氣質(zhì)聯(lián)用技術檢測對甲苯磺酸酯類雜質(zhì)

氣質(zhì)聯(lián)用技術檢測對甲苯磺酸酯類雜質(zhì)對甲苯磺酸烷基酯，如對甲苯磺酸甲酯和對甲苯磺酸乙酯，是對甲苯磺酸與甲醇，乙醇，或其它低級醇形成的酯。對甲苯磺酸烷基酯會被視為潛在基因毒性雜質(zhì)，這些物質(zhì)可與DNA發(fā)生烷基化反應，從而可能成為引發(fā)癌癥的誘因。由于拉帕替尼在生產(chǎn)過程中使用了對甲苯磺酸、甲醇、乙醇和異丙醇，反應過程中易生成對甲苯磺酸甲酯，對甲苯磺酸乙酯，對甲苯磺酸異丙酯。本試驗采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術檢測檢測這三種雜質(zhì)。儀器Agilent6890-5973GC/MS氣質(zhì)聯(lián)用儀。對照品對甲苯磺酸甲酯（分析純），對甲苯磺酸乙酯（分析純），對甲苯磺酸異丙酯（分析純），對甲苯磺酸丁酯（分析純）。色譜條件色譜柱：以6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管柱（長：30m內(nèi)徑：0.32mm膜厚：1um。載氣：氦氣。流速：2.0mL/min。進樣口溫度：220C。頂空條件：平衡溫度60C;平衡時間30min。柱程序升溫：初始柱溫40C，保持3分鐘，以每分鐘5C的速度升到220C，保持5分鐘。質(zhì)譜檢測參數(shù)：電子轟擊（EI）離子源，電離能量70eV，離子源溫度230C,SIM掃描模式，分別選擇質(zhì)荷比（m/z）為142、156、170、184的離子進行檢測。溶液配制稀釋劑：水一乙腈（50：50）。溶液A:稱取120g碘化鈉，60mg無水硫代硫酸鈉溶于少量水中，再用水定容至100mL量瓶中。內(nèi)標液：精密量取100[LL對甲苯磺酸正丁酯用稀釋劑稀釋至100mL搖勻，精密量取該液20卩L用稀釋劑稀釋至100.0mL,搖勻即得。供試品溶液：取本品適量（約相當于拉帕替尼25mg，精密稱定，置于20mL頂空瓶，加入0.50mL溶液A和0.50mL內(nèi)標液，密封，搖勻。對照品溶液（a）:分別精密稱取400mg的對甲苯磺酸甲酯、1250.0mg的對甲苯磺酸乙酯和18.0mg的對甲苯磺酸異丙酯，用甲苯稀釋至10.0mL。精密量取50卩L該液用內(nèi)標液稀釋定容至25.0mL。對照品溶液（b）:精密量取100卩L對照品溶液（a）用內(nèi)標液稀釋至100mL取1.0mL該液和1.0mL溶液A于20mL頂空瓶中，密封，搖勻。對照品溶液（c）:精密量取500卩l(xiāng)對照品溶液（a）用內(nèi)標液稀釋至20.0mL,取I.OmL該液和I.OmL溶液A于20mL頂空瓶中，密封，搖勻。方法驗證（1）系統(tǒng)適用性考察靈敏度試驗。取對照品溶液（b）進樣，記錄色譜圖。結果各目標峰的信噪比均遠大于10。進樣重復性試驗。取對照品溶液（c）5份，分別進樣檢測，各溶劑峰面積與內(nèi)標物峰面積比值的RSD勻小于5.0%，各溶劑峰保留時間均小于1.0%。（2）專屬性分別對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯、對甲苯磺酸異丙酯和對甲苯磺酸正丁酯適量，制得對照品溶液，分別進樣。專屬性考察結果表明，各目標峰之間分離度良好，無其他分子量相同的雜質(zhì)干擾測定，該方法專屬性強。（3）定量限試驗數(shù)據(jù)顯示：對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯和對甲苯磺酸異丙酯定量限濃度均為0.001卩g/mL;即樣品檢測濃度為25mg/mL時，樣品中含有0.004ppm的對甲苯磺酸甲酯、對甲苯磺酸乙酯和對甲苯磺酸異丙酯均能被定量檢出。（4）線性范圍對甲苯磺酸甲酯在0.040卩g/mL?2.203卩g/mL濃度范圍內(nèi)線性方程：y=9.958x+0.591，相關系數(shù)：r=0.9989;對甲苯磺酸乙酯在0.125ag/mL?6.877卩g/mL濃度范圍內(nèi)線性方程：y=9.187x+1.297，相關系數(shù)：r=0.9992；對甲苯磺酸異丙酯在0.002ag/mL?0.109ag/mL濃度范圍內(nèi)線性方程：y=6.254x+0.010，相關系數(shù)：r=0.9995。（5） 精密度考察重復性考察。分別配制供試品溶液6份，依法檢測。對甲苯磺酸甲酯平均含量為0.15ppm，RSD為1.8%，對甲苯磺酸乙酯平均含量為3.42ppm，RSD為2.3%，對甲苯磺酸異丙酯平均含量為0.06ppm，RSC為4.6%。中間精密度考察。在同一實驗室，由不同操作者，于不同日期進行檢測。對甲苯磺酸甲酯平均含量為 0.13ppm，RSD為1.4%，對甲苯磺酸乙酯3.53ppm，RSC為3.1%，對甲苯磺酸異丙酯0.05ppm，RSC為3.4%。（6） 回收率分別配制相當于進樣濃度80%、100%、120%的加標供試品溶液