基因工程乙肝疫苗課件

基因工程乙肝疫苗乙肝的潛在危害很多病例病程遷延或轉(zhuǎn)為慢性，其中一部分可發(fā)展為肝炎后肝硬化變甚至肝癌；極少數(shù)病例病程發(fā)展迅猛，肝細(xì)胞出現(xiàn)大片壞死，成為重型肝炎；另有一些感染者則成為無癥狀的病毒攜帶者。慢性乙肝病人肝硬化發(fā)生率為2％～20％，發(fā)展成肝癌的占6％～15％。據(jù)調(diào)查推算，中國的慢性乙肝病人中，約25％～40％最終將死于肝硬化或合并肝癌。HBV攜帶者最終死于相關(guān)肝病的危險(xiǎn)性，男性為50％，女性為15％。這與男性吸煙、飲酒等有關(guān)。HBV是一種小型DNA病毒，基因組由單個環(huán)形DNA分子構(gòu)成；球形顆粒，直徑42nm；包膜為脂質(zhì)構(gòu)成（含乙肝表面抗原HBsAg），內(nèi)為20面體核蛋白殼（含乙肝核心抗原，HBcAg）。

s=surfaceproteinsc=coreproteinD=ViralDNAp=DNAPolymeraseHBV進(jìn)入人體通常，大多數(shù)成人的免疫系統(tǒng)都能夠抵抗B型肝炎病毒，并毫無問題地“復(fù)原”。但是也有許多成人無法抵抗B型肝炎病毒，尤其是大多數(shù)受到傳染的嬰兒和兒童因?yàn)閶雰汉蛢和拿庖呦到y(tǒng)尚未健全，無法識別“敵人”,反而把“敵人”當(dāng)成體內(nèi)的“自己人”,長期“和平共處”HBV侵染肝細(xì)胞當(dāng)HBV進(jìn)入人體后,它將首先攻擊肝細(xì)胞。乙肝病毒不直接引起肝細(xì)胞病變，只是利用肝細(xì)胞攝取養(yǎng)料賴以生存，并在肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。乙肝傳播途徑B型肝炎病毒通過接觸被感染者的血液或體液傳播，和導(dǎo)致艾滋病的人類免疫缺陷病毒(HIV)的途徑相同。然而，HBV比HIV感染性強(qiáng)50到100倍。乙肝病毒主要傳播途徑：血源性傳播；醫(yī)源性傳播；胎源性傳播是病毒傳染，而不是遺傳!生活密切接觸性傳播在世界范圍內(nèi)，大多數(shù)傳染發(fā)生于從被感染的母親到孩子，一家人中兒童和兒童的接觸，以及重用未殺菌的針和耳咽管。但2003年的一項(xiàng)調(diào)查表明：隨著社會的發(fā)展、醫(yī)療技術(shù)條件的改進(jìn)、人們生活方式的變遷，通過生活密切接觸傳播已越來越成為乙肝的主要傳播方式。但乙肝不會通過水和食物以及通常的接觸傳播(不過不能合用剪刀，指甲鉗，牙刷等)所以對乙肝攜帶者的歧視是由于人們對乙肝知識的匱乏導(dǎo)致的偏見造成的。遠(yuǎn)離乙肝最安全有效的方法就是注射乙肝疫苗，一般來說，凡沒有感染過乙肝病毒者都應(yīng)該注射乙肝疫苗。疫苗—是利用微生物及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒或滅活或基因工程等方法方法制成，用于預(yù)防疾病的自動免疫制劑。乙肝疫苗有兩種類型：血源性疫苗乙肝血源疫苗是采用乙肝表面抗原攜帶者的血清或血漿作為原料，經(jīng)過化學(xué)濃縮，提純其中的表面抗原，而制成的乙肝疫苗，這種疫苗已停止使用基因工程疫苗疫苗分類國家免疫規(guī)劃疫苗的免疫程序大致是在6個月的時段內(nèi)注射（皮下）3次疫苗結(jié)束時做一次血液乙肝三系的檢查。因?yàn)橹挥凶⑸湟呙绾竽墚a(chǎn)生足量抗體的人，才有預(yù)防作用。約有90~95%人會因此而獲得免疫能力編號HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb頻度臨床意義1+-+-+常見急肝，慢性活動期，有傳染性2+--++常見恢復(fù)期，弱傳染性3---++常見恢復(fù)期，弱傳染性4+---+常見急肝，慢性sAg攜帶者5----+常見急性窗口期，既往感染過6-+-++常見康復(fù)期編號HBsAgHBsAbHBeAgHBeAbHBcAb頻度臨床意義7-+--+常見既往感染過，仍有免疫力8-+---常見康復(fù)期，主動被動免疫后9-----常見未感染過HBV10+----少見急性早期，慢性sAg攜帶者11+-+--少見早期感染，強(qiáng)傳染性12+--+-少見恢復(fù)期，慢性sAg攜帶者易陰轉(zhuǎn)注射后產(chǎn)生的保護(hù)性抗體不是永久性的，一般只能維持3～5年

