IPT的臨床應(yīng)用和報(bào)告解讀學(xué)習(xí)培訓(xùn)課件

NIPT的臨床應(yīng)用和報(bào)告解讀NIPT開(kāi)展規(guī)范解讀案例分享目錄Contents020301NIPT介紹01NIPT技術(shù)介紹孕婦外周血胎兒游離DNA的發(fā)現(xiàn)PresenceoffetalDNAinmaternalplasmaand

serumLo,Y.M.;Corbetta,N.;Chamberlain,P.F.;Rai,V.;Sargent,I.L.;Redman,C.W.;Wainscoat,J.S.Lancet1997350(9076):

485-4871997年，香港中文大學(xué)的盧煜明教授等在《柳葉刀》(Lancet)上，報(bào)道了在懷有男胎孕婦的外周血中檢測(cè)到了Y染色體的存在，從而證明了孕婦外周血中存在來(lái)自胎兒的游離DNA。盧煜明獲2021

年科學(xué)突破獎(jiǎng)生命科學(xué)獎(jiǎng)無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)之父孕婦外周血中胎兒游離DNA來(lái)源和特點(diǎn)KristinE.Webb,BS,RDMS1.DetectionofFetalAneuploidyUsingCell-FreeDNA:ALiteratureReview胎兒cffDNA的來(lái)源：孕婦外周血含有cffDNA幾乎全部來(lái)源于胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞孕婦外周血中cffDNA含量約在5-30%胎兒cffDNA的基本特點(diǎn)：DNA片段較小，大小一般位于150-200bp之間，平均長(zhǎng)度為166bp左右懷孕第4周即可檢出，8周后含量上升并穩(wěn)定（7周建立胎兒胎盤(pán)循環(huán)）分娩后短時(shí)間內(nèi)消失，平均半衰期為16min，分娩后2h就無(wú)法檢胎兒游離DNA：cell-free

fetal

DNA(cffDNA)出，再次妊娠不影響檢測(cè)存在個(gè)體差異NIPT:

Non-Invasive

PrenatalTesting無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)抽取母體血液和分離游離DNA對(duì)游離DNA進(jìn)行測(cè)序通過(guò)生物信息學(xué)分析評(píng)估胎兒患21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征的風(fēng)險(xiǎn)NIPT：孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前篩查，俗稱(chēng)無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)，是應(yīng)用高通量基因測(cè)序技術(shù)檢測(cè)孕期母體外周血中胎兒游離DNA片段，以評(píng)估胎兒常見(jiàn)染色體非整倍體異常風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)目前技術(shù)發(fā)展水平，NIPT的目標(biāo)疾病為3種常見(jiàn)胎兒染色體非整倍體異常，即21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征。檢測(cè)適宜孕周：12+0～22+6周。02NIPT開(kāi)展規(guī)范解讀NIPT項(xiàng)目開(kāi)展規(guī)范NIPT項(xiàng)目開(kāi)展機(jī)構(gòu)/人員要求采血從事NIPT專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員：經(jīng)省級(jí)衛(wèi)生行政部門(mén)批準(zhǔn)，取得從事產(chǎn)前篩查/診斷的《母嬰保健技術(shù)考核合格證書(shū)》備案采血本院檢測(cè)或與第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)合作產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)（分子遺傳資質(zhì)）產(chǎn)前篩查機(jī)構(gòu)產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)（無(wú)分子遺傳資質(zhì)）其余機(jī)構(gòu)或個(gè)人不得開(kāi)展孕婦外周血胎兒游離DNA采血、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、相關(guān)臨床技術(shù)等服務(wù)。未經(jīng)備案不得開(kāi)展孕婦外周血胎兒游離DNA采血、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、相關(guān)臨床技術(shù)等服務(wù)。簽訂合作協(xié)議NIPT違規(guī)開(kāi)展處罰案例NIPT違規(guī)開(kāi)展處罰案例NIPT違規(guī)開(kāi)展處罰案例合法合規(guī)開(kāi)展NIPTNIPT是一項(xiàng)好的技術(shù)更須合法合規(guī)開(kāi)展避免醫(yī)療糾紛目標(biāo)疾病/適宜時(shí)間適用/慎用/不適用人群檢測(cè)前咨詢(xún)及知情同意檢測(cè)信息采集/標(biāo)本采集/檢測(cè)/報(bào)告發(fā)放檢測(cè)后咨詢(xún)/妊娠結(jié)局隨訪(fǎng)檢測(cè)前咨詢(xún)及知情同意

