茶樹育種學（全套課件下）

第四章

有性雜交育種

第一節(jié)有性雜交育種的類別和意義第二節(jié)雜交方式第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性第五節(jié)雜交技術(shù)第六節(jié)雜交后代的培育和選擇

茶樹有性雜交育種(Sexualcrossbreeding)：以基因型不同的配子進行交配或結(jié)合形成雜種，通過對后代雜種比較、鑒定、選擇、培育，獲得新品種的方法。第一節(jié)

有性雜交育種的類別和意義

一、有性雜交育種的類別

根據(jù)參與雜交親本親緣關系遠近，分近緣雜交（茶種內(nèi)不同品種及普洱茶和白毛茶變種間的雜交）和遠緣雜交育種。按雜交性質(zhì)不同，又可分為有性雜交和無性雜交育種（體細胞融合）。第一節(jié)有性雜交育種的類別和意義

自然雜交：指基因型不同的親本在自然狀態(tài)下的交配。人工雜交：根據(jù)育種目標的需要選擇親本，用人工授粉使母本卵子受精的雜交方法。

第一節(jié)有性雜交育種的類別和意義

二、有性雜交育種的意義

（1）是創(chuàng)造新品種新類型的重要手段雜交引起基因重組、基因互作。雜交、選擇和無性繁殖相結(jié)合：雜交產(chǎn)生基因重組，創(chuàng)造變異；選擇將優(yōu)良變異個體或類型從雜種后代中分離出來；無性繁殖能迅速增加后代數(shù)量，并使優(yōu)良單株的基因不再分離。

第一節(jié)有性雜交育種的類別和意義（2）是生物進化的重要方式自然界通過生物群體間的天然雜交而產(chǎn)生變異，人類有意識地將不同親本的理想基因組合一起，創(chuàng)造新的種質(zhì)資源，打破了生物種間的生殖隔離。

第一節(jié)有性雜交育種的類別和意義（3）是研究遺傳理論的重要方法之一自由分離和獨立分配規(guī)律；連鎖遺傳現(xiàn)象；細胞質(zhì)遺傳等。遺傳學中純系雜交、自交和回交方法在茶樹中應用受到限制。

第一節(jié)有性雜交育種的類別和意義第二節(jié)雜交方式雜交方式：要用幾個親本，親本間如何配置。親本：父本和母本父本：♂，開花期與母本接近，花粉發(fā)芽率高。母本：♀，結(jié)實力強，無通過細胞質(zhì)遺傳的不良性狀。雜交：×，母本在前，父本在后。雜種第一代：雜交后所得到的種子及其長出的植株，用F1表示。茶樹雜交育種中主要利用雜種一代。

第二節(jié)雜交方式

一、兩親雜交

兩親雜交：參加雜交的親本只有兩個。有正反交之分，如果育種目標的性狀不受細胞質(zhì)基因控制時，正交和反交的育種效果相同。簡單易行，育種時間短，雜種后代群體的規(guī)模相對較小，在茶樹中普遍采用。第二節(jié)雜交方式

二、多親雜交

多親雜交：三個或三個以上的親本參加的雜交。能將分散于多個親本上的優(yōu)良性狀綜合于雜種之中，育種年限長。根據(jù)參加雜交的親本次序不同分為添加雜交和合成雜交。第二節(jié)雜交方式（1）添加雜交多個親本逐個參與雜交的方式，如（A×B）×C。添加的親本越多，雜種綜合優(yōu)良性狀也越多，育種年限延長。安排好親本的組合方式和先后次序是重要問題，需要考慮各親本的優(yōu)缺點、性狀互補的可能性，及各親本遺傳物質(zhì)在后代中所占比例等。早期親本，在核遺傳組成中所占比例小。一般先將遺傳力高的性狀進行親本組配，而把綜合性狀好的親本安排在最后一次雜交。

第二節(jié)雜交方式黃柑(A)×Kyang(B)F1(臺農(nóng)938號)×白毛猴(C)臺茶14號第二節(jié)雜交方式（2）合成雜交

參加雜交的親本先配成單交種，然后將兩個單交種雜交，如（A×B）×（C×D）或（A×B）×（A×C）等。為了加強雜交后代內(nèi)某一親本性狀，可以將該親本重復參加雜交，例如（A×B）×（A×C）的組配方式，則A的核遺傳組成在雜種中占1/2。

第二節(jié)雜交方式大葉烏龍(A)×Kyang(B)臺茶20(C)×白毛猴(D)

F1（臺農(nóng)335號）×F1（臺農(nóng)1958號）臺茶16號第二節(jié)雜交方式（3）多父本授粉一個以上父本的混合花粉授給一個母本。將母本種植在若干選定的父本之間，也可采用人工授粉的方法，在一個母本品種上同時可得到多個單交組合。

第二節(jié)雜交方式（4）回交雜交第一代及其以后世代與其親本之一再進行雜交稱回交（Backcross）。

中國種×印度種

F1（印中雜種）×中國種

格魯吉亞1號第二節(jié)雜交方式

當A品種綜合性狀良好，而個別性狀有欠缺時，可選擇在這些（個）性狀上具有良好表現(xiàn)的B品種與A品種雜交，F(xiàn)1及以后各代仍用A品種進行一系列回交和選擇，準備改進的性狀借選擇以保持，A品種原有的優(yōu)良性狀通過回交而恢復。

A品種稱為輪回親本，B品種只參加一次雜交，稱為非輪回親本。

第二節(jié)雜交方式第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配

親本選擇：指根據(jù)育種目標選用具有優(yōu)良性狀的品種類型作為雜交親本。親本選配：從入選的親本中選用哪些親本配組雜交，確定父母本及先后順序。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配

一、親本的選擇原則

（1）廣泛搜集，精選親本如果某些目標性狀在一般栽培品種中不能找到時，搜集范圍擴大到半栽培或野生類型。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（2）具有較多優(yōu)良性狀優(yōu)良性狀多，容易選配與之互補的親本，短期內(nèi)達到目標，否則就需要采用多親雜交方式；如果親本帶有遺傳力很強的不良性狀，會對后代性狀的改良增加難度。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（3）明確親本目標性狀，分清目標性狀主次

復合性狀產(chǎn)量是由多、重、快、長單位性狀所構(gòu)成、品質(zhì)是由色、香、味、形單位性狀所構(gòu)成等，根據(jù)構(gòu)成性狀進行選擇比由它們構(gòu)成的復合性狀進行選擇更具有操作性。第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（4）重視選用地方品種對當?shù)氐淖匀粭l件和栽培條件有良好的適應性，產(chǎn)品受歡迎的程度與當?shù)氐南M習慣有關，容易推廣。如福建、臺灣喜喝用烏龍茶品種加工的烏龍茶，江、浙、皖一帶偏愛中、小葉品種制作的綠茶，印度、斯里蘭卡等國喜歡飲用大葉品種加工的紅碎茶等。第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（5）親本一般配合力要高

一般配合力：某一親本品種和其它若干品種雜交后，雜種后代在某個數(shù)量形狀上全部組合的平均表現(xiàn)。優(yōu)良品種與好的親本關系。

云南大葉種是一個優(yōu)良品種，且一般配合力高。一般配合力的高低目前還不能根據(jù)親本性狀的表現(xiàn)估算，只能根據(jù)雜種的表現(xiàn)來判斷。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配

二、親本的選配原則（1）雙親具有較多的優(yōu)點，優(yōu)缺點能互補性狀互補：雜交親本雙方優(yōu)良性狀綜合起來應能滿足育種目標的要求，親本之一的優(yōu)點能克服另一親本的缺點。雙親互補：不同性狀的互補；構(gòu)成同一性狀的不同單位性狀的互補。為了解決抵抗某種主要病害，可選用所抗的生理小種有所差別的親本雜交。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（2）選用不同生態(tài)型的親本配組親本間遺傳基礎差異大，雜交后代的分離廣，易于選出性狀超越親本和適應性比較強的新品種?！霸颇洗笕~種”作親本，與“四川中葉種”雜交育成了“蜀永1號”等，對F1及其親本的過氧化物酶和酯酶同工酶分析，F(xiàn)1出現(xiàn)了“互補帶”和“雜交帶”

。第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（3）以具有較多優(yōu)良性狀的親本作母本使細胞質(zhì)基因控制的有用性狀也得到利用。栽培品種與野生類型雜交，用栽培品種作母本；本地品種與外地品種雜交，以本地品種作母本。第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（4）用一般配合力高的親本配組借鑒前人的經(jīng)驗，了解雜交育種中常用的親本品種。福鼎大白茶與云南大葉種的自然雜交后代中選育出福云6號、7號、8號、10號、12號、迎霜、翠峰等新品種。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配（5）注意父母本的開花期雙親花期不遇，用開花晚的材料作母本?；ǚ劭少A藏一段時間。

