開心散對(duì)D半乳糖致衰老小鼠非酶糖基化和自由基的抑制作用研究

1、周高明王華王袆丹高向東【摘要】目的探究快樂散對(duì)朽邁少鼠的高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物AGEs和自由基的按捺作用。要領(lǐng)創(chuàng)立D-半乳糖誘導(dǎo)的亞急性朽邁模子，用快樂散舉行治療，不雅察其對(duì)朽邁模子小鼠腦、肝臟的高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物AGEs，SD活力以及DA含量的影響。效果快樂散可以或許顯著改進(jìn)D-半乳糖誘導(dǎo)的朽邁少鼠的學(xué)習(xí)影象停滯，明顯進(jìn)步朽邁少鼠的腦、肝臟中SD的活力，低落AGEs，DA的含量。結(jié)論快樂散大概通過低落體內(nèi)AGEs的含量以及掃除自由基的作用來改進(jìn)D-半乳糖誘導(dǎo)小鼠的學(xué)習(xí)影象本領(lǐng)?！娟P(guān)鍵詞】快樂散高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物抗氧化學(xué)習(xí)影象Keyrds:KaixinPder;AGEs;Antixidative;

2、Learninganderyabilities快樂散KXS是古代醫(yī)籍?備急令媛要方?所紀(jì)錄的益智類方劑之一，顛末昔人恒久的臨床理論，證明有精良的益智作用。比年的研究表白，非酶糖基化和自由基在朽邁的產(chǎn)生生長中具有協(xié)同作用，因此同時(shí)拮抗非酶糖基化和自由基以堵截它們之間的惡性循環(huán)，成為抗朽邁研究的一個(gè)新的打破點(diǎn)。D-半乳糖誘導(dǎo)的朽邁少鼠模子可以明顯增長小鼠體內(nèi)血清AGEs含量，低落SD活力等1，因此，我們以快樂散研究工具，通過測定小鼠體內(nèi)高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物和自由基程度，分析快樂散抗朽邁的大概機(jī)制。1質(zhì)料1.1藥物快樂散由人參、遠(yuǎn)志、菖蒲、茯苓4味藥構(gòu)成。藥材均購于南京市藥材公司，經(jīng)中國藥科大學(xué)中藥資

3、源學(xué)教研室秦民堅(jiān)傳授斷定切合藥用劃定。快樂散根據(jù)人參10g，遠(yuǎn)志10g，菖蒲10g，茯苓20g的比例混淆后，加9倍重量的水提取兩次，1h/次，兩次水提液歸并后減壓濃縮至干，利用時(shí)用蒸餾水稀釋至所需濃度。1.2試劑D-半乳糖D-Galatse，D-gal上海試劑二廠，批號(hào)050719；腦復(fù)康NFK，南京白敬宇制藥，批號(hào)050811；超氧化物歧化酶SD試劑盒、丙二醛DA試劑盒，南京建成生物工程研究所提供。1.3儀器四盲端六折角小鼠水迷宮，熒光分光光度計(jì)(aryElipse)，均由東南大學(xué)群眾衛(wèi)生學(xué)院提供。1.4動(dòng)物雄性昆明種小鼠1822g，由中國藥科大學(xué)動(dòng)物中央提供。2要領(lǐng)與效果2.1分組造模及給

4、藥小鼠隨機(jī)分成6組，每組12只，即正常比較組，模子組，腦復(fù)康組0.4g/kg，快樂散高劑量組0.9g/kg、中劑量組0.3g/kg、低劑量組0.1g/kg。逐日灌胃1次，除正常比較組逐日腹腔注射等容量無菌生理鹽水外，別的各組逐日腹腔注射3.75%D-gal150g/kg，一連6周2。2.2學(xué)習(xí)影象本領(lǐng)測試效果表白，D-半乳糖模子組小鼠影象本領(lǐng)顯著低落，表現(xiàn)為在水迷宮內(nèi)反響錯(cuò)誤次數(shù)與游抵平臺(tái)的時(shí)間較正常比較組明顯增長P0.01，陽性藥腦復(fù)康組以及快樂散高，中，低3個(gè)劑量都有顯著的改進(jìn)作用，而各用藥組之間無明顯性差異。效果見表1。表1快樂散對(duì)D-半乳糖模子小鼠在水迷宮試驗(yàn)中學(xué)習(xí)影象本領(lǐng)的影響(略)

