2023屆吉林省東北高考壓軸卷生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下圖為初級精母細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)的一對同源染色體示意圖，圖中1～8表示基因。不考慮突變的情況下，下列敘述正確的是A．1與2、3、4互為等位基因，與6、7、8互為非等位基因B．同一個(gè)體的精原細(xì)胞有絲分裂前期也應(yīng)含有基因1～8C．1與3都在減數(shù)第一次分裂分離，1與2都在減數(shù)第二次分裂分離D．1分別與6、7、8組合都能形成重組型的配子2．2020年初，荷蘭某研究所利用蛇干細(xì)胞培養(yǎng)出可分泌毒液的蛇毒腺微型組織，讓毒素的獲取途徑更加安全和簡單。下列敘述正確的是（）A．培養(yǎng)蛇干細(xì)胞時(shí)O2的作用是維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定B．蛇毒腺微型組織基因的表達(dá)與蛇干細(xì)胞不完全相同C．利用蛇干細(xì)胞的大量增殖即可獲得大量分泌毒液的細(xì)胞D．培養(yǎng)蛇毒腺微型組織與哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件完全相同3．關(guān)于植物的向光生長，Hasegawa等人重復(fù)了溫特的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)用物理化學(xué)法測定燕麥胚芽鞘兩側(cè)擴(kuò)散的生長素含量并沒有區(qū)別。經(jīng)過層析分析，發(fā)現(xiàn)瓊脂塊中至少有兩種抑制物。據(jù)他們的實(shí)驗(yàn)，下列結(jié)論最可能錯誤的是（）A．兩種抑制物之間存在相互作用B．向光一側(cè)的抑制物活性高于背光一側(cè)C．背光一側(cè)的生長素含量大于向光一側(cè)D．向光一側(cè)的生長抑制物比背光一側(cè)多4．PEP是某油料作物細(xì)胞中的一種中間代謝產(chǎn)物，在兩對獨(dú)立遺傳的基因（A和a、B和b）的控制下，可轉(zhuǎn)化為油脂或蛋白質(zhì)。某科研小組通過RNA干擾的方式獲得了產(chǎn)油率更高的品種，基本原理如下圖所示。下列說法錯誤的是（）A．產(chǎn)油率高植株和產(chǎn)蛋白高植株的基因型分別為AAbb、aaBBB．圖示中過程①與過程②所需要的嘧啶堿基數(shù)量不一定相同C．該研究通過抑制基因B表達(dá)過程中的翻譯階段來提高產(chǎn)油率D．圖示表明基因是通過控制酶的合成來控制代謝，進(jìn)而控制性狀5．下列有關(guān)物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的敘述，不正確的是（）A．細(xì)胞代謝產(chǎn)生的丙酮酸能為合成其他化合物提供原料B．一定量的無機(jī)鹽離子對維持血漿的酸堿平衡非常重要C．植物細(xì)胞之間的胞間連絲是運(yùn)輸各種植物激素的通道D．高爾基體通過“出芽”形成的囊泡有運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)的功能6．癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白可與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白結(jié)合，導(dǎo)致T細(xì)胞不能全面啟動對癌細(xì)胞的免疫攻擊，使用抗PD-1抗體可使癌癥患者的腫瘤快速萎縮。下列敘述錯誤的是（）A．癌細(xì)胞的清除體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除功能B．PD-L1蛋白和PD-1蛋白結(jié)合，這體現(xiàn)了細(xì)胞膜的信息交流功能C．抗PD-1抗體作用于T細(xì)胞而不是作用于癌細(xì)胞D．癌癥患者體內(nèi)的PD-1蛋白表達(dá)不足會降低機(jī)體細(xì)胞免疫的能力7．將基因型為Dd（品系甲）的玉米幼苗芽尖用秋水仙素處理，得到四倍體植株幼苗（品系乙）。將甲乙品系間行種植，自然狀態(tài)下生長、繁殖，得到子一代丙。相關(guān)敘述合理的是（）A．將甲、乙品系間行種植，自然狀態(tài)下獲得的丙全部為三倍體B．顯微鏡下觀察品系乙的根、葉細(xì)胞，在分裂中期時(shí)兩者染色體數(shù)目不相等C．品系乙植株自交后代中基因型有四種，全為顯性性狀D．秋水仙素處理的目的是促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂后期著絲點(diǎn)分裂，從而誘導(dǎo)染色體加倍8．（10分）下列有關(guān)生物體中元素和化合物的敘述，正確的是（）A．性激素在核糖體上合成，經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工再由高爾基體分泌B．血紅蛋白含有Fe3＋且參與O2運(yùn)輸，葉綠素含有Mg2＋且吸收可見光C．血漿滲透壓主要由蛋白質(zhì)維持，組織液滲透壓主要由無機(jī)鹽維持D．控制細(xì)菌性狀的基因位于擬核的DNA分子上和質(zhì)粒上二、非選擇題9．（10分）在自然鼠群中，已知毛色由一對等位基因控制，A控制黃色，a1控制灰色，a2控制黑色，顯隱性關(guān)系為A＞a1＞a2，且AA純合胚胎致死。請分析回答相關(guān)問題。（1）兩只鼠雜交，后代出現(xiàn)三種表現(xiàn)型。則該對親本的基因是______，它們再生一只灰色雄鼠的概率是______。（2）現(xiàn)進(jìn)行多對Aa1×a1a2的雜交，統(tǒng)計(jì)結(jié)果平均每窩出生8只小鼠。在同樣條件下進(jìn)行許多Aa2×Aa2的雜交，預(yù)期每窩平均生出的黑色小鼠占比為______。（3）現(xiàn)有一只黃色雄鼠和多只其他各色的雌鼠，如何利用雜交方法檢測出該雄鼠的基因型？實(shí)驗(yàn)思路及預(yù)測結(jié)果：實(shí)驗(yàn)思路：______。預(yù)測結(jié)果：若子代表現(xiàn)型及比例為_______，則該黃色雄鼠基因型為Aa1。若子代表現(xiàn)型及比例為_______，則該黃色雄鼠基因型為Aa2。10．（14分）轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這在基因治療、疫苗研發(fā)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景。回答下列問題。（l）腺病毒營____活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細(xì)胞中啟動表達(dá)的關(guān)鍵。（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可獲得相同的____，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的___。（3）通過腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞，利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為________。這時(shí)，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入___等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。11．（14分）地中海貧血癥是一種高發(fā)的基因遺傳病，患者除了需要輸血緩解癥狀之外，常見治療手段是進(jìn)行異體骨髓移植。日前科學(xué)家正在研究利用生物工程技術(shù)將患者的體細(xì)胞轉(zhuǎn)化為多能干細(xì)胞，以獲得用于自體移植的細(xì)胞，具體操作過程如下圖。（1）異體骨髓移植治療的局限性主要是發(fā)生________反應(yīng)。上圖所用生物工程技術(shù)沒有該局限性，其變異原理是________。（2）分析生物工程操作過程并回答：Ⅰ：基因表達(dá)載體含有目的基因、啟動子、終止子等。其中啟動子是________的部位。慢病毒表達(dá)載體所含的病毒經(jīng)________形成cDNA片段，該片段幫助外源基因整合到宿主細(xì)胞染色體DNA上，使外源基因穩(wěn)定表達(dá)。Ⅱ：由圖可知，將________導(dǎo)入包裝細(xì)胞，一段時(shí)間后可以獲得能夠轉(zhuǎn)化患者多能干細(xì)胞的慢病毒顆粒。Ⅲ：為了便于篩選出成功轉(zhuǎn)化的多能干細(xì)胞，其中的________載體含有易檢測的標(biāo)記基因。（3）理論上在獲得成功轉(zhuǎn)化的多能干細(xì)胞后，需要誘導(dǎo)其定向分化為________，然后植入患者骨髓。該方法雖然操作復(fù)雜，但效果較為可靠，稱為________治療。12．胡蘿卜是傘形科的兩年生草本植物，因其營養(yǎng)豐富且老少皆宜，成為了人們餐桌上一種重要的食材，回答下列有關(guān)問題：（1）胡蘿卜可生吃，可燉煮，還可以制作成泡菜，泡菜發(fā)酵過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽，因此食用前需要檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量而避免中毒，測定亞硝酸鹽含量的常用方法是___________。制作泡菜時(shí)，若泡菜壇未密封好，則會因雜菌污染而導(dǎo)致制作失敗，為探明導(dǎo)致泡菜制作失敗的微生物種類，實(shí)驗(yàn)小組將被污染的泡菜液接種到培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。常用于統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目的接種方法是_____________________，使用該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目偏低，原因是___________________________。統(tǒng)計(jì)微生物數(shù)目的方法除利用菌落進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)外，還有________________法。（2）胡蘿卜中含有大量的胡蘿卜素，天然胡蘿卜素具有使癌細(xì)胞恢復(fù)成正常細(xì)胞的功能，根據(jù)胡蘿卜素具有易溶于有機(jī)溶劑的特點(diǎn)，常采用____________法提取胡蘿卜素。（3）芫荽，又名香菜，也是傘形科的一種常見食材，香菜之所以具有香氣，是因?yàn)槠浜袚]發(fā)性精油，精油在日常生活中有著廣泛的應(yīng)用，不同精油的制備過程不同，這與其原料的性質(zhì)等有關(guān)，柚皮在水中蒸餾時(shí)容易焦糊，宜采用_____________法提取柚皮精油；玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，常選擇______________法進(jìn)行提取。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