第三節(jié)有性雜交親本的選擇和選配第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

一、開花習性

花蕾在6月出現(xiàn)，分化形成期延續(xù)到11月。部分在蕾期自然脫落，不同品種的落蕾率（福鼎大白茶早期花蕾開花率~13%，后期花蕾全部不開花）和開花率（福建水仙的落蕾率為78.7%，福鼎大白茶27.8%）差異大（

表4-1

）。第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

茶花為兩性花，由花托、花萼、花冠、雄蕊、雌蕊五部分組成?；ü诎咨?，雄蕊包圍著雌蕊，由花絲和花藥構(gòu)成，花藥具有4個孢子囊，內(nèi)含無數(shù)花粉粒。雌蕊分子房、花柱、柱頭三部分。第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

Ⅴ．花軸Ⅰ．花圖式Ⅱ．花萼Ⅳ．花的中央縱切面

花程式：用字母、符號和數(shù)字表示花各部分的組成、排列、位置以及相互關系的公式?；▓D式：顯示花在橫切面上形態(tài)特征的簡單圖解。第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

開花期9~12月，10月中、下旬至11月中旬為盛花期。同一地區(qū)不同品種，或同一品種在不同地區(qū)的花期有明顯差別（表4-3）。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

茶花開放上午5~9時較多，樹冠中部的花蕾比上、下部的先開，東南面的比西北面的先開；短枝上的花蕾比長枝上的先開，中下部的花蕾比上部的先開；在溫暖晴天，壽命較短，約1~2天；在低溫下雨氣候下，達4~5天。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

二、授粉特點和受精過程

屬于蟲媒花，受精率低，人工輔助授粉可以顯著提高茶樹的結(jié)實率。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

同一朵花的雌、雄蕊成熟期相仿，茶花開放1~2小時左右，花粉粒從囊中散出，即可授粉。花粉即將成熟時淡黃色，成熟時金黃色，成熟過度黑褐色。花粉生活力的高低與品種和花粉成熟度有密切關系。龍井種花粉成熟度對發(fā)芽率的影響

雜交時應選擇金黃色的成熟花粉。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

未成熟花粉發(fā)芽率（%）成熟花粉發(fā)芽率（%）過度成熟花粉發(fā)芽率（%）2.064.517.0不同品種的花粉生活力

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

品種發(fā)芽率（％）安化中葉種95.8樂昌白毛茶77.8毛蟹1.9梅占5.9政和大白茶3.2

當花粉粒到柱頭上幾小時后，便開始萌發(fā)，長出花粉管，并隨著花柱內(nèi)腔進入胚囊，進行雙受精作用，受精過程在10~11月可完成。有性種的花粉生活力強，花粉生活力弱的品種不宜作父本。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

三、結(jié)實習性

茶樹結(jié)實率一般為2%，有性系品種茶籽產(chǎn)量一般750kg/hm2左右，幾乎完全自花不孕。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

茶樹結(jié)實率的高低與下述因素有關：（1）品種不同品種的結(jié)實率差異大，有的品種只開花不結(jié)實，無結(jié)實力或結(jié)實力低不宜作母本。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

不同品種的結(jié)實率比較

（2）氣候適當延長光照，生殖生長加強，采取遮陽措施，花果減少。茶樹邊緣枝及受光面開花結(jié)果多，與光照充足有關。

光照對茶樹開花結(jié)果的影響

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

處理10月中旬花蕾數(shù)（個、叢）長日照（16h）1603遮陽（8h）415對照（自然光照）1071（3）開花期盛花期開放的花朵結(jié)實率最高，占總結(jié)實數(shù)的50%-80%，雜交工作宜選擇親本盛花期進行。

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

（4）植株部位短枝上結(jié)實率占全株總結(jié)實率~85%，著生樹冠下、中層的茶果80~90%，朝南面和朝東面的結(jié)實率高，這些習性可作為選擇母本上的花朵時參考。第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

（5）輔助授粉

蟲媒花、花多結(jié)實率低、盛花期授粉媒介不足。授粉次數(shù)4~8次的結(jié)實較好，種子量的遞增率為63%~78%

人工輔助授粉與茶籽增產(chǎn)率的關系

第四節(jié)茶樹開花與結(jié)實習性

授粉次數(shù)12345678910茶籽增產(chǎn)率（%）40465363677371787286第五節(jié)雜交技術(shù)

一、雜交前的準備工作計劃：雜交組合數(shù)、配組方式、父母本的確定、正反交、雜交花數(shù)。準備雜交用具。第五節(jié)雜交技術(shù)

二、花粉采集與貯藏

授粉前1-2天，從父本植株上采集即將開放、花粉呈金黃色的花朵，置干燥地方，次日將花粉從花朵上刷下。父母本開花期不一致，或者由于從異地采集花粉，貯藏時間以2天為限，低溫干燥可延長花粉的壽命。第五節(jié)雜交技術(shù)測定發(fā)芽率方法：（1）形態(tài)法：顯微鏡下觀測，正常呈球形。（2）培養(yǎng)法：5%蔗糖溶液，25℃培養(yǎng)數(shù)小時。

第五節(jié)雜交技術(shù)

（3）染色法：過氧化物酶是花粉在發(fā)芽過程中呼吸時所必須的，在該酶的作用下，將多元酚氧化而釋放出活性氧，有生活力的花粉染成紅色，無生活力的花粉染成黃色或無色。

聯(lián)苯胺、α-萘酚、碳酸鈉溶液。第五節(jié)雜交技術(shù)

三、隔離為防止天然異交，須對母本的花朵進行隔離。應在花朵未開放前進行，方法分套袋和全株隔離。選擇盛花期開放、著生在短枝上發(fā)育良好的花蕾進行隔離。第五節(jié)雜交技術(shù)

四、去雄茶樹有一定自交結(jié)實率。以研究遺傳規(guī)律為目的的人工雜交須作去雄處理，當雜交的目的是創(chuàng)造新品種時，可免去繁重的去雄工作。去雄的時間一般在母本植株開花前1~2天，通常用鑷子鉗去雄蕊的花藥。第五節(jié)雜交技術(shù)

五、授粉去雄后1~2天，或開放后當天，晴朗無風的上午8~10時進行。打開隔離袋，將花粉輕輕涂在柱頭上，套上隔離袋，掛上標牌。第五節(jié)雜交技術(shù)

六、授粉后管理授粉后一周左右，花瓣凋萎脫落，柱頭呈褐色干縮狀，去掉隔離袋或隔離框，以便受精后的子房在自然條件下正常發(fā)育。第五節(jié)雜交技術(shù)

幼果的脫落率很大，在人工雜交下為57.3%~

98.8％（表4-12）。原因除品種外，還可由不良的環(huán)境和不當?shù)脑耘啻胧┑纫?。茶果成熟后，應按不同雜交組合，及時分別采收，統(tǒng)計雜交結(jié)實率，分別貯放和播種。第五節(jié)雜交技術(shù)

第六節(jié)雜交后代的培育和選擇

早春將種子在苗圃實行單粒播，一足齡時定植。

雜種后代的選擇方法可采用單株選擇和集團選擇。根據(jù)相關性狀進行早期鑒定，進一步進行產(chǎn)量和品質(zhì)的直接鑒定。第五章雜種優(yōu)勢的利用

第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)第二節(jié)雜種優(yōu)勢產(chǎn)生的原因第三節(jié)茶樹雜種優(yōu)勢利用的特點第四節(jié)遠緣雜交

第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

一、雜種優(yōu)勢的概念與度量二、雜種優(yōu)勢的檢測三．雜種優(yōu)勢的利用效果

一、雜種優(yōu)勢的概念與度量

雜種優(yōu)勢（Heterosis）：兩個基因型不同的親本雜交產(chǎn)生的雜種第一代（F1），在生長勢、生活力、繁殖力、抗逆性、產(chǎn)量和品質(zhì)等性狀方面超過其雙親的現(xiàn)象。第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

雜種優(yōu)勢的表現(xiàn)是多方面的，例如，營養(yǎng)生長方面（生長勢強、營養(yǎng)生長期長等）；品質(zhì)性狀方面（某些有效成分含量提高、萌芽期提早、持嫩性好等；生理功能方面（適應性、抗病蟲性、耐受力增強，光合效率提高等）。各種表現(xiàn)，既有區(qū)別，又互相聯(lián)系。利用雜種優(yōu)勢時，可偏重某一方面，同時也要兼顧其它重要性狀。第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

度量方法：

（1）中親優(yōu)勢（Mid-parentheterosis）:某一數(shù)量性狀的平均值與雙親差數(shù)的比率。

（2）超親優(yōu)勢（Over-parentheterosis）：某一數(shù)量性狀的平均值與高值親本差數(shù)的比率。第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)（3）超標優(yōu)勢(Over-standardheterosis)：某一數(shù)量性狀的平均值與當?shù)赝茝V品種差數(shù)的比率。（4）雜種優(yōu)勢指數(shù)(Indexofheterosis)：某一數(shù)量性狀的平均值與雙親比值。第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

