種制作一、本次試驗(yàn)的目的和要求食用菌原種與栽培種
5、制作的工藝流程和制作的根本技能。二、試驗(yàn)內(nèi)容或原理原種與栽培種培育基配制工藝流程:培育基配料裝瓶或裝袋滅菌冷卻接種把握原種與栽培種的接種操作技術(shù)三、需用的儀器或試劑等儀器:接種箱、高壓滅菌鍋、750毫升廣口瓶、酒精燈、接種勾等。酒精、氣霧消毒劑、棉籽殼、木屑、麩皮、石膏粉、棉花等。四、試驗(yàn)步驟78%,麥麩或1%1%。拌料 先依據(jù)要做原種的數(shù)量,算出各種原料的用量,然后稱量、混合,加水拌料?;熨n予時(shí),先將棉籽殼和玫麩混合在一起,過磷酸鈣和糖混溶在拌料用的水中。拌料時(shí),邊加水邊攪拌,邊測試含水量。含水量的測定 拌好料后,用手抓一把培育料,捏在手中緊握,手指縫中62%-64%。裝瓶 將拌好的培育料裝
6、入原種瓶或塑料袋中心,邊裝邊壓實(shí)但不得過緊,始終裝到瓶肩處為宜。擦瓶 將瓶口和瓶外粘的培育料擦掉,以免接種后污染雜菌。封口 用棉塞塞住瓶口或用透氣膜包住瓶口,再包一層防潮紙或牛皮紙,用線繩將瓶口扎好,預(yù)備滅菌。71.4-1.5Kg/cm2,1.5-2.0h8、接種 挑取母種培育基一小塊,置于原種或栽培種培育基中心孔邊,隨即按原樣封口。9、菌絲培育 接種后的原種,置于 25的培育室培育。3-5 天后菌絲即可恢復(fù)生長。5-7天菌絲開頭伸入培育基內(nèi)。當(dāng)菌絲長滿瓶后,即可直接分移栽培種,栽培種菌絲長滿面瓶后,需要養(yǎng)菌 1-2 周,以增加菌絲量及增加菌絲活力后,再用于生產(chǎn)。10.五、教學(xué)方式六、考核要求
7、把握原種與栽培種培育基的料水比例與高壓、常壓蒸汽滅菌方法,要求原種與栽培種成功率在 90%以上。依據(jù)提交的試驗(yàn)報(bào)告、試驗(yàn)過程與結(jié)果,評分方式為優(yōu)、良、中、及格、不及格。七、試驗(yàn)的報(bào)告要求要求有觀看記載數(shù)據(jù),完成試驗(yàn)報(bào)告。試驗(yàn)四 食用菌栽培技術(shù)一、本次試驗(yàn)的目的和要求二、試驗(yàn)內(nèi)容或原理1.平菇或金針菇栽培袋制作工藝流程:栽培原料配制裝袋滅菌冷卻搬入接種室接種室消毒接種適溫培育菌絲2、出菇治理:控溫調(diào)溫通風(fēng)采收水三、需用的儀器或試劑等試劑:75%酒精、氣霧消毒劑、棉籽殼、木屑、麩皮、石膏粉等。 四、試驗(yàn)步驟配方 本試驗(yàn)以棉籽殼為主料培育基為例。配方為:棉籽殼 78%,麥麩或20%1%1%。拌料 先
8、依據(jù)要做原種的數(shù)量,算出各種原料的用量,然后稱量、混合,加水拌料?;熨n予時(shí),先將棉籽殼和玫麩混合在一起,過磷酸鈣和糖混溶在拌料用的水中。拌料時(shí),邊加水邊攪拌,邊測試含水量。含水量的測定 拌好料后,用手抓一把培育料,捏在手中緊握,手指縫中62%-64%。裝袋 將拌好的培育料裝入塑料袋中心,邊裝邊壓實(shí)但不得過緊2/3長為宜。套環(huán) 用雙套環(huán)或纖維繩扎實(shí)袋口,預(yù)備滅菌。滅菌 滅菌方法同原種栽培種的滅菌方法。7.菌絲培育 接種后的栽培袋,置于培育室培育。3-5 天后菌絲即可恢復(fù)生長。5-7天菌絲開頭伸入培育基內(nèi)。當(dāng)菌絲長滿袋后,移入菇房。五、教學(xué)方式六、考核要求把握平菇或金針菇栽培袋的制作技術(shù),要求制袋成功率在 95%以上。依據(jù)六、試驗(yàn)的報(bào)告要求要求有觀看記載數(shù)據(jù),完成試驗(yàn)報(bào)告。試驗(yàn)五 食用菌栽培與加工現(xiàn)場參觀一、
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