DB37-T 3474-2018土壤中12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜法

ICS13.080B10

DB37山 東 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB37/T3474—201812測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法Determinationof12organophosphorouspesticidesandmetabolitesresiduesinsoilLiquidchromatography-massspectrometry2018-12-29發(fā)布 2019-01-29實(shí)施山東省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布DB37/T3474DB37/T3474—2018II前??言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并監(jiān)督實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：山東省農(nóng)藥檢定所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：周力、韓帥兵、張耀中、李向陽、姜士聚、吳亞玉、遲歸兵、鞠易明、楊揚(yáng)、林得平、于淼。DB37/T3474DB37/T3474—2018PAGEPAGE1312/質(zhì)譜法范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了土壤中12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物殘留量的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜檢測方法。唑磷、二嗪磷、辛硫磷、丙溴磷、毒死蜱殘留量的測定。規(guī)范性引用文件件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法原理土壤樣品中殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物經(jīng)乙腈提取，鹽析離心，分散固相萃取凈化，用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀檢測，外標(biāo)法定量。試劑與材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為符合GB/T6682中規(guī)定的一級水。試劑411甲醇（C3412乙腈（C3甲酸（HCOOH，64-18-6）：色譜純。乙酸銨（C3CO4，616-）：色譜純。4.1.5氯化鈉（NaCl，7647-14-5）。溶液配制0.02%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸銨）：準(zhǔn)確移取0.2mL甲酸和稱取0.385g乙酸銨于1000?mL容量瓶中，用水定容至刻度，現(xiàn)配現(xiàn)用。標(biāo)準(zhǔn)品12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，純度≥95%。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液分別準(zhǔn)確稱取適量（精確至0.1mg）12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物標(biāo)準(zhǔn)品于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，配制成濃度約為100mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，0～4℃保存，保存期為6個(gè)月。中間標(biāo)準(zhǔn)溶液用甲醇稀釋配制成10mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液準(zhǔn)確吸取適量中間標(biāo)準(zhǔn)溶液（4.4.2），用甲醇稀釋配制成所需濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。材料有機(jī)濾膜：0.22μm。DsesveSE5mRutsadE1儀器和設(shè)備液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。5.20.01g0.0001g?；匦秸袷幤?。6000r/min。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。旋渦混合器。真空泵。具塞離心管：100mL。量筒：50mL。雞心瓶：25mL?？潭入x心管：10mL。試樣制備取土壤樣品約500g，除去土壤中的碎石、雜草和植物根莖等雜物后，過1mm試驗(yàn)篩，均分成三份18止樣品污染或發(fā)生殘留物含量的變化。分析步驟提取DispersiveSPE15mL，F(xiàn)ruitsandVeg，ENAgilent稱取10g試樣（精確至0.01g），置于100mL離心管中，加入5mL水，再準(zhǔn)確加入20.0mL乙腈，在回旋式振蕩器上震搖30min。加入3g～5gNaCl，再劇烈震蕩30s，在離心機(jī)中以4500r/min離心min，待凈化。凈化移取約7mL上層提取液至分散固相萃取凈化管（4.5.2）中，在旋渦混合器上渦旋1min，中以4500r/min離心3min。準(zhǔn)確移取4.00mL上層清液至雞心瓶中，于40μm濾膜過濾，供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定。測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜參考條件色譜柱：Shim-packXR-ODS2.0mm（i.d）×75mm，1.6μm，或相當(dāng)者。1。表1流動相及梯度洗脫條件時(shí)間/min流速/（mL/min）流動相A（甲醇）/%流動相B（0.02%甲酸+5mmol/L乙酸銨水溶液）/%0.000.3510900.500.3510902.000.3560405.000.3560409.000.3595511.500.3595512.000.3510907.3.1.3柱溫：40進(jìn)樣量：0.5μL。A。B。定性測定2表2定性測定時(shí)相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度>50%>20%至50%>10%至20%≤10%允許的相對偏差±20%±25%±30%±50%定量測定本標(biāo)準(zhǔn)中液相色譜-質(zhì)譜/范圍以內(nèi)。對混合基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣液等體積參插進(jìn)樣測定。12（MRM）色譜圖參見附錄C。平行試驗(yàn)按以上步驟對同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)?？瞻自囼?yàn)除不稱取試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。結(jié)果計(jì)算液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定結(jié)果可由計(jì)算機(jī)按外標(biāo)法自動計(jì)算，也可按式(1)計(jì)算：SV1AXV3V5S

