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文檔簡介
第七章農(nóng)藥(nóngyào)及其代謝產(chǎn)物的測定第一頁,共十二頁。第一節(jié)
有機磷農(nóng)藥(nóngyào)
一、理化(lǐhuà)特性◆代謝(氧化、還原(huányuán)、水解、結(jié)合)二、代謝和生物監(jiān)測指標◆吸收◆分布
◆排泄◆毒作用第二頁,共十二頁?!羯?shēngwù)監(jiān)測指標
1、血液中有機磷農(nóng)藥
接觸性生物(shēngwù)標志物2、血液中膽堿酯酶活性
效應性生物標志物輕度中毒:正常人的70%~50%中度(zhōnɡdù)中毒:正常人的50%~30%重度中毒:正常人的30%以下第三頁,共十二頁。三、樣品(yàngpǐn)采集及保存2、血液(xuèyè)中膽堿酯酶活性的測定1、血液(xuèyè)中有機磷農(nóng)藥的測定四、血液中有機磷農(nóng)藥的測定第四頁,共十二頁。1、測定(cèdìng)原理3、樣品處理(chǔlǐ)和測定2、色譜(sèpǔ)條件擔體:ChromsorbW-HP,80~100目固定液:SE-30,甲基硅橡膠四、血液中有機磷農(nóng)藥的測定4、注意事項第五頁,共十二頁。(一)三氯化鐵分光(fēnɡuānɡ)光度法1、測定(cèdìng)原理五、全血膽堿酯酶活性的測定(cèdìng)紅棕色羥肟酸鐵絡(luò)合物
520nm2、繪制標準曲線
第六頁,共十二頁。2、繪制標準(biāozhǔn)曲線
3、樣品處理(chǔlǐ)和測定①取A和B兩管,各加入水0.96ml及耳垂血40u1,搖勻,置于37℃水浴(shuǐyù)中,預熱5~10min.②向樣品管A中,加乙酰膽堿標準液1ml,準確計時,于37℃±0.5℃水浴30min后,立即加堿性羥胺4ml,振搖3min終止反應.③向?qū)φ展蹷中,先加堿性羥胺4ml,振搖3min,再加乙酰膽堿標準液1ml。第七頁,共十二頁。3、樣品處理(chǔlǐ)和測定①取A和B兩管,各加入(jiārù)水0.96ml及耳垂血40u1,搖勻,置于37℃水浴中,預熱5~10min.②向樣品管A中,加乙酰膽堿標準液1ml,準確計時,于37℃±0.5℃水浴30min后,立即加堿性(jiǎnxìnɡ)羥胺4ml,振搖3min終止反應.③向?qū)φ展蹷中,先加堿性羥胺4ml,振搖3min,再加乙酰膽堿標準液1ml。④向A和B兩管中,各加1+2鹽酸2m1,振搖1min,然后各管加10%三氯化鐵溶液2ml,搖勻,過濾。于520nm處測定吸光度。第八頁,共十二頁。4、結(jié)果(jiēguǒ)計算被水解(shuǐjiě)乙酰膽堿的吸光度
=B管吸光度-A管吸光度被水解(shuǐjiě)乙酰膽堿的量(μmol)40u1血
膽堿酯酶活性絕對值(C)全血膽堿酯酶活性值(μmol/ml)=C/0.04正常人全血膽堿酯酶活性值膽堿酯酶活性百分數(shù)接觸者全血膽堿酯酶活性值×100%=5、注意事項第九頁,共十二頁。1、測定(cèdìng)原理(二)DTNB分光(fēnɡuānɡ)光度法HOOC412nm2、繪制(huìzhì)標準曲線第十頁,共十二頁。1、測定(cèdìng)原理4、注意事項(二)DTNB分光(fēnɡuānɡ)光度法2、繪制標準(biāozhǔn)曲線
3、樣品處理和測定第十一頁,共十二頁。內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)第七章農(nóng)藥及其代謝產(chǎn)物的測定。第七章農(nóng)藥及其代謝產(chǎn)物的測定。第一節(jié)有機磷農(nóng)藥。1、血液中有機磷農(nóng)藥
接觸性生物(shēngwù)標志物。2、血液中膽堿酯酶活性
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