由圖可知，圖中為一對同源染色體，1與2、5與6、3與4、7與8為相同基因，1（或2）與3或4可能是等位基因，5（或6）與7或8可能是等位基因。【詳解】1與2是相同基因，1與3、4可能互為等位基因，1與6、7、8互為非等位基因，A錯誤；精原細(xì)胞有絲分裂前期與其進(jìn)行減數(shù)分裂時(shí)形成的初級精母細(xì)胞含有的染色體的數(shù)目和基因種類、數(shù)目均相同，故均含有基因1~8，B正確；若不考慮交叉互換，1與3會在減數(shù)第一次分裂的后期隨同源染色體的分開而分離，1與2會在減數(shù)第二次分裂的后期隨姐妹染色單體的分開而分離，若考慮交叉互換，則1與2可能會在減數(shù)第一次分裂的后期隨同源染色體分開而分離，1與3可能在減數(shù)第二次分裂的后期隨姐妹染色單體的分開而分離，C錯誤；1與5在同一條姐妹染色單體上，5與6是相同的基因，因此1與6的組合不能形成重組配子，D錯誤。故選B。2、B【解析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)；細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)?！驹斀狻緼、培養(yǎng)蛇干細(xì)胞時(shí)，二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液pH穩(wěn)定，A錯誤；B、蛇毒腺微型組織已經(jīng)分化，具有特定的形態(tài)，與蛇干細(xì)胞的一些基因的表達(dá)相同，如呼吸酶基因，與一些特定基因的表達(dá)不同，如與毒素合成有關(guān)的基因的表達(dá)，B正確；C、蛇干細(xì)胞沒有分化成腺細(xì)胞，不能合成大量毒素，不能增殖得到大量分泌毒液的細(xì)胞，C錯誤；D、蛇屬于變溫動物，培養(yǎng)時(shí)需要的溫度低于哺乳動物，D錯誤。故選B。3、C【解析】

