生物制藥工藝學(xué)知識點整理

生物制藥工藝學(xué)知識點整理1.生化藥物生物藥物：是利用生物體、生物組織或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、物理化學(xué)和藥學(xué)的原理與方法進行加工、制造而成的一大類預(yù)防、診斷、治療制品。生物藥物包括從動物、植物、海洋生物、微生物等生物原料制取的各種天然生物活性物質(zhì)及其人工合成或半合成的天然類似物。生物藥物包括抗生素、生化藥物、生物制品。生物制品：用生物學(xué)方法（包括基因工程方法）和生化方法制成的，具有免疫學(xué)反應(yīng)或平衡生理作用的藥物制劑。（舉例：乙肝疫苗）抗體：指機體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下，由B淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。配體：指受體具有選擇性結(jié)合能力的生物性物質(zhì)包括內(nèi)源激素外源活性物質(zhì)等。半合成抗生素：將天然代謝產(chǎn)物用生物、化學(xué)或者生化方法進行分子結(jié)構(gòu)改造而制成的各種衍生物。油水分配系數(shù)：logP值指某物質(zhì)在正辛醇（油）和水中的分配系數(shù)比值的對數(shù)值。反映了物質(zhì)在油水兩相中的分配情況。logP值越大，說明該物質(zhì)越親油，反之，越小，則越親水，即水溶性越好?？股兀菏巧镌谄渖顒舆^程中產(chǎn)生的、在低微濃度下能選擇性地抑制或殺死他種生物技能的化學(xué)物質(zhì)。（舉例：青霉素）8.多肽類生化藥物：是以多肽激素和多肽細胞生長調(diào)節(jié)因子為主的一大類內(nèi)源性活性成分，如催產(chǎn)素。干擾素：系指由干擾素誘導(dǎo)有關(guān)生物細胞所產(chǎn)生的一類高活性、多功能的誘生蛋白質(zhì)。這類誘生蛋白質(zhì)從細胞中產(chǎn)生和釋放之后，作用于相應(yīng)的其它同種生物細胞，并使其獲得抗病毒和抗腫瘤等多方面的免疫力。10.藥典：藥典是一個國家關(guān)于藥品標(biāo)準(zhǔn)的法典,是國家管理藥品生產(chǎn)與質(zhì)量的依據(jù).藥典由國家藥典委員會編纂,國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)并頒布實施.11.藥物的ADMEA:absorption吸收D:distribution分布M:metabolism代謝E:excretion排泄醫(yī)療用抗生素的特點：難使病原菌產(chǎn)生耐藥性，較大的差異毒力，最小抑菌濃度（MIC）要低，抗菌譜要廣。紅霉素的分子結(jié)構(gòu)特點及抗菌作用機理。作用機制：與核糖核蛋白體的50s（or70s？）亞單位結(jié)合，抑制肽?；D(zhuǎn)移酶，影響核糖核蛋白體的移位過程，妨礙肽鏈延長，抑制細菌蛋白質(zhì)的合成。14.抗生素種類有哪些，并各舉一代表藥物。按化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：β-內(nèi)酰胺類抗生素(青霉素)、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(紅霉素)、四環(huán)素類抗生素(四環(huán)素)、氨基糖苷類抗生素(鏈霉素)、多肽類抗生素(放線菌素)微生物抗生素生產(chǎn)一般工藝過程。生產(chǎn)過程發(fā)酵過程：1、菌種制備2、種子擴大培養(yǎng)3、大規(guī)模罐批培養(yǎng)分離過程：吸附法，溶劑萃取法，離子交換法，沉淀法純化過程：層析法，中間鹽轉(zhuǎn)移法，結(jié)晶和重結(jié)晶法，活性炭脫色法和超濾法，加抗氧化劑或通惰性氣體，加脫水劑，透析，電透析，濃縮β-內(nèi)酰胺類抗生素的結(jié)構(gòu)與作用機理，并分別寫出青霉素母核6-APA和頭孢霉素母核7-ACA的分子結(jié)構(gòu)式。