適用人群1、血清學(xué)篩查顯示胎兒常見(jiàn)染色體非整倍體風(fēng)險(xiǎn)值介于高風(fēng)險(xiǎn)切割值與1/1000之間的孕婦。2、有介入性產(chǎn)前診斷禁忌證者（如先兆流產(chǎn)、發(fā)熱、出血傾向、慢性病原體感染活動(dòng)期、孕婦Rh陰性血型等）。3、孕20+6周以上，錯(cuò)過(guò)血清學(xué)篩查最佳時(shí)間，但要求評(píng)估21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征風(fēng)險(xiǎn)者。孕婦在充分知情同意情況下，可選擇孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前檢測(cè)。慎用人群1、早、中孕期產(chǎn)前篩查高風(fēng)險(xiǎn)。2、預(yù)產(chǎn)期年齡≥35歲。3、重度肥胖（體重指數(shù)>40）。4、通過(guò)體外受精—胚胎移植方式受孕。5、有染色體異常胎兒分娩史，但除外夫婦染色體異常的情形。6、雙胎及多胎妊娠。7、醫(yī)師認(rèn)為可能影響結(jié)果準(zhǔn)確性的其他情形。有下列情形的孕婦進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)準(zhǔn)確性有一定程度下降，檢出效果尚不明確；或按有關(guān)規(guī)定應(yīng)建議其進(jìn)行產(chǎn)前診斷的情形。在充分告知并知情同意的前提下仍自愿要求進(jìn)行檢測(cè)的孕婦，可選擇孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前檢測(cè)。檢測(cè)前咨詢(xún)及知情同意不適用人群1、孕周＜12+0周。2、夫婦一方有明確染色體異常。3、1年內(nèi)接受過(guò)異體輸血、移植手術(shù)、異體細(xì)胞治療等。4、胎兒超聲檢查提示有結(jié)構(gòu)異常須進(jìn)行產(chǎn)前診斷。5、有基因遺傳病家族史或提示胎兒罹患基因病高風(fēng)險(xiǎn)。6、孕期合并惡性腫瘤。7、醫(yī)師認(rèn)為有明顯影響結(jié)果準(zhǔn)確性的其他情形。檢測(cè)前咨詢(xún)及知情同意有下列情形的孕婦進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可能?chē)?yán)重影響結(jié)果準(zhǔn)確性。豫衛(wèi)辦[2018]84號(hào)文，相關(guān)機(jī)構(gòu)和人員不得對(duì)“不適用人群”進(jìn)行孕婦外周血胎兒游離DNA采血與檢測(cè)。檢測(cè)前咨詢(xún)及知情同意對(duì)符合適用人群情形并自愿進(jìn)行檢測(cè)的，或符合慎用人群情形但在充分告知并知情同意的前提下仍自愿要求進(jìn)行檢測(cè)的孕婦，醫(yī)師應(yīng)當(dāng)對(duì)孕婦本人及其家屬詳細(xì)告知該檢測(cè)的目標(biāo)疾病、目的、意義、準(zhǔn)確率、局限性、風(fēng)險(xiǎn)以及其他篩查與診斷方案，與孕婦本人或其家屬簽署知情同意書(shū)并填寫(xiě)申請(qǐng)單。檢出率T21檢出率不低于95%T18檢出率不低于85%T13檢出率不低于70%假陽(yáng)性率T21、T18、T13的復(fù)合假陽(yáng)性率不高于0.5%檢測(cè)失敗率由于凝血、溶血、DNA質(zhì)量控制不合格等標(biāo)本原因造成的檢測(cè)失敗率不超過(guò)5%146958例孕婦NIPT篩查結(jié)果真陽(yáng)性

假陽(yáng)性假陰性 靈敏度（檢出率）特異性陽(yáng)性預(yù)測(cè)值陰性預(yù)測(cè)值檢測(cè)前咨詢(xún)及知情同意NIPT不能評(píng)估胎兒神經(jīng)管缺陷風(fēng)險(xiǎn)！對(duì)未接受中孕期血清學(xué)篩查直接選擇孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前檢測(cè)的孕婦，應(yīng)當(dāng)在中孕期進(jìn)行胎兒神經(jīng)管缺陷風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。檢測(cè)后咨詢(xún)及報(bào)告解讀010203低風(fēng)險(xiǎn)建議定期進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)前檢查高風(fēng)險(xiǎn)遺傳咨詢(xún)，轉(zhuǎn)診至產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)進(jìn)行產(chǎn)前診斷低風(fēng)險(xiǎn)，但存在影像學(xué)檢查異常遺傳咨詢(xún)，轉(zhuǎn)診至產(chǎn)前診斷機(jī)構(gòu)進(jìn)行產(chǎn)前診斷90%100%妊娠結(jié)局隨訪(fǎng)1、隨訪(fǎng)率2、隨訪(fǎng)內(nèi)容低風(fēng)險(xiǎn)孕婦 高風(fēng)險(xiǎn)孕婦隨訪(fǎng)應(yīng)至少至分娩后12周，有條件的可隨訪(fǎng)至分娩后1年。后期流產(chǎn)、引產(chǎn)、早產(chǎn)或足月產(chǎn)、死產(chǎn)、死胎等妊娠結(jié)局，是否為21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征患兒，有條件的可將后期流產(chǎn)、死胎的遺傳學(xué)診斷納入妊娠結(jié)局隨訪(fǎng)內(nèi)容。03病例分享案例1

