地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷課件

1、和地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷 徐湘民南方醫(yī)科大學(xué)，醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)教研室南方醫(yī)院產(chǎn)前診斷和遺傳病診斷技術(shù)中心Zhongshan 2007, November 30地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民1和地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷 徐湘民Zhongsha遺傳性血紅蛋白病Genetic disorders of human hemoglobin 異常血紅蛋白 Abnormal hemoglobin, Structural variants 地中海貧血 (地貧) Thalassemias -thalassemia -thalassemia 遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白 Hereditary persi

2、stence of fetal hemoglobin(HPFH)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民2遺傳性血紅蛋白病地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民2Thalassemia地中海貧血是全球最大的單基因遺傳病之一中國(guó)南方不同高發(fā)地區(qū)人群攜帶率 1 23%研究背景地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民3Thalassemia地中海貧血是全球最大的單基因遺傳病之一全球血紅蛋白病人群負(fù)荷WHO地區(qū)人口(百萬(wàn))出生(百萬(wàn))純合子出生(千)非洲65030.0230美洲73017.55.0亞洲315084.0120.0歐洲78011.01.6大洋洲300.50.2合計(jì)5340143.0356.8地中海貧

3、血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民4全球血紅蛋白病人群負(fù)荷WHO地區(qū)人口出生純合子出生(千)非洲中國(guó)南方地中海貧血人群攜帶率 地區(qū)攜帶率(%) 地貧 地貧 廣東 8.53 2.54 廣西 14.95 6.78 四川 1.92 2.18 臺(tái)灣 4.20 1.10 香港 5.02 3.41Xu, et al. J Clin Pathol 2004, 57:517-22. Cai, et al. Chi J Epidemiol 2002,23:281-5. 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民5中國(guó)南方地中海貧血人群攜帶率 地區(qū)攜帶率(%) 地貧排序出生缺陷分析例數(shù)發(fā)生頻率(/萬(wàn))1先天性心臟病26019

4、.662重型地貧 20815.733多指20015.124肢體短縮111 8.395唇裂 / 腭裂109 8.24廣州市主要出生缺陷的發(fā)生率 (1998-2001) 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民6排序出生缺陷分析例數(shù)發(fā)生頻率1先天性心臟病26019.662Pedigree for -thalassemia in a typical family. 地中海貧血: 常染色體隱性遺傳病地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民7Pedigree for -thalassemia in 地貧是嚴(yán)重致死、致殘性遺傳性血液病 常染色體隱性遺傳病 受累基因： 地貧 - 珠蛋白基因（16p13.3） 地貧

5、- 珠蛋白基因（11p15.3） 突變純合子：重型地貧 - 致死 中間型地貧 - 致殘 病理學(xué)基礎(chǔ)： /鏈比例失衡地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民8地貧是嚴(yán)重致死、致殘性遺傳性血液病 常染色體隱性遺傳病地地貧純合子：致死性出生缺陷重型地貧:胎兒水腫綜合征 早產(chǎn)死胎或出生前后死亡 可導(dǎo)致嚴(yán)重產(chǎn)科并發(fā)癥 無(wú)理想治療方法重型地貧 出生后1年內(nèi)發(fā)病 多于未成年前因嚴(yán)重貧血而夭折 輸血和去鐵治療可維持,代價(jià)昂貴地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民9地貧純合子：致死性出生缺陷重型地貧:胎兒水腫綜合征重型地家系樣品采集現(xiàn)場(chǎng)中間型地貧是嚴(yán)重致殘性遺傳病地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民10家系樣品采集現(xiàn)