β-內(nèi)酰胺類抗生素概述：系指化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有β-內(nèi)酰胺環(huán)的一類抗生素。包括青霉素類；頭孢菌素類；頭霉素類；硫霉素類；其他非典型β-內(nèi)酰胺類抗生素優(yōu)點：殺菌活性強，毒性低，適應(yīng)癥廣及臨床療效好的優(yōu)點.抗菌作用機制：通過抑制細菌細胞壁粘肽合成酶的活性而阻礙細胞壁粘肽的合成，使細菌胞壁缺損，菌體膨脹裂解。由于哺乳動物無細胞壁，不受β-內(nèi)酰胺類抗生素的影響，故對機體的毒性小。研究證實，細菌細胞壁粘肽合成酶即是位于細菌胞漿膜上的特殊蛋白，稱青霉素結(jié)合蛋白(PBPs)，此是β-內(nèi)酰胺類抗生素的作用靶點。各種細菌細胞膜上的PBPs數(shù)目、分子量不同，而對β-內(nèi)酰胺類抗生素的敏感性也不同觸發(fā)細菌的自溶酶活性；產(chǎn)生自溶和胞壁質(zhì)水解。研發(fā)半合成抗生素的目的：增強活性，增加選擇性，降低毒性，改變體內(nèi)代謝命運以達到不同的用藥目的，改善理化特性以滿足藥用要求，降低成本。18.簡述GMP、GLP、GCP、GSP的定義《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》GMP(GoodManufacturePractice)生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)出全面符合藥品標(biāo)準(zhǔn)的藥物,必須按GMP規(guī)定組織生產(chǎn)、嚴(yán)格把關(guān).《藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范》GLP(GoodLaboratoryPractice)科研單位研制安全有效藥物必須按照GLP規(guī)定開展工作.嚴(yán)格控制藥物研制的質(zhì)量,確保實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確可靠.《藥品臨床試驗管理規(guī)范》GCP（GoodClinicalPractice）1在新藥研究中保護受試者和病人的安全和權(quán)利.2新藥臨床研究人員保證藥品臨床試驗資料的科學(xué)性、可靠性、重視性.《藥品經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范》GSP（GoodSupplyPractice）藥品供應(yīng)部門為了保證藥品運輸、貯存、銷售過程中藥品的質(zhì)量和效力，必須按照GSP進行.大環(huán)內(nèi)脂類抗生素的種類有哪些？概念：系指化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有大環(huán)內(nèi)酯為母體，通過羥基，以苷鍵和1~3個分子的糖相連接的一類抗生素。分類:多氧大環(huán)內(nèi)酯\多烯大環(huán)內(nèi)酯\蒽沙大環(huán)內(nèi)酯β-內(nèi)酰胺類抗生素的作用機制。通過抑制細菌細胞壁粘肽合成酶的活性而阻礙細胞壁粘肽的合成，使細菌胞壁缺損，菌體膨脹裂解。評價酶純化過程的指標(biāo)有哪些？酶比活，總活力回收簡述單克隆抗體的制備原理。B細胞群受抗原刺激后能產(chǎn)生針對抗原決定族的特異性抗體，一個機體可產(chǎn)生多達100萬種特異性的抗體。但是一個B細胞卻只能分泌一種特異性抗體。例如，小鼠B細胞受乙肝病毒刺激后，可產(chǎn)生針對乙肝病毒的7種不同標(biāo)志的特異性抗體，它們分別由7種小鼠B細胞產(chǎn)生。這些B細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合后，形成7種雜交瘤細胞，稀釋純化，挑出單個雜交瘤細胞，進行無性繁殖（克?。?。同一個克隆的雜交瘤細胞基因相同，合并分泌的特異性抗體質(zhì)地均一，這種抗體稱之為單克隆抗體。23.生物藥物質(zhì)量檢驗的程序與方法有哪些？1）取樣——科學(xué)性、真實性、代表性根據(jù)藥物性質(zhì)、不同劑型,采用不同的取樣方法及不同的取樣量.取樣原則：均勻性，合理性取樣程序：先進行外觀檢查包括：品名、劑型、批號、保質(zhì)期及包裝情況等.