遺傳學(xué)實驗講義(16年修改)匯總

遺傳學(xué)實驗講義（16年修改）匯總實驗一、果蠅的飼養(yǎng)與形態(tài)觀察一、果蠅簡介果蠅是在世界各地常見的昆蟲，屬于昆蟲綱，雙翅目，果蠅科，果蠅屬。果蠅屬有3000多種，我國已經(jīng)發(fā)現(xiàn)800多種，遺傳學(xué)研究中通常用的是黑腹果蠅(Drosophilamelanogaster)。作為遺傳學(xué)研究的材料，果蠅具有非常突出的優(yōu)點，它形體小，生長迅速，繁殖率高，飼養(yǎng)方便，世代周期短，約12d就可繁殖一代，突變性狀多，染色體數(shù)目少，基因組小，實驗處理十分方便，容易重復(fù)實驗，便于觀察和分析。果蠅的遺傳學(xué)研究廣泛而深入，尤其在基因分離、連鎖、互換等方面十分突出，為遺傳學(xué)的發(fā)展作出了突出的貢獻。目前果蠅仍然是遺傳學(xué)、細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)等研究中常用的模式動物。二、實驗?zāi)康?掌握果蠅的基本特征及鑒別雌雄果蠅的方法，熟悉常見突變型。.了解果蠅生活周期特征及各階段的形態(tài)變化。三、實驗材料儀器設(shè)備：顯微鏡、指型管、毛筆。藥品與試劑：乙醴、玉米粉、酵母粉、蔗糖、丙酸。四、實驗內(nèi)容和步驟.生活周期的觀察果蠅的生活史：果蠅與家蠅是不同的種，是完全變態(tài)昆蟲，其完整的生活周期可分為4個明顯的時期，即卵、幼蟲、蛹和成蟲。用放大鏡從培養(yǎng)瓶外即可觀察到這四個時期，也可取出用立體解剖鏡仔細觀察。果蠅的生活周期長短與溫度關(guān)系很密切，低溫使生活周期延長，生活力減低，高于30c使果蠅不育甚至死亡。果蠅培養(yǎng)的最適溫度為 20?25C,25c培養(yǎng)條件下果蠅從受精卵到成蟲約10d,其中卵和幼蟲期5d,蛹4do成蟲果蠅在25c條件下約成活15d。卵：受精卵白色，橢圓形，腹面稍扁平，長約0.5mm,在前端背面伸出一觸絲，它能使卵附著在食物上。幼蟲：受精卵經(jīng)24h就可孵化成幼蟲，幼蟲經(jīng)兩次蛻皮到第三齡期體長可達4?5mm肉眼4察可見幼蟲一端稍尖為頭部，上有一黑色的鉤狀口器。蛹：幼蟲生活4d左右即開始化蛹。化蛹前三齡幼蟲停止攝食，爬到相對干燥的表面，如培養(yǎng)瓶壁，漸次形成一個菱形的蛹，起初顏色淡黃、柔軟，以后逐漸硬化變成深褐色，此時即將羽化。成蟲：剛從蛹殼中羽化出來的果蠅，蟲體較肥大，翅膀還未展開，體表也未完全幾丁質(zhì)化，所以呈半透明的乳白色。透過腹部體壁還可以觀察到消化道和性腺。約1h后，蠅體即變?yōu)榇侄虣E圓形，雙翅伸展，體色加深，如野生型果蠅初為淺灰，后變成灰褐色。成蟲果蠅羽化后8h即可交配。雄果蠅的精子可貯存于雌果蠅的受精囊，以后逐漸釋放到輸卵管，雌蠅2d后即開始產(chǎn)卵，最初幾天每天可產(chǎn)50?70個，隨后逐漸減少。.果蠅的形態(tài)特征和常見突變的類型果蠅的雌雄性別的鑒別果蠅有雌雄之分，幼蟲時很難區(qū)別，但成蟲區(qū)別很容易。雄性的腹部環(huán)紋5節(jié)，末端鈍而圓，顏色深。第一對足的附節(jié)前端表面有黑色鬃毛流蘇，稱性梳；雌性腹部環(huán)文7節(jié)，末端尖，顏色淺，附節(jié)前端無黑色鬃毛性梳。雄性個體一般比雌性小。一些常見的突變性狀果蠅的突變性狀很多，已知的達幾百種，并且隨著研究的深入會發(fā)現(xiàn)或誘變產(chǎn)生更多的突變性狀。果蠅的許多突變都是明顯而且穩(wěn)定的，大多是形態(tài)變異，容易觀察。.果蠅的麻醉的方法對果蠅進行檢查時，一般用乙醴進行麻醉，使其保持靜止狀態(tài)。由于果蠅對乙醴比較敏感，因此麻醉時應(yīng)根據(jù)實驗要求而定，作種蠅以輕度麻醉為宜，做觀察時可深度麻醉，致死也可。麻醉程度是實驗成功與否的關(guān)鍵步驟，麻醉不夠，果蠅就會飛掉，麻醉過頭又會殺死果蠅。果蠅翅膀外展45度角表示已經(jīng)死亡。麻醉的操作步驟如下：1）輕搖或輕拍培養(yǎng)瓶使果蠅落到培養(yǎng)瓶底部。2）右手兩指取下培養(yǎng)瓶塞，迅速將麻醉瓶口與培養(yǎng)瓶口對接嚴密。3）左手握緊兩瓶接口處，倒轉(zhuǎn)使培養(yǎng)瓶在上。4）緊握兩瓶接口，使兩瓶稍微傾斜，右手輕拍培養(yǎng)瓶將果蠅振落到麻醉瓶中。注意不要讓培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基掉入麻醉瓶中，如培養(yǎng)基已變得太稀而易脫落，可采用麻醉瓶在上，而用黑紙或雙手遮住培養(yǎng)瓶，使果蠅趨光自動飛入麻醉瓶中。5）當果蠅進入麻醉瓶后，迅速分開，將兩瓶各自蓋好。然后再將麻醉瓶的果蠅拍到瓶底，迅速拔開塞子，在塞子上滴幾滴乙醴，重新塞上麻醉瓶。6）觀察麻醉瓶中的果蠅，約半分鐘后果蠅便不再爬動，轉(zhuǎn)動瓶子，果蠅在瓶壁上站不穩(wěn)，麻醉就算成功了，即可倒在白瓷板上進行觀察。7）果蠅麻醉狀態(tài)通常可維持5?10min,如果觀察中蘇醒過來，可進行補救麻醉，即用一平皿，內(nèi)貼一帶乙醴的濾紙條，罩住果蠅形成一臨時麻醉小室。.果蠅培養(yǎng)將果蠅移入新培養(yǎng)瓶時，須將瓶橫臥，并在培養(yǎng)基上薄博鋪上一層玉米粉，然后接入5?10對果蠅，待果蠅清醒后，再把培養(yǎng)瓶豎起，以防果蠅粘在培養(yǎng)基上。果蠅培養(yǎng)基