雜種優(yōu)勢因雙親基因互作和與環(huán)境條件的影響，表現(xiàn)復雜。在雜交親和范圍內(nèi)，雙親的親緣關系、生態(tài)類型、地理距離和性狀差異較大，性狀能互補，雜種優(yōu)勢較強。在雙親的親緣關系和性狀有差異的前提下，基因型純度愈高，雜種優(yōu)勢愈強。第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

二、雜種優(yōu)勢的檢測（1）性狀觀察：性狀比較和分析，簡單方便。（2）生化分析：如同功酶和蛋白質(zhì)電泳等方法。（3）細胞遺傳學鑒定：進行細胞和染色體水平的鑒定。（4）分子遺傳學鑒定：主要方法有RAPD、RFLP、STS、SSR、AFLP等。第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

三．雜種優(yōu)勢的利用效果

（1）提高產(chǎn)量（2）改善品質(zhì)（3）增強抗逆性（4）發(fā)芽期早第一節(jié)雜種優(yōu)勢的慨念與表現(xiàn)

第二節(jié)雜種優(yōu)勢產(chǎn)生的原因

一、顯性假說顯性假說：F1集中了雙親有利性狀的顯性基因，每個基因產(chǎn)生完全顯性或部分顯性，由于顯性基因互補作用，產(chǎn)生雜種優(yōu)勢。

二、超顯性假說超顯性假說：雜合等位基因的貢獻大于純合顯性和純合隱性基因的貢獻。第二節(jié)雜種優(yōu)勢產(chǎn)生的原因

生活力假說：雙親性細胞的異質(zhì)性，提高了生活力。遺傳平衡假說：形成一種遺傳平衡很好的異質(zhì)結(jié)合。上位性假說：基因間相互作用?；蚪M互補假說：雜種一代DNA復制、RNA轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)譯上的量的增加。基因多態(tài)性假說：父母本間差異既包括兩親本之間的基因型差異，也包括基因多態(tài)性。第二節(jié)雜種優(yōu)勢產(chǎn)生的原因

第三節(jié)茶樹雜種優(yōu)勢利用的特點（1）茶樹是多年生植物只要親本選配得當并將其相互交叉種植，每年都可獲得具有雜種優(yōu)勢的雜種第一代種子。（2）茶樹是異花授粉植物一、自花結(jié)實率極低，不必培育雄性不育系。雄性不育系：雄性器官退化，自交不結(jié)實，雌性器官正常。二、具有遺傳性狀差異懸殊的變種、品種和生態(tài)型，為選擇雜交親本提供了有利條件。三、遺傳組成雜合，雜種第一代就出現(xiàn)不同程度的分離現(xiàn)象。四、須采取隔離措施。

（3）茶樹是葉用作物植物營養(yǎng)體的雜種優(yōu)勢表現(xiàn)最強。

（4）茶樹具有無性繁殖能力可通過無性繁殖，固定雜種優(yōu)勢。

第四節(jié)遠緣雜交

一、遠緣雜交的概念及其作用二、遠緣雜交不親和性和遠緣雜種夭亡、不育的原因及其克服方法三、茶樹遠緣雜交四、遠緣雜種后代的分離、培育和選擇

一、遠緣雜交的概念及其作用（一）遠緣雜交的慨念近緣雜交：同種內(nèi)不同品種或類型之間的雜交。遠緣雜交：不同種、屬或親緣關系更遠的植物類型間所進行的雜交。亞遠緣雜交：地理上相距甚遠、生態(tài)條件極不相同和系統(tǒng)上長期隔離的種內(nèi)不同類型或亞種間的雜交。第四節(jié)遠緣雜交

（二）遠緣雜交的作用（1）引入異種(屬)植物的有利基因：人為地促進不同物種的基因漸滲和交流。（2）創(chuàng)造新物種和異染色體體系：導入不同種、屬的染色體組；導入異源染色體或片段。（3）誘導單倍體：誘導孤雌生殖。（4）有效地利用雜種優(yōu)勢：核基因和核質(zhì)之間的互作。（5）用于研究生物的進化：使物種在進化過程中所出現(xiàn)的一系列中間類型重現(xiàn)。第四節(jié)遠緣雜交

二、遠緣雜交不親和性和遠緣雜種夭亡、不育的原因及其克服方法

雙親能否進行遠緣雜交，不但要能親和可孕，而且其F1代能正常生長發(fā)育，并能通過有性或無性方式繁育后代。第四節(jié)遠緣雜交

（一）遠緣雜交的不親和性原因及克服辦法

1．遠緣雜交不親和性原因雙親親緣關系遠，遺傳差異大，染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)不相同，生理上不協(xié)調(diào)?，F(xiàn)象：花粉不能在異種柱頭上萌發(fā)；花粉管不能伸入柱頭；或花粉管進入柱頭后，生長緩慢，甚至破裂；或花粉管長度不夠等原因而不能到達子房；雌、雄配子不能受精形成合子。為保持各物種的獨立性，存在種間的生殖隔離。第四節(jié)遠緣雜交（1）注意親本的選擇與組配同種植物不同的變種或品種，配子間的親和力有差異。在親本選配上應注意：以栽培種為母本；以染色體數(shù)目多的作母本；以雜種為母本；注意細胞質(zhì)的作用，正反交的差異。

2．克服遠緣雜交不親和性的方法第四節(jié)遠緣雜交

（2）染色體預先加倍：將染色體數(shù)目少的親本加倍后再雜交。（3）橋梁法：親本之一與橋梁品種雜交，雜種加倍后，再和另一親本雜交。（4）特殊授粉：如混合花粉授粉、重復授粉、提前或延遲授粉等。第四節(jié)遠緣雜交

（5）組織培養(yǎng)等生物技術(shù)柱頭手術(shù)(Stigmagraftingtechnique)：把母本花柱切短；或切取已由父本花粉授粉，花粉剛發(fā)芽的父本柱頭的上端部分，移植到母本柱頭上。子房受精(Overyfertilization)：將花柱切除后，把父本花粉直接撒在子房頂端的切面上。第四節(jié)遠緣雜交

（5）組織培養(yǎng)等生物技術(shù)雌蕊離體培養(yǎng)：在母本花藥未開裂前切取花蕾，將雌蕊接種在人工培養(yǎng)基上，進行人工授粉和培養(yǎng)。試管受精(Test-tubefertilization)：將未受精的胚珠從子房中剝出，在試管內(nèi)授以父本花粉或已萌發(fā)伸長的花粉管。體細胞融合：將雙親原生質(zhì)體進行融合后人工培養(yǎng)。

第四節(jié)遠緣雜交1．遠緣雜種夭亡、不育的現(xiàn)象和原因有時雖能完成受精作用，但受精不完全。例如精子雖能與卵核結(jié)合，但不能和極核結(jié)合形成胚乳；或胚乳發(fā)育不正常；或胚和胚乳發(fā)育不同步，因而不能獲得雜交種子；或幼苗在生育過程中死亡而不能獲得雜種植株；或不能受精結(jié)實獲得雜種后代。

（二）遠緣雜種夭亡、不育的原因及其克服方法第四節(jié)遠緣雜交

一個物種的核物質(zhì)導入另一物種，引起核質(zhì)互作不平衡；或由于雙親的染色體組、染色體數(shù)目、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)等差異，造成染色體不平衡，減數(shù)分裂時不能進行同源染色體的配對、分離，不能形成有正常功能的配子；或不同物種的DNA分子大小、核苷酸的排列順序和結(jié)構(gòu)、DNA分子所攜帶的遺傳信息所反映的代謝及其調(diào)控功能等的差異，很難協(xié)調(diào)地共處于一個細胞中，產(chǎn)生基因不平衡；或胚、胚乳及母體組織間生理代謝失調(diào)，導致胚乳敗育及雜種幼胚夭亡。第四節(jié)遠緣雜交

各個物種之所以能夠按其特定方式繁衍后代并保持其種性，是它們在長期進化過程中，形成一個完整、平衡與穩(wěn)定的遺傳系統(tǒng)。第四節(jié)遠緣雜交

2．克服遠緣雜種夭亡、不育的方法

（1）幼胚離體培養(yǎng)：解決胚乳敗育、胚和胚乳不協(xié)調(diào)造成的雜種夭亡。（2）雜種染色體加倍：解決雙親的染色體組或染色體數(shù)目不同而缺少同源性，不能形成具生活力的配子而造成的雜種不育。（3）回交法：雜種產(chǎn)生的雌、雄配子并不是都是無效的，用雜種與親本之一回交。（4）嫁接等無性繁殖：把不育的雜種嫁接在可育株上。第四節(jié)遠緣雜交

