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文檔簡介
實驗診斷學(xué)
LaboratoryDiagnosis11級臨床、精神、中西醫(yī)、法醫(yī)、影像本科實驗診斷學(xué)
LaboratoryDiagnosis11級2【病例分析】
某患者,男性,15歲,學(xué)生。雙膝關(guān)節(jié)腫脹、疼痛2天入院。入院前做雙杠運(yùn)動后即覺雙膝關(guān)節(jié)疼痛,繼而腫脹,當(dāng)?shù)匕赐鈧o予止痛,消炎及外貼傷濕藥膏無效。自幼年起經(jīng)常出現(xiàn)活動時或輕微損傷后皮膚血腫,有時伴關(guān)節(jié)輕微腫脹,經(jīng)輸血、止血后可緩解?;颊吣赣H家族中有類似患者。2【病例分析】某患者,男性,15歲,學(xué)生。雙3【病例分析】體檢:T:36.6℃,P:98次/分,R:20次/分,BP:102/68mmHg。一般情況良好,輕度貧血貌,皮膚無出血點。心肺無異常。腹軟,肝脾肋下未觸及。雙膝關(guān)節(jié)腫脹,活動受限,但無紅、熱現(xiàn)象,余無異常發(fā)現(xiàn)。3【病例分析】體檢:T:36.6℃,P:98次/分,R:204【病例分析】實驗室檢查:血液一般檢查:RBC2.9×1012/L,Hb88g/L,WBC10×l09/L,PLT220×109/L。止血與凝血檢查:BT6min,CT15min,APTT84s,PTl2s,TT16s。4【病例分析】實驗室檢查:5【病例分析】思考題
1.提出初步診斷。
2.診斷依據(jù)是什么?5【病例分析】思考題第三章血栓與止血檢測第三章血栓與止血檢測7第一節(jié)血管壁檢測第二節(jié)血小板檢測第三節(jié)凝血因子檢測第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測第五節(jié)纖溶活性檢測第八節(jié)檢測項目的選擇和應(yīng)用本章內(nèi)容7本章內(nèi)容8血管中流動的血液為什么不凝固破損的血管為什么能止血生理狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)存在著復(fù)雜的凝血系統(tǒng)和抗凝系統(tǒng)復(fù)習(xí):止血、凝血和纖溶機(jī)制8血管中流動的血液為什么不凝固生理狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)存在著復(fù)雜的凝9正常止血機(jī)制兩個方面五個因素凝血機(jī)制抗凝機(jī)制血管壁(vesselwall)血小板(platelet)凝血系統(tǒng)(coagulationsystem)抗凝系統(tǒng)(anticoagulationsystem)纖溶系統(tǒng)(fibrinolyticsystem)9正常止血機(jī)制兩個方面五個因素凝血機(jī)制抗凝機(jī)制血管壁(ves10一、血管壁的止血作用
當(dāng)血管壁受損后的一系列變化:Ⅰ.神經(jīng)反射血管收縮血流變慢出血/停止Ⅱ.內(nèi)皮細(xì)胞分泌vWF促進(jìn)plt粘附Ⅲ.釋放組織因子FIII啟動外源性凝血途徑Ⅳ.暴露內(nèi)皮下膠原促進(jìn)血小板粘附啟動內(nèi)源性凝血途徑傷口縮小10一、血管壁的止血作用
當(dāng)血管壁受損后的一系列變化:Ⅰ.神11二、血小板的止血作用①維持血管壁的完整性,毛細(xì)血管的通透性②粘附(vWF)、聚集(Fg)在血管破損處,形成白色血栓,構(gòu)成初期止血屏障③釋放活性物質(zhì)(ADP5-HTTXA2),促進(jìn)血小板聚集,或增強(qiáng)血管收縮④血小板提供磷脂表面、PF3,參與或促進(jìn)凝血過程,⑤血塊收縮,形成穩(wěn)固血栓,達(dá)到永久止血的目的11二、血小板的止血作用①維持血管壁的完整性,毛細(xì)血管的通12目前公認(rèn)的凝血因子共14個,按羅馬數(shù)字命名的有12個,尚有高分子量激肽原(HMWK),前激肽釋放酶(PK)大多數(shù)由肝臟產(chǎn)生,其中II、VII、IX、X合成依賴于Vitk,稱Vitk依賴因子正常情況下,所有因子都處于無活性狀態(tài)三、凝血因子在凝血過程中的作用12目前公認(rèn)的凝血因子共14個,按羅馬數(shù)字命名的有12個,尚13
凝血過程分為三個階段,兩個途徑
(內(nèi)源性、外源性)
第一階段:凝血酶原激活物形成第二階段:凝血酶形成第三階段:纖維蛋白形成13凝血過程分為三個階段,兩個途徑
(內(nèi)源性、外源性)14
IIaCa2+
VIII---------------VIIIaIIIPlt------------------PF3Ca2+
IIaXaV——————————————VaCa2+正常凝血過程(瀑布學(xué)說)PF3
磷脂
凝血酶原(II)凝血酶(IIa)
纖維蛋白原(I)可溶性纖維蛋白穩(wěn)固性纖維蛋白
[內(nèi)源性途徑]膠原等帶負(fù)電荷表面PKaPKXII——————XIIaHMWK[外源性途徑]組織損傷釋放組織因子(III)XIXIa
ⅢaIXIXaVIIaVIIXIIIXIIIa參加因子:所需時間:X
Xa(凝血旁路)VIII、IX、XI、XIIV、X、II、IIII、VIICa2+、PF3、磷脂3~8min14正常凝血過程(瀑布學(xué)說)15四、抗凝系統(tǒng)的作用(一)細(xì)胞抗凝機(jī)制單核-吞噬細(xì)胞吞噬清除凝血過程有關(guān)物質(zhì)和產(chǎn)物15四、抗凝系統(tǒng)的作用(一)細(xì)胞抗凝機(jī)制單核-吞噬細(xì)胞吞16(二)體液抗凝機(jī)制
血液中存在多種抗凝物質(zhì)及抗凝系統(tǒng)
抗凝血酶III(antithrombinIII,AT-III)
AT-III
滅活I(lǐng)Ia、IXa、Xa、Ⅺa、
