羅氏試劑盒說(shuō)明書(shū) Anti-TPO

1、05572339001V1Anti-TPO甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 2009-05, V 1 中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析儀11820818 191 100測(cè)試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于體外定量檢測(cè)人血清中的甲狀腺過(guò)氧化物抗體（anti-TPO）。臨床可應(yīng)用于自身免疫性甲狀腺疾病的輔助診斷。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫分析“ECLIA”。臨床應(yīng)用1,2,3,4,5,6甲狀腺特異性過(guò)氧化物酶（T

2、PO）存在于甲狀腺細(xì)胞的微粒體上，并在其上部的細(xì)胞表面表達(dá)。在甲狀腺球蛋白（Tg）的協(xié)同作用下，TPO在L-酪氨酸的碘化；單碘、雙碘酪氨酸的化學(xué)偶聯(lián)，生物合成甲狀腺激素T4、T3、和rT3方面具有重要作用。TPO是一種潛在的自身抗原，血清anti-TPO滴度的升高常見(jiàn)于一些自身免疫性疾病引起的甲狀腺炎。在還沒(méi)有認(rèn)識(shí)到TPO是一種由微粒體引起的自身免疫性抗原時(shí)，經(jīng)常稱(chēng)anti-TPO為“微粒體抗體”。從臨床應(yīng)用上來(lái)說(shuō)，anti-TPO和微粒體抗體這兩個(gè)術(shù)語(yǔ)是相同的，但是就檢測(cè)方法而言它們是有差異的。高達(dá)90%的慢性橋本氏甲狀腺炎患者體內(nèi)可檢測(cè)到高滴度的anti-TPO，70%的Graves病患者

3、有anti-TPO滴度升高。雖然同時(shí)檢測(cè)其它甲狀腺抗體（anti-Tg、TSH受體抗體-TRAb）可以增加敏感性，但是anti-TPO陰性結(jié)果不能排除自身免疫性疾病的可能性?？贵w滴度與疾病的臨床活動(dòng)性無(wú)關(guān)。在疾病的緩解期或經(jīng)過(guò)漫長(zhǎng)的病程之后原先升高的抗體滴度可能轉(zhuǎn)為陰性，如果抗體在緩解之后再次出現(xiàn)，那么可能是復(fù)發(fā)。Anti-TPO檢測(cè)使用純化的過(guò)氧化物酶，而常用的微粒體抗體檢測(cè)使用未純化的微粒體作為抗原制劑。這兩種方法在臨床敏感性方面具有類(lèi)似的性能，但是，由于anti-TPO檢測(cè)使用高質(zhì)量的抗原，因而具有更好的批間一致性和更高的臨床特異性。Elecsys Anti-TPO試劑盒使用重組抗原和多

4、克隆的anti-TPO抗體。檢測(cè)原理競(jìng)爭(zhēng)法，總檢測(cè)時(shí)間：18分鐘第一次孵育：20l樣本和釕復(fù)合物標(biāo)記anti-TPO 抗體一起孵育3。第二次孵育：添加生物素化的TPO和包被鏈霉親和素的磁珠微粒，樣本中的anti-TPO抗體與釕復(fù)合物a標(biāo)記anti-TPO抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合生物素化的TPO抗原。抗原抗體復(fù)合物通過(guò)生物素、鏈霉素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。將反應(yīng)液吸入測(cè)量池中，通過(guò)電磁作用將磁珠微粒吸附在電極表面。未與磁珠微粒結(jié)合的物質(zhì)通過(guò)ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過(guò)光電倍增器測(cè)量發(fā)光強(qiáng)度。儀器通過(guò)2點(diǎn)定標(biāo)校正試劑條形碼包含的廠(chǎng)商定標(biāo)曲線(xiàn)，自動(dòng)計(jì)算得到檢測(cè)結(jié)果。a)T

5、ris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作溶液M包被鏈霉親和素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶6.5mL：包被鏈霉親和素的磁珠微粒，0.72mg/mL；防腐劑。R1 釕復(fù)合物標(biāo)記anti-TPO抗體（灰蓋），1瓶，10mL：釕復(fù)合物標(biāo)記的多克隆anti-TPO抗體（羊），濃度1.0mg/L，TRIS緩沖液100mmol/L，pH 7.2；防腐劑。R2 生物素化的TPO（黑蓋），1瓶，10mL：生物素化的TPO(重組)，濃度0.15mg/L，TRIS緩沖液30mmol/L，pH7.2；防腐劑。Cal1 A-TPO定標(biāo)液1（白蓋）