茶與山茶、茶與茶梅、茶與油茶進行雜交，茶的近緣植物威爾遜山茶、山茶花、尾葉山茶、大葉山茶、茶梅等同茶樹進行種間雜交。生態(tài)型有顯著差異的大葉種和小葉種的雜交，培育出了許多優(yōu)良品種。

三、茶樹遠緣雜交第四節(jié)遠緣雜交

四、遠緣雜種后代的分離、培育和選擇

（一）遠緣雜種后代性狀分離的特點（1）分離無規(guī)律性（2）分離類型豐富、并有向兩親分化的傾向（3）分離世代長、穩(wěn)定慢第四節(jié)遠緣雜交第六章誘變育種

第一節(jié)誘變育種的特點第二節(jié)輻射誘變育種第三節(jié)化學誘變育種第四節(jié)誘變育種的方法和程序第五節(jié)多倍體育種

誘變育種：利用物理、化學因素，誘發(fā)生物產(chǎn)生遺傳變異，根據(jù)育種目標對變異體進行選擇和鑒定，直接或間接培育新品種的育種途徑。實質(zhì)是通過誘變使DNA發(fā)生結(jié)構(gòu)變化（包括染色體畸變、易位及堿基序列改變），從而導致基因的變異。

選擇育種和雜交育種，是利用自然突變和基因重組，不能創(chuàng)造新的基因。且有些基因緊密連鎖，往往有利和不利性狀同時傳遞給雜交后代。

（一）提高突變率、擴大變異譜：突變提高100－1000倍，變異范圍廣。（二）適于品種個別性狀的改良：誘發(fā)點突變，只改變原品種個別性狀。第一節(jié)誘變育種的特點（三）變異的方向和性質(zhì)難以掌握：生物是經(jīng)歷長期進化的，它們的遺傳物質(zhì)及代謝過程已達到協(xié)調(diào)狀態(tài)，某一基因被誘發(fā)產(chǎn)生突變，這種狀態(tài)就遭到破壞。了解、預測和控制變異，定向地改良品種性狀。（四）與其他育種方法結(jié)合，發(fā)揮更大的作用：獲得的突變體，可通過其它手段轉(zhuǎn)移到別的品種上。

一、輻射誘變源的種類及特性二、輻射的劑量測量三、適宜劑量和劑量率的選擇四、輻射誘變的機理五、輻射處理的方法

第二節(jié)輻射誘變育種一、輻射誘變源的種類及特性

常用的輻射種類有：β粒子、中子、X射線、γ射線和紫外線。

微粒輻射電磁輻射短波光輻射宇宙線輻射地殼輻射帶電粒子（α射線、β射線、質(zhì)子）中性粒子、中子（快中子、慢中子、熱中子）X射線γ射線紫外線微粒輻射電磁輻射由各種放射性物質(zhì)產(chǎn)生第二節(jié)輻射誘變育種二、輻射的劑量測量1．放射性強度：放射性核素特征的物理量。國際制單位是貝可（Bq），專用單位是居里。

2．照射量：只用于X和γ射線。國際制單位是庫（倫）每千克（C/kg），專用單位是倫琴（R）。

3．吸收劑量：輻射的生物效應與吸收劑量的關系。國際制單位是焦耳每千克（J/kg），專用單位是戈瑞（Gy）。劑量率：單位時間內(nèi)被照射材料所接受的劑量稱為。

4．中子流量：以每平方厘米上通過的中子總數(shù)。

第二節(jié)輻射誘變育種

輻射劑量范圍與誘變效果有密切的關系，如果照射劑量過低，不易獲得理想的誘變效果；若照射劑量過高，易使被照植株大量死亡。

一般照射劑量選擇在臨界劑量（LD40）附近，或半致死劑量（LD50）。

三、適宜劑量和劑量率的選擇第二節(jié)輻射誘變育種

不同的作物種類，同種作物不同的品種、不同的器官和組織、不同的發(fā)育階段和生理狀態(tài)對輻射的敏感性都有差異。

對γ射線照射敏感性：扦插枝條＞扦插苗＞實生苗＞茶籽＞花粉。

大葉類品種＞中小葉類品種敏感。

第二節(jié)輻射誘變育種四、輻射誘變的機理

電離輻射引起有機體變異分為四個階段：（1）物理階段：發(fā)生電離和激發(fā)；（2）物理化學階段：產(chǎn)生活潑的自由原子或自由基；（3）生物化學階段：原子和自由基與核酸和蛋白質(zhì)發(fā)生反應，引起分子結(jié)構(gòu)的變化；（4）生物學階段：各種細胞器的結(jié)構(gòu)及其組成發(fā)生變化，包括染色體的畸變和基因突變。第二節(jié)輻射誘變育種

輻射誘變主要是細胞水平上的染色體畸變和分子水平上的基因突變。第二節(jié)輻射誘變育種五、輻射處理的方法（1）種子照射：對干、濕、或萌動種子進行照射，要求種子生活力強。操作簡便，體積小，處理數(shù)量多，并易于貯存和運輸。

（2）營養(yǎng)器官照射：插穗和插播苗。（3）花粉照射第二節(jié)輻射誘變育種化學誘變育種：采用化學誘變劑處理植物材料，誘發(fā)遺傳物質(zhì)發(fā)生突變，然后根據(jù)育種目標，對變異進行鑒定、培育和選擇，最后育成新品種的途徑。

第三節(jié)化學誘變育種

第三節(jié)化學誘變育種一、常用化學誘變劑及作用機理（1）烷化劑類（2）核酸堿基類似物：胸腺嘧啶類似物、腺嘌呤類似物。（3）簡單有機化合物：乙酸、甲醛等。（4）簡單無機化合物：氨、雙氧水等。（5）抗生素：鏈霉素等。（6）生物堿：秋水仙素、高級酚類等。

（1）浸漬法：將種子、接穗等浸漬于溶液中。

（2）注入法：用注射器將藥液注入生長點、腋芽等部位。

二、化學誘變方法第三節(jié)化學誘變育種（3）涂抹法和滴液法：將試劑溶于瓊脂等粘性物質(zhì)中，涂于處理部位?；?qū)⒚撝耷蚍庞谔幚聿课缓螅ㄆ诘渭铀幰?。用于生長點、芽等。

（4）熏蒸法：試材放入密閉潮濕的小室，通入藥劑產(chǎn)生的蒸汽進行處理，常用于花粉、花藥、子房等。

（5）施入法：試劑加入到培養(yǎng)基中，或施于植株根部。第三節(jié)化學誘變育種一、材料的選擇（1）育種目標：綜合性狀優(yōu)良，只是一二個不好的性狀需要改進。（2）不同品種或類型：對誘變因素的敏感性不同。（3）處理部位：有利于物理或化學誘變劑最大限度地發(fā)揮作用。第四節(jié)誘變育種的方法和程序二、誘變劑量的確定參比同種植物或相近植物（如同屬、同科植物等）的同類器官誘變劑量。為了減少多發(fā)性突變，處理劑量要稍低些；如果期望產(chǎn)生多類型的突變體，應采取較高的劑量。第四節(jié)誘變育種的方法和程序三、處理群體大小的確定及后代選擇劑量、品種的敏感性，繁殖系數(shù)，育種目標和人力、物力，茶籽用量為1-2kg。扦插苗所發(fā)生的突變是體細胞，由它長成的變異枝條，當代選擇，無性繁殖。第四節(jié)誘變育種的方法和程序

一、多倍體的概念

一個屬內(nèi)各個種所特有的、維持其生活機能的最低限度數(shù)目的一組染色體稱染色體組，各個染色體組所含有的染色體數(shù)目稱染色體基數(shù)（X）。

第五節(jié)多倍體育種

多倍體育種：在有性世代或無性世代的某一階段，用物理的或化學的方法使染色體倍數(shù)增加，然后經(jīng)過選擇培育而育成新品種的途徑。第五節(jié)多倍體育種

二、多倍體育種的意義

1．巨大性：各組織和器官變大。

2．生化成分：新陳代謝旺盛，生化成分含量提高。第五節(jié)多倍體育種3．育性：三倍體高度不育；同源多倍體在減數(shù)分裂中染色體不能正常配對或分離；異源多倍體有一定程度的不育性，但高于同源多倍體。

4．克服遠緣雜交不孕性和遠緣雜種不實性：將雜交的親本之一的染色體加倍后雜交，有可能雜交成功；將F1植物染色體加倍，各染色體組的各個染色體都能聯(lián)會成二價體，育性增加。第五節(jié)多倍體育種（一）化學試劑誘變多倍體秋水仙素：百合科植物的秋水仙的器官和種子中一種化學物質(zhì)，性極毒。易溶于水、酒精中，使用濃度以0.2%為最常用。