6、場(chǎng)中間型地貧是嚴(yán)重致殘性遺傳病地中海貧血的分子研究地中海貧血的意義 重癥地貧患兒的出生是世界公認(rèn)的公共衛(wèi)生問(wèn)題 通過(guò)產(chǎn)前診斷阻止重癥患兒出生是首選預(yù)防措施 WHO優(yōu)先推薦在發(fā)展中國(guó)家實(shí)施預(yù)防的遺傳性疾病 預(yù)防地貧是中國(guó)南方高發(fā)區(qū)減少出生缺陷的戰(zhàn)略需求研究背景地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民11研究地中海貧血的意義研究背景地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐中國(guó)需要解決的研究主題 發(fā)展用于臨床和預(yù)防的分子診斷技術(shù) 高發(fā)地區(qū)人群中的遺傳流行病學(xué)調(diào)查 開(kāi)展人群水平的地中海貧血預(yù)防地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民12中國(guó)需要解決的研究主題地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民1指導(dǎo)制定計(jì)劃大人群監(jiān)控

7、和預(yù)防用于基因分型用于產(chǎn)前診斷 診斷 篩查 預(yù)防地中海貧血的研究策略研究背景遺傳流行病學(xué)調(diào)查建立一系列診斷標(biāo)準(zhǔn)和診斷技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民13指導(dǎo)制定計(jì)劃用于基因分型用于產(chǎn)前診斷 診斷 地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)黃疸肝脾腫大 (脾大明顯)骨髓擴(kuò)增發(fā)育遲緩合并感染Barts 水腫胎(地貧,宮內(nèi)或出生后半小時(shí)內(nèi)死亡)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民14地中海貧血的臨床特征小細(xì)胞低色素性溶血型貧血(中、重度)地中地中海貧血的血液學(xué)表型特征 RBC 參數(shù) MCV MCH 細(xì)胞形態(tài)變化 Hb電泳分析 Hb A2 () 或 () Hb Barts Hb

8、H () Hb E () 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民15地中海貧血的血液學(xué)表型特征地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘地貧血象：紅細(xì)胞著色不足、異形紅細(xì)胞和骨髓成紅血細(xì)胞增多癥地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民16地貧血象：紅細(xì)胞著色不足、異形紅細(xì)胞和骨髓成紅血細(xì)胞增多癥地血紅蛋白電泳圖譜1 2 3 4 51. 正常人HB2. 輕型地貧 3. 異常HB E 雜合子4. 新生兒HB Barts (地貧標(biāo)準(zhǔn)型）5. HB HNormal AA2 AE Barts AF HA+-500V, 25min地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民17血紅蛋白電泳圖譜1 2 地貧發(fā)生的分子病理學(xué)經(jīng)典機(jī)

9、制 地貧: 基因缺失使基因功能丟失 地貧: 結(jié)構(gòu)基因變異使轉(zhuǎn)錄異常地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民18地貧發(fā)生的分子病理學(xué)經(jīng)典機(jī)制 地貧: 基因缺失使基因功能 -50kb -10kb 0kb 10kb 20kb 30kb (-SEA) Deletion (- 4.2) Deletion (- 3.7) Deletion 2 1導(dǎo)致地貧的不同類(lèi)型的基因缺失地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民19 -50kb -10kb Globin genes affected by thalassemia deletionSilent carrierThalassemia traitHb H diseas

10、eHydrops fetalisNormal 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民20 Globin genes affected by tha地貧疾病嚴(yán)重程度的單倍型順序2 1T 2 1 2T1 1T 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民21地貧疾病嚴(yán)重程度的單倍型順序地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷Hematological data of the proposituse and her family members. 121234512Sex/age(Y) F/49M/54M/33F/27F/25M/22F/35F/1M/5Hb(g/L) 11815017312613513 5118112

11、141RBC(1012) 5.634.965.706.234.514.575.876.095.02MCV(fL)64.585.788. 162.187.882.363.056.278.5MCH(pg) 21.030.230.420.229.929.520.118.428.1HbA(%) 97.897.593.197.096.695.796.990.097.4HbA2(%)2.202.503.272.983.373. 283.122.182. 65HbF(%)003.6200007.790Genotype-11.1/-11.1/-11.1/- 11.1/地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民22H