A:糖6.2g,加瓊脂0.62g,再加水38ml。煮沸溶解。B:玉米粉8.25g,加水38ml,加熱攪拌均勻。A、B混和加熱后成糊狀后，加0.5ml丙酸，充分混勻后，再加0.7g酵母粉，攪拌均勻后，趁熱分裝至指型管中，每管約2cm厚。注意事項分裝時不要把培養(yǎng)基倒在瓶壁上。剛配制完的培養(yǎng)基放涼后在瓶壁上會有許多水滴， 這時如果將果蠅放進去，水滴可能將果蠅的翅膀粘住。為避免發(fā)生此事，可將配好的果蠅培養(yǎng)基放置溫箱內(nèi)2?3d,待水分蒸發(fā)后再使用，或用酒精棉球?qū)⑵勘谏系乃植恋簟?實驗交配果蠅雌體生殖器官有受精囊，可保留交配所得的大量精子，能使大量的卵受精，因此在做品系間雜交時，雌體必須選用處女蠅。雌果蠅一般孵出 8h后才會交配，所以把老果蠅除去后，8h內(nèi)所收集到的雌蠅必定為處女蠅。由于雌蠅兩天內(nèi)不產(chǎn)卵，所以雄果蠅可以直接放到處女蠅培養(yǎng)瓶中。

實驗二、果蠅唾腺染色體觀察形成時，染色體著絲粒和近著絲粒的異染色質(zhì)區(qū)聚于一起形成一個染色體中心，所以在光學(xué)顯微鏡下可見染色中心伸出6條配對的染色體臂，其中5條為長臂，1條為緊靠染色體中心的很短的臂。一、實驗原理唾腺染色體是一類存在于雙翅目昆蟲，如果蠅、搖蚊幼蟲唾液腺中的巨大染色體，雙翅目昆蟲的消化道細胞發(fā)育到一定階段之后就不再進行有絲分裂，而永久停留在分裂間期。但隨著幼蟲的生長，唾液腺染色體仍不斷地進行自我復(fù)制而且不分開，經(jīng)過多次的復(fù)制形成約1000?4000拷貝的染色體絲，合起來直徑達5一、實驗原理唾腺染色體是一類存在于雙翅目昆蟲，如果蠅、搖蚊幼蟲唾液腺中的巨大染色體，雙翅目昆蟲的消化道細胞發(fā)育到一定階段之后就不再進行有絲分裂，而永久停留在分裂間期。但隨著幼蟲的生長，唾液腺染色體仍不斷地進行自我復(fù)制而且不分開，經(jīng)過多次的復(fù)制形成約1000?4000拷貝的染色體絲，合起來直徑達5（im,長度達400叩，比普通細胞中期染色體大約100?150倍，所以稱為多線染色體或者巨大染色體。唾腺染色體的另外一個特點是體細胞中同源染色體處于緊密配對狀態(tài)，這種狀態(tài)稱為體細胞聯(lián)會”。在以后不斷的復(fù)制中仍不分開，由此成千上萬核蛋白纖維絲結(jié)合在一起，緊密盤圖果蠅有絲分裂中2n=8,其中第II、第III染色繞。所以細胞中染色體只呈單倍數(shù)。黑腹果蠅的染色體數(shù)目體為中部著絲粒染色體，第IV和第I（X染色體）染色體為端著絲粒染色體。唾腺染色體唾腺染色體經(jīng)染色后，呈現(xiàn)顏色深淺不同、疏密各異的橫紋。這些橫紋的數(shù)目、位置、寬窄及排列順序都具有物種的特異性。研究認為這些橫紋與染色體的基因是有一定關(guān)系的。從其橫紋分布特征可對物種的進化特征進行比較，而一旦染色體上發(fā)生了缺失、重復(fù)、倒位、易位等結(jié)構(gòu)變化，也可較容易地在唾腺染色體上觀察識別出來。二、實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)取出果蠅等幼蟲唾腺的技術(shù)和制作唾腺染色體標本的方法。.了解果蠅唾腺染色體的形態(tài)學(xué)及遺傳學(xué)特征。三、實驗材料黑腹果蠅的三齡幼蟲。這種材料既易飼養(yǎng)，又易取得唾腺，但為了得到更好的染色體標本，需要在20?25c和營養(yǎng)良好的條件下飼養(yǎng)幼蟲。選擇行動遲緩、肥大，爬上管壁的三齡幼蟲（就要化蛹了）做標本最佳。四、實驗器具和藥品用具：雙筒解剖鏡，顯微鏡，銀子，解剖針，載玻片，蓋玻片，濾紙，繪圖紙。藥品：果蠅培養(yǎng)基，苯酚品紅，果蠅用生理鹽水（NaCl7.5g、KCl0.35g、CaCl20.21g,順次溶解于1000ml蒸儲水中）。配方I:石碳酸品紅（carbolfuchsin）母液A:3g堿性品紅，溶解于100ml的70%酒精中（此液可長期保存）。母液B:取母液A10ml,加入90ml的5%石碳酸水溶液（兩周內(nèi)使用）。石碳酸品紅染色液：取母液B45ml,加入6ml冰醋酸和6ml37%甲醛。配方H:改良石碳酸品紅取石碳酸品紅染色液2?10ml,加入90?98ml45%的醋酸和1.8g山梨醇。五、實驗步驟取一條三齡幼蟲（往往已爬上培養(yǎng)瓶壁），置于載玻片上，并加一滴生理鹽水，置雙筒解剖鏡下觀察。首先熟悉幼蟲具一鈍尾和一帶黑色口器的尖頭端。 