三、人工獲得多倍體的方法第五節(jié)多倍體育種

作用機制：秋水仙素與正在分裂的細胞接觸后，抑制細胞分裂時紡錘絲形成，使已正常分裂的染色體停留在赤道板上，不能拉向兩極，同時又抑制細胞板的形成，使分裂的染色體留在一個細胞核中，從而造成染色體數(shù)目加倍。第五節(jié)多倍體育種（1）處理萌動的種子茶籽浸種催芽，用脫脂棉包裹胚芽，將0.2%－0.3%秋水仙素溶液滴在小棉球上，處理期間內(nèi)用秋水仙素溶液保持棉球濕潤，規(guī)定時間處理完畢后，將棉球去掉，清水洗去殘留在茶籽上的秋水仙素溶液。濃度和時間應很好的配合；不同的基因型對誘變效果有影響。（2）處理新梢（3）處理黃化枝條第五節(jié)多倍體育種（二）物理因素誘變多倍體溫度激變、機械損傷、電離射線以及離心力等。

第五節(jié)多倍體育種（二）遠緣雜種后代的培育

分別采收，單粒播種，單株定植，以行株距150×75cm為宜。

（三）遠緣雜種后代的選擇

采用單株選擇，淘汰要慎重。根據(jù)遠緣雜種后代分離復雜的特點，適當增加雜種后代的選株數(shù)量和選育代數(shù)。發(fā)現(xiàn)有利變異，無性繁殖。

第四節(jié)遠緣雜交

第七章生物技術(shù)在茶樹育種中的應用

第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種第三節(jié)細胞培養(yǎng)及其突變體篩選第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

生物技術(shù)（Biotechnology）是以生命科學為基礎，利用生物體的特性和功能，設計、構(gòu)建、培育具有預期性狀的新物種、新品種、新品系，以及與工程原理相結(jié)合，進行加工生產(chǎn)，為社會提供商品和服務的綜合技術(shù)體系。

一、組織與器官培養(yǎng)的概念和應用（一）組織與器官培養(yǎng)的概念（二）組織與器官培養(yǎng)在育種中的應用二．培養(yǎng)的步驟與方法（一）無菌培養(yǎng)的建立（二）營養(yǎng)繁殖體的增殖（三）生根（四）試管苗移栽大田第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)一、組織與器官培養(yǎng)的概念和應用（一）組織與器官培養(yǎng)的概念植物組織與器官培養(yǎng)(planttissueandorganculture)是建立在植物細胞全能性（plantcelltotipotency）學說的理論基礎上，以無菌操作作為核心的現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分。細胞全能性：外植體細胞經(jīng)過脫分化，失去了原來的結(jié)構(gòu)和功能而成為未分化狀態(tài)，經(jīng)再分化形成各種不同類型的細胞，實現(xiàn)全能性。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)根據(jù)所用材料，離體培養(yǎng)技術(shù)主要有以下類型：

（1）組織培養(yǎng)(tissueculture)；

（2）器官培養(yǎng)(organculture)；

胚胎培養(yǎng)(embryoculture)

花粉培養(yǎng)(pollenculture)

（3）細胞培養(yǎng)(cellculture)；

（4）原生質(zhì)體培養(yǎng)(protoplastculture)第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)

根據(jù)培養(yǎng)過程可分為初代培養(yǎng)（第一代培養(yǎng)）和繼代培養(yǎng)；按照培養(yǎng)基還可分為固體和液體培養(yǎng)；根據(jù)培養(yǎng)方式又可分為淺層培養(yǎng)、深層培養(yǎng)、看護培養(yǎng)、微室培養(yǎng)、平板培養(yǎng)和條件培養(yǎng)等。

第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（二）組織與器官培養(yǎng)在育種中的應用（1）擴大變異范圍：培養(yǎng)組織細胞處在不斷分裂分化狀態(tài)，容易受到培養(yǎng)條件和外加壓力的影響而產(chǎn)生突變。（2）克服遠緣雜交障礙：柱頭或花柱等障礙；胚的早期敗育。（3）獲得體細胞雜種：原生質(zhì)體的培養(yǎng)。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（4）倍性控制：胚乳培養(yǎng)獲得三倍體植株；花藥、花粉或未受精的子房和胚珠培養(yǎng)獲得單倍體；在培養(yǎng)周期中進行染色體加倍。（5）快速無性繁殖：莖尖、莖段培養(yǎng)可快速形成無性繁殖系，周期短、繁殖數(shù)量大、不受季節(jié)和環(huán)境條件的限制、適合進行工廠化生產(chǎn)、防止苗木帶病退化等。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（6）獲得脫毒苗：病毒是通過維管束傳導，用尚未分化維管束的莖尖或其他分生組織進行離體培養(yǎng)。（7）種資資源的保存：利用莖尖及細胞培養(yǎng)結(jié)合低溫或超低溫冷凍貯藏保存種質(zhì)資源。（8）作為外源基因轉(zhuǎn)化的受體系統(tǒng)：利用植物組織、細胞及原生質(zhì)體作為受體，將外源目的基因?qū)胫参锛毎?。第一?jié)組織與器官培養(yǎng)二．培養(yǎng)的步驟與方法第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（一）無菌培養(yǎng)的建立（二）營養(yǎng)繁殖體的增殖（三）生根（四）試管苗移栽大田（一）無菌培養(yǎng)的建立

過程：外植體的選擇→滅菌→接種→培養(yǎng)等。要求：無污染，有適當比例的成活并較快的生長?？紤]三個方面：適當外植體；培養(yǎng)基的種類和添加成分；以及培養(yǎng)環(huán)境條件。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)1．取材（外植體）

考慮供體的生理狀況及所取的部位，成功的難易程度有所不同。較大的外植體有較強的再生能力，易污染；快速繁殖，可以相對大一些；太小多形成愈傷組織，甚至難以成活。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（1）胚及相關材料離體胚珠和子房與在母株上相同，形成種子，進而發(fā)育成植株；另一種是胚珠和子房組織脫分化產(chǎn)生愈傷組織和胚狀體，進而發(fā)育成植株。再生植株可起源于體細胞，為二倍體。起源于性細胞，是單倍體。胚培養(yǎng)有兩種方式：以幼胚誘導愈傷組織，通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生再生植株；二是使發(fā)育完全的胚直接萌發(fā)，獲得植株。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（2）莖尖及相關材料

田間生長的茶樹、扦插苗、實生苗、室內(nèi)培養(yǎng)的實生苗、組織培養(yǎng)苗等均可作為培養(yǎng)材料的來源。（3）葉片

采摘面中央春季生長健壯的芽下第一、二葉，切除主脈。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)2．滅菌

既要達到滅菌的目的，又不能讓外植體細胞大量死亡。滅菌藥劑的種類和濃度、滅菌時間的長短。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)3．培養(yǎng)基

考慮外植體能夠存活和能夠較快生長。根據(jù)培養(yǎng)基作用，分為誘導產(chǎn)生愈傷組織的誘導培養(yǎng)基(inductionmedium)和促使愈傷組織分化成苗的分化培養(yǎng)基(differentiationmedium)，它們都是由基本培養(yǎng)基(basismedium)加上植物激素等成分組成。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)

基本培養(yǎng)基包括大量元素和微量元素、維生素、氨基酸以及糖和水等。由愈傷組織（callus）再分化成苗的過程叫做“再分化”。常用的植物生長調(diào)節(jié)劑包括細胞分裂素類和生長素類。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)

外植體褐變接種后，其表面開始褐變，有時甚至會使整個培養(yǎng)基褐變的現(xiàn)象。多酚氧化酶被激活，使細胞的代謝發(fā)生變化。在褐變過程中，會產(chǎn)生醌類物質(zhì)，抑制其他酶的活性，影響所接種外植體的培養(yǎng)。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)

褐變的原因①基因型：不同植物、不同品種間的褐變現(xiàn)象是不同的。②生理狀態(tài)：外植體的生理狀態(tài)不同，在接種后褐變程度也不同。③培養(yǎng)基成分：濃度過高的無機鹽或細胞分裂素可使褐變現(xiàn)象加深。④培養(yǎng)條件不當：如果光照過強、溫度過高、培養(yǎng)時間過長等。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（二）營養(yǎng)繁殖體的增殖三種方式：（1）誘導腋芽潛伏狀態(tài)的腋芽，在離體條件下伸長生長。（2）誘導產(chǎn)生不定芽（adventiousbud）或新梢（3）體細胞胚胎發(fā)生（somaticembryogenesis）先形成胚狀體（embryoid），再發(fā)育成為完整的植株。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)