——NIPT低風(fēng)險(xiǎn)，超聲提示異常，產(chǎn)前診斷為唐氏兒張芹,等.

無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢測(cè)胎兒染色體非整倍體假陰性?xún)衫齕J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,

2017,034(006):884-887.孕婦27歲，G1P0，孕18周血清學(xué)篩查：21三體高風(fēng)險(xiǎn)（1/55）NIPT：低風(fēng)險(xiǎn)孕24周B超檢查：胎兒鼻骨發(fā)育不全、左腎竇分離產(chǎn)前診斷臍血穿刺：胎兒染色體核型分析為易位型21三體無(wú)創(chuàng)低風(fēng)險(xiǎn)不代表胎兒一定沒(méi)問(wèn)題！后續(xù)超聲異常要做產(chǎn)前診斷，避免漏診！案例2

——NIPT提示性染色體異常，產(chǎn)前診斷胎兒為15號(hào)染色體異常孕婦，36歲，G2P1，NT

2mm/CRL66mmNIPT：提示性染色體異?？赡墚a(chǎn)前診斷羊水穿刺：胎兒染色體核型分析為未見(jiàn)異常（46,XN），基因芯片檢測(cè)到胎兒15q13.3區(qū)段存在432.5kb重復(fù)孕婦基因芯片結(jié)果：

45,X[36%]/46,XX[64%]嵌合型攜帶者，15q13.3區(qū)段存在432.5kb重復(fù)無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)不代表胎兒一定有問(wèn)題！也可能是孕婦本人的染色體異常導(dǎo)致！NIPT高風(fēng)險(xiǎn)一定要做產(chǎn)前診斷，避免誤診！案例3

——NIPT提示16號(hào)染色體異常，胎盤(pán)的問(wèn)題孕婦，28歲NIPT：提示16號(hào)染色體異常產(chǎn)前診斷羊水穿刺：胎兒染色體核型分析、基因芯片未見(jiàn)異常孕32周B超：胎兒嚴(yán)重宮內(nèi)生長(zhǎng)受限，小于同孕齡4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差引產(chǎn)，經(jīng)基因芯片檢查，胎盤(pán)為16三體無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)不代表胎兒一定有問(wèn)題！也可能是胎盤(pán)的染色體異常導(dǎo)致胎兒嚴(yán)重FGR！NIPT高風(fēng)險(xiǎn)一定要做產(chǎn)前診斷，并持續(xù)超聲隨訪(fǎng)，避免誤診/漏診！案例4

——NIPT低風(fēng)險(xiǎn)，產(chǎn)前診斷為18三體綜合征北京協(xié)和醫(yī)院病例唐篩低風(fēng)險(xiǎn)超聲提示異常NIPT低風(fēng)險(xiǎn)產(chǎn)前診斷為18三體綜合征引產(chǎn)胎盤(pán)染色體為正常--摘自北京協(xié)和醫(yī)院蔣宇林搖椅足北京協(xié)和醫(yī)院NIPT假陽(yáng)性病例無(wú)創(chuàng)高風(fēng)險(xiǎn)不代表胎兒一定有問(wèn)題！NIPT高風(fēng)險(xiǎn)一定要做產(chǎn)前診斷，避免誤診！--摘自北京協(xié)和醫(yī)院蔣宇林造成NIPT假陽(yáng)性或假陰性的原因胎兒游離DNA含量低孕周過(guò)早、孕婦體重過(guò)重、IVF-ET妊娠、雙胎母體染色體CNV改變母體染色體異常、母體CNV異常、母體染色體嵌合胎兒/胎盤(pán)染色體不一致局限性胎盤(pán)嵌合、胎盤(pán)正常但胎兒異常外源性或特殊游離DNA干擾雙胎之一停育、外源性輸血、淋巴細(xì)胞免疫治療、母體腫瘤、母體免疫系統(tǒng)疾病其他原因測(cè)序深度、數(shù)據(jù)分析、人為錯(cuò)誤NIPT只是一種篩查方法，存在假陽(yáng)性和假陰性，不能以NIPT