XIIa、激肽釋放酶肝素16(二)體液抗凝機(jī)制血液中存在多種抗凝17組織型纖溶酶原激活物(t-PA)尿激酶型纖溶酶原激活物(u-PA)凝血因子:XIIa、IIa、激肽釋放酶(K)纖溶酶原(PLG)、纖溶酶(PL)纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)五、纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用最重要的生理性抗凝系統(tǒng)XIIa、IIa、K纖溶酶原纖溶酶u-PAt-PA++17組織型纖溶酶原激活物(t-PA)五、纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作18止凝血障礙性疾病的發(fā)病機(jī)制血管壁結(jié)構(gòu)與功能異常血小板質(zhì)與量異常凝血因子質(zhì)與量異??鼓到y(tǒng)異常纖溶系統(tǒng)異常綜合因素一期止血缺陷二期止血缺陷纖溶系統(tǒng)缺陷18止凝血障礙性疾病的發(fā)病機(jī)制血管壁結(jié)構(gòu)與功能異常一期止血19第一節(jié)血管壁檢測一、篩檢試驗
出血時間(BT)二、診斷試驗血管性血友病因子抗原測定19第一節(jié)血管壁檢測一、篩檢試驗二、診斷試驗20
出血時間(bleedingtime,BT)[定義]
★將皮膚毛細(xì)血管刺破,讓血液自然流出到自然停止所需要的時間。
BT長短主要受血小板因素和血管壁因素的影響。
一、篩檢試驗20出血時間(bleedingtime,BT)[21[臨床意義]BT延長
血小板數(shù)量明顯<50109/L
血小板功能異常:血小板無力癥嚴(yán)重缺乏某些血漿凝血因子:如血管性血友?。╒WD)、DIC血管異常:遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥
⑤
藥物影響:如抗血小板藥(阿司匹林)等
BT縮短臨床意義不大,血液高凝狀態(tài)21[臨床意義]BT延長血小板數(shù)量22二、診斷試驗[臨床意義]vWF:Ag是血管內(nèi)皮細(xì)胞的促凝指標(biāo)之一1.減低:vWD,是診斷vWD及其分型的指標(biāo)之一2.增高:血栓性疾病,如心梗、腦血管病變、糖尿病、妊高征、大手術(shù)后等血管性血友病因子抗原測定(vonWillebrandfactorantigen,vWF:Ag)22二、診斷試驗[臨床意義]血管性血友病因子抗原測定23第二節(jié)血小板檢測一、篩檢試驗血小板計數(shù)(PC)血塊收縮試驗(CRT)二、診斷試驗單克隆抗體血小板抗原固定試驗23第二節(jié)血小板檢測一、篩檢試驗二、診斷試驗24(一)血小板計數(shù)(plateletcount,PC)[參考值](100-300)×109/L
一、篩檢試驗24(一)血小板計數(shù)(plateletcount,PC)25[臨床意義]1.PLT減少:<100×109/L⑴生成障礙:再障、急性白血?、破茐幕蛳脑龆啵篒TP、TTP、DIC⑶分布異常:脾大2.PLT增多:>400×109/L⑴原發(fā)性增多:原發(fā)性血小板增多癥⑵反應(yīng)性增多:急性感染,急性溶血25[臨床意義]26血小板增多癥ITP26血小板增多癥ITP27血凝塊血小板收縮蛋白纖維蛋白網(wǎng)收縮血清被擠出血凝塊縮小加固[原理]
(二)血塊收縮試驗(clotretractiontest,CRT)27血凝塊血小板纖維蛋白網(wǎng)收縮血清被擠出[原理]
(二)血28血清析出血小板功能纖維蛋白原數(shù)量血漿異常蛋白影響因素CRT(clotretractiontest)28血清析出血小板功能影響因素CRT(clotretra29[參考值]
血塊收縮時間:
2h
開始收縮
18h-24h
完全收縮
血塊收縮率:65.8%±11.0%
析出的血清(ml)
全血量(ml)×(100%-Hct%)×100%29[參考值]血塊收縮時間:×100%30
主要用于血小板功能測定的初篩試驗
收縮不良(<40%)見于:
a)血小板功能異?;蛄浚ㄓ绕?lt;50109/L)
b)低(無)纖維蛋白原血癥
c)多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥[臨床意義]30主要用于血小板功能測定的初篩試驗[臨床意義]31單克隆抗體血小板抗原固定試驗[臨床意義]二、診斷試驗
自身免疫性疾病,如ITP。[參考值]陰性31單克隆抗體血小板抗原固定試驗[臨床意義]二、診斷試驗自32一、篩檢試驗*
活化的部分凝血活酶時間(APTT)*
凝血時間(CT)*
血漿凝血酶原時間(PT)二、診斷試驗*
血漿凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定*
血漿凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、X促凝活性測定*
血漿纖維蛋白原(Fg)測定第三節(jié)凝血因子檢測32一、篩檢試驗二、診斷試驗第三節(jié)凝血因子檢測33血凝儀33血凝儀34凝血常規(guī)報告單34凝血常規(guī)報告單35[原理]
接觸因子激活劑磷脂、
Ca2+
血漿凝固所需要的時間
[參考值]不同方法,不同試劑檢測結(jié)果差異較大>正常對照10s以上為延長(一)活化的部分凝血活酶時間(activatedpartialthromboplastintime,APTT)一、篩檢試驗35[原理](一)活化的部分凝血活酶時間(act36[臨床意義]
主要檢測內(nèi)源性凝血系統(tǒng)
APTT延長:
1.因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ↓:如血友病A、B、C2.凝血酶原、纖維蛋白原↓:如DIC、嚴(yán)重肝病
3.循環(huán)中抗凝物質(zhì)↑:如SLE4.普通肝素抗凝治療的首選監(jiān)測指標(biāo):