在解剖鏡下用解剖針壓住頭部，壓點盡可能靠頭圖唾液腺部口器處。幼蟲頭部固定之后，再用另一針壓住尾部（或用尖頭銀子夾住），平穩(wěn)快速一拉,使口器部分斷開，體內(nèi)各器官也從切口擠出，一對唾液腺也隨之而出。唾液腺是對透明的香蕉狀腺體，仔細觀察可發(fā)現(xiàn)由一個個較大的唾液腺細胞組成。分離的腺體可能伴有消化道和脂肪體。在載玻片上再加一滴生理鹽水，用刀片或解剖針仔細剔除這些雜物，僅讓腺體留下。用濾紙將多余生理鹽水吸去，注意不要碰著腺體，以防吸走。然后滴上石碳酸品紅，染色10min左右。染色后，蓋上蓋玻片，用濾紙輕輕吸去多余染料，然后平放在實驗桌上，用大拇指壓下蓋片，用力適當即可獲得染色體分散良好的制片，顯微鏡下觀察。實驗三、果蠅的伴性遺傳一、實驗原理位于性染色體上的基因，其傳遞方式與位于常染色體上的基因不同，它的傳遞方式與雌雄性別有關(guān)，因此稱為伴性遺傳。果蠅的性染色體有X和Y兩種，雌蠅為XX,是同配性別；雄蠅為XY,是異配性別。二、實驗?zāi)康?記錄交配結(jié)果和掌握統(tǒng)計處理方法。.正確認識伴性遺傳的正交、反交的差別。三、實驗材料黑腹果蠅品系：野生型果蠅：紅眼三隱性果蠅：白眼，此基因在X染色體上四、實驗用具和藥品.用具：毛筆，培養(yǎng)瓶，麻醉瓶，解剖鏡.藥品：乙醴.果蠅培養(yǎng)基：A:糖6.2g,加瓊脂0.62g,再加水38ml,煮沸溶解。B:玉米粉8.25g,加水38ml,加熱攪拌均勻。將A和B混合繼續(xù)加熱成糊狀，加入0.5ml丙酸和0.7g酵母粉，混勻后分裝到培養(yǎng)瓶中，約2cm厚。

五、實驗步驟.果蠅的飼養(yǎng)與觀察；.收集處女蠅；.雜交；按正、反交組合，把已經(jīng)麻醉的紅眼?、白眼含和紅眼含、白眼?分別放入不同瓶內(nèi)進行雜交，貼上標簽。標簽形式如下：A組合++XA組合++XwY日期姓名wwX+Y日期姓名6?7d后，見到有Fi幼蟲出現(xiàn)，即除去親本果蠅，注意：一定要清除干凈！.再過3?4d后，觀察F1成蠅的性狀，正、反交有何不同，顏色和性別的關(guān)系如何？.所出現(xiàn)的Fi?、含果蠅麻醉后，挑3?5對果蠅換入新的培養(yǎng)基繼續(xù)飼養(yǎng)，此處不需處女蠅。兩組合后代不能混合，應(yīng)分別培養(yǎng)。.培養(yǎng)6?7d后去掉Fi代親本果蠅。.再過3?4d后，F(xiàn)2代成蠅出現(xiàn)，麻醉后倒在白瓷板上觀察顏色和性別，進行統(tǒng)計.每隔1?2d統(tǒng)計一次，累積6?7d的數(shù)據(jù)。一般要求不少于250只。六、實驗報告FiA組合：正交?六、實驗報告FiA組合：正交?++XwY含察結(jié)果一.統(tǒng)計日期各類果蠅的數(shù)目紅眼臺(+)白眼?(w)B組合：反交?wwX+Y8察各類果蟲惠的數(shù)目 1白眼?(w)紅眼臺(+)統(tǒng)日期F2A組合：正交?++XwY8觀各類果I姆數(shù)U一口/紅眼小/■\r口眼紅眼C/■\白眼統(tǒng)計日期8(+)0(w)?(+)?(w)臺力13#)-LjB組合：反交?wwX+Y8\ 觀各類果!、年紅眼個/.X白眼紅眼白眼筑計已期'S(+)3(w)?(+)?(w)Axt百分上4/-JX2測定:根據(jù)X2測定，查X2表，若P>5%,說明觀察值與理論值之間的偏差是沒有意義的，也就是說，可以認為觀察值是符合假設(shè)的。即所得到的實驗結(jié)果應(yīng)該符合伴性遺傳的假設(shè)， 表明眼色的這對性狀是由于位于X性染色體上的一對等位基因控制的。實驗四、人類染色體G帶顯示法一、實驗?zāi)康恼莆罩苽銰帶染色體方法，了解G帶染色體在細胞遺傳學(xué)分析中的重要意義。二、實驗原理G帶是把制備的染色體在染色前用各種不同的方法進行預(yù)處理，使染色體在 Giemsa染色后可顯示出不同明暗相間的帶紋。G帶可使人們能夠準確的識別每一個染色體和它們所發(fā)生的畸變，這就為染色體遺傳疾病的診斷、 雜種細胞檢定，特殊細胞株的標記、染色體的識別等開創(chuàng)了一種新的方法，有助于染色體研究的發(fā)展。關(guān)于G帶形成的機理，到目前為止還沒有完全定論，但有人提出了以蛋白質(zhì)構(gòu)象改變?yōu)榛A(chǔ)的顯帶機理。此機理認為，帶紋所反映的是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的差異，這種差異與DNA的功能活動相適應(yīng)。G帶的形成與Giemsa染料的組成及染色特性分不開。Giemsa染料是由亞甲藍（美藍）、天藍和曙紅組成的復(fù)合染料，除曙紅外，均為曝嗪類染料，它只與DNA中的PO43-基結(jié)合而不與蛋白質(zhì)結(jié)合，所以染色體著色首先是兩個嚷嗪分子與DNA的結(jié)合，在此基礎(chǔ)上結(jié)合一個曙紅分子；形成2:1曝嗪-曙紅沉淀物。其次要有一個有助于染料沉淀物積累的疏水環(huán)境。