固體原料藥當(dāng)n≤3時，每件取樣；當(dāng)n≤300時,按+1；當(dāng)n>300時,按/2+1制劑分析片劑、膠囊劑（非均勻制劑），每批至少10～20片；注射劑（均勻制劑）一般3～5支（測定３次）鑒別依據(jù)生物藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)，采用化學(xué)法、物理法及生物學(xué)方法進行某些特殊反應(yīng)，或測試某些物理常數(shù)或光譜特征及,判斷藥物及其制劑的真?zhèn)?鑒別方法要求：專屬性強，再現(xiàn)性好，靈敏度高，簡便快速化學(xué)反應(yīng)法(1)呈色反應(yīng)鑒別法(2)沉淀生成反應(yīng)鑒別法(3)熒光反應(yīng)鑒別法(4)氣體生成鑒別法光譜鑒別法紫外光譜鑒別法①測定最大吸收波長,或同時測定最小吸收波長.②規(guī)定吸收波長和吸收度比值法③與對照品比較,對比吸收光譜的一致性④規(guī)定一定濃度供試品在最大吸收波長處的吸收度.⑤經(jīng)化學(xué)處理后,測定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性.紅外光譜法中國藥典采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法BP采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法、對照品法USP采用對照品法JP規(guī)定條件下測定一定波長處特征吸收峰.色譜鑒別法HPLCGCTLC（1）高效液相色譜法(HPLC)供試品和對照品色譜峰保留時間一致.（2）氣相色譜法(GC)同HPLC要求（3）薄層掃描法(TLC)對照品比較法供試品斑點與對照品的Rf值及斑點的顏色應(yīng)一致.①方法要有一定的專屬性、靈敏性、且便于推廣.②化學(xué)法和儀器法相結(jié)合，每種藥品一般選用2~4種方法進行鑒別試驗,相互取長補短.③盡可能采用藥典中收載的方法.檢查雜質(zhì)檢查：藥物在不影響療效及人體健康的原則下,可以允許生產(chǎn)過程和貯藏期間引入的微量雜質(zhì)的存在.檢查是判斷藥品純度是否符合限量規(guī)定的要求.安全性檢查：生物藥物應(yīng)保證符合無毒、無菌、無熱源、無致敏源和降壓物質(zhì)等一般安全性要求。（1）異常毒性試驗：用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途徑給予規(guī)定體重的某種試驗動物，觀察其毒性反應(yīng)。反應(yīng)的判斷以試驗動物的死亡與否為終點。（2）無菌檢查：是檢查藥品及輔料是否染有活菌的一種方法，是藥典中比較重要的檢查項目之一。（3）熱源檢查：本法是將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內(nèi)（家兔法），以其體溫升高的程度，判定該供試品中所含熱源是否符合規(guī)定，是一種限度試驗法（4）過敏試驗：是檢查異性蛋白的實驗。藥物中若夾雜有異性蛋白，在臨床使用時易引起病人的多種過敏反應(yīng)。（5）降壓物質(zhì)檢查：降壓物質(zhì)是指某些藥物中可能含有的能導(dǎo)致血壓降低的物質(zhì)。中國藥典采用貓（或狗）血壓法檢查藥物中所含的降壓物質(zhì)。含量測定鑒別用來判定藥物的真?zhèn)?檢查和含量測定可判定藥物的優(yōu)劣藥物在通過鑒別無誤、雜質(zhì)、安全檢查合格的基礎(chǔ)上,進行含量測定.含量測定——測定藥品的含量是評定藥品質(zhì)量,保證藥品療效的重要手段.采用化學(xué)分析方法或物理分析方法。生物藥物的含量表示方法：①用百分含量表示，適合于結(jié)構(gòu)明確的小分子藥物或經(jīng)水解后變成小分子藥物。②用生物效價或酶活力單位來表示。適合于多肽、蛋白質(zhì)和酶類藥物。檢驗報告原始記錄記錄完整、無缺頁損腳；內(nèi)容必須真實、簡明、具體；宜用鋼筆或特種圓珠筆書寫；字跡清晰、色調(diào)一致,不得涂抹（寫錯時,劃上單 線或雙線，再在旁邊改正重寫,并簽名或蓋章）檢驗報告內(nèi)容a供試品的名稱、批號、規(guī)格、數(shù)量、來源；取樣方法、取樣日期；外觀性狀、包裝情況.b檢驗?zāi)康?