5、2.3腦、肝臟AGEs含量的測定舉動(dòng)學(xué)實(shí)行竣事后第2天，摘取全腦、全肝，用無菌生理鹽水制備10%的腦勻漿和肝勻漿，3000r/in離心10in，取上清液測定腦和肝臟的AGEs含量3，引發(fā)波長和發(fā)射波長別離接納340n和430n，熒光相對(duì)強(qiáng)度以恣意熒光單元/毫克卵白表現(xiàn)，效果表白，模子組小鼠腦、肝臟的AGEs含量明顯升高，而快樂散中、高劑量可以或許明顯低落腦、肝臟AGEs含量的增長。效果見表2。表2快樂散對(duì)D-半乳糖模子小鼠腦、肝臟AGEs含量的影響(略)2.4SD，DA的測定取腦，肝臟勻漿上清液舉行SD，DA的測定。效果表白，D-半乳糖模子組腦內(nèi)SD活力明顯低落，DA含量明顯升高，快樂散高、中

6、劑量均能明顯升高朽邁少鼠腦，肝臟的SD活力，快樂散高，中，低3個(gè)劑量都可以或許明顯低落小鼠腦的DA含量，而快樂散的中，高劑量可以明顯低落肝臟DA的含量。效果見表34。表3快樂散對(duì)D-半乳糖模子小鼠腦構(gòu)造SD活力和DA含量的影響(略)表4快樂散對(duì)D-半乳糖模子小鼠肝臟SD活力和DA含量的影響(略)3討論生物大分子如卵白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸均可以在沒有酶到場的條件下自覺的與一些復(fù)原糖反響天生不變的共價(jià)加成產(chǎn)物-高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物，該反響歷程稱為非酶糖基化反響NEG。AGEs在構(gòu)造中形成和沉淀后，引起構(gòu)造的老化和成效闌珊。自由基可以誘發(fā)細(xì)胞膜或細(xì)胞器中不飽和脂肪酸產(chǎn)生過氧化作用，也是生物學(xué)朽邁的緊張緣故原

7、由之一。比年來的研究表白,非酶糖基化和自由基彼此促進(jìn)，對(duì)朽邁的產(chǎn)生生長起著協(xié)同作用，非酶糖基化反響可以通過多種途徑促進(jìn)自由基介導(dǎo)的過氧化反響，如修飾SD等抗過氧化酶，直接產(chǎn)生過氧化陰離子，誘導(dǎo)形成AGE依靠的過氧化物泉源，從而加重對(duì)機(jī)體的損傷4；另一方面，lff等創(chuàng)造氧自由基在非酶糖基化的初始階段即已產(chǎn)生，因此以為，非酶糖基化反響是開始于復(fù)原糖的自身氧化，即復(fù)原糖先經(jīng)氧化作用天生烯二醇和二羰基并產(chǎn)生超氧陰離子、過氧化氫和羥自由基，二羰基再與游離氨基產(chǎn)生反響并形成AGEs5。同時(shí)氧化作用促使非酶糖基化反響向晚期反響生長，對(duì)AGEs的形成起到了結(jié)實(shí)的作用，是造成卵白質(zhì)產(chǎn)生不成逆損傷的決定因素。本實(shí)

8、行證明，快樂散可以明顯改進(jìn)D-半乳糖模子小鼠的學(xué)習(xí)影象本領(lǐng)，低落小鼠腦和肝臟的AGEs含量，進(jìn)步小鼠腦和肝臟的SD活性，低落DA程度，表白快樂散具有按捺高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物的天生，掃除自由基的作用。本文效果提示快樂散大概通過掃除AGEs含量、抗氧化等的作用來發(fā)揮其益智和抗朽邁的作用。【參考文獻(xiàn)】1XuSng,inginBa,DiandngLi,etal.AdvanedglyatininD-galatseindueduseagingdelJ.ehanissfAgEingandDevelpent,1999,108:239.2余資江，應(yīng)大君，董世武，等.半乳糖急性致朽邁動(dòng)物模子劑量的探究J.剖解學(xué)雜志,2022,28(4):42.3孫賀英，張宗玉.小鼠增齡歷程中皮膚、尾腱非