6、，1瓶，1.5mL：人血清基質(zhì)的多克隆anti-TPO抗體（羊）約35IU/mL;防腐劑。Cal2 A-TPO定標(biāo)液2（黑蓋），1瓶，1.5mL：人血清基質(zhì)的多克隆anti-TPO抗體（羊）約350IU/mL;防腐劑。定標(biāo)液：試劑條形碼內(nèi)包含批特異性定標(biāo)液的精確定值信息。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有實(shí)驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專(zhuān)業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。所有人源性物質(zhì)必須視為有潛在感染性。來(lái)源于人血液的所有產(chǎn)品由獻(xiàn)血員提供，經(jīng)特殊制備而成，經(jīng)檢測(cè)HBSAg、HCV抗體、HIV抗體，均為陰性。所應(yīng)用的檢測(cè)方法經(jīng)FDA認(rèn)可或符合歐

7、洲法令98/79/EC附件II列表A。所有用于質(zhì)控品的人源性物質(zhì)都已經(jīng)過(guò)HIV、HBV、和HCV感染的檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果均為陰性。但由于任何實(shí)驗(yàn)方法都不能絕對(duì)地排除潛在感染的危險(xiǎn)，故該產(chǎn)品仍需視作病人樣本一樣仔細(xì)處理。接觸者必須遵循健康專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)相應(yīng)的法規(guī)7.8。避免試劑和樣本（樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒為即用型，專(zhuān)用于配套系統(tǒng)。Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀：定標(biāo)液Cal 1和Cal 2使用前必須室溫平衡(20-25C)。定標(biāo)吸樣結(jié)束后，應(yīng)立即蓋好瓶蓋，2-8C儲(chǔ)存。確保定標(biāo)液瓶蓋不粘有定標(biāo)液?？紤]蒸發(fā)因素，每瓶定標(biāo)液定標(biāo)次數(shù)不宜超過(guò)5次。MO

8、DULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀:不要把整瓶定標(biāo)液放在分析儀上進(jìn)行定標(biāo)，可使用專(zhuān)用小空瓶分裝定標(biāo)液，并貼上標(biāo)簽，2-8C下儲(chǔ)存，分裝的每瓶定標(biāo)液僅使用一次。試劑相關(guān)信息可以通過(guò)試劑條形碼閱讀獲取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28。請(qǐng)垂直擺放Elecsys Anti-TPO 試劑盒(M,R1,R2)，確保儀器的自動(dòng)攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開(kāi)封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開(kāi)封試劑，286周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上2周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上2周放置分析儀Elec

9、sys 1010上1周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開(kāi)蓋的情況下至多20小時(shí)）定標(biāo)液穩(wěn)定性開(kāi)封后28可保存6周2025，在Elecsys 2010和cobas e 411分析儀上最長(zhǎng)可保存5小時(shí)MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601 分析儀只可使用一次定標(biāo)液要垂直保存!確保定標(biāo)液沒(méi)有附著在瓶蓋上。樣本的采集和準(zhǔn)備只有以下類(lèi)型的標(biāo)本才可進(jìn)行檢測(cè)。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、肝素鈉、肝素氨、K3-EDTA、檸檬酸鈉、和氟化鈉/草酸鉀抗凝的血漿都適用。標(biāo)準(zhǔn)：血清值回收率為90110或斜率0.9-1.1，截距小于2分析靈敏度（最低

10、檢出限），相關(guān)系數(shù)0.95。穩(wěn)定性：2-8可保存3天；-20可保存1個(gè)月,僅可凍融一次。9選擇合適的試管進(jìn)行不同類(lèi)型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測(cè)。不同廠(chǎng)商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測(cè)（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本檢測(cè)前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測(cè)前，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測(cè)必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。26 小瓶標(biāo)簽需要的物品（未提供）貨號(hào)050

11、42666191, PreciControl ThyroAB, 規(guī)格2x2 ml, 各含PreciControl ThyroAB 1和2貨號(hào)11776576322, CalSet小瓶，2x56有蓋小空瓶實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號(hào)11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)11662970122, CleanCell, 6x380 mL,測(cè)量池洗液 貨號(hào)11930346122, Elecsy

12、s SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號(hào)11933159001, SysClean 適配器 貨號(hào)11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨號(hào)11706802001, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號(hào)11706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120移液管吸頭MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號(hào)04880340190,ProCell M, 2 x 2 L系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)04880293190, CleanCell M, 2 x

13、2 L測(cè)量池洗液 貨號(hào)03023141001, PC/CC杯 12個(gè)，用于在檢測(cè)前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號(hào)03005712190,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測(cè)完畢后或更換試劑時(shí)清洗試劑針。貨號(hào)12102137001,反應(yīng)杯/吸頭 組合裝84反應(yīng)杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號(hào)03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號(hào)03027651001,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號(hào)11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測(cè)要優(yōu)化檢測(cè)性能，請(qǐng)遵照本說(shuō)明書(shū)中

14、有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊(cè)。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過(guò)條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無(wú)法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請(qǐng)輸入條碼標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑（M,R1,R2）室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤(pán)（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開(kāi)、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑(M,R1, R2）室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤(pán)（室溫20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前