APTT維持在正常對照的1.5-2.0倍為宜
APTT縮短:血栓性疾病、血栓前狀態(tài)36[臨床意義]主要檢測內(nèi)源性凝血系統(tǒng)37
血友病患者,膝關(guān)節(jié)腫脹變形
37
38(二)凝血時間(clottingtime,CT)[定義]
★靜脈采血放入試管中,觀察自采血開始至試管中血液凝固所需的時間。38(二)凝血時間(clottingtime,CT)[39
[參考值]
4-12min(試管法)
15-32min(硅管法)
10-19min(塑料管法)[臨床意義]
內(nèi)源性凝血系統(tǒng)測定的初篩試驗,意義同APTT,但不如APTT敏感。39
[參考值]40[原理]
組織因子(兔腦、胎盤、肺組織浸液)Ca2+
血漿凝固時間[參考值]不同方法,不同試劑檢測結(jié)果差異較大>正常對照3s以上為延長(三)血漿凝血酶原時間(Prothrombintime,PT)40[原理](三)血漿凝血酶原時間(Prothromb41[參考值]PTR(凝血酶原時間比值)1.0±0.05PTR=受檢者PT值/正常對照PT值INR(國際正?;戎?INR=PTRISI
參考值依ISI不同而異ISI為國際靈敏度指數(shù),ISI越小,組織凝血活酶的靈敏度越高。41[參考值]PTR(凝血酶原時間比值)1.0±0.0542[臨床意義]
為外源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗PT延長:
1.先天性凝血因子I、Ⅱ、V、Ⅶ、X缺乏
2.獲得性凝血因子缺乏:嚴(yán)重肝病、VitK缺乏癥、纖溶亢進(jìn)、DIC3.循環(huán)中抗凝物質(zhì)增加,如SLE4.口服抗凝劑的首選監(jiān)測指標(biāo):
INR以2.0-2.5為宜PT縮短:血液高凝狀態(tài)42[臨床意義]為外源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗PT延長:43二、診斷試驗(一)血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定(二)血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定43二、診斷試驗(一)血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定44(三)血漿纖維蛋白原(Fg)測定[參考值]
比濁法:2-4g/L[臨床意義]增高:血栓性疾病及血栓前狀態(tài),急性感染、糖尿病、妊高征、手術(shù)創(chuàng)傷、惡性腫瘤、口服避孕藥減少:
1.低(無)纖維蛋白原血癥
2.嚴(yán)重肝病
3.纖溶亢進(jìn),DIC4.溶栓治療44(三)血漿纖維蛋白原(Fg)測定[參考值]比濁法:245
第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測一、病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗
☉血漿凝血酶時間(TT)二、病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗
☉狼瘡抗凝物質(zhì)測定三、生理性抗凝因子檢測
☉血漿抗凝血酶(AT)活性測定45第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測一、病理性抗凝物質(zhì)的篩檢46[原理]
標(biāo)準(zhǔn)化凝血酶
受檢血漿出現(xiàn)纖維蛋白絲的時間
[參考值]
手工法:16-18s>正常對照3s以上為延長血漿凝血酶時間(thrombintime,TT)一、病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗46[原理]血漿凝血酶時間(thrombintim47[臨床意義]TT延長:
1.低(無)和異常纖維蛋白原血癥
2.FDPs增多:如纖溶亢進(jìn)、DIC3.循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多:如肝素或類肝素樣物質(zhì)(SLE、肝病、應(yīng)用肝素治療)
TT縮短:無臨床意義47[臨床意義]TT延長:48[臨床意義]
陽性:見于血液中有狼瘡抗凝物質(zhì),如SLE、自發(fā)性流產(chǎn)、抗磷脂抗體綜合征等。
狼瘡抗凝物質(zhì)測定二、病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗48[臨床意義]狼瘡抗凝物質(zhì)測定二、病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗49血漿抗凝血酶(AT)活性測定[臨床意義]1.活性增高
血友病、白血病、再障、口服抗凝藥
2.活性降低先天性AT缺乏;獲得性AT缺乏(血栓前狀態(tài)、血栓性疾病、DIC、肝臟疾病等)三、生理性抗凝因子檢測49血漿抗凝血酶(AT)活性測定[臨床意義]三、生理性抗凝因50第五節(jié)纖溶活性檢測一、篩檢試驗?血漿D-二聚體(D-D)測定?血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPs)測定二、診斷試驗
*
血漿魚精蛋白副凝固試驗(3P試驗)50第五節(jié)纖溶活性檢測一、篩檢試驗二、診斷試驗51(一)血漿D-二聚體測定(D-dimer,D-D)
膠乳凝集法
陰性ELISA法0~0.256mg/L
血漿D-D是交聯(lián)纖維蛋白水解的一種特異性降解產(chǎn)物,為繼發(fā)性纖溶特有的降解產(chǎn)物。[原理]定性:D-D+D-D抗體-乳膠顆粒→凝集反應(yīng)
定量:D-D+D-D抗體-酶+底物→顯色反應(yīng)[參考值]一、篩檢試驗
51(一)血漿D-二聚體測定(D-dimer,D-D)膠521.