（三）生根

添加促進生根的生長素激素，一般不再需要細胞分裂素類。

第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)（四）試管苗移栽大田

馴化(habituation)鍛煉：提高移栽成活率，逐漸適應外界環(huán)境。主要問題是防止組織失水和病菌感染。移入預先已消毒的培養(yǎng)土中，初期用薄膜和紗網(wǎng)覆蓋，土壤保持適當濕度，適時噴水保濕，切忌水分過多。其次，是如何使其由異養(yǎng)為主轉(zhuǎn)變?yōu)橥耆责B(yǎng)，移栽小苗經(jīng)過一段生長后，逐漸揭去薄膜，逐漸適應自然光照。第一節(jié)組織與器官培養(yǎng)第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種

一、單倍體在植物育種上的重要性二、花藥和花粉培養(yǎng)技術(shù)（一）花藥培養(yǎng)（二）花粉培養(yǎng)三、單倍體植株的染色體加倍一、單倍體在植物育種上的重要性

單倍體植物（Haploidplant）：具有配子染色體數(shù)的植物。

應用價值：（1）單倍體染色體加倍可獲得純合二倍體（2）有利于遠緣雜交新類型的培育和穩(wěn)定：通過花藥或花粉培養(yǎng)途徑再生單倍體植株，再對其染色體進行加倍。第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種（3）與誘變育種結(jié)合加速育種進程：單倍體不存在顯隱性關系，顯性和隱性突變均可在當代表現(xiàn)出來，便于鑒定和選擇，將有利突變的個體染色體加倍。（4）作為外源基因轉(zhuǎn)化的受體系統(tǒng)：有利于外源基因的整合表達。第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種二、花藥和花粉培養(yǎng)技術(shù)

（一）花藥培養(yǎng)

花藥培養(yǎng)的基本程序：外植體(花蕾)選擇→外植體預處理→外植體消毒→剝?nèi)』ㄋ帯臃N→誘導培養(yǎng)→分化培養(yǎng)→移栽第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種（1）取材考慮三個方面的問題，即外植體的基因型、外植體的生理狀態(tài)和花粉的發(fā)育時期。多數(shù)來自雜交育種F1的花藥，雜交育種的親本選配原則，也適用于單倍體育種。第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種

植物的種類和品種不同難易程度存在很大差異，須對供體植株的基因型有所選擇。選取花粉處于一定發(fā)育期的花藥，大多數(shù)為單核中、晚期。茶樹在11月前后雄核發(fā)育處于單核中晚期的花藥接種。（2）滅菌

75％的酒精，0.1％升汞浸泡，無菌水沖洗。（3）接種（4）再生花藥培養(yǎng)誘導單倍體植株有兩種途徑。第一條是經(jīng)胚狀體的再生途徑，第二條是經(jīng)愈傷組織，分化出不定芽，再形成不定根。（5）移栽。

第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種（二）花粉培養(yǎng)

花藥培養(yǎng)常常是一個既有單倍體，又有二倍體、甚至多倍體的混合群體。花粉培養(yǎng)誘導形成的植株全部來源于單倍體的花粉，從而省略對其鑒定的程序；結(jié)合突變體篩選以及進行基因操作等研究；花粉培養(yǎng)所要求的技術(shù)比花藥培養(yǎng)復雜。第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種

花粉的分離：機械分離法和自然散落法?；ǚ叟囵B(yǎng)：淺層液體培養(yǎng)法和看護培養(yǎng)法。第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種三、單倍體植株的染色體加倍

（1）自然加倍：誘導過程中，有一些植株會自然加倍。要注意與二倍性愈傷組織分化植株的區(qū)分。（2）人工誘導加倍：秋水仙堿處理（3）從愈傷組織再生二倍體植株第二節(jié)花藥和花粉培養(yǎng)與單倍體育種第三節(jié)細胞培養(yǎng)

（一）分離細胞的方法（二）單細胞培養(yǎng)方法（三）培養(yǎng)細胞的密度及活力的測定

單細胞培養(yǎng)從植物組織器官或愈傷組織游離出單細胞，在無菌條件，使其再生完整植株。

第三節(jié)細胞培養(yǎng)及其突變體篩選（一）分離細胞的方法（1）物理方法：搖床振蕩，鎳絲網(wǎng)過濾，離心收集。（2）酶法：果膠酶和纖維素酶。第三節(jié)細胞培養(yǎng)及其突變體篩選

（二）單細胞培養(yǎng)方法（1）液體淺層培養(yǎng)：細胞在平皿中形成一淺層，密封培養(yǎng)。（2）微滴培養(yǎng)：一小滴的單細胞在培養(yǎng)皿上，密封培養(yǎng)。（3）平板培養(yǎng)：細胞包埋于培養(yǎng)基中培養(yǎng)。（4）看護培養(yǎng)：單細胞接種到濾紙上培養(yǎng)。第三節(jié)細胞培養(yǎng)及其突變體篩選

（三）培養(yǎng)細胞的密度及活力的測定（1）起始培養(yǎng)的細胞密度：104～108個/ml（2）細胞的活力測定：熒光素雙醋酸鹽能使酯酶分解而成為具熒光的極性物，有活力的細胞會發(fā)出黃綠色熒光。酚藏花紅能將死細胞染成紅色。Evans藍不被活細胞吸收而被死細胞吸收。（3）植板率的測定：每個平板接種細胞總數(shù)形成細胞團的百分率。第三節(jié)細胞培養(yǎng)及其突變體篩選

第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

植物原生質(zhì)體：除去細胞壁由質(zhì)膜包裹著的具有生活力的植物裸細胞。原生質(zhì)體融合或體細胞雜交（somatichybridization）：在離體條件下，使同一物種或不同物種的原生質(zhì)體融合（protoplastfusion），形成雜種細胞，再經(jīng)過人工培養(yǎng)誘導雜種細胞分化形成植株的過程。一、原生質(zhì)體的分離

（一）分離原生質(zhì)體的材料：各個部位幾乎均能分離出原生質(zhì)體。（二）原生質(zhì)體的分離1．材料的預處理：使游離的原生質(zhì)體更能適應新的培養(yǎng)條件。（1）預培養(yǎng)；（2）暗處理；（3）藥物或添加物處理；（4）萎焉處理第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

2．原生質(zhì)體的分離有機械法和酶法，一般采用酶法，常使用纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶，分別作用于細胞壁的不同組分。不同種類的植物，所需的酶的種類和濃度不同。配制酶液須加入適量的滲透壓穩(wěn)定劑，代替細胞壁對原生質(zhì)體起保護作用。有兩類：一類為糖醇或可溶性糖；另一類為無機鹽溶液。分離時間和溫度與不同植物材料、酶活力等有關。酶法分離分為兩步分離法和一步分離法。一步分離法較為常用，將所需果膠酶和纖維素酶混合配成溶液。

第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交二、原生質(zhì)體的培養(yǎng)

（一）培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件

KM培養(yǎng)基等，還應注意以下問題：（1）植物激素：2，4-D是最普遍的生長調(diào)節(jié)劑。（2）原生質(zhì)體的密度：一般采用103個/ml以上的密度。（3）光照和溫度：一開始應在黑暗中培養(yǎng)，再生成愈傷組織時，需要強光照。第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

（二）原生質(zhì)體的培養(yǎng)方法：單細胞培養(yǎng)的各種方法。（三）原生質(zhì)體的培養(yǎng)過程分為三步：細胞壁再生、細胞分裂和植株再生。愈傷組織形成后存在兩條再生植株的途徑。

第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交三、原生質(zhì)體的融合

（一）原生質(zhì)體融合的類型和方式自發(fā)融合：酶分離原生質(zhì)體過程中同種原生質(zhì)體自然融合，形成同核體。誘導融合：加入誘導劑或其他方法促進不同親本的異種原生質(zhì)體之間發(fā)生融合的過程。誘導融合不是沒有親緣界限的，在很大程度上取決于原生質(zhì)體之間的親緣關系和生理狀態(tài)。第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

（二）誘導融合的方法物理方法：電融合（electrofusion）；化學方法：（1）高pH高鈣法；（2）多聚化合物法第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交四、原生質(zhì)體融合體的發(fā)育及雜種細胞的篩選（一）原生質(zhì)融合體的生長發(fā)育經(jīng)歷以下四個過程：（1）異核體的壁再生；（2）異核體的核融合（nuclearfusion）；（3）融合細胞的增殖；（4）愈傷組織的器官分化第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交（二）雜種細胞的篩選產(chǎn)生了雜種細胞，要及時地從同時存在的雙親細胞和同源融合體的混合群體中把它們篩選出來，轉(zhuǎn)移到適宜培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng)，設計一種只允許雜種細胞生長的雜種篩選體系。第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

互補選擇法：利用兩個不同親本具有不同的生理或遺傳特性，在形成雜種細胞時產(chǎn)生的互補作用進行選擇。如激素自養(yǎng)型互補、營養(yǎng)互補、抗性互補。機械分離法：根據(jù)雙親原生質(zhì)體在顏色上的差別進行選擇。第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交五、體細胞雜種植株的鑒定