（這個時間眾說紛紜，WHO，世界衛(wèi)生組織認(rèn)為至少有15年）以后必須在醫(yī)生指導(dǎo)下再加強(qiáng)注射最好是定期檢查（1年）企業(yè)名稱認(rèn)證范圍證書編號安徽安科生物高技術(shù)有限責(zé)任公司重組人生長激素車間A0016

重組人干擾素車間A0017

浙江漢生制藥有限公司注射用人干擾素A0029

杭州九源基因工程有限公司針劑車間（注射劑）A0038

基因工程車間（注射劑）A0039

齊魯制藥廠重組人粒細(xì)胞集落刺激因子生產(chǎn)車間A0044

北京三元基因工程有限公司凍干粉針劑A0085

深圳市華生元基因工程發(fā)展有限公司外用重組人表皮生長液體制劑A0092

艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司體外診斷試劑A0120

山東賽若金生物藥業(yè)有限公司重組人紅細(xì)胞生成素生A0124

產(chǎn)車間

山東格蘭百克生物制藥有限公司重組人粒細(xì)胞集落A0125

刺激因子注射液生產(chǎn)車間

北海集琦方舟基因藥業(yè)有限公司重組人粒細(xì)胞集落刺激A0159

因子注射液生產(chǎn)車間

山東阿華生物藥業(yè)有限公司重組人紅細(xì)胞生成素B0188

注射液生產(chǎn)車間

上海東昕生物技術(shù)有限公司注射用重組人粒細(xì)胞-巨噬B0191

細(xì)胞集落刺激因子生產(chǎn)車間

淮南福壽藥業(yè)有限公司注射用重組人粒細(xì)胞-巨噬B0193

細(xì)胞集落刺激因子生產(chǎn)車間

北京雙鷺?biāo)帢I(yè)有限責(zé)任公司重組人粒細(xì)胞集落刺激因子注射液、B0208

注射用重組人白介素�2生產(chǎn)車間

北京四環(huán)生物工程制品廠重組人紅細(xì)胞生成素生產(chǎn)車間B0219

深圳康泰生物制品有限公司基因工程乙肝疫苗生產(chǎn)車間B0225

華北制藥集團(tuán)金坦生物技術(shù)重組人粒細(xì)胞集落刺激因子、重組人B0268

開發(fā)有限公司(我的公司）粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子注射劑

和重組人紅細(xì)胞生成素注射液生產(chǎn)車間

基因工程乙肝疫苗

基因工程乙肝疫苗（酵母重組）是一種乙肝表面抗原（HbsAg）亞單位疫苗，它系采用現(xiàn)代生物技術(shù)將乙肝病毒表達(dá)表面抗原的基因進(jìn)行質(zhì)粒構(gòu)建，克隆進(jìn)入啤酒酵母菌中，通過培養(yǎng)這種重組酵母菌來表達(dá)乙肝表面抗原亞單位。這種乙肝表面抗原亞單位具有原料易得、產(chǎn)量大、安全、高效等特點(diǎn)。美國默克公司研究的此產(chǎn)品最早獲美國FDA批準(zhǔn)。國內(nèi)生產(chǎn)此產(chǎn)品技術(shù)均從其引進(jìn)?；蚬こ桃腋我呙缛〈匆腋我呙缫殉啥ň?/p>

乙肝表面抗原攜帶者由于已感染乙肝病毒，在此情況下，再抽取其血漿作為乙肝疫苗原料，對攜帶者的身體健康有損害;疫苗的生產(chǎn)受到乙肝病毒表面抗原攜帶者血漿來源和質(zhì)量限制，無法大規(guī)模穩(wěn)定生產(chǎn)；在表面抗原陽性血漿的采集、運(yùn)輸和加工過程中，存在著引發(fā)血源性傳染病流行的可能性；在血源乙肝疫苗的生產(chǎn)過程中，雖采用三步滅活工藝，但三步滅活不足以將血源中所有已知和未知的潛在致病因子全部滅活，難以最大限度地保證血源乙肝疫苗受種者絕對安全.基因工程乙肝疫苗（酵母重組）的生產(chǎn)工藝