陽性:見于繼發(fā)性纖溶癥(如DIC)和觀察溶栓治療;2.陰性:見于原發(fā)性纖溶癥和正常人。本試驗敏感性高、特異性低,在深靜脈血栓、肺血栓栓塞、血栓形成時均可陽性;但在陳舊性血塊呈陰性。臨床應(yīng)用:診斷DIC、血栓形成;觀察溶栓療效。[臨床意義]521.陽性:見于繼發(fā)性纖溶癥(如DIC)和觀察溶栓治療53(二)血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測定(fibrin(ogen)degradationproducts,FDPs)
纖溶酶原在各種活化素(如尿激酶、鏈激酶等)的作用下轉(zhuǎn)變成纖溶酶,纖溶酶使纖維蛋白(原)降解,產(chǎn)生FDPs,使凝膠狀態(tài)的纖維蛋白溶解。[原理]
定性:FDPs+FDPs抗體-乳膠顆?!磻?yīng)
定量:FDPs+FDPs抗體-酶+底物→顯色反應(yīng)
[參考值]
膠乳凝集法陰性
ELISA法<5mg/L
?什麼是FDPs53(二)血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測定纖溶酶54陽性或增高見于:*
原發(fā)性纖溶癥*
繼發(fā)性纖溶癥(如DIC、惡性腫瘤、肺血栓栓塞、深靜脈血栓形成、肝臟疾病、腎臟疾病、移植排斥反應(yīng)、溶栓治療等)FDPs測定是診斷DIC較敏感的指標(biāo)之一,快速、簡單[臨床意義]54陽性或增高見于:[臨床意義]55血漿魚精蛋白副凝固試驗
(plasmaprotamineparacoagulationtest,3P試驗)[原理]受檢血漿+硫酸魚精蛋白溶液,若血漿中存在可溶性纖維蛋白單體-FDPs復(fù)合物時,則魚精蛋白使其解離釋出纖維蛋白單體,后者自行聚合成肉眼可見的纖維蛋白絲,為陽性。[參考值]
正常人陰性二、診斷試驗55血漿魚精蛋白副凝固試驗
(plasmaprotamin56[臨床意義]
陽性:DIC早、中期(注意假陽性)
陰性:正常人、DIC晚期和原發(fā)性纖溶癥本試驗特異性高、敏感性低,是鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶癥(DIC)的試驗之一。3P試驗是診斷DIC特異性較高指標(biāo)之一,快速、簡單56[臨床意義]57原發(fā)性纖溶癥(primaryfibrinolysis)
原發(fā)性纖溶亢進(jìn)癥,簡稱原發(fā)性纖溶癥,是由于纖溶酶原激活物(t-PA,u-PA)增多導(dǎo)致纖溶酶活性增強(qiáng),后者降解血漿纖維蛋白原和多種凝血因子。57原發(fā)性纖溶癥(primaryfibrinolysis)58繼發(fā)性纖溶癥(secondfibrinolysis)
主要見于彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)。DIC時由于因子XIIa、激肽釋放酶(K)、凝血酶等增多導(dǎo)致纖溶酶活性增強(qiáng),后者降解血漿纖維蛋白(原)和多種凝血因子。58繼發(fā)性纖溶癥(secondfibrinolysis)59鑒別一、原發(fā)性纖溶亢進(jìn):沒有凝血過程,無Ⅱa生成,纖溶酶活性↑,導(dǎo)致纖溶亢進(jìn),纖維蛋白原被降解。FDPs↑二、繼發(fā)性纖溶亢進(jìn):繼發(fā)于Ⅱa生成后,有纖維蛋白單體生成及交聯(lián)纖維蛋白形成,而后發(fā)生的纖溶亢進(jìn)。FDPs↑,D-二聚體↑,3P試驗+59鑒別606061
篩檢試驗
診斷試驗第八節(jié)檢測項目的選擇和應(yīng)用61篩檢試驗診斷試驗第八節(jié)檢測項目的62一期止血缺陷篩檢試驗NN正常人、血管性紫癜延長↓血小板減少癥延長↑血小板增多癥延長N血小板功能異?;蚰蜃尤狈?vWF、Fg)
BTPLT結(jié)果判斷62一期止血缺陷篩檢試驗NN63過敏性紫癜63過敏性紫癜64APTT、PT、TT檢測進(jìn)一步做以下篩選試驗:二期止血缺陷篩檢試驗64APTT、PT、TT檢測進(jìn)一步做以下篩選試驗:二期止血缺65APTT、PT、TT測定2.僅有APTT延長提示內(nèi)源性凝血途徑缺陷:FⅧ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ缺乏延長不能用正常血漿糾正:循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多1.APTT、PT均正常正常人僅見于遺傳性或獲得性因子XIII缺陷癥3.僅有PT延長
提示外源性凝血途徑缺陷:FⅦ缺乏延長不能用正常血漿糾正:循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多65APTT、PT、TT測定2.僅有APTT延長1.APTT664.APTT、PT均延長
1)TT延長
纖維蛋白原(因子I)缺乏癥抗凝物質(zhì)增多,如肝素治療、SLE、嚴(yán)重肝病纖溶亢進(jìn)(FDPs增高),如DIC、溶栓治療
2)TT正常共同凝血途徑缺陷:因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ缺乏癥
進(jìn)一步做有關(guān)因子的測定(確診試驗)
APTT、PT、TT測定664.APTT、PT均延長APTT、PT、TT測定67定義:是由多種致病因素導(dǎo)致全身血管內(nèi)微血栓形成和多臟器功能衰竭,消耗了大量的血小板和凝血因子,并引起繼發(fā)性纖溶亢進(jìn),造成臨床血栓-出血綜合癥。彌散性血管內(nèi)凝血(DisseminatedIntravascularCoagulation,DIC)DIC分期:
高凝期
消耗性低凝期
繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)期67定義:是由多種致病因素導(dǎo)致全身血管內(nèi)微血栓形成和多臟器功68DIC出血68DIC出血69DIC診斷標(biāo)準(zhǔn):
PLT<100×109/L,或進(jìn)行性下降
Fg<1.0g/L,或進(jìn)行性降低
PT縮短或延長3秒以上
APTT縮短或延長10秒以上
血漿FDPs>20mg/L(肝?。?0mg/L)
D-二聚體>0.5mg/L
3P試驗陽性69DIC診斷標(biāo)準(zhǔn):70本次課的內(nèi)容:
第三章血栓與止血檢測重點內(nèi)容:活化部分凝血活酶時間、血漿凝血酶原時間、纖維蛋白原、凝血酶時間、D-二聚體檢測的參考值及臨床意義臨床常見出血性疾病檢測項目的選擇名詞解釋:出血時間、凝血時間、DIC小結(jié)70本次課的內(nèi)容:小結(jié)后面內(nèi)容直接刪除就行資料可以編輯修改使用資料可以編輯修改使用資料僅供參考,實際情況實際分析后面內(nèi)容直接刪除就行主要經(jīng)營:課件設(shè)計,文檔制作,網(wǎng)絡(luò)軟件設(shè)計、圖文設(shè)計制作、發(fā)布廣告等秉著以優(yōu)質(zhì)的服務(wù)對待每一位客戶,做到讓客戶滿意!致力于數(shù)據(jù)挖掘,合同簡歷、論文寫作、PPT設(shè)計、計劃書、策劃案、學(xué)習(xí)課件、各類模板等方方面面,打造全網(wǎng)一站式需求主要經(jīng)營:課件設(shè)計,文檔制作,網(wǎng)絡(luò)軟件設(shè)計、圖文設(shè)計制作、發(fā)感謝您的觀看和下載Theusercandemonstrateonaprojectororcomputer,orprintthepresentationandmakeitintoafilmtobeusedinawiderfield感謝您的觀看和下載Theusercandemonstr實驗診斷學(xué)
LaboratoryDiagnosis11級臨床、精神、中西醫(yī)、法醫(yī)、影像本科實驗診斷學(xué)
LaboratoryDiagnosis11級75【病例分析】
某患者,男性,15歲,學(xué)生。雙膝關(guān)節(jié)腫脹、疼痛2天入院。入院前做雙杠運(yùn)動后即覺雙膝關(guān)節(jié)疼痛,繼而腫脹,當(dāng)?shù)匕赐鈧o予止痛,消炎及外貼傷濕藥膏無效。自幼年起經(jīng)常出現(xiàn)活動時或輕微損傷后皮膚血腫,有時伴關(guān)節(jié)輕微腫脹,經(jīng)輸血、止血后可緩解?;颊吣赣H家族中有類似患者。2【病例分析】某患者,男性,15歲,學(xué)生。雙76【病例分析】體檢:T:36.6℃,P:98次/分,R:20次/分,BP:102/68mmHg。一般情況良好,輕度貧血貌,皮膚無出血點。心肺無異常。腹軟,肝脾肋下未觸及。雙膝關(guān)節(jié)腫脹,活動受限,但無紅、熱現(xiàn)象,余無異常發(fā)現(xiàn)。3【病例分析】體檢:T:36.6℃,P:98次/分,R:2077【病例分析】實驗室檢查:血液一般檢查:RBC2.9×1012/L,Hb88g/L,WBC10×l09/L,PLT220×109/L。止血與凝血檢查:BT6min,CT15min,APTT84s,PTl2s,TT16s。4【病例分析】實驗室檢查:78【病例分析】思考題
1.提出初步診斷。
2.診斷依據(jù)是什么?5【病例分析】思考題第三章血栓與止血檢測第三章血栓與止血檢測80第一節(jié)血管壁檢測第二節(jié)血小板檢測第三節(jié)凝血因子檢測第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測第五節(jié)纖溶活性檢測第八節(jié)檢測項目的選擇和應(yīng)用本章內(nèi)容7本章內(nèi)容81血管中流動的血液為什么不凝固破損的血管為什么能止血生理狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)存在著復(fù)雜的凝血系統(tǒng)和抗凝系統(tǒng)復(fù)習(xí):止血、凝血和纖溶機(jī)制8血管中流動的血液為什么不凝固生理狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)存在著復(fù)雜的凝82正常止血機(jī)制兩個方面五個因素凝血機(jī)制抗凝機(jī)制血管壁(vesselwall)血小板(platelet)凝血系統(tǒng)(coagulationsystem)抗凝系統(tǒng)(anticoagulationsystem)纖溶系統(tǒng)(fibrinolyticsystem)9正常止血機(jī)制兩個方面五個因素凝血機(jī)制抗凝機(jī)制血管壁(ves83一、血管壁的止血作用
當(dāng)血管壁受損后的一系列變化:Ⅰ.神經(jīng)反射血管收縮血流變慢出血/停止Ⅱ.內(nèi)皮細(xì)胞分泌vWF促進(jìn)plt粘附Ⅲ.釋放組織因子FIII啟動外源性凝血途徑Ⅳ.暴露內(nèi)皮下膠原促進(jìn)血小板粘附啟動內(nèi)源性凝血途徑傷口縮小10一、血管壁的止血作用