（1）形態(tài)學鑒定：體細胞雜種應具有兩個親本的形態(tài)學特征，或與兩個親本有區(qū)別。（2）細胞學鑒定：融合后的原生質(zhì)體應是四倍體（tetraploid）或雙二倍體（doublediploid）雜種。第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

（3）生化鑒定：利用親本的某些生物化學特性（如酶等）在雜種中的表達來鑒別體細胞雜種。（4）DNA檢測鑒定：每個物種都有特定的DNA分子圖譜。第四節(jié)原生質(zhì)體培養(yǎng)與體細胞雜交

第八章分子育種第一節(jié)基因工程與育種一、基因工程的概念二、茶樹基因工程的方法和步驟三、基因工程的安全性評價第二節(jié)分子標記與育種一、常用分子標記的原理和方法二、分子標記在茶樹育種中的應用一、基因工程的概念二、茶樹基因工程的方法和步驟（一）目的基因的分離和克?。ǘ┠康幕虻霓D(zhuǎn)化（三）轉(zhuǎn)基因植株的鑒定三、基因工程的安全性評價（一）安全性評價的意義（二）轉(zhuǎn)基因植物安全性評價（三）轉(zhuǎn)基因植物各階段安全性評價申報要求第一節(jié)基因工程與育種

一、基因工程的概念

基因工程：應用人工方法把生物的遺傳物質(zhì)（通常是DNA）分離出來，在體外進行切割、拼接和重組，然后將重組的DNA導入某種宿主細胞或個體，從而改變它們的遺傳特性；有時還使新的遺傳信息在新的宿主細胞或個體中大量表達，以獲得基因產(chǎn)物。第一節(jié)基因工程與育種（一）目的基因的分離和克隆1．基因文庫分離目的基因；2．功能蛋白組技術(shù)分離目的基因；3．PCR技術(shù)；4．mRNA差別顯示技術(shù)。

（二）目的基因的轉(zhuǎn)化1．農(nóng)桿菌介導的基因轉(zhuǎn)化2．化學和物理法誘導DNA直接轉(zhuǎn)化3．種質(zhì)系統(tǒng)介導的基因轉(zhuǎn)化

二、茶樹基因工程的方法和步驟第一節(jié)基因工程與育種

（一）目的基因的分離和克隆1．基因文庫分離目的基因:構(gòu)建cDNA文庫，用核酸探針把目的基因從文庫中分離出來.2．功能蛋白組技術(shù)分離目的基因:分離純化功能蛋白，進行氨基酸序列分析，合成簡并引物，進行PCR擴增分離蛋白基因。3．PCR技術(shù):通過序列的相似性設計簡并引物，采用RT-PCR和5’/3’RACE技術(shù)分離基因。4．mRNA差別顯示技術(shù):個體發(fā)育的不同階段，或是在不同組織或細胞中發(fā)生的不同基因按時間、空間進行有序的表達。第一節(jié)基因工程與育種

（二）目的基因的轉(zhuǎn)化

外源（目的）基因轉(zhuǎn)化到植物中，賦予植物新的產(chǎn)物或性狀，使之成為新品種。考慮三個因素：一是要有適宜的基因；二是組織培養(yǎng)系統(tǒng)；三是外源基因轉(zhuǎn)化到植物的途徑和方法。轉(zhuǎn)化方法主要有三種；轉(zhuǎn)化受體可以是原生質(zhì)體或是植物組織。第一節(jié)基因工程與育種1．農(nóng)桿菌介導的基因轉(zhuǎn)化Ti質(zhì)粒：能夠把本身的一段DNA轉(zhuǎn)移至植物細胞，并整合進植物基因組得以表達，從而導致植物冠癭瘤的發(fā)生。轉(zhuǎn)化工作可分為三大部分：受體系統(tǒng)的建立、Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化載體的構(gòu)建及目的基因的轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)化方法：整體植株接種共感染法、葉盤轉(zhuǎn)化法和原生質(zhì)體共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化法。發(fā)根農(nóng)桿菌及其Ri質(zhì)粒也可用于植物的基因轉(zhuǎn)化。第一節(jié)基因工程與育種2．化學和物理法誘導DNA直接轉(zhuǎn)化（1）聚乙二醇(PEG)法：干擾細胞間的識別。（2）脂質(zhì)體法：脂類化學物質(zhì)包裹DNA，通過原生質(zhì)體的吞噬轉(zhuǎn)入受體細胞。（3）電擊法：利用高壓電脈沖，形成瞬間通道。第一節(jié)基因工程與育種（4）超聲波法：擊穿細胞膜造成通道。（5）顯微注射法：將外源DNA直接注入受體細胞中。（6）激光微束法：在細胞膜上形成小孔，實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移。（7）基因槍法：將外源DNA包被在金粒中，在高壓的作用下射入受體細胞。第一節(jié)基因工程與育種

3．種質(zhì)系統(tǒng)介導的基因轉(zhuǎn)化特點：轉(zhuǎn)化的DNA可以是裸露的，也可以重組在質(zhì)粒DNA上；依靠生物自身的種質(zhì)系統(tǒng)或細胞結(jié)構(gòu)功能來實現(xiàn)；整體水平上的轉(zhuǎn)化；方法簡便；不需要植物組織、細胞、原生質(zhì)體等離體培養(yǎng)過程。

第一節(jié)基因工程與育種（1）花粉管通道法外源DNA沿著花粉管滲入，經(jīng)過珠心通道進入胚囊，轉(zhuǎn)化尚不具備正常細胞壁的卵、合子或早期胚胎細胞。第一節(jié)基因工程與育種（2）生殖細胞浸泡法將供試外植體如種子、胚、胚珠、子房、花粉粒等直接浸泡在外源DNA溶液中，利用滲透作用把外源基因?qū)胧荏w細胞，整合并穩(wěn)定地表達與遺傳。第一節(jié)基因工程與育種（3）胚囊、子房注射法使用顯微注射儀把外源DNA溶液注入到子房或胚囊中。第一節(jié)基因工程與育種

（三）轉(zhuǎn)基因植株的鑒定基因轉(zhuǎn)化后：1.在含有選擇壓力的培養(yǎng)基上誘導轉(zhuǎn)化細胞分化。2.對轉(zhuǎn)化植株進行分子生物學鑒定，Southern雜交證明外源基因在植物染色體的整合、Northern雜交證明是否正常轉(zhuǎn)錄、Western雜交證明轉(zhuǎn)錄和翻譯是否成功。3.性狀鑒定及外源基因表達調(diào)控研究。4.遺傳學分析，獲得轉(zhuǎn)基因植物品種。第一節(jié)基因工程與育種

從檢測的基因功能上可分為報告基因和目的基因的檢測，當轉(zhuǎn)化的目的基因無直檢測性質(zhì)時，將能提供易檢測性質(zhì)的報告基因與目的基因相接，通過檢測報告基因間接了解目的基因的轉(zhuǎn)化。第一節(jié)基因工程與育種三、基因工程的安全性評價（一）安全性評價的意義生物安全性評價就是要對生物技術(shù)活動本身及其產(chǎn)品，可能對人類和環(huán)境的不利影響及其不確定性和風險性進行科學評估，并采取必要措施加以管理和控制，使之降低到可接受的程度，以保障人類健康和環(huán)境安全。第一節(jié)基因工程與育種

2001年國務院發(fā)布了令第304號《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評價管理條例》，2002年農(nóng)業(yè)部發(fā)布了令第8號《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評價管理辦法》，第9號《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物進口安全管理辦法》，第10號《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標識管理辦法》，以及《關于貫徹執(zhí)行〈農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評價管理條例〉及配套規(guī)章的通知》。第一節(jié)基因工程與育種

（二）轉(zhuǎn)基因植物安全性評價

對安全性控制過嚴，會妨礙生物技術(shù)的發(fā)展；對安全性要求過低，也可能使人類健康和環(huán)境遭受嚴重威脅。

《管理辦法》對安全等級的劃分，安全性評價、申報和審批、技術(shù)檢測管理、監(jiān)督管理、安全監(jiān)控的辦法及懲罰措施都做了詳細地規(guī)定。將受體生物分為四個安全等級；將轉(zhuǎn)基因生物也分為四個安全等級；將轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品分為四個安全等級。第一節(jié)基因工程與育種（三）轉(zhuǎn)基因植物各階段安全性評價申報要求（1）中間試驗的報告（2）環(huán)境釋放的申報（3）生產(chǎn)性試驗的申報（4）安全證書的申報第一節(jié)基因工程與育種

第二節(jié)分子標記與育種一、常用分子標記的原理和方法（一）RFLP標記（二）RAPD標記（三）AFLP標記（四）SSR標記二、分子標記在育種中的應用（一）構(gòu)建遺傳圖譜（二）分析親緣關系（三）分子標記輔助選擇（四）育種過程監(jiān)測和個體鑒定一、常用分子標記的原理和方法