基因工程乙肝疫苗（酵母重組）的生產(chǎn)工藝包括發(fā)酵、提取、純化、吸附、配制、分裝等工序。生產(chǎn)工藝中采用世界一流的發(fā)酵罐，通過全自動控制，提供酵母菌最優(yōu)生長條件，發(fā)酵后經(jīng)過細(xì)胞破碎和一系列微濾、超濾、硅膠吸附、洗脫等工序，再經(jīng)過疏水層析，可使產(chǎn)品抗原蛋白純度達(dá)99%以上。所有工藝設(shè)備可自動清洗、自動滅菌，有效地減少了種種人為因素的干擾，確保生產(chǎn)穩(wěn)定和質(zhì)量一致性?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）質(zhì)量控制

基因工程乙肝疫苗（酵母重組）嚴(yán)格按照美國默克公司質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量控制，生產(chǎn)單位建立了全面質(zhì)量管理體系，產(chǎn)品原輔材料、半成品、成品檢測和環(huán)境檢測等方面均有嚴(yán)格質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)和檢定程序?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）的安全性

基因工程乙肝疫苗的有效成分來自能表達(dá)乙肝表面抗原的酵母工程菌，之所以選擇酵母這種宿主是因?yàn)榻湍妇^其他宿主有更高的安全性和穩(wěn)定性。這種酵母工程菌源自于啤酒酵母菌，幾千年來，人類利用啤酒酵母生產(chǎn)啤酒的歷史表明啤酒酵母是非常安全的。在我國基因工程乙肝疫苗已使用1500萬人份以上，如此大規(guī)模接種，尚未出現(xiàn)嚴(yán)重副反應(yīng)報(bào)道?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）免疫效果

基因工程乙肝疫苗能有效阻止乙肝的傳播。它通過主動免疫的方式使人獲得對乙肝的抵抗力。大量臨床資料表明：它是一種安全有效的制品，它的抗體陽轉(zhuǎn)率在95%以上，母嬰阻斷率在85%以上，它能降低乙肝感染率、攜帶率，成為控制乙肝的一種重要手段?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）有著遠(yuǎn)高于血源乙肝疫苗的母嬰阻斷效果。5μg基因工程乙肝疫苗（酵母重組）阻斷效果超過了國產(chǎn)30μg血源乙肝疫苗?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）因是一個新產(chǎn)品，免疫持久性可以保護(hù)5年?；蚬こ桃腋我呙缈纱碳と梭w產(chǎn)生免疫記憶反應(yīng)，因此，長期受益是可能的?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）的使用

基因工程乙肝疫苗的接種對象、用法、貯存條件和有效期等方面均同于血源乙肝疫苗，但其規(guī)格則不同于血源乙肝疫苗?；蚬こ桃腋我呙缫?guī)格為5μg/0.5ml?；蚬こ桃腋我呙纾ń湍钢亟M）與血源乙肝疫苗可互換使用。臨床研究表明，人體對基因工程乙肝疫苗（酵母重組）有很好的耐受性，無嚴(yán)重副反應(yīng)出現(xiàn)。有報(bào)道極少數(shù)對酵母高敏者，在接種后有致敏現(xiàn)象，這種人群應(yīng)禁用。馬鈴薯乙肝疫苗人體試驗(yàn)成功

乙肝疫苗市場競爭現(xiàn)狀分析

目前，全球約有20家企業(yè)被世界衛(wèi)生組織認(rèn)定為疫苗生產(chǎn)商，然而疫苗市場實(shí)際上被4家跨國企業(yè)所壟斷，分別是原史克必成公司（SKB）、巴斯德梅里公司（Pasteur

Merieux，PMSV）、默克公司（MSD）和立達(dá)公司（Lederle）。這4家公司掌握著全球約3／4的疫苗市場。國內(nèi)市場——產(chǎn)銷平衡少波瀾