當(dāng)血管壁受損后的一系列變化:Ⅰ.神84二、血小板的止血作用①維持血管壁的完整性,毛細(xì)血管的通透性②粘附(vWF)、聚集(Fg)在血管破損處,形成白色血栓,構(gòu)成初期止血屏障③釋放活性物質(zhì)(ADP5-HTTXA2),促進(jìn)血小板聚集,或增強(qiáng)血管收縮④血小板提供磷脂表面、PF3,參與或促進(jìn)凝血過程,⑤血塊收縮,形成穩(wěn)固血栓,達(dá)到永久止血的目的11二、血小板的止血作用①維持血管壁的完整性,毛細(xì)血管的通85目前公認(rèn)的凝血因子共14個,按羅馬數(shù)字命名的有12個,尚有高分子量激肽原(HMWK),前激肽釋放酶(PK)大多數(shù)由肝臟產(chǎn)生,其中II、VII、IX、X合成依賴于Vitk,稱Vitk依賴因子正常情況下,所有因子都處于無活性狀態(tài)三、凝血因子在凝血過程中的作用12目前公認(rèn)的凝血因子共14個,按羅馬數(shù)字命名的有12個,尚86
凝血過程分為三個階段,兩個途徑
(內(nèi)源性、外源性)
第一階段:凝血酶原激活物形成第二階段:凝血酶形成第三階段:纖維蛋白形成13凝血過程分為三個階段,兩個途徑
(內(nèi)源性、外源性)87
IIaCa2+
VIII---------------VIIIaIIIPlt------------------PF3Ca2+
IIaXaV——————————————VaCa2+正常凝血過程(瀑布學(xué)說)PF3
磷脂
凝血酶原(II)凝血酶(IIa)
纖維蛋白原(I)可溶性纖維蛋白穩(wěn)固性纖維蛋白
[內(nèi)源性途徑]膠原等帶負(fù)電荷表面PKaPKXII——————XIIaHMWK[外源性途徑]組織損傷釋放組織因子(III)XIXIa
ⅢaIXIXaVIIaVIIXIIIXIIIa參加因子:所需時間:X
Xa(凝血旁路)VIII、IX、XI、XIIV、X、II、IIII、VIICa2+、PF3、磷脂3~8min14正常凝血過程(瀑布學(xué)說)88四、抗凝系統(tǒng)的作用(一)細(xì)胞抗凝機(jī)制單核-吞噬細(xì)胞吞噬清除凝血過程有關(guān)物質(zhì)和產(chǎn)物15四、抗凝系統(tǒng)的作用(一)細(xì)胞抗凝機(jī)制單核-吞噬細(xì)胞吞89(二)體液抗凝機(jī)制
血液中存在多種抗凝物質(zhì)及抗凝系統(tǒng)
抗凝血酶III(antithrombinIII,AT-III)
AT-III
滅活I(lǐng)Ia、IXa、Xa、Ⅺa、
XIIa、激肽釋放酶肝素16(二)體液抗凝機(jī)制血液中存在多種抗凝90組織型纖溶酶原激活物(t-PA)尿激酶型纖溶酶原激活物(u-PA)凝血因子:XIIa、IIa、激肽釋放酶(K)纖溶酶原(PLG)、纖溶酶(PL)纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)五、纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作用最重要的生理性抗凝系統(tǒng)XIIa、IIa、K纖溶酶原纖溶酶u-PAt-PA++17組織型纖溶酶原激活物(t-PA)五、纖維蛋白溶解系統(tǒng)的作91止凝血障礙性疾病的發(fā)病機(jī)制血管壁結(jié)構(gòu)與功能異常血小板質(zhì)與量異常凝血因子質(zhì)與量異??鼓到y(tǒng)異常纖溶系統(tǒng)異常綜合因素一期止血缺陷二期止血缺陷纖溶系統(tǒng)缺陷18止凝血障礙性疾病的發(fā)病機(jī)制血管壁結(jié)構(gòu)與功能異常一期止血92第一節(jié)血管壁檢測一、篩檢試驗
出血時間(BT)二、診斷試驗血管性血友病因子抗原測定19第一節(jié)血管壁檢測一、篩檢試驗二、診斷試驗93
出血時間(bleedingtime,BT)[定義]
★將皮膚毛細(xì)血管刺破,讓血液自然流出到自然停止所需要的時間。
BT長短主要受血小板因素和血管壁因素的影響。
一、篩檢試驗20出血時間(bleedingtime,BT)[94[臨床意義]BT延長
血小板數(shù)量明顯<50109/L
血小板功能異常:血小板無力癥嚴(yán)重缺乏某些血漿凝血因子:如血管性血友?。╒WD)、DIC血管異常:遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥
⑤
藥物影響:如抗血小板藥(阿司匹林)等
BT縮短臨床意義不大,血液高凝狀態(tài)21[臨床意義]BT延長血小板數(shù)量95二、診斷試驗[臨床意義]vWF:Ag是血管內(nèi)皮細(xì)胞的促凝指標(biāo)之一1.減低:vWD,是診斷vWD及其分型的指標(biāo)之一2.增高:血栓性疾病,如心梗、腦血管病變、糖尿病、妊高征、大手術(shù)后等血管性血友病因子抗原測定(vonWillebrandfactorantigen,vWF:Ag)22二、診斷試驗[臨床意義]血管性血友病因子抗原測定96第二節(jié)血小板檢測一、篩檢試驗血小板計數(shù)(PC)血塊收縮試驗(CRT)二、診斷試驗單克隆抗體血小板抗原固定試驗23第二節(jié)血小板檢測一、篩檢試驗二、診斷試驗97(一)血小板計數(shù)(plateletcount,PC)[參考值](100-300)×109/L