染色體上含有高濃度疏水性蛋白的區(qū)域有利于嚷嗪 -曙紅沉淀物的形成，這些區(qū)域相當于含高比例二硫鍵的氧化態(tài)蛋白質(zhì)區(qū)域， 經(jīng)一系列處理后顯示暗帶，而另一些區(qū)域（明帶區(qū)）則為含琉基的還原態(tài)蛋白質(zhì)，為親水性蛋白質(zhì)，對染料親合力低，所以不顯色。這表明，在G帶形成的過程中，蛋白質(zhì)狀態(tài)是一個主要因素。這與染色體的功能有關(guān)。如果染色體上某一區(qū)域的DNA為重復(fù)序列，轉(zhuǎn)錄活性低，相應(yīng)地包裝它們的蛋白質(zhì)也較穩(wěn)定,可能通過較強的二硫鍵形成很穩(wěn)定的疏水的e螺旋結(jié)構(gòu)，成為染料沉淀物積累的環(huán)境，從而顯示出陽帶（暗帶）。反之，如果染色體上某一區(qū)域的DNA富含具轉(zhuǎn)錄活性的結(jié)構(gòu)基因，

則功能上相對活躍，包裝它們的蛋白質(zhì)也較疏松，構(gòu)象上類似 ,折疊結(jié)構(gòu)，經(jīng)處理后二硫鍵斷裂，還原為筑基，成為親水性蛋白，不利于染料沉淀物的積累，所以著色淺，顯示陰帶（明帶）。關(guān)于G帶形成的機理還有待進一步探討。G帶有許多優(yōu)點：染色是永久性的，以較長時間保存；帶紋分析通常較好；用普通光學(xué)顯微鏡可觀察等。二、實驗用品材料：人染色體（或其它動物染色體標本）器材：溫箱（37±0.5）C、水浴鍋（30±0.5）C、顯微鏡、離心機、量筒、燒杯、玻璃棒、立式染缸（2個）、天秤、試劑瓶、染片架等。試齊I」：00ml00.2g、GKN液：葡萄糖1g、KCl0.4g、NaCl8g>NaHCO300ml00.2g、Versene液:EDTA2Na(乙二胺四乙酸二鈉)0.2g、NaCl8g、KH2PO40.2g、KClNa2HPO4-2H2O1.55g(或Na2HPO4-12H2O3.1g),加蒸儲水稀釋至1000ml。HCO3,胰蛋白酶液：25mg胰蛋白酶（trysin），先用50mlGKN液溶解，并加0.2gNa待完全溶解后再加50mlVersene液，混勻。HCO3,Giemsa染液：Giemsa原液和磷酸鹽緩沖液（1:10）,pH6.8。Giemsa原液：Giemsa粉齊0.5g,甘油（AR）33ml,無水甲醇（AR）33ml。將Giemsa粉末先溶于少量甘油中，在研缽內(nèi)研磨（30min以上）至看不見顆粒為止將剩余甘油倒入，于56c溫箱內(nèi)保溫2h,然后加入甲醇，攪勻后裝入棕色瓶中低溫保存。四、實驗方法.空氣干燥的染色體制片，在37c溫箱內(nèi)預(yù)處理2?3h.染色體標本在0.025%胰蛋白酶液內(nèi)處理40?80s.在GKN液內(nèi)漂洗30s.用Giemsa磷酸鹽緩沖液染色8?10min.鏡檢。五、實驗結(jié)果每條染色體均顯示出各種不同的明暗相間的帶紋，同源染色體之間帶紋相似，可配對實驗五、人類體細胞染色體組型分析核型是將一個細胞內(nèi)的染色體按照一定的順序排列起來所構(gòu)成的圖像。 通常是用顯微攝

影得到的染色體照片剪貼而成。正常細胞的核型能代表個體的核型。組型是以模式圖的方式表示，它是通過對許多細胞染色體的測量取其平均值繪制而成的， 代表了一物種染色體組型的特征。由于染色體是遺傳物質(zhì)單位基因的載體，核型代表了種屬的特征。所以組型分析對于探討人類遺傳病的機制和動植物起源，物種間親緣關(guān)系，鑒定遠緣雜種等方面都具有重要的意義。、苦驗?zāi)康牧私夂驼莆杖祟愺w細胞染色體分析方法、實驗原理人類細胞有絲分裂中期染色體形態(tài)典型，便于分析，一般都分析中期分裂相。中期染色體已經(jīng)縱裂為二個染色單體，但是著絲粒還未分離，所以兩條染色單體相連于一著絲粒，著絲粒在標本上為一淡染區(qū)。從著絲粒向兩端就是染色體的“兩臂” ，凡著絲粒不在中央者，必然將染色體分隔成短臂和長臂。根據(jù)著絲粒的不同，可將染色體分為中部著絲粒染色體，亞中部著絲粒染色體，亞端部著絲粒染色體，端部著絲粒染色體。在一些亞端部著絲粒染色體中，除去著絲粒以外，有時還能看到一段稍窄的淡染區(qū)，叫次縊痕。對任何一個染色體的基本形態(tài)學(xué)特征來說，很重要的參數(shù)有4個。.相對長度，指單個染色體長度與包括X染色體(或Y染色體)在內(nèi)的單倍染色體總長之比，以百分率(或千分率)表示。100%相對長聲 每條染色體長度100%單倍常染色體X或Y的總總長.臂指數(shù)：指長臂同短臂的比率，即臂率長臂長度

短臂長度臂率長臂長度