12、ematological data of the propJia SQ, et al. J Clin Pathol, 2004; 57:164-7. 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民23Jia SQ, et al. J Clin Pathol, Different point mutations reducing globin gene expression EXON 1IVS 1 EXON 2EXON 3 IVS 2Promoter mutationRNA splicing Initiation mutationFrameshiftNonsense Poly(A) signal Rund

13、. & Rachmilewitz. N. Engl. J. Med. 2005, 353:1135-46. 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民24Different point mutations EXON世界上不同種族的常見(jiàn)地貧突變類(lèi)型 種 族 突變類(lèi)型 地中海人 IVS-1, position 110 (G A) CD39, nonsense (CAG TAG) IVS-1, position 1 (G A) IVS-2, position 745 (C G) IVS-1, position 6 (T C) IVS-2, position 1 (G A)黑人 29, (A G); 88,

14、 (C T) Poly(A), (AATAAA AACAAA) 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民25世界上不同種族的常見(jiàn)地貧突變類(lèi)型 種 族 東南亞人,中國(guó)人 CD 41-42, Frameshift (CTTT) IVS-2, position 654 (C T) 28, (A G); Hb E (G A) CD17, nonsense (AAG TAG) IVS-1, position 5 (G C)亞洲印地安人 IVS-1, position 5 (G C) 619-bp deletion CD 8-9, Frameshift (+G) IVS-1, position 1 (G T)

15、 CD 41-42, Frameshift (CTTT)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民26東南亞人,中國(guó)人 CD 41-42, FrameshSexProbandfemale Motherfemale Father maleBrothermale Husband maleRBC(x1012)5.7 6.4Hb (g/L) 139 105154144145MCV (fl) 73.6 68.288.273.467.1MCH (pg) 23.6 21.833.024.722.8MCHC (g/L) 357 320374336340RDW (%) 0.149 0.1520.13

16、20.1440.159HbA (%) 94.3 93.697.294.097.1HbA2 (%) 5.7 2.9Genotype -90/ N -90/NN/N-90/NN/N/ ratio 2.130 2.2193.7162.2385.341Results of blood analysis, DNA diagnosis and mRNA detection in the family members.地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民27SexProbandMotherFather BrotherSequencing of the -globin gene amplif

17、ied from the probandHeterozygosity for the CT substitution at position-90 of the-globin gene地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民28Sequencing of the -globin gen近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的部分中國(guó)南方新突變基 因 突 變珠蛋白基因 11.1大片段缺失珠蛋白基因 2CD118(+TCA)珠蛋白基因 90(CT)珠蛋白基因 73(AT)珠蛋白基因 28(AC)珠蛋白基因 CDs15/16(+G)珠蛋白基因 CD38(A) 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民29近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的部分中國(guó)南方新突變基

18、 因 突 變地中海貧血的產(chǎn)前診斷 胎兒取樣技術(shù) DNA診斷技術(shù) -地貧的診斷 -地貧的診斷地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民30地中海貧血的產(chǎn)前診斷 胎兒取樣技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)羊膜穿刺 (amniocentesis) 抽取胎兒樣品示意圖地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民31羊膜穿刺 (amniocentesis) 抽取胎兒樣品示意圖 植入前基因診斷 Preimplantation genetic diagnosis(PGD) 超聲產(chǎn)前診斷 Prenatal diagnosis: Ultrasound measurement 母體外周血分離胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷 Prenatal d

19、iagnosis: Fetal cells in the maternal circulation 母體血漿或血清中胎兒DNA分析 Analysis of fetal DNA in maternal plasma and serum目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民32 植入前基因診斷目前及今后的胎兒產(chǎn)前診斷新技術(shù)地中海貧血的Ding C, Chiu RW, Lau TK, Leung TN, Chan LC, Chan AY, Charoenkwan P, Ng IS, Law HY, Ma ES, Xu X, Wanapirak C, Sanguanserm