15、后手動(dòng)開(kāi)關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。將A-TPO定標(biāo)液Cal1和Cal2 放在分析儀的樣本架上。只在定標(biāo)時(shí)打開(kāi)瓶蓋。定標(biāo)相關(guān)信息可通過(guò)條形碼閱讀自動(dòng)獲取。定標(biāo)完成后，將定標(biāo)液Cal1和Cal2 放回28保存或者丟棄(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀)定標(biāo)溯源性：該檢測(cè)方法可溯源至NIBSC 66/387標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。每套Elecsys Anti-TPO試劑的條碼標(biāo)簽上均含有其批特異的定標(biāo)信息。使用Elecsys Anti-TPO定標(biāo)液1和2可調(diào)整預(yù)設(shè)置的定標(biāo)曲線(xiàn)。定校頻率：以下情況需進(jìn)行定標(biāo)：每個(gè)試劑盒以下情況需重新定標(biāo)：每日：同一試劑盒在分析

16、儀上使用（Elecsys 1010 分析儀上使用，室溫:20-32C）根據(jù)需要：如質(zhì)控超限。質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl ThyroAB 1和2進(jìn)行質(zhì)量控制。其他合適的質(zhì)控品也適用。各濃度質(zhì)控至少每24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)一次，每次更換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。請(qǐng)遵循政府法規(guī)和當(dāng)?shù)匦袠I(yè)導(dǎo)則進(jìn)行質(zhì)量控制。計(jì)算儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本中的分析物濃度，單位是IU/mL或kIU/L。干擾因素檢測(cè)結(jié)果不受黃疸（膽紅素1129mol/L或66mg/dL）, 溶血（血紅蛋白

17、0.93mmol/L或 1.5g/dL）, 脂血(甘油三酯23.9mmol/L或 2100mg/dL)和生物素40.9mol/L或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣本。濃度達(dá)1500 IU/ml類(lèi)風(fēng)濕因子對(duì)檢測(cè)結(jié)果不影響。體外對(duì)23種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。極少數(shù)病例由于存在高濃度的抗分析物特異性抗體、抗鏈霉素或釕的抗體會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)已將這些影響降低到最小化。作為診斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來(lái)綜合評(píng)估檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)范圍5-600IU/mL（通過(guò)最低檢出限和廠(chǎng)商定標(biāo)曲線(xiàn)的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告600IU/mL。稀釋樣本不可

18、稀釋。自身抗體屬異質(zhì)性，會(huì)產(chǎn)生非線(xiàn)性稀釋現(xiàn)象。期望值使用Elecsys Anti-TPO試劑盒在奧地利和德國(guó)的3個(gè)臨床中心208位健康受試者中進(jìn)行期望值研究，結(jié)果顯示第95百分位點(diǎn)的臨界值為34IU/mL。兒童、青少年和孕婦的參考范圍可以參考“兒童和成人參考范圍”（英文貨號(hào): 04640292, 德文貨號(hào): 04625889）手冊(cè)也包括了成人參考范圍研究得到的甲狀腺激素影響因素的詳細(xì)研究結(jié)果。不同的入選和排除標(biāo)準(zhǔn)均遵循NACB導(dǎo)則關(guān)于甲狀腺超聲檢查（甲狀腺體積和密度）的結(jié)果。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定參考范圍的適用性，必要時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在分析儀上的性能試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。

19、各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證重復(fù)性（批內(nèi)：n=21，批間：n=21）；總精密度按照NCCLS的EP5-A在MODULAR ANALYTICS E170分析儀上測(cè)定：每天6次，共10天 (n=60)。結(jié)果如下：分析靈敏度（最低檢出限）5.0IU/mL最低檢出限指區(qū)別于零濃度的分析物最低檢測(cè)濃度。最低檢出限是最低濃度標(biāo)準(zhǔn)品+2SD得到的濃度（廠(chǎng)商定標(biāo)品1+2SD，批內(nèi)精密度，n=21）。方法學(xué)比較使用臨床樣本比較Elecsys Anti-TPO檢測(cè)（y） 和商售anti-TPO檢測(cè)試劑(X)的檢測(cè)結(jié)果，相關(guān)性數(shù)據(jù)如

20、下：檢測(cè)樣本數(shù)：50Passing/Bablok10 線(xiàn)性回歸y = 0.77x +2.94 y = 0.63x +17.1r = 0.785 r = 0.899樣本比較的濃度范圍約為12460 IU/mL。分析特異性未檢測(cè)到甲狀腺球蛋白抗體(394IU/mL)影響結(jié)果。參考文獻(xiàn)1. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddruesenkrankheiten Diagnose und Therapie, 2nd edition. Berliner Medizinische Verlagsanstalt. 1995;28-30,141,169-172,200- 201.

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