短臂長度按Levan(1964)的標準劃分：臂指數(shù)在1.0?1.7之間為中部著絲粒染色體；其臂指數(shù)在1.7?3.0之間這亞中部著絲粒染色體；臂指數(shù)在3.0?7.0之間為亞端部著絲粒染色體；臂指數(shù)大于7.0者為端部著絲粒染色體。.著絲粒指數(shù)，指短臂占整條染色體長度的比率，它決定著絲粒的相對位置著絲粒指數(shù)短臂長度該條染色體長度著絲粒指數(shù)短臂長度該條染色體長度100%按Levan(1964)的劃分標準，著絲粒指數(shù)在50.0?37.5之間為中部著絲粒染色體，指數(shù)在37.5?25.0之間為亞中部著絲粒染色體，指數(shù)在25.0?12.5之間為亞端部著絲粒染色體,指數(shù)在12.5?0.0之間為端部著絲粒染色體。.染色體臂數(shù)，是根據(jù)著絲粒的位置來確定，著絲粒位于染色體端部，為端部著絲粒染色體，其臂數(shù)可作為一個。當著絲粒位于染色體的中部或亞中部，染色體臂數(shù)可計為二個。人類體細胞的正常核型是含有46條染色體，相互構(gòu)成23對。其中22對是男女所共有,

叫常染色體，有一對為男女所不同的叫性染色體，女性有兩條 X染色體，男性有一條X染色體和一條Y染色體，染色體數(shù)目為46的細胞叫做二倍體。成熟的生殖細胞，染色體數(shù)目由于減數(shù)分裂而減少了一半，只有23條染色體，叫做單倍體。A群：包括第粒略偏離中央。B群：包括第C群：包括第根據(jù)丹佛（I960）A群：包括第粒略偏離中央。B群：包括第C群：包括第2對的著絲1、2.、3號染色體，易于區(qū)別，體積大，有中央著絲粒，第4、52對的著絲6?12號染色體和X染色體，中等大小，為亞中部著絲粒染色體，彼此間難以區(qū)分。第6對的著絲粒染色體靠近中央，X染色體大小介于第6對與第7對之I9對染色體長臂上有一次縊痕，第11對染色體的短臂較長，第12對染色體的短臂較短，這些特點對于鑒別有幫助。D群：包括第13、14、15三對染色體，中等大小，有近端著絲粒，有隨體。彼此之不易區(qū)分。次縊E群：包括16、17、18三對染色體。中等大小，第16對有中央著絲粒，長臂上有痕，易于區(qū)別，第17和18對有亞中部著絲粒彼此不易區(qū)分，后者的短臂較短。次縊F群：包括第19、20兩對染色體，體積小，有中部著絲粒，彼此不易區(qū)分。G群：包括第21、22兩對染色體和Y染色體。第21和22對體積小，有近端澡著線粒,有隨體，長臂常呈分叉狀，彼此不易區(qū)分，Y染色體較前兩對略大，也有近端部著絲粒,隨體，長臂常常彼此平行，根據(jù)上述特征可以加以識別。三、實驗用品材料：染色體顯微照片器材：硬紙板（或其它可貼染色體的紙）、剪刀、銀子、膠水、直尺等四、心驗方法.將顯微鏡攝影后放大照片上的一個細胞的全部染色體，分別一條一條剪下。.按上述分類標準排列。.用膠水貼上，測量10個細胞的染色體即可。五、實驗結(jié)果.根據(jù)排列的人類核型鑒別是男性或女性.運用測量的數(shù)據(jù)，計算出相對長度、臂指數(shù)（或著絲粒指數(shù)）、染色體臂數(shù)。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理算出標準差（S、D）,或標準誤（S、E）。.給出一個典型的染色體的模式圖實驗六、蠶豆根尖微核檢測技術(shù)（開放性實驗）一、實驗?zāi)康?了解微核測試原理和毒理遺傳學(xué)意義。.學(xué)習(xí)蠶豆根尖的微核測試技術(shù)。二、實驗原理微核（micronucleus,MCN）是真核生物細胞經(jīng)各種理化因子作用后引起染色體畸變，在間期細胞中的一種表現(xiàn)形式。在細胞間期，微核呈圓形或橢圓形，游離于主核之外，大小應(yīng)在主核1/3?1/10之間，染色與主核一樣或稍淺。一般認為微核是由無著絲粒的染色體斷片或落后染色體，在分裂末期不能進入主核，便形成了主核之外的核塊。當子細胞進入下一次分裂間期時，它們便濃縮成主核之外的小核，即微核。用微核試驗來評價藥物、放射線、有毒物質(zhì)等對人體細胞或體外培養(yǎng)細胞遺傳學(xué)損傷仍是一個直觀有效可行的方法，在遺傳毒理、醫(yī)學(xué)、食品、藥物、環(huán)境等諸多方面得到了廣泛的應(yīng)用。利用蠶豆根尖作為實驗材料進行危害測試，可準確地顯示各種處理誘發(fā)畸變的效果，并可用于污染程度的監(jiān)測。三、實驗器材和藥品青皮蠶豆、顯微鏡、銀子、載玻片、蓋玻片、燒杯、Carnoys固定液、鹽酸酒精解離液、改良苯酚品紅染液。四、實驗步驟.浸種催芽：擇飽滿、均勻的種子，洗凈后用蒸儲水常規(guī)浸種 24?30h,此期至少換水2次；待種子充分吸脹后，移入鋪有干凈、雙層濕紗布的托盤內(nèi)催芽，待大部分初生根長至1?2cm時，按照自行設(shè)計的實驗方案進行染毒處理。.用被檢測液處理根尖：選初生根生長良好的蠶豆6?8粒，分別放入自行設(shè)計的染毒液中進行染毒處理。.根尖細胞恢復(fù)培養(yǎng)：處理后的種子用蒸儲水（自來水）浸洗3次，每次2?3min;將處理液洗凈后，置于濕紗布上恢復(fù)培養(yǎng) 22?24h;同時均設(shè)蒸儲水處理為空白對照組。以上溫度均為25Co.