植物向光彎曲生長的原理：（1）均勻光照或無光：尖端產(chǎn)生生長素→尖端以下部位生長素分布均勻→生長均勻→直立生長。（2）單側(cè)光→尖端→影響生長素運(yùn)輸→尖端以下部位生長素分布不均勻→生長不均勻（背光側(cè)快）→向光彎曲?！驹斀狻緼、由于在瓊脂塊中至少有兩種抑制物，所以這兩種抑制物之間存在相互作用，A正確；B、向光一側(cè)的抑制物活性高于背光一側(cè)，則向光側(cè)生長速度比背光側(cè)慢，所以會出現(xiàn)向光彎曲生長，B正確；C、根據(jù)題干信息，植物向光性不是生長素分布不均勻?qū)е?，可能與生長抑制物的分布和含量有關(guān)，且向光側(cè)抑制物多于背光側(cè)，C錯誤；D、向光一側(cè)的生長抑制物比背光一側(cè)多，則向光側(cè)生長速度比背光側(cè)慢，植物會向光彎曲生長，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題需要考生抓住題干信息“側(cè)擴(kuò)散的生長素含量并沒有區(qū)別，發(fā)現(xiàn)瓊脂塊中至少有兩種抑制物”，結(jié)合教材中分析植物向光彎曲生長的原理進(jìn)行解釋即可。4、A【解析】