我國生產(chǎn)的基因乙肝疫苗有兩種:一種是從默克公司引進(jìn)的酵母基因工程乙肝疫苗，共有兩條生產(chǎn)線，一條在北京天壇生物（北京生物技術(shù)研究所），另一條在深圳康泰公司。自1995年建成生產(chǎn)后，北京天壇生物年生產(chǎn)能力為3600萬支；深圳康泰公司年生產(chǎn)能力為6000萬支，估計(jì)實(shí)際年產(chǎn)量為3000萬支。上海生物技術(shù)研究所從史克必成公司進(jìn)口酵母基因工程乙肝疫苗自行分裝，估計(jì)年產(chǎn)量為2000萬支左右。

另一種是1991年中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所聯(lián)合長春生物技術(shù)研究所等單位研制成功哺乳動物（CHO）細(xì)胞表達(dá)的基因工程疫苗，已有長春生物技術(shù)研究所、華北制藥集團(tuán)、北京華爾盾公司、蘭州生物技術(shù)研究所、武漢生物技術(shù)研究所和成都生物技術(shù)研究所獲得生產(chǎn)批文，這6家合計(jì)年產(chǎn)量估計(jì)約為

200－600萬支。從目前國內(nèi)從事生產(chǎn)CHO細(xì)胞乙肝疫苗的6家生產(chǎn)單位中,華北制藥的生產(chǎn)技術(shù)水平處于絕對領(lǐng)先地位。該企業(yè)乙肝疫苗年產(chǎn)量居國內(nèi)第3位（與上海生研所并列）。

國家第五次全國人口普查數(shù)據(jù)顯示，我國每年新生兒為1700萬左右，再加上5歲～12歲兒童的使用量，大致推測用于預(yù)防的乙肝基因疫苗市場需求量至少每年3000－3200萬人份（折合9000－9600萬支）。如果考慮從事特殊職業(yè)的高危人群和乙肝病毒高流行區(qū)的人員等，實(shí)際市場需求量還要略高于上述數(shù)字。目前，國內(nèi)市場實(shí)際生產(chǎn)與需求基本處于平衡狀態(tài)成本降低——突破口是技改在世界范圍內(nèi)，用酵母生產(chǎn)的基因乙肝疫苗由于成本較低，工藝成熟，取得了支配地位。估計(jì)綜合成本約6元／每人份（在中國生產(chǎn)），國內(nèi)目前出廠價(jià)每人份7．5～12元。

我國哺乳動物（CHO）細(xì)胞生產(chǎn)的乙肝疫苗，表達(dá)量較酵母低，細(xì)胞培養(yǎng)成本較高，但其純化工藝簡單，加上哺乳動物表達(dá)的乙肝抗原分泌良好，一次接種細(xì)胞后可連續(xù)培養(yǎng)收集產(chǎn)物達(dá)60天以上，因此綜合成本并不太高。在尚未形成規(guī)?；a(chǎn)、使用的仍是轉(zhuǎn)瓶工藝的情況下，目前每人份成本約為7元左右，但其技術(shù)改造的潛力較大，通過細(xì)胞系本身和培養(yǎng)工藝的改造，其成本完全能降到每人份5元以下，是酵母生產(chǎn)的乙肝疫苗的強(qiáng)有力競爭對手。

目前，基因工程乙肝疫苗已獲得良好免疫效果，無論從屬哪種類型，高效廉價(jià)、使用方便是其發(fā)展的重要方向，包括提高抗原本身的免疫原性，提高工程菌種和細(xì)胞的原始表達(dá)水平，改進(jìn)發(fā)酵工藝，研發(fā)聯(lián)合疫苗和發(fā)展治療性乙肝疫苗。

我國預(yù)防性乙肝基因工程疫苗目前每1份（3支）市場零售價(jià)為25.6元，全國市場銷售額為7．7-8.2億元。生產(chǎn)乙肝疫苗的利潤為20-30%，經(jīng)技術(shù)改造后，利潤還會明顯增加。國產(chǎn)基因工程乙肝疫苗大規(guī)模生產(chǎn)的進(jìn)程緩慢的主要原因是，對其技術(shù)改造和產(chǎn)業(yè)化重視不夠，支持的力度不夠。目前企業(yè)主要應(yīng)使用現(xiàn)代發(fā)酵工藝對原工藝進(jìn)行改造，為新一代基因工程乙肝疫苗的產(chǎn)業(yè)化奠定重要基礎(chǔ)。

風(fēng)平浪靜——還能延續(xù)多久

目前，國際上乙肝疫苗最大廠商史克必成公司每年給上海生研所提供產(chǎn)品原液，由上海生研所分裝制劑在國內(nèi)市場銷售，該