根尖細胞固定：將恢復(fù)后的種子，從根尖頂端切下1?1.5cm長的幼根，用Carnoys固定液固定20?24h0固定后的根如不及時制片，可換入70%的酒精溶液中置4c冰箱中保存?zhèn)溆谩?酸解：用蒸儲水浸洗固定好的幼根3次，每次5min,吸凈蒸儲水，加入1mol鹽酸解離液室溫下酸解10?12min,幼根軟化即可。.染色：吸去鹽酸，用蒸儲水浸沒幼根3次，每次1?2min。最后浸于水中。制片前取出置載玻片上，截下1?2mm左右長的根尖，滴1?2滴改良苯酚品紅染液染色5?8min后，加上蓋玻片，覆以吸水紙常規(guī)壓片。五、實驗結(jié)果在顯微鏡低倍鏡下找到分生組織區(qū)細胞分散均勻， 分裂相較多的部位，再轉(zhuǎn)高倍鏡觀察微核。每一處理觀察3個根尖，每個根尖數(shù)1000個細胞，統(tǒng)計其中含微核的細胞數(shù)，然后平均，即為該處理的MCN%,即微核千分率，以此可作一個檢測指標。根據(jù)你的實驗安排列表填出你的實驗結(jié)果。污染指數(shù)（PI）=樣品實測MCN%平均值/對照組MCN%平均值污染指數(shù)在0?1.5區(qū)間基本沒有污染；1.5?2區(qū)間為輕度污染；2?3.5區(qū)間為中度污染；3.5以上為重度污染。六、作業(yè).在蠶豆根尖細胞的微核測試中，為什么要進行恢復(fù)培養(yǎng)？.產(chǎn)生微核的根尖細胞在產(chǎn)生前的分裂中期可能出現(xiàn)什么樣的中期分裂圖象？實驗觀察中請同時仔細觀察每個分裂相細胞。實驗七、人體皮紋的遺傳分析一、實驗原理人體的皮膚由表皮和真皮組成。真皮乳頭向表皮突起，構(gòu)成許多整齊的乳頭線稱為崎線（ridge）。崎線之間凹陷部分稱為溝（furrow）。皮膚表層因皮崎和皮溝走向不同而形成各種圖形，稱為皮膚紋理（dermatoglyphy）,簡稱皮紋。皮紋在胚胎發(fā)育的第 12?13周開始，第19周左右形成，其形態(tài)終身不變，主要分布于手掌、手指、腳掌、腳趾等部位。國際上公認Galton是現(xiàn)代皮紋學(xué)的創(chuàng)始人，他（1892）所撰寫的《指紋》一書，具體地提出了弓、箕、斗的指紋構(gòu)型分類，與目前的分類法十分相似，并提出了指紋的可遺傳性。Elderdon(1920)發(fā)表《指紋的遺傳》，為最早論述指紋遺傳的論文。Bonnevie(1924)提出皮紋屬于多基因遺傳的假說，用指紋的形態(tài)指數(shù)(formindex)方法研究指紋的親子關(guān)系。皮紋學(xué)(dermatoglyphics)一詞，是Cummins和Midlo于1926年首先提出的，并最早報道了先天愚型(Down氏綜合征)患者的特異性皮紋特征，為皮紋學(xué)應(yīng)用于臨床診斷和疾病研究開辟了新途徑。皮紋學(xué)是研究皮紋的形態(tài)特征、發(fā)生、遺傳變異規(guī)律及其應(yīng)用的學(xué)科。目前廣泛應(yīng)用于人類學(xué)、遺傳學(xué)、法醫(yī)學(xué)及臨床診斷等領(lǐng)域，我國是世界上公認的指紋術(shù)的發(fā)源地，是最早應(yīng)用指紋、掌紋的國家。人體的皮膚紋理屬多基因遺傳，具有高度的個體特異性。其遺傳方式有顯性、隱性、中間性、不完全顯性、不完全外顯率及不同表現(xiàn)度等多種形式。二、實驗材料本校各院系學(xué)生或某一區(qū)域人群。三、實驗儀器與試劑.儀器放大鏡，量角器，直尺，鉛筆，印油(或黑色油墨)，海綿墊，白紙，印圖紙，搪瓷盤，鑲子等。.試劑亞鐵氧化鉀，三氯化鐵，苗三酮，氨基酸（組氨酸、谷氨酸或精氨酸等均可）等。四、操作程序.皮紋采樣方法通常采用直接觀察法、油墨法、苗三酮-氨基酸顏色反應(yīng)法、普魯士藍顏色反應(yīng)法、掌紋捺印盒等，具體操作見附錄。苗三酮-氨基酸顏色反應(yīng)法和普魯士藍顏色反應(yīng)法，操作簡便，顯色清晰，不易褪色，便于長期保存。且無異味，不污手足，易于受檢者接受。.指紋分析對手指端的紋理進行觀察，辨別弓形紋、箕形紋、斗形紋3種類型，其各自形態(tài)特征見附錄圖2。.崎紋計數(shù)（ridgecount）從箕形紋或斗形紋的中心點到三叉點的中心畫一直線，再計算直線經(jīng)過的崎紋數(shù)。因弓形紋沒有三叉點，所以計數(shù)為0;箕形紋按上述方法計數(shù)（附錄，圖4）;斗形紋因有2個交叉點，需經(jīng)2次計數(shù)，并按較大的數(shù)計(附錄，圖5);雙箕斗形紋有2個三叉點和2個中心，崎紋計數(shù)時，先將2個三叉點與距它們較近的中心以及2中心點間用直線連接起來，分別記錄3條直線上通過的崎紋數(shù)目，最后將3個數(shù)字相加，得到的數(shù)除以2,所得數(shù)值就是雙箕斗形紋崎紋數(shù)目(附錄，圖5d)。.總指崎數(shù)(totalfingerridgecount,TFRC)將左右手10個手指末端靖紋數(shù)相加的總和，是表示指端各種紋形比例和大小的指標。