漿樣樹突狀細(xì)胞重建與單倍體相合造血干細(xì)胞移植的慢性移植物抗宿

1、漿樣樹突狀細(xì)胞重建與單倍體相合造血干細(xì)胞移植的慢性移植物抗宿【摘要】為了討論漿樣樹突狀細(xì)胞(PD)在單倍體相合造血干細(xì)胞移植術(shù)后重建的特點及其與慢性移植物抗宿主病GVHD和患者復(fù)發(fā)的關(guān)系，采用流式細(xì)胞術(shù)對19例白血病患者移植后外周血樹突狀細(xì)胞D亞群晚期重建進展動態(tài)監(jiān)測，并將其與患者GVHD和復(fù)發(fā)的關(guān)系進展分析。結(jié)果顯示：白血病患者髓樣樹突狀細(xì)胞D、D1和D百分比和絕對細(xì)胞數(shù)以及D/PD比率均低于正常對照(P0.05)，而髓樣樹突狀細(xì)胞2D2、PD百分?jǐn)?shù)與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異?；颊咭浦埠驪D比例于12月時到達正常P=0.494，而PD絕對值和其余各亞群比例及數(shù)量均于移植后9月時恢復(fù)到正常程度，

2、與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05；D/PD于移植后120天時已到達正常對照組程度P=0.602。發(fā)生GVHD患者移植后120天PD比例高于未發(fā)生組；患者復(fù)發(fā)后D1比例及數(shù)值下降，而D2和PD比例及數(shù)值略上升。結(jié)論：白血病患者單倍體相合造血干細(xì)胞移植前外周血D比例、絕對數(shù)及D/PD比率均減少；移植后D/PD比率恢復(fù)較快；各亞群比例和數(shù)量在移植后9月后根本恢復(fù)正常；且恢復(fù)情況與慢性移植物抗宿主病發(fā)生和患者復(fù)發(fā)相關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】單倍體相合造血干細(xì)胞移植；漿樣樹突狀細(xì)胞；慢性移植物抗宿主?。话籽?fù)發(fā)InvestigatinfPlasaytidDendritiellRenstitutinandItsR

3、elatinshipithGVHDandRelapseafterHaplidentialHeatpietiSteellTransplantatinAbstratTinvestigatetheharateristisandsignifianefrenstitutinfperipheralbldplasaytiddendritiell(PD)preursrsafterallgenEihuanleukyteantigenisathed/haplidentialheatpietisteelltransplantatin,anditsrelatinshipithhrnigraftversushstdis

4、easeGVHDandrelapse，19patientsithleukeiaereenrlledfrthisstudy.Peripheralblddendritiell(D)subsetsfpatientsandhealthyntrlseredetetedbyflytetry,andtherrelatinsbeteenrenstitutinfDandGVHD,relapseereanalyzed.Theresultsshedthatparedithhealthysubjets,patientsithleukeiahadasignifiantlydereasedprprtinandabslut

5、enuberfyeliddendritiell(D),D1,DandtheratifD/PD(P0.05).ThereerentstatistiallydifferentinD2andPDbeteenpatientsandhealthysubjets.Aftertransplant,alltheprprtinfBandabslutenubersfDreahedthealthyntrlslevelsat9nths(P0.05),besidestheprprtinfPDhihreahedthealthyntrlslevelsat1yearP=0.494.paredithlevelsbefrerel

6、apse,theprprtinsfD1,D,DandtheratifD/PDereler,butprprtinsfD2andPDereslightlyhigherafterrelapse.PatientsithahighPDreveryprfilehadaniprveduulativeinidenefGVHDinntrasttpatientsithalPDreveryprfilenday120aftertransplantatin(P=0.007).Itisnludedthatparedithhealthysubjets,denvleukeiapatientshaveasignifiantly

7、dereasedprprtinandabslutenuberfDandtheratifD/PDbefrehaplidentialheatpietisteelltransplantatin;hileratifD/PDanbenralizedithrelativerapidity,theprprtinsfallDsubsetsreahedtnrallevelsnthehleat9nthsaftertransplantatin,andalsreverylevelfDsisrrelatedithurrenefGVHDandrelapse.Keyrdshaplidentialheatpietisteel

8、ltransplantatin;plasaytiddendritiell;hrnigraftversushstdisease;leukeiarelapse中國實驗血液學(xué)雜志JExpHeatl2022;15(2)漿樣樹突狀細(xì)胞重建與人類白細(xì)胞抗原不合/單倍體相合造血干細(xì)胞移植慢性移植物抗宿主病/復(fù)發(fā)關(guān)系初探材料和方法對象患者從2022年2月至2022年4月間，對在北京大學(xué)人民醫(yī)院血液病研究所行HLA不完全相合單倍體移植的19位患者和12例安康親緣供者進展研究?；颊吣行?4例，女性5例，中位年齡2112-51歲。19例患者中急性髓性白血病5例，急性B淋巴細(xì)胞白血病6例，慢性髓性白血病7例，骨髓增生