借助與目標基因緊密連鎖的遺傳標記基因的基因型分析，鑒定分離群體中含有目標基因的個體，以提高選擇效率，即分子標記輔助育種

。

第二節(jié)分子標記與育種

遺傳標記：基因型易于識別的表現(xiàn)形式，遺傳標記分為四種類型。第二節(jié)分子標記與育種

形態(tài)標記：簡單直觀、數(shù)量少、易受環(huán)境影響。細胞標記：染色體核型和帶型，數(shù)目也很有限。生化標記：同工酶和貯藏蛋白，標記數(shù)有限分子標記：基于DNA水平多態(tài)性的遺傳標記，它通過檢測基因組的一批識別位點來估測基因組的變異性或多樣性。

分子標記特點：（1）是在DNA水平上對遺傳變異的直接反映；（2）多態(tài)性高；（3）大多數(shù)分子標記是共顯性的。

第二節(jié)分子標記與育種

限制性片段長度多態(tài)性。生物體在長期進化過程中，種屬間甚至品種間由于突變、重組等原因，在限制性內(nèi)切酶位點上發(fā)生核苷酸的插入、缺失和點突變（使原酶切位點消失或產(chǎn)生新酶切位點），當用限制性內(nèi)切酶處理不同生物體的DNA時，酶切所產(chǎn)生的DNA片段其長度可能不相同，這種酶切后DNA片段長度的差異就是RFLP。

（一）RFLP標記第二節(jié)分子標記與育種

隨機擴增片段多態(tài)性。采用人工合成的較短的隨機排列堿基順序核酸單鏈為引物，在一種DNA多聚酶作用下，對所研究的基因組DNA進行PCR擴增，獲得一組不連續(xù)的DNA片段，其中每個擴增所產(chǎn)生的片段代表了基因組上的一個位點，所檢測出來的擴增產(chǎn)物DNA片段的多態(tài)性反映了基因組相應區(qū)域的DNA多態(tài)性。

（二）RAPD標記第二節(jié)分子標記與育種

擴增片段長度多態(tài)性。用限制性內(nèi)切酶對基因組DNA進行酶切，然后對限制性片段進行選擇性擴增，從而揭示DNA多態(tài)性。

（三）AFLP標記第二節(jié)分子標記與育種

簡單重復序列。利用真核生物的基因組中普遍存在1~6個bp簡單串聯(lián)重復特性作為分子標記。

（四）SSR標記第二節(jié)分子標記與育種

二、分子標記在育種中的應用（一）構(gòu)建遺傳圖譜（二）分析親緣關系（三）分子標記輔助選擇（四）育種過程監(jiān)測和個體鑒定第二節(jié)分子標記與育種第九章品種審（鑒）定與新品種保護第一節(jié)品種審（鑒）定一、品種審（鑒）定任務和意義品種審定（Cultivarassessment）:品種審定委員會對新育成或新引進的茶樹品種根據(jù)品種區(qū)域試驗或生產(chǎn)試驗，按規(guī)定程序進行審查，決定該品種是否能推廣，并確定推廣范圍的過程。第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應主要任務:根據(jù)品種區(qū)域試驗或生產(chǎn)試驗的情況，準確地評定新育成的茶樹品種在生產(chǎn)上的利用價值、經(jīng)濟效益；確定其推廣價值、適應地區(qū)及相應的栽培技術(shù)；對新品種的示范、繁育、推廣工作提出建議。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應二、審定機構(gòu)及其工作內(nèi)容上世紀50年代初是和群眾性良種評選活動結(jié)合進行的。

1960年以后，各省、市、自治區(qū)相繼成立了品種審定委員會。

1981年全國農(nóng)作物品種審定委員會成立，并頒布了《全國農(nóng)作物品種審定試行條例》，開始了國家級品種審定工作。

1989年，國務院通過了《中華人民共和國種子管理條例》，使我國農(nóng)作物品種審定工作逐步走上法制化、規(guī)范化軌道。

2000年7月8日全國人大常委會通過并于2000年12月1日正式施行的《中華人民共和國種子法》，農(nóng)業(yè)部于2001年2月發(fā)布《主要農(nóng)作物品種審定辦法》，制定了農(nóng)作物品種審定的實施細則。第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應我國主要農(nóng)作物品種和主要林木品種實行國家和省級兩級審定制度，申請者可以直接申請省級審定或者國家級審定。國家農(nóng)作物品種審定委員會和林木品種審定委員會分別由國務院農(nóng)業(yè)、林業(yè)行政主管部門設立，負責主要農(nóng)作物品種和主要林木品種的審定工作，省級農(nóng)業(yè)、林業(yè)行政主管部門則分別設立省級農(nóng)作物品種和林木品種審定委員會。第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應

主要農(nóng)作物指水稻、小麥、玉米、棉花、大豆以及國務院農(nóng)業(yè)行政主管部門和省、自治區(qū)、直轄市人民政府農(nóng)業(yè)行政主管部門各自分別確定的其他1～2種農(nóng)作物。

2005年03月安徽省主要農(nóng)作物品種審定辦法：主要農(nóng)作物，是指稻、小麥、玉米、棉花、大豆、油菜、馬鈴薯以及安徽省農(nóng)業(yè)委員會確定的其他農(nóng)作物。第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應國家級茶樹品種審定工作以往是由全國農(nóng)作物品種審定委員會茶樹專業(yè)委員會承擔的，我國新《種子法》實施后，茶樹沒有列入強制審定的作物范圍，2003年組織成立了第一屆全國茶樹品種鑒定委員會，今后的品種鑒定則是在育種者自愿的前提下進行。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應

第一批認定的30個國家級良種（1984年）：福鼎大白茶、黃山種、祁門種等。第二批認定的22個國家級良種（1987年）：龍井43、安徽1號、安徽3號等。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應

品種認定是品種審定的替代形式，具有與審定同等的效力。適用于因歷史原因缺少系統(tǒng)的試驗資料或選育程序不完整，但在實行品種審定制度之前已在生產(chǎn)上有較大面積的應用并繼續(xù)有推廣價值的品種。第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應

第三批審定的25個國家級良種（1994年）：楊樹林783、皖農(nóng)95等。第四批審定的18個國家級良種（2001年）：鳧早２號、舒茶早、皖農(nóng)111等。第五批鑒定的1個國家級良種（2003年）：桂綠1號。第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應三、報審條件和程序

（一）區(qū)試設置及參試條件參加全國區(qū)試品種必須是無性系，且親本清楚、農(nóng)藝性狀穩(wěn)定一致，并與現(xiàn)有國家推廣品種有明顯區(qū)別，參試單位或個人應提供所需材料。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應（二）參加區(qū)試和品種鑒定申請1．填報申請表。2．提供標準苗木和參試合同。3．提出品種鑒定申請。4．提交以下材料：（1）申請鑒定表；（2）區(qū)試總結(jié)；（3）品種選育報告；（4）品質(zhì)鑒定報告；（5）抗性鑒定報告；（6）品種標準圖片；（7）區(qū)試點負責人證明。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應（三）總結(jié)與鑒定評價品種鑒定的判定分為“通過”、“暫緩”和“不通過”?！巴ㄟ^”鑒定的品種必須符合下列條件之一：（1）品質(zhì)、產(chǎn)量均超過對照，且有一定抗性；（2）感官品質(zhì)明顯超過對照，且產(chǎn)量不低于對照的90%；（3）具有特異性狀，例如：氨基酸總量>6%，茶多酚>45%，咖啡堿<1%或>5%，或紅茶中茶黃素>1.3%；生育期特早，發(fā)芽期早于對照10天以上，產(chǎn)量或品質(zhì)與對照相當；抗旱、寒、病、蟲等抗逆性中某一項或多項抗性強等。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應福鼎大白茶的品種登記號為“GS13001—1985”，G為“國”的漢語拼音的第一個字母，表示屬國家級品種；S為“審”的漢語拼音的第一個字母，表示屬審（認）定通過的品種；“13”為全國農(nóng)作物品種審定委員會對作物的編號，代表茶樹；“001”是序號；“1985”表示公布年號。

第一節(jié)品種審（鑒）定鐘鳴谷應第二節(jié)新品種保護

鐘鳴谷應

一、新品種保護的意義

保護植物新品種所有人的合法權(quán)益，鼓勵人們培育和使用植物新品種，促進發(fā)展，提高生活水平。第二節(jié)新品種保護鐘鳴谷應二、中國植物新品種保護條例的主要內(nèi)容（一）植物新品種權(quán)的審批機構(gòu)國務院農(nóng)業(yè)、林業(yè)行政部門，按照職責分工共同負責植物新品種權(quán)申請的受理和審查，并對符合條例規(guī)定的