總指崎數(shù)的絕對增多或減少可為異常，若十指均為弓形紋，其崎紋數(shù)為0,則總指靖數(shù)也為0。.掌紋分析掌紋皮紋崎線構(gòu)成多種花紋，其中弓形紋稱為非真實花紋，斗形紋和箕形紋稱為真實花紋。具體掌紋分析見附錄。.a-b崎線數(shù)(a-bridgecount,a-bRC)在三叉點a和b之間作一直線，除去起止點計算所經(jīng)過的崎線數(shù)，即得a-bRC值，該值可作單手或雙手計算。中國人a-bRC正常值為：男性左手37.4±4.84,右手37.2土5.03;女性左手37.2±5.54,右手37.2±5.63。兩手之和明顯低于歐美人種。.atd角和t距比測量在手掌近腕處大小魚際交界的位置存在一個三叉點稱為軸三叉或軸三角，常用t表不■（圖1a）。t距是t三叉點距遠側(cè)腕關(guān)節(jié)褶線的距離，正常成年人的t距為0.5?3cm,一般認為中國漢族成人的t距小于2cm。若該三叉點向掌心方向移位，稱為t'三叉；若移位到掌心附近，則稱為t"三叉。t'和t"常見于三體綜合征患者。軸三叉的位置可用atd角表示。atd角指三叉點a和三叉點d分別引一直線連接軸三叉t所形成的夾角。中國正常人群的atd角小于45°,平均41°,用t表示；若atd角在45°~56°之間，用t'表示；若atd角大于56°,則用t"表示。軸三叉位置的另一測量指標為 t距比（percentdistanceofaxialtriradius,tPD）,指t距與手掌長（中指基部的指掌褶線距遠側(cè)腕關(guān)節(jié)褶線的距離 ）的比值，用％表示（圖1b）。正常比值t為0?14%,t'為15%~39%,t"為大于40%o

圖1atd角、t距比及其測量.掌褶紋和指褶紋在手掌和手指的屈面各關(guān)節(jié)彎曲活動的地方可見到明顯的皮膚皺褶，稱為掌褶紋(palmarflexioncrease)和指褶紋(digitalflexioncrease)。它們雖不屬于皮膚紋理，但由于某些染色體病患者的掌褶紋和指褶紋常有特異性改變，故觀察分析它們對某些遺傳病的診斷有一定參考價值。正常人除拇指僅有1條指褶紋外，其余4指均有2條指褶紋，13三體、18三體、21三體綜合征患者小指僅有1條指褶紋。正常人的掌褶紋有3條：遠側(cè)橫褶紋、近側(cè)橫褶紋、大魚際褶紋，這3條褶紋的分布可出現(xiàn)變異，常見有：通貫手、過渡I型、過渡口型、悉尼手。具體描述見附錄。9,足掌紋足掌紋也稱跖紋(solepattern),是腳掌面的皮紋，由于足掌面上有較多的三叉點，因而其花紋更為復(fù)雜。在人的腳趾、腳掌的皮膚紋理中，拇趾球部的皮紋(hallucalareapattern)研究較多且有使用價值。拇趾球部是人足第一跖骨與拇趾第一趾骨相關(guān)連處的膨大區(qū)域，此區(qū)出現(xiàn)的各種皮崎花紋也可分為弓、箕、斗等，一般按照拇趾球部弓、箕、斗等紋線在脛側(cè)、腓側(cè)以及遠側(cè)的走向分為7種類型：遠側(cè)箕形紋、脛側(cè)箕形紋、腓側(cè)箕形紋、脛側(cè)弓形紋、腓側(cè)弓形紋、近側(cè)弓形紋、斗形紋。具體描述見附錄。五、實驗結(jié)果與分析.指紋分布的一般規(guī)律左右手指紋花樣分布有明顯不同，左手弓、正箕和反箕的出現(xiàn)率比右手高，斗的出現(xiàn)率則右手比左手高。大多數(shù)人群中，弓形紋出現(xiàn)率依次為食指、中指、拇指、小指、環(huán)指；正箕出現(xiàn)率依次為小指、中指、食指、拇指、環(huán)指；反箕出現(xiàn)率依次為食指、中指、拇指、環(huán)指、小指；斗的出現(xiàn)率依次為環(huán)指、拇指、食指、中指、小指。男女之間指紋花樣出現(xiàn)率大多具有顯著的差異，一般男性的斗紋和箕紋的出現(xiàn)率比女性高，而正箕和弓紋的出現(xiàn)率則女性高于男性。.崎紋計數(shù)與總指崎數(shù)絕大多數(shù)人群男性的平均總指崎數(shù)大于女性，多數(shù)人群右手的總指崎數(shù)比左手的多，但每一人群中男女之間和左右手之間平均總指崎數(shù)的差異大多不顯著。不同手指上崎紋數(shù)的多少不同，中國人群中一般以拇指最多，依次為環(huán)指、中指、食指、小指，總指崎數(shù)在中國各人群中的變動范圍為97.20?171.25條。在世界范圍內(nèi)，波利尼西亞人、日本人、夏威夷人、菲律賓人等太平洋人群的總指崎數(shù)較多，而葡萄牙人、波多黎各人、高加索人等大西洋人群的總指崎數(shù)較少。.掌紋中各花紋的一般規(guī)律Th/I1區(qū)的真實花紋中以箕紋出現(xiàn)率最高，在有的人群中可達10%,其他真實花紋出現(xiàn)率一般不超過2.0%。在多數(shù)人群中男性的真實花紋出現(xiàn)率高于女性，但差異大多數(shù)不顯著。而幾乎所有人群左手的真實花紋出現(xiàn)率高于右手，并差異顯著。