20、sri T, Liao C, Ai MA, Chui DH, Cantor CR, Lo YM. MS analysis of single-nucleotide differences in circulating nucleic acids: Application to noninvasive prenatal diagnosis.Proc Natl Acad Sci U S A. 2004 20;101(29):10762-7. 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民33Ding C, Chiu RW, Lau TK, Leung單堿基延伸產(chǎn)物的質(zhì)譜分析M FF父親的突變類(lèi)型SABER:

21、single allele base extension reaction 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民34單堿基延伸產(chǎn)物的質(zhì)譜分析M FF父親的突變類(lèi)型SABE分子量FMStandard protocol SABER protocol在母血漿DNA中排除父親的地貧突變+雙親基因型不同：地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民35分子量FMStandard protocol SABER pCase CD 41/42 - CTTT IVS2 654 C T nt 28 A G CD 17A T Standard protocol SABER Fetal genotypeWeeks gesta

22、tion 1 F M N / N11 2 F M N / N18 3 F M N / N21 4 M F F / N18 5 M F F / M 17 6 F M F / N11 7 F M F / N14 8 F N / N7 9 F F / N12 10 M F N / N17 11 F F / N20 12 M & F N.A. N.A. N / N18 鑒定母血漿DNA中的父親地貧突變地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民36Case CD 41/42IVS2 654nt 28 C單倍型分析用于鑒定母血漿DNA中的父親等位基因Case Mother Father HBB mutant a

23、llele HBB WT allele SNP G allele Paternal HBB mutation Fetal HBB genotype3 CC GC G C N / N11 CC GC G C F / N12 CC GC G C N.A. N / N地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民37單倍型分析用于鑒定母血漿DNA中的父親等位基因Case Mo地中海貧血的產(chǎn)前診斷 胎兒取樣技術(shù) DNA診斷技術(shù) -地貧的診斷 -地貧的診斷地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民38地中海貧血的產(chǎn)前診斷 胎兒取樣技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)DNA診斷技術(shù) 多重PCR （multiplex PCR） 等

24、位基因特異性性寡核苷酸雜交（ASO） 反向點(diǎn)雜交 （RDB） 變性高效液相色譜（DHPLC） 基于微孔板 (microtiter well-based ) 高通量檢測(cè) 實(shí)時(shí)PCR (real-time PCR) 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民39DNA診斷技術(shù) 多重PCR （multiplex PCR） -50kb -10kb 0kb 10kb 20kb 30kb (-SEA) Deletion (- 4.2) Deletion (- 3.7) Deletion 2 1導(dǎo)致地貧的不同類(lèi)型的基因缺失地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民40 -50kb -10kb Location of p

25、rimers and detection of -SEA deletion by gap-PCR地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民41Location of primers and detectGenotyping of the-SEA alleles by Gap-PCR 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民42Genotyping of the-SEA allelesChong SS, et al. Blood. 2000; 95(1):360-2. 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民43Chong SS, et al. Blood. 2000;寡核苷酸探針雜交技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)

26、及產(chǎn)前診斷徐湘民44寡核苷酸探針雜交技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民44ASO探針檢測(cè) -地貧基因診斷結(jié)果 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民45ASO探針檢測(cè) -地貧基因診斷結(jié)果 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及PCRBBBBBBgDNAHybridizationDetectionStreptavidin-PODColor Signal MMembraneASON M N M N MSubstrate(TMB)反向點(diǎn)雜交技術(shù)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民46PCRBBBBBBgDNAHybridizationDeteRDB analysis: application to rapid

27、prenatal diagnosisfor eight thalassaemia mutations.GenotypeFather CDs41-42 (CTTT) / N MotherIVS-2-654 (CT) / N FetusCDs41-42 / IVS-2-654Normal control N / N 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民47RDB analysis: application to rHuman -globin gene and the PCR amplicons 5UTREXON 1IVS 1EXON 2IVS 2 IVS2EXON 33UTRFA(453bp)FB