、項目、方法與依據(jù)；檢驗數(shù)據(jù).c結(jié)論及處理意見；d檢驗者簽名蓋章、復(fù)核者簽名蓋章.氨基糖苷類抗生素化學(xué)結(jié)構(gòu)特點和作用特點是什么？概念：系指化學(xué)結(jié)構(gòu)中由氨基糖苷、氨基糖和糖組成的一類抗生素(氨基環(huán)醇-氨基糖苷類抗生素).1.對G-桿菌抗菌作用強大2.對G-球菌作用較差3.對耐藥金葡菌有效，對鏈球菌弱4.部分對結(jié)核桿菌有較強作用抗菌機制(一)

—阻礙細菌蛋白質(zhì)的合成1.抑制核蛋白體70s亞基始動復(fù)合物的形成2.導(dǎo)致核蛋白體合成異常無功能的蛋白質(zhì)3.阻止肽鏈釋放及70s亞基的解離抗菌機制(二)

—增加細胞膜通透性賴氨酸直接發(fā)酵法工藝流程是什么？斜面接種→種子培養(yǎng)→發(fā)酵→上柱交換→氨水洗脫→真空濃縮→調(diào)pH5~6→得粗制賴氨酸鹽酸鹽→重結(jié)晶、脫色→精制賴氨酸鹽酸鹽新藥研究開發(fā)的過程有哪些，并說出其特點？1.確定研究計劃要綜合考慮醫(yī)療、市場、化學(xué)的評估，文獻狀況，專利的檢索，結(jié)構(gòu)的選擇，合成的前景等。2.準(zhǔn)備化合物文獻研究，合成或分離，結(jié)構(gòu)鑒定，標(biāo)準(zhǔn)化，專利申請，對研究目標(biāo)的復(fù)核等。3.藥理篩選體內(nèi)試驗和體外試驗及體內(nèi)驗證。四環(huán)類抗生為素的結(jié)構(gòu)特點，作用機理，主要品種？概念：系指化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有四并苯為母體的一類抗生素.作用機理：藥物能特異性的與細菌核糖體30s亞基的A位置結(jié)合，阻止氨基酰-tRNA在該位置上的聯(lián)結(jié)，從而抑制肽鏈的增長和影響細菌蛋白質(zhì)的合成。代表:金霉素\土霉素\四環(huán)素\地美環(huán)素及其半合成衍生物多西環(huán)素\美他環(huán)素\米諾環(huán)素等.青霉素發(fā)酵生產(chǎn)的一般流程？為保證臨床使用的安全，有效和穩(wěn)定，抗生素在有效期內(nèi)，常見的檢查項目有哪些？生物制藥中分離制備方法的特點？生物制藥中分離、制備方法有以下特點：（1）生物材料組成非常復(fù)雜。一種生物材料常含成千上萬成分，各種化合物的形狀、 大小、分子量和理化性質(zhì)都各不相同。沒有固定操作方法。（2）有些化合物在生物材料中含量極微，只達萬分之一，甚至百萬分之一。因此，分 離操作步驟多，不易獲得高收率。（3）生物活性物質(zhì)離開生物體后，易變性，破壞，分離進程必須十分小心的保護這些 化合物的生理活性。（難點）（4）生物制藥的分離方法幾乎都在溶液中進行，各種參數(shù)（溫度，pH，離子強度）對 溶液中各種組分的綜合影響常常無法固定，以致許多實驗設(shè)計理論性不強。（5）為了保護目的物的生理活性及結(jié)構(gòu)上的完整性，生物制藥中的分離方法多采用溫 和的逐級分離方法。親和層析分離具有分離的專一性，高效性。（6）生物產(chǎn)品最后均一性的證明與化學(xué)純度的概念不完全相同，因生物分子對環(huán)境反 應(yīng)十分敏感，結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系比較復(fù)雜。31.酶的固定化方法有哪些？并闡述其原理。1）吸附法吸附法分為物理吸附法與離子吸附法。用物理吸附法制成固定化酶，酶活力損失很少，但吸著在載體上的酶，易于脫落，使用價值少。離子吸附法是將酶與含有離子交換劑的水不溶性載體結(jié)合，酶吸附于載體上較為牢固，在工業(yè)上用途頗廣。（2）包埋法包埋法系將酶包埋于凝膠或高分子聚合物網(wǎng)格內(nèi)，網(wǎng)格可以防止酶的滲出，底物仍能滲入網(wǎng)格內(nèi)與酶相接觸。包埋法的優(yōu)點是酶分子本身不參與水不溶性網(wǎng)格的形成，許多酶都可用此法固定化。其操作簡單，