小魚際區(qū)的真實花紋出現(xiàn)率以反箕最高，多數(shù)人群中女性的真實花紋出現(xiàn)率比男性高，而兩手相比，左手的真實花紋出現(xiàn)率比右手高。指間區(qū)12、13、I4中，以指間區(qū)I4的真實花紋出現(xiàn)率最高，其次是指間區(qū)I3,最低為指間區(qū)12。多數(shù)人群中指間區(qū)12、I3的真實花紋出現(xiàn)率男性超過女性，而指間區(qū)I4的出現(xiàn)率則女性超過男性。指間區(qū)I2、I3的真實花紋出現(xiàn)率右手高于左手，而指間區(qū)I4則相反，即左手高于右手。各指間區(qū)的真實花紋出現(xiàn)率在性別、 左右側(cè)之間的差異在多數(shù)人群中均不顯著。.a-b崎線數(shù)大多數(shù)人群中的平均a-b崎線數(shù)男性多于女性，左手的平均a-b崎線數(shù)比右手的多，但差異都不顯著。.atd角與t距比在人的生長發(fā)育時期，atd角的大小隨年齡增加而變小，因此對所調(diào)查人群的atd角數(shù)據(jù)分析時，要考慮到年齡因素的影響。絕大多數(shù)人群的女性atd角大于男性，且差異大多數(shù)具有顯著性。左手的atd角一般比右手大，但差異大多不顯著。t距比在我國少數(shù)民族中多在17.0%以上，變動范圍從15.31%（寧夏回族卜20.99%（基諾族）。各種先天性大腦發(fā)育不全的遺傳性疾病，如先天性愚型、13三體綜合征，XO綜合征等都有atd角明顯增大，均值高達56°?64°的顯著特征。因此，atd角被認為在一定程度上有助于判斷人的機敏程度。各項優(yōu)秀運動員的均值，男子僅在 37°?39°,女子在39°?40。。一般對臨場應(yīng)變能力要求高的項目其運動員的atd角比以固定程式比賽項目的??；田徑中技巧群（跳高、跳遠、跨欄）比跑群和投擲群的atd角?。惑w操中參加全能項的運動員比僅參加單項運動員的 atd角小。6,掌褶紋在中國正常人群中，通貫手有3%~5%，過渡I型有10%~15%，過渡n型有3%~6%，悉尼手有2%~5%。13三體和18三體綜合征患者雙手為通貫手出現(xiàn)率比正常人高出10?30倍。中國人的普通型中女性高于男性，而變異型的出現(xiàn)率男性超過女性。人群中普通型、悉尼手、過渡H型左手的出現(xiàn)率比右手高，通貫手和過渡 I型出現(xiàn)率則右手高于左手，但多數(shù)人群中不同性別之間和左右手之間的差異不顯著。.拇趾球部的皮紋中國人群拇趾球部的皮紋中真實花紋出現(xiàn)率以遠側(cè)箕形紋最高，平均為60.95%;其次是簡斗，平均出現(xiàn)率為20.77%;脛側(cè)箕形紋與脛側(cè)弓形紋，其平均出現(xiàn)率分別為7.54%與4.72%,而先天愚型患者脛側(cè)弓形紋高達72%;腓側(cè)箕形紋出現(xiàn)率平均為0.30%,而13三體綜合征患者高達42%o.皮紋調(diào)查統(tǒng)計與比較

將所調(diào)查的人群皮膚紋理填寫在表1中，統(tǒng)計分析并寫出相關(guān)調(diào)研報告。表1皮紋調(diào)查統(tǒng)計表姓名才性別年齡民族日期編號項巨左右合計指（星止）拇指食指中指環(huán)指小指拇指食指中指環(huán)指小指皮紋類型崎紋計數(shù)總指崎數(shù)a-b崎線數(shù)atd角t屈4t距比掌褶紋普通通貫過渡過渡悉尼普通通貫過渡過渡悉尼

紋手I型II型手紋手I型II型手指間花紋Th/I1I2I3I4I5Th/I1I2I3I4I5小魚際花紋小指褶線拇趾球部皮紋其他1_六、思考題.通過皮膚紋理的調(diào)查，對指紋、崎紋計數(shù)、總指崎數(shù)、a-b崎線數(shù)、atd角等項目的比較研究，你認為是否存在性別間和左右側(cè)間的差異？.皮膚紋理分析有何遺傳學(xué)意義？【實驗建議】如同一省皮紋遺傳分析實驗最好能選擇一些區(qū)域人群,市區(qū)縣、同一民族等人群或雙生如同一省子。有條件的情況下，也可以讓學(xué)生對自己家庭或家譜中2~3代成員的指紋、掌紋進行比較，分析上下代之間、同胞之間、個體左右側(cè)對稱性等方面的皮紋相似性研究，撰寫研究性實驗報告或論文。附錄?、皮紋采樣方法.直接觀察法直接用肉眼觀察被檢者的手、足部的皮紋，當場記錄所調(diào)查的各項目。其優(yōu)點是直接、快速，應(yīng)用于群體調(diào)查和收集一般性疾病的皮紋資料，但缺點是無法留下標本，不易復(fù)查。.油墨法（掌紋捺印盒）這是應(yīng)用最廣泛的一種印紋方法。①印泥（或油墨）倒人盒內(nèi)海綿墊上，涂抹均勻。②受檢者將手（足）按在海綿墊上輕輕按壓，使手（足）表面獲得均勻的油印。切記不要來回涂抹，油量適中。③取掌紋印用按壓法。令受檢者把涂有油墨的手伸直展平，手腕稍上翹，使掌指保持自然狀態(tài)（手指自然分開，不要用力張開），從掌腕褶線開始，先壓在白紙上，再從后向前依掌、指順序逐一放下，操作者從受檢者的掌背部適當用力壓，特別是腕部、掌心凹陷處和手指基部，然后將指頭翹起