28、(364bp)FC(423bp)-90,-73,-29,-28cd2cd13-14,cd14-15,cd15-16,cd17 cd26,cd27-28 IVS1-1,IVS1-5 cd37,cd38 cd41-42,cd43cd71-72IVS2-5,IVS2-16IVS2-654,IVS2-666地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民48Human -globin gene and the PCFragmentMutation patternsNormal patternsTotalMutationMutation + SNPHeterozygousHomozygousFA12221237FB

29、 5152224FC 0 322 7Total1740566868 uniquely profiled DHPLC patterns observed from 795 DNA samples地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民49FragmentMutation patternsNorma實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民50實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民50實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民51實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民51實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民52實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民52實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的

30、分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民53實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民53實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民54實(shí)驗(yàn)結(jié)果地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民54中國(guó)南方和地中海貧血的預(yù)防計(jì)劃人群篩查預(yù)防計(jì)劃的策略 醫(yī)院水平(Hospital-based)的預(yù)防計(jì)劃 社區(qū)水平(community-based)的預(yù)防計(jì)劃 家系擴(kuò)展篩查(screening extended families)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民55中國(guó)南方和地中海貧血的預(yù)防計(jì)劃地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前Carrier screening for and thalassemia in pregnancy:

31、 the results of an 11-year prospective program in Guangzhou Maternal and Neonatal Hospital Guangzhou Maternal and Neonatal Hospital Liao C Li J Huang YN Li QM Feng Q Zhong HZ Cui YYSouthern Medical University Mo QH Li LY Hua L Zhang JZ Zeng R Jia SQ Xu XMPrenat Diagn 2004, 25:163-71地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘

32、民56Carrier screening for and 地貧攜帶者篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象（婚前或孕中期）血液學(xué)分析（MCV，Hb A2變化）排除地貧地貧攜帶者遺傳咨詢(xún)，配偶檢查血液學(xué)分析（MCV Hb A2變化）地貧攜帶者排除地貧遺傳咨詢(xún)雙親基因分析胎兒產(chǎn)前診斷地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民57地貧攜帶者篩查及產(chǎn)前診斷流程被檢對(duì)象（婚前或孕中期）血液學(xué)分年份 篩查 廣州總 篩查 孕婦數(shù) 孕婦數(shù) 丈夫數(shù) 篩查發(fā)現(xiàn)的 檢 測(cè) 出 的 完 成 的 產(chǎn) 前 陽(yáng)性孕婦數(shù) 陽(yáng) 性 夫 婦 數(shù) 診 斷 數(shù)地貧 (%)地貧 (%)地貧 (%)地貧 (%)/地貧(%)地貧 (%)地貧 (%)1993

33、3989 68393 350 232 (5.8) 129 (3.2) 13 (3.7) 8 (2.3) 10 (2.9) 12 (92.3) 7 (87.5) 1994456471617421265 (5.8) 164 (3.6) 18 (4.3) 8 (1.9) 9 (2.1) 16 (88.9) 8 (100) 19953902 71751 361 227 (5.8) 142 (3.6) 17(4.7) 7 (1.9) 12(3.3) 15 (88.2)7 (100)19964994 74460 464 285 (5.7) 181 (3.6) 19(4.1) 8 (1.7) 12 (2.6

34、) 17 (89.5) 8 (100) 19974392 71989 401 250 (5.7) 158 (3.6) 21 (5.2) 7 (1.7) 10 (2.5)18 (85.7) 7 (100) 19984532 75378 425 263 (5.8) 172 (3.8) 17 (4.0) 8 (1.9) 12(2.8) 17 (100) 8 (100) 19995016 80141 465 285 (5.7) 186 (3.7) 24 (5.2) 8(1.7) 14(3.0) 23(95.8) 8 (100) Outcomes of screening program in GZMN

