病理科切片及染色方法和問題(1)課件

病理科切片及染色方法和職業(yè)暴露的預(yù)防病理科：黃山石蠟切片的步驟①將已固定和修好的石蠟塊裝在切片機的夾物臺上。

②將切片刀固定在刀夾上，刀口向上。

③搖動推動螺旋，使石蠟塊與刀口貼近，但不可超過刀口。

④調(diào)整石蠟塊與刀口之間的角度與位置，刀片與石蠟切片約成15度左右。

⑤調(diào)整厚度調(diào)節(jié)器到所需的切片厚度，一般為4-10微米。

⑥一切調(diào)整好后主可以開始切片。此時右手搖動轉(zhuǎn)輪，讓蠟塊切成蠟帶，左手持毛筆將蠟帶提起，搖轉(zhuǎn)速度不可太急，通常以40-50r/min。

⑦切成的蠟帶到20-30cm長時，右手用另一支毛筆輕輕將蠟帶挑起，以免卷曲，并牽引成帶，平放在蠟帶盒上，靠刀面的一面較光滑，朝下，較皺的一面朝上。

⑧用單面刀片切取蠟片一小段，放在載玻上加水一滴，置于放大鏡或顯微鏡下觀察切片是否良好。

⑨切片工作結(jié)束后，應(yīng)將切片刀取下用氯仿擦去刀上沾著的石蠟，把切片機擦拭干凈妥為保存。切片結(jié)束后的撈片展片、貼片

打開水浴鍋，使水溫維持在40-45℃，另準(zhǔn)備30%乙醇溶液。

①

切片時，將一碗30%乙醇溶液放于切片機旁的桌面上。

②

用小鑷子夾取預(yù)先用刀片割開的蠟帶，放在乙醇溶液的水面上，使切片展開。

③小鑷子輕輕地將連在一起的切片分開，用一個載玻片將切片完整，已展開的切片撈至溫水中，使之充分展開。

④

另取潔凈的載玻片，撈起展開的切片，使其位于切片1/3處，另一端（磨邊，粗糙的一端）磨面上標(biāo)記或貼上標(biāo)簽，放于切片架上。

10.

脫蠟復(fù)水

將水浴鍋溫度調(diào)至60℃，待水溫控制在60℃時，將切片連同切片架放入一干燥的染色缸內(nèi)，放入水浴鍋中，蓋上蓋子（可密封），30min至蠟熔化。

萊卡切片機石蠟切片的關(guān)鍵點1、時刻注意保護好自己，切片刀非常鋒利，小心被割傷。預(yù)防方法？2、如何才能切出滿意的病理切片？a，愛護機器。b、取材脫水合適。c、切片厚度也很重要。d、切片方法（非常重要）。e、多做練習(xí)，多多觀察，發(fā)現(xiàn)不同組織不同的切片方法。一些組織的切片方法1、脂肪多的組織。（乳腺、淋巴結(jié)、脂肪瘤）2、過脆的組織（肝臟、脾臟）3、過硬的組織（骨組織，鈣化組織）4、小組織。5、某些皮膚組織。水浴鍋撈片的關(guān)鍵點1、水溫。（47-50°）2、如何選擇最合適的切片。3、出現(xiàn)皺褶如何解決。4、如何才能杜絕撈片中發(fā)生的污染。HE染色后切片會遇到的一些問題1、蘇木素染色不滿意，核不藍或者過染。2、伊紅染色不滿意，過紅或者過淡。3、切片白色不透明，非常的臟。4、鏡下觀察組織上有氣泡。5、鏡下發(fā)現(xiàn)細胞核上有黑點，類似芝麻點。6、組織朦朦朧朧，結(jié)構(gòu)不清。結(jié)束語：制作良好的石蠟切