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1、實(shí)驗(yàn)三 顯微鏡的使用、霉菌的形態(tài)及細(xì)菌三型的觀察主講人:劉 濤 李開(kāi)1.實(shí)驗(yàn)三 顯微鏡的使用、霉菌的形態(tài)及細(xì)菌三型的觀察主講人:劉 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征學(xué)習(xí)掌握霉菌水浸片制作的基本方法P74實(shí)驗(yàn)(一) 霉菌的形態(tài)觀察2.一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征實(shí)驗(yàn)(一) 霉菌的形態(tài)觀 霉菌:凡在營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上形成絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)形絲狀菌體的真菌,統(tǒng)稱為霉菌。霉菌包括分類學(xué)上許多不同綱或類的真菌,它們分別屬于藻狀菌綱、子囊菌綱、擔(dān)子菌綱和半知菌類。霉菌菌絲分為有隔菌絲和無(wú)隔菌絲兩類.二、實(shí)驗(yàn)原理3. 霉菌:凡在營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上形成絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)形絲狀菌體的黑曲霉屬于半知菌亞門(mén), 菌絲
2、有隔,細(xì)胞多核;部分氣生菌絲細(xì)胞形成特化的厚壁、膨大的足細(xì)胞,由足細(xì)胞的中間稍呈垂直地向上延長(zhǎng),形成分生孢子梗。 4.黑曲霉屬于半知菌亞門(mén), 菌絲有隔,細(xì)胞多核;部分氣生菌絲細(xì)胞青霉屬于半知菌亞門(mén),分生孢子梗基部無(wú)足細(xì)胞,孢子梗頂端不膨大成囊,而是多次分枝形成掃帚狀,小梗末端形成分生孢子。5.青霉屬于半知菌亞門(mén),分生孢子梗基部無(wú)足細(xì)胞,孢子梗頂端不膨大根霉橫向生長(zhǎng)的菌絲產(chǎn)生假根,附著在基質(zhì)上。 菌絲無(wú)隔、無(wú)性生殖產(chǎn)生孢囊孢子,有性生殖產(chǎn)生接合孢子。6.根霉橫向生長(zhǎng)的菌絲產(chǎn)生假根,附著在基質(zhì)上。 6.三、實(shí)驗(yàn)材料真菌培養(yǎng)物 1. 黑曲霉、根霉、青霉的培養(yǎng)物。 2. 黑曲霉、根霉、青霉示范片。顯微
3、鏡、載玻片、接種環(huán)、解剖針、酒精燈、鑷子等。50酒精、蒸餾水等。7.三、實(shí)驗(yàn)材料真菌培養(yǎng)物7.四、實(shí)驗(yàn)步驟:霉菌水浸片的制作和觀察:1、黑曲霉、青霉的水浸片的制作取一塊干凈的載玻片,滴加50的乙醇一滴用解剖針挑取少量有孢子的霉菌菌絲(注意曲霉和青霉需要適當(dāng)挑取一點(diǎn)培養(yǎng)基)浸入乙醇洗滌于另一干凈載玻片上加一滴蒸餾水,再將洗滌后的菌絲置于蒸餾水中,用解剖針將菌絲盡量分散,蓋上蓋玻片,用橡皮或塑料請(qǐng)輕輕敲擊。鏡檢:10 x ,40 x物鏡觀察。8.四、實(shí)驗(yàn)步驟:霉菌水浸片的制作和觀察:1、黑曲霉、青霉的水2、葡枝根霉水浸片的制作先用 10 x 物鏡直接觀察生長(zhǎng)在培養(yǎng)皿蓋上的根霉菌絲,因菌絲是立體形態(tài)
4、,觀察時(shí)應(yīng)將顯微鏡載物臺(tái)上下移動(dòng),以便看清菌絲全貌。再取一載玻片,滴一滴蒸餾水,解剖針挑取少量根霉菌絲浸入水滴中,用解剖針將菌絲撥散、分開(kāi),蓋上蓋玻片。10 x 物鏡觀察菌絲、假根、孢子囊。9.2、葡枝根霉水浸片的制作先用 10 x 物鏡直接觀察生長(zhǎng)在培養(yǎng)黑曲霉觀察黑曲霉菌絲分隔情況和分生孢子著生情況(著重辨認(rèn)分生孢子梗、足細(xì)胞和分生孢子)10.黑曲霉觀察黑曲霉菌絲分隔情況和分生孢子著生情況(著重辨認(rèn)分生青霉的帚狀枝與分生孢子副枝?;」S^察青霉分生孢子著生情況(著重辨認(rèn)分生孢子梗和分生孢子)11.青霉的帚狀枝與分生孢子副枝梗基小梗觀察青霉分生孢子著葡枝根霉接合孢子囊軸囊托孢子囊梗孢子囊囊軸觀