一、篩檢試驗24(一)血小板計數(shù)(plateletcount,PC)98[臨床意義]1.PLT減少:<100×109/L⑴生成障礙:再障、急性白血?、破茐幕蛳脑龆啵篒TP、TTP、DIC⑶分布異常:脾大2.PLT增多:>400×109/L⑴原發(fā)性增多:原發(fā)性血小板增多癥⑵反應(yīng)性增多:急性感染,急性溶血25[臨床意義]99血小板增多癥ITP26血小板增多癥ITP100血凝塊血小板收縮蛋白纖維蛋白網(wǎng)收縮血清被擠出血凝塊縮小加固[原理]
(二)血塊收縮試驗(clotretractiontest,CRT)27血凝塊血小板纖維蛋白網(wǎng)收縮血清被擠出[原理]
(二)血101血清析出血小板功能纖維蛋白原數(shù)量血漿異常蛋白影響因素CRT(clotretractiontest)28血清析出血小板功能影響因素CRT(clotretra102[參考值]
血塊收縮時間:
2h
開始收縮
18h-24h
完全收縮
血塊收縮率:65.8%±11.0%
析出的血清(ml)
全血量(ml)×(100%-Hct%)×100%29[參考值]血塊收縮時間:×100%103
主要用于血小板功能測定的初篩試驗
收縮不良(<40%)見于:
a)血小板功能異?;蛄浚ㄓ绕?lt;50109/L)
b)低(無)纖維蛋白原血癥
c)多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥[臨床意義]30主要用于血小板功能測定的初篩試驗[臨床意義]104單克隆抗體血小板抗原固定試驗[臨床意義]二、診斷試驗
自身免疫性疾病,如ITP。[參考值]陰性31單克隆抗體血小板抗原固定試驗[臨床意義]二、診斷試驗自105一、篩檢試驗*
活化的部分凝血活酶時間(APTT)*
凝血時間(CT)*
血漿凝血酶原時間(PT)二、診斷試驗*
血漿凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定*
血漿凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、X促凝活性測定*
血漿纖維蛋白原(Fg)測定第三節(jié)凝血因子檢測32一、篩檢試驗二、診斷試驗第三節(jié)凝血因子檢測106血凝儀33血凝儀107凝血常規(guī)報告單34凝血常規(guī)報告單108[原理]
接觸因子激活劑磷脂、
Ca2+
血漿凝固所需要的時間
[參考值]不同方法,不同試劑檢測結(jié)果差異較大>正常對照10s以上為延長(一)活化的部分凝血活酶時間(activatedpartialthromboplastintime,APTT)一、篩檢試驗35[原理](一)活化的部分凝血活酶時間(act109[臨床意義]
主要檢測內(nèi)源性凝血系統(tǒng)
APTT延長:
1.因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ↓:如血友病A、B、C2.凝血酶原、纖維蛋白原↓:如DIC、嚴(yán)重肝病
3.循環(huán)中抗凝物質(zhì)↑:如SLE4.普通肝素抗凝治療的首選監(jiān)測指標(biāo):
APTT維持在正常對照的1.5-2.0倍為宜
APTT縮短:血栓性疾病、血栓前狀態(tài)36[臨床意義]主要檢測內(nèi)源性凝血系統(tǒng)110
血友病患者,膝關(guān)節(jié)腫脹變形
37
111(二)凝血時間(clottingtime,CT)[定義]
★靜脈采血放入試管中,觀察自采血開始至試管中血液凝固所需的時間。38(二)凝血時間(clottingtime,CT)[112
[參考值]
4-12min(試管法)
15-32min(硅管法)
10-19min(塑料管法)[臨床意義]
內(nèi)源性凝血系統(tǒng)測定的初篩試驗,意義同APTT,但不如APTT敏感。39
[參考值]113[原理]
組織因子(兔腦、胎盤、肺組織浸液)Ca2+
血漿凝固時間[參考值]不同方法,不同試劑檢測結(jié)果差異較大>正常對照3s以上為延長(三)血漿凝血酶原時間(Prothrombintime,PT)40[原理](三)血漿凝血酶原時間(Prothromb114[參考值]PTR(凝血酶原時間比值)1.0±0.05PTR=受檢者PT值/正常對照PT值INR(國際正常化比值)INR=PTRISI
參考值依ISI不同而異ISI為國際靈敏度指數(shù),ISI越小,組織凝血活酶的靈敏度越高。41[參考值]PTR(凝血酶原時間比值)1.0±0.05115[臨床意義]
為外源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗PT延長:
1.先天性凝血因子I、Ⅱ、V、Ⅶ、X缺乏
2.獲得性凝血因子缺乏:嚴(yán)重肝病、VitK缺乏癥、纖溶亢進(jìn)、DIC3.循環(huán)中抗凝物質(zhì)增加,如SLE4.口服抗凝劑的首選監(jiān)測指標(biāo):
INR以2.0-2.5為宜PT縮短:血液高凝狀態(tài)42[臨床意義]為外源性凝血系統(tǒng)的篩選試驗PT延長:116二、診斷試驗(一)血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定(二)血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測定43二、診斷試驗(一)血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測定117(三)血漿纖維蛋白原(Fg)測定[參考值]
比濁法:2-4g/L[臨床意義]增高:血栓性疾病及血栓前狀態(tài),急性感染、糖尿病、妊高征、手術(shù)創(chuàng)傷、惡性腫瘤、口服避孕藥減少:
1.低(無)纖維蛋白原血癥
2.嚴(yán)重肝病
3.纖溶亢進(jìn),DIC4.溶栓治療44(三)血漿纖維蛋白原(Fg)測定[參考值]比濁法:2118
第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測一、病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗
☉血漿凝血酶時間(TT)二、病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗
☉狼瘡抗凝物質(zhì)測定三、生理性抗凝因子檢測
☉血漿抗凝血酶(AT)活性測定45第四節(jié)抗凝系統(tǒng)檢測一、病理性抗凝物質(zhì)的篩檢119[原理]
標(biāo)準(zhǔn)化凝血酶
受檢血漿出現(xiàn)纖維蛋白絲的時間
[參考值]
手工法:16-18s>正常對照3s以上為延長血漿凝血酶時間(thrombintime,TT)一、病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗46[原理]血漿凝血酶時間(thrombintim120[臨床意義]TT延長:
1.低(無)和異常纖維蛋白原血癥
2.FDPs增多:如纖溶亢進(jìn)、DIC3.循環(huán)中抗凝物質(zhì)增多:如肝素或類肝素樣物質(zhì)(SLE、肝病、應(yīng)用肝素治療)
TT縮短:無臨床意義47[臨床意義]TT延長:121[臨床意義]
陽性:見于血液中有狼瘡抗凝物質(zhì),如SLE、自發(fā)性流產(chǎn)、抗磷脂抗體綜合征等。
狼瘡抗凝物質(zhì)測定二、病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗48[臨床意義]狼瘡抗凝物質(zhì)測定二、病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗122血漿抗凝血酶(AT)活性測定[臨床意義]1.活性增高
血友病、白血病、再障、口服抗凝藥
2.活性降低先天性AT缺乏;獲得性AT缺乏(血栓前狀態(tài)、血栓性疾病、DIC、肝臟疾病等)三、生理性抗凝因子檢測49血漿抗凝血酶(AT)活性測定[臨床意義]三、生理性抗凝因123第五節(jié)纖溶活性檢測一、篩檢試驗?血漿D-二聚體(D-D)測定?血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPs)測定二、診斷試驗
*
血漿魚精蛋白副凝固試驗(3P試驗)50第五節(jié)纖溶活性檢測一、篩檢試驗二、診斷試驗124(一)血漿D-二聚體測定(D-dimer,D-D)
膠乳凝集法
陰性ELISA法0~0.256mg/L
血漿D-D是交聯(lián)纖維蛋白水解的一種特異性降解產(chǎn)物,為繼發(fā)性纖溶特有的降解產(chǎn)物。[原理]定性:D-D+D-D抗體-乳膠顆?!磻?yīng)
定量:D-D+D-D抗體-酶+底物→顯色反應(yīng)[參考值]一、篩檢試驗
51(一)血漿D-二聚體測定(D-dimer,D-D)膠1251.
陽性:見于繼發(fā)性纖溶癥(如DIC)和觀察溶栓治療;2.陰性:見于原發(fā)性纖溶癥和正常人。本試驗敏感性高、特異性低,在深靜脈血栓、肺血栓栓塞、血栓形成時均可陽性;但在陳舊性血塊呈陰性。臨床應(yīng)用:診斷DIC、血栓形成;觀察溶栓療效。[臨床意義]521.陽性:見于繼發(fā)性纖溶癥(如DIC)和觀察溶栓治療126(二)血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測定(fibrin(ogen)degradationproducts,FDPs)
纖溶酶原在各種活化素(如尿激酶、鏈激酶等)的作用下轉(zhuǎn)變成纖溶酶,纖溶酶使纖維蛋白(原)降解,產(chǎn)生FDPs,使凝膠狀態(tài)的纖維蛋白溶解。[原理]
定性:FDPs+FDPs抗體-乳膠顆?!磻?yīng)
定量:FDPs+FDPs抗體-酶+底物→顯色反應(yīng)
[參考值]
膠乳凝集法陰性
ELISA法<5mg/L
?什麼是FDPs53(二)血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測定纖溶酶127陽性或增高見于:*
原發(fā)性纖溶癥*
繼發(fā)性纖溶癥(如DIC、惡性腫瘤、肺血栓栓塞、深靜脈血栓形成、肝臟疾病、腎臟疾病、移植排斥反應(yīng)、溶栓治療等)FDPs測定是診斷DIC較敏感的指標(biāo)之一,快速、簡單[臨床意義]54陽性或增高見于:[臨床意義]128血漿魚精蛋白副凝固試驗
(plasmaprotamineparacoagulationtest,3P試驗)[原理]受檢血漿+硫酸魚精蛋白溶液,若血漿中存在可溶性纖維蛋白單體-FDPs復(fù)合物時,則魚精蛋白使其解離釋出纖維蛋白單體,后者自行聚合成肉眼可見的纖維蛋白絲,為陽性。[參考值]
正常人陰性二、診斷試驗55血漿魚精蛋白副凝固試驗
(plasmaprotamin129[臨床意義]
陽性:DIC早、中期(注意假陽性)
陰性:正常人、DIC晚期和原發(fā)性纖溶癥本試驗特異性高、敏感性低,是鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶癥(DIC)的試驗之一。3P試
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