分析題意和題圖：基因A控制合成酶a，使PEP轉(zhuǎn)化為油脂。基因B的鏈2正常表達(dá)出酶b，可使PEP轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)。以基因B的鏈1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄出的RNA可與鏈2正常轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成雙鏈RNA，干擾酶b的合成，抑制PEP轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)，從而提高油脂產(chǎn)量?！驹斀狻緼、根據(jù)題圖可知，產(chǎn)油高植株的基因型為Abb，產(chǎn)蛋白高植株的基因型為aaB，A錯誤；B、由于過程①和過程②的模板鏈不同，所需的嘧啶堿基數(shù)量不一定相同，B正確；C、根據(jù)分析題圖可知，通過抑制基因B表達(dá)過程中的翻譯階段可提高產(chǎn)油率，C正確；D、圖示表明基因是通過控制酶的合成來控制代謝，進(jìn)而控制性狀，D正確。故選A?！军c(diǎn)睛】解答本題需明確幾點(diǎn)：1.基因與性狀的關(guān)系：基因通過控制蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)來控制性狀；通過控制酶的合成控制代謝過程，從而影響生物性狀。2.分析題圖：油菜產(chǎn)油率高的原因是因?yàn)榛駼中1鏈轉(zhuǎn)錄形成的RNA能與2鏈轉(zhuǎn)錄形成的mRNA結(jié)合形成雙鏈RNA，從而抑制了合成酶b的翻譯過程。5、C【解析】

分泌蛋白合成與分泌過程:核糖體合成蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行粗加工內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡高爾基體進(jìn)行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)高爾基體“出芽”形成囊泡細(xì)胞膜?！驹斀狻緼、細(xì)胞代謝產(chǎn)生的丙酮酸是合成其他化合物的原料，如丙酮酸可以轉(zhuǎn)變?yōu)楸彼?，A正確；B、有的無機(jī)鹽離子具有維持血漿的酸堿平衡的功能，B正確；C、在植物體內(nèi)，生長素在細(xì)胞間的運(yùn)輸為主動運(yùn)輸，需要膜蛋白的協(xié)助，胞間連絲具有運(yùn)輸信息分子的作用，但不是運(yùn)輸各種植物激素的通道，C錯誤；D、高爾基體在動物細(xì)胞內(nèi)與分泌物的形成有關(guān)，高爾基體發(fā)揮分泌功能是通過“出芽”形成的囊泡來完成的，從而完成了分泌蛋白的分泌過程，D正確。故選C。6、D【解析】

體液免疫和細(xì)胞免疫過程：【詳解】A、癌變細(xì)胞的清除體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的監(jiān)控和清除功能，A正確；B、癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白可與T細(xì)胞表面的PD-1分子結(jié)合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的信息交流作用，B正確；C、抗PD-1抗體與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白結(jié)合，C正確；D、癌癥患者體內(nèi)的PD-1蛋白表達(dá)不足，使癌細(xì)胞表面的PD-L1蛋白與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白結(jié)合減少，減緩對T細(xì)胞功能的抑制，會提高機(jī)體細(xì)胞免疫能力，D錯誤。故選D。7、B【解析】

用秋水仙素處理Dd的玉米幼苗（品系甲），可抑制細(xì)胞有絲分裂過程中紡錘體的形成，導(dǎo)致染色體數(shù)目加倍，形成四倍體（DDdd）（品系乙）?！驹斀狻緼、用秋水仙素處理品系甲植株（Dd）后，得到的四倍體品系乙植株（DDdd），將甲、乙品系間行種植，自然狀態(tài)下有自交也有雜交，故獲得的丙有二倍體、三倍體和四倍體，A錯誤；B、秋水仙素處理的是幼苗的芽尖，故葉細(xì)胞中染色體數(shù)目加倍，而根細(xì)胞沒有加倍，在分裂中期時(shí)兩者染色體數(shù)目不相等，B正確；C、品系乙植株（DDdd）可以產(chǎn)生DD、Dd、dd三種配子，故自交后代中基因型有五種，有顯性性狀也有隱性性狀，C錯誤；D、秋水仙素處理的目的是抑制紡錘體的形成而誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，而紡錘體形成于有絲分裂的前期，D錯誤。故選B。8、D【解析】