5、察根霉菌絲情況和子囊孢子情況(著重辨認(rèn)孢子囊、包囊梗、假根)12.葡枝根霉接合孢子囊軸囊托孢子囊梗孢子囊囊軸觀察根霉菌絲情況五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制青霉 (40 x)、黑曲霉 (40 x)、根霉(10 x)的形態(tài),注明各部分名稱。13.五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果13.六、思考題你認(rèn)為在顯微鏡下,細(xì)菌和霉菌的主要區(qū)別是什么? 在霉菌的制片過(guò)程中,你覺(jué)得要注意哪些環(huán)節(jié)才能制得好的片子?14.六、思考題你認(rèn)為在顯微鏡下,細(xì)菌和霉菌的主要區(qū)別是什么? 1實(shí)驗(yàn)(二) 油鏡的使用學(xué)習(xí)并掌握普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和油鏡的使用技術(shù)及維護(hù)的基本知識(shí)初步認(rèn)識(shí)細(xì)菌的基本形態(tài)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?5.實(shí)驗(yàn)(二) 油鏡的使用學(xué)習(xí)并掌握普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造
6、和油鏡的實(shí)驗(yàn)原理顯微鏡的構(gòu)造 1.光學(xué)部分:目鏡 、物鏡 、照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等)。它使檢視物放大,生成物象。2.機(jī)械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、載物臺(tái)轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細(xì)調(diào)節(jié)器等部件。它起著支持調(diào)節(jié) 固定等作用。16.實(shí)驗(yàn)原理顯微鏡的構(gòu)造 圖1-1-2 光學(xué)顯微鏡的成像原理倒立的虛像17.圖1-1-2 光學(xué)顯微鏡的成像原理倒立的虛像17.油鏡使用的原理 油浸接物鏡。當(dāng)光線由反光鏡通過(guò)玻片與鏡頭之間的空氣時(shí),由于空氣與玻片的密度不同,使光線受到曲折,發(fā)生散射,降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油(其折射率與玻片的相近),則幾乎不發(fā)生折射,增加了視野的進(jìn)光量,
7、從而使物象更加清晰。浸沒(méi)油與玻璃的折射率相近很多原來(lái)由于在透鏡及載片表面的反射和折射而損失的 光線可以進(jìn)入物鏡,使照明亮度提高,改善觀察效果。18.油鏡使用的原理 浸沒(méi)油與玻璃的二、顯微操作現(xiàn)場(chǎng)演示1.低倍鏡觀察:粗調(diào)、細(xì)調(diào)。依次再進(jìn)行中倍、高倍觀察2.油鏡觀察:高倍鏡下找到清晰的物象后,在標(biāo)本中央滴一滴香柏油,使油鏡鏡頭浸入香柏油中,細(xì)調(diào)至看清物象為止。3.換片:另?yè)Q新片,必須從第1條開(kāi)始操作。4.用后復(fù)原:觀察完畢,上懸鏡筒,先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油,然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油,最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯,后將鏡體全部復(fù)原。注意:油鏡使用完畢后一定要用二甲苯擦拭鏡頭用油鏡觀察細(xì)菌三型永久裝片。19.二、顯微操作現(xiàn)場(chǎng)演示1.低倍鏡觀察:粗調(diào)、細(xì)調(diào)。依次再進(jìn)行中1.不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。2.鏡面只能用擦鏡紙擦,不能用手指或粗布,以保證光潔度3.觀察標(biāo)本時(shí),必須依次用低、中、高倍鏡,最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時(shí),特別在使用油鏡時(shí),切不可使用粗調(diào)節(jié)器,以免壓碎玻片或損傷鏡面。4.拿顯微鏡時(shí),一定要右手拿鏡臂,左手托鏡座,不可單手拿,更不可傾斜拿。5.顯微鏡應(yīng)存放在陰涼干燥處,以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片。顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項(xiàng)20.1.不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。顯微鏡保養(yǎng)和使
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