35、H 1993-2003 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民58 篩查發(fā)現(xiàn)的 檢 測(cè) 出 的 年份 篩查 廣州總 篩查 孕婦數(shù) 孕婦數(shù) 丈夫數(shù) 篩查發(fā)現(xiàn)的 檢 測(cè) 出 的 完 成 的 產(chǎn) 前 陽(yáng)性孕婦數(shù) 陽(yáng) 性 夫 婦 數(shù) 診 斷 數(shù)地貧 (%)地貧 (%)地貧 (%)地貧 (%)/地貧(%)地貧 (%)地貧 (%)2000 4492 81817 418 256 (5.7) 172 (3.8) 21 (5.0) 7 (1.7) 16 (3.8) 21 (100) 7 (100) 2001 4521 80152 411 254 (5.6) 164 (3.6) 17 (4.1) 8 (1.9) 1

36、2 (2.9) 17 (100) 8 (100) 20024695 80667 415 260 (5.6) 163 (3.4) 16 (3.9) 8 (1.9) 11 (2.7) 16 (100) 8(100) 20034124 86393 372 227 (5.5) 152 (3.6) 15 (4.0) 6 (1.6) 13 (3.5) 15 (100) 6 (100) Total49221 860758 4503 2804 (5.7) 1783 (3.6) 198 (4.4) 83 (1.8) 131 (2.9) 187 (95.8) 82 (98.8) ( contd )地中海貧血的分子

37、基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民59 篩查發(fā)現(xiàn)的 檢 測(cè) 出 的 完診斷結(jié)果 基因型 例數(shù) 正常 30 雜合子 (total) 35 CDs 41-42 (TCTT) / N 14IVS-2-654 (CT) / N 8-28 (AG) / N 5CD17 (AT) / N 3CD26 (GA) / N 2-29 (AG) / N 1 CDs27-28 (+C) / N 1 Unknown / N or Normal 1 Prenatal diagnosis in 83 fetuses at-risk for thalassemia 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民60診斷結(jié)果 基因型 例數(shù) 正常 3

38、0 雜合子診斷結(jié)果 基因型 例數(shù) 純合子或雙重雜合子(總數(shù)) 18CDs 41-42 (TCTT) / IVS-2-654 (CT) 6CDs 41-42 (TCTT) / -28 (AG) 4CDs 41-42 (TCTT) / CD17 (AT) 2IVS-2-654 (CT) / CD17 (AT) 2CDs 41-42 (TCTT) / CDs 41-42 (TCTT) 1CDs 41-42 (TCTT) / CDs 27-28 (+C) 1IVS-2-654 (CT) / CDs 71-72 (+A) 1IVS-2-654(CT) / CD43 (GT) 1總數(shù) 83( contd

39、)地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民61診斷結(jié)果 基因型 例數(shù) 純合子或雙重雜合子(總數(shù)) 18C胎兒診斷 產(chǎn)前診斷例數(shù) 地貧 地貧 總數(shù) (%) 正常 41 30 69 (25.6) 攜帶者 92 35 125 (46.3) 受累胎兒 *54 18 72 (26.7) 胎兒流產(chǎn) 2 1 3 (1.11) 誤診 0 0 0.0 總數(shù)(%) 187 (69.3) 83 (30.7) 270 (100) Results in 266 pregnancies where a precisediagnosis was achieved * Three Hb H disease involved地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民62胎兒診斷 產(chǎn)前診斷例數(shù) Detection of the -SEA/ deletion by 1% agarose gelelectrophoresis of amplified fragments using gap-PCR. M N P B Fa Mo Fe Fa Mo Fe Fa Mo Fe Normal Heterozygote HomozygoteFamily 1 Family 2 Family3NormalMutant 地中海貧血的分子基礎(chǔ)及產(chǎn)前診斷徐湘民63Detection of th