1、血紅蛋白具有運(yùn)輸血液中氧氣的功能，F(xiàn)e是血紅蛋白的組成成分之一，人體缺Fe會使血紅蛋白的合成受阻，血紅蛋白含量降低，血液運(yùn)輸氧氣的功能下降，導(dǎo)致組織細(xì)胞缺氧，組織細(xì)胞無氧呼吸增強(qiáng)，無氧呼吸產(chǎn)生乳酸增多，也可能導(dǎo)致乳酸中毒。2、原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的根本區(qū)別在于原核細(xì)胞無以核膜為界限的細(xì)胞核，真核細(xì)胞有以核膜為界限的細(xì)胞核。【詳解】A、性激素的化學(xué)本質(zhì)為脂質(zhì)，其合成場所為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，A錯誤；

B、血紅蛋白含有Fe2+且參與O2運(yùn)輸，葉綠素含有Mg2+且吸收可見光，B錯誤；

C、血漿滲透壓的大小主要與無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)的含量有關(guān)，組織液滲透壓主要無機(jī)鹽維持，C錯誤；

D、細(xì)菌屬于原核生物，沒有成形的細(xì)胞核，控制細(xì)菌性狀的基因位于擬核的DNA分子上和質(zhì)粒上，D正確。

故選D。【點(diǎn)睛】此題主要考查的是無機(jī)鹽的主要存在形式和作用以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生對基礎(chǔ)知識的理解掌握，難度適中。二、非選擇題9、Aa2×a1a21/41/3選用該黃色雄鼠與多只黑色雌鼠雜交，統(tǒng)計(jì)后代毛色及比例黃色：灰色=1：1黃色：黑色=1：1【解析】

根據(jù)題意分析可知：三種表現(xiàn)型對應(yīng)的基因型如下表現(xiàn)型黃色灰色黑色基因型Aa1Aa2a1a1a1a2a2a2【詳解】（1）由后代有黑色a2a2可推知親代均有a2，又因后代有3種表現(xiàn)型，故親本的基因型為Aa2和a1a2；它們再生一只灰色（a1a1、a1a2）雄鼠的概率為1/2×1/2=1/4；（2）Aa2和a1a2所生的后代全部存活，而Aa2和Aa2的后代有1/4AA胚胎致死，即2只死亡，則每窩生出的黑色小鼠為1/3；；（3）要通過雜交方法檢測出黃色雄鼠的基因型（Aa1或Aa2），可用測交的方法，即將該黃色雄鼠與多只黑色（a2a2）雌鼠雜交并觀察后代毛色；如果后代出現(xiàn)黃色：灰色=1:1，則該黃色雄鼠的基因型為Aa1；如果后代出現(xiàn)黃色：黑色=1:1，則該黃色雄鼠的基因型為Aa2。【點(diǎn)睛】本題考查基因分離規(guī)律的相關(guān)知識，解題關(guān)鍵是根據(jù)題干信息判斷各表現(xiàn)型對應(yīng)的基因型，據(jù)此分析作答。10、寄生RNA聚合酶黏性末端或平末端磷酸二酯鍵膠原蛋白酶細(xì)胞的接觸抑制傳代血清、血漿【解析】

1、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要用同種限制酶切割目的基因和載體，以產(chǎn)生相同的末端，然后用DNA連接酶連接，恢復(fù)被切開的核苷酸之間的磷酸二酯鍵，RNA聚合酶能夠與啟動子識別并結(jié)合催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行，這是是外源基因在受體細(xì)胞中啟動表達(dá)的關(guān)鍵。2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?！驹斀狻浚?）腺病毒屬于動物病毒，其無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，營寄生生活，必須寄生于宿主的活細(xì)胞中才能繁殖；用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上應(yīng)具有RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位啟動子，這樣才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄形成mRNA，最終合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可以獲得相同的黏性末端或平末端，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）對山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，便于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸；培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制；這時(shí)重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于人們對動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入血漿、血清等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面要求。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程的知識點(diǎn)，要求學(xué)生掌握基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程以及啟動子的作用，把握操作工具限制酶和DNA連接酶的應(yīng)用及其作用結(jié)果，理解動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和特點(diǎn)，把握動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的概念，識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，這是解決問題的關(guān)鍵。11、免疫排斥基因重組RNA聚合酶識別和結(jié)合逆轉(zhuǎn)錄表達(dá)載體和包裝載體表達(dá)造血干細(xì)胞體外基因【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）地中海貧血癥患者常見的治療手段是進(jìn)行異體骨髓移植，它的局限性主要是移入的骨髓易被機(jī)體識別為抗原而發(fā)生發(fā)生免疫排斥。上圖所用生物工程技術(shù)主要為基因工程，其變異原理是基因重組。（2