9、異常綜合癥/急性髓性白血病1例。所有患者在進入研究前均簽署知情同意書，供者標(biāo)本在獲取前均得到本人同意，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過。預(yù)處理方案供者發(fā)動及造血干細(xì)胞采集移植物抗宿主病預(yù)防和治療應(yīng)用環(huán)孢菌素A+霉酚酸酯+短程甲氨喋呤方案。環(huán)孢菌素A2.5g/kgd靜脈滴注,移植前9天至腸道功能恢復(fù)正常后改為口服，一般用至移植后9-12月；霉酚酸酯0.5g每12小時1次，口服，移植前10天至植活后減半，后漸停藥；甲氨喋呤移植后1天15g/2，移植后3、6、11天10g/2。GVHD根據(jù)受累器官和廣泛程度分為局限型和廣泛型。局限型GVHD包括局限的皮膚損害和(或)本病所致的肝臟損害。廣泛型GVHD有

10、下述二者之一加上另外4項中任意3項:皮膚全身廣泛受損;病理證實部分皮膚病變并兼有GVHD的肝損害。另外4項包括:肝臟病理呈慢性重癥肝炎或肝硬化,眼部枯燥(Shirer試驗濕度僅5),唾液腺或口腔粘膜有本病病理,任何其他的靶器官受損。發(fā)生GVHD后根據(jù)情況加用皮質(zhì)激素、sA、F、FK506、依木蘭等治療。植活監(jiān)測流式細(xì)胞術(shù)檢測分析細(xì)胞外表標(biāo)記每管取新穎抽取的EDTA抗凝血至少100l，分別參加各種抗體及陰性對照抗體10l,4避光孵育15分鐘；加溶血素2l室溫避光10分鐘，溶解紅細(xì)胞；然后300g離心5分鐘,棄上清,用PBS將標(biāo)記細(xì)胞洗滌2次；參加含1%多聚甲醛PBS200l,固定后24小時內(nèi)上流

11、式細(xì)胞儀檢測。統(tǒng)計學(xué)處理結(jié)果病人特點19位患者和12例安康親緣供者納入本研究，HLA配型3/6不合10例，2/6不合7例，1/6不合2例。發(fā)生GVHD11例，其中局限型7例，廣泛型4例；復(fù)發(fā)2例，死亡5例，余無病生存。詳細(xì)情況見表1。外周血D前體細(xì)胞晚期重建正常對照組和患者移植前的D及其亞群12例來源于安康供者的外周血標(biāo)本被作為對照組。白血病患者預(yù)處理前D1、D及D在白細(xì)胞中所占百分比較正常對照組明顯減低，分別為D10.03%vs0.435%；D0.045%vs0.645%和D0.125%vs0.76%(P均0.01)；而D2和PD所占的百分比雖中位數(shù)亦低于對照組，分別為0.005%vs0.0

12、35%和0.07%vs0.135%,但P0.05，無統(tǒng)計學(xué)差異。各D亞群的絕對值與百分比相類似，分別為D11.33/lvs26.7/l；D1.52/lvs35.56/l和D7.89/lvs42.66/l,均較正常對照組明顯減低，差異具有顯著性P0.01患者移植后D亞群晚期重建患者移植后晚期移植后100天外周血D各亞群的重建根本同步，各亞群在白細(xì)胞中所占比例隨移植后時間推移逐漸恢復(fù)正常。如表2所示除移植后9月時PD在白細(xì)胞所占比例為0.08%(0.04%-0.11%)，仍略低于正常對照組，兩者有統(tǒng)計學(xué)差異P=0.016外，余各亞群所占比例均于移植后9月時恢復(fù)到正常對照程度，無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05

13、?；颊咭浦埠笸砥谝浦埠?00天外周血D各亞群數(shù)量的重建與比例重建根本相似，各亞群重建亦根本同步且亞群的數(shù)量與比例隨時間推移逐漸恢復(fù)正常。如表3所示D各亞群數(shù)量均于移植后9月時恢復(fù)到正常對照程度，與正常對照組無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05。D/PD比率如前所述已于移植后30天時到達正常對照組程度，移植后晚期此趨勢未出現(xiàn)改變，各時間點與正常對照組相比均無統(tǒng)計學(xué)差異P0.05。D前體細(xì)胞晚期重建與GVHD的關(guān)系我們對移植后120天的D/PD也做了分組分析，結(jié)論和PD相似，低D/PD組GVHD的累計發(fā)生率為明顯低于高D/PD組，但無統(tǒng)計學(xué)差異P=0.068?；颊咭浦埠髲?fù)發(fā)前后D亞群變化本研究過程中有2例患者出現(xiàn)復(fù)發(fā)，監(jiān)測其復(fù)發(fā)前后外周血D各亞群的變化，結(jié)果顯示復(fù)發(fā)后各亞群比例及數(shù)量向患者移植前趨勢轉(zhuǎn)化。D1、D、總D的比例及數(shù)量均較移植前下降，D2和PD較復(fù)發(fā)前上升趨勢(表4，表5)。討論D是專職的抗原呈遞細(xì)胞，可以呈遞具有細(xì)胞遺傳學(xué)異常的白血病細(xì)胞，尤其是D1，通過誘導(dǎo)Th1發(fā)育促進抗腫瘤免疫。白血病患者D數(shù)量減少，尤其是D1數(shù)量減少，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞獲得免疫逃逸。Reddy等