(1)式中：

V2ASV4mω——試樣中每種被測組分殘留量，單位為毫克每千克（mg/kg）；ρ——標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（m/）；1——提取溶液總體積，單位為毫升（mL）；2——凈化后吸取出用于濃縮的提取溶液體積，單位為毫升3——樣品定容體積，單位為毫升（mL）；45S——標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積；X——待測液的峰面積；m——試樣質(zhì)量，單位為克注：計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差不大于重復(fù)性限（r），重復(fù)性限（r）附錄D。在再現(xiàn)性條件下，兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差不大于再現(xiàn)性限（R），再現(xiàn)性限（R）附錄E。定量限和回收率定量限本方法中12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物在土壤中定量限均為0.001mg/kg?；厥章时痉椒ǖ奶砑铀胶突厥章史秶姼戒汧。附 錄 A（資料性附錄）質(zhì)譜儀參數(shù)2)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀的質(zhì)譜儀參數(shù)：掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測；離子源：電噴霧離子源（ESI）；電離電壓：4.0kV；加熱塊溫度：400DL250檢測器電壓：1.74kV；碰撞氣：氬氣；碰撞氣壓力：0.23Mpa；霧化氣流速：3.0L/min；干燥氣流速：10.0L/min；加熱氣流速：10.0L/min。LCMS-8050了提供參考，并不涉及商業(yè)目的，鼓勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)使用者嘗試采用不同廠家或型號的儀器。附 錄 B（資料性附錄）12種有機(jī)磷農(nóng)藥及其代謝物中英文名稱、監(jiān)測離子對、碰撞電壓和保留時(shí)間序號中文名英文名保留時(shí)間/min定量離子對碰撞電壓/V定性離子對碰撞電壓/V1甲胺磷Methamidophos1.19142.10>94.00-14142.10>125.10-182乙酰甲胺磷Acephate1.73184.00>143.00-10184.00>125.00-173氧樂果Omethoate1.96214.10>155.00-15214.10>183.00-114噻唑磷Fosthiazate3.99283.80>104.00-23283.80>227.95-115甲拌磷亞砜Phorat-sulfoxide4.07277.00>96.90-31277.00>198.90-106甲拌磷砜Phorat-sulfone4.21293.00>171.05-9293.00>115.00-247三唑磷Triazophos6.91314.05>162.15-19314.05>119.15-358二嗪磷Diazinon8.05305.00>169.10-19305.00>153.10-209辛硫磷Phoxim8.19299.10>77.10-52299.10>129.10-1110甲拌磷Phorate8.25261.00>75.00-11261.00>143.00-1711丙溴磷Profenofos8.87372.90>302.80-19372.90>345.00-1212毒死蜱Chlorpyrifos9.28351.90>199.90-18351.90>96.95-33附 錄 C（資料性附錄）12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）色譜圖及質(zhì)譜圖100

Inten.0圖C.1甲胺磷100

Inten.0圖C.2乙酰甲胺磷

Inten.0圖C.3氧樂果100

Inten.0圖C.4噻唑膦100

Inten.0圖C.5甲拌磷亞砜100

Inten.0圖C.6甲拌磷砜

162.150圖C.7三唑磷100

Inten.0圖C.8二嗪磷

Inten.0圖C.9辛硫磷100

Inten.0圖C.10甲拌磷100

Inten.0C.11丙溴磷100

Inten.0

m/z圖C.12毒死蜱附 錄 D（規(guī)范性附錄）實(shí)驗(yàn)室重復(fù)性限（r）數(shù)據(jù)表序號農(nóng)藥名稱含量mg/kg重復(fù)性限r(nóng)含量mg/kg重復(fù)性限r(nóng)含量mg/kg重復(fù)性限r(nóng)1甲胺磷0.0015.39×10-50.015.74×10-40.18.70×10-32乙酰甲胺磷0.0018.33×10-50.016.56×10-40.17.64×10-33氧樂果0.0018.01×10-50.015.33×10-40.11.06×10-24噻唑磷0.0019.40×10-50.011.43×10-30.11.50×10-25甲拌磷亞砜0.0011.44×10-40.011.17×10-30.11.47×10-26甲拌磷砜0.0011.90×10-40.019.16×10-40.11.47×10-27三唑磷0.0011.61×10-40.011.07×10-30.11.69×10-28二嗪磷0.0011.39×10-40.011.19×10-30.11.49×10-29辛硫磷0.0011.69×10-40.019.74×10-40.11.40×10-210甲拌磷0.0011.69×10-40.011.24×10-30.11.51×10-211丙溴磷0.0011.22×10-40.011.12×10-30.11.30×10-212毒死蜱0.0012.64×10-40.011.12×10-30.11.55×10-2附 錄 E（規(guī)范性附錄）實(shí)驗(yàn)室再現(xiàn)性限（R）數(shù)據(jù)表序號農(nóng)藥名稱含量mg/kg再現(xiàn)性限R含量mg/kg再現(xiàn)性限R含量mg/kg再現(xiàn)性限R1甲胺磷0.0011.17×10-40.011.02×10-30.13.79×10-22乙酰甲胺磷0.0011.23×10-40.017.45×10-40.12.08×10-23氧樂果0.0011.36×10-40.018.26×10-40.11.01×10-24噻唑磷0.0011.67×10-40.011.97×10-30.12.02×10-25甲拌磷亞砜0.0012.07×10-40.013.14×10-30.12.23×10-26甲拌磷砜0.0012.95×10-40.011.33×10-30.11.91×10-27三唑磷0.0011.69×10-40.011.92×10-30.12.03×10-28二嗪磷0.0011.83×10-40.011.57×10-30.11.80×10-29辛硫磷0.0011.67×10-40.011.98×10-30.11.53×10-210甲拌磷0.0013.52×10-40.011.70×10-30.11.90×10-211丙溴磷0.0012.95×10-40.011.28×10-30.11.34×10-212毒死蜱0.0012.53×10-40.011.38×10-30.11.47×10-2附 錄 F（資料性附錄）12種有機(jī)磷農(nóng)藥及代謝物加標(biāo)回收率情況添加水平（mg/kg）甲胺磷回收率（%）乙酰甲胺磷回收率（%）氧樂果回收率（%）噻唑磷回收率（%）甲拌磷亞砜回收率（%）甲拌磷砜回收率（%）0.00175.4～80.072.9～80.280.7～87.993.8～100.596.0～103.6107.4～125.40.0172.6～75.270.5～73.477.0～82.490.7～97.688.7～98.491.2～99.80.172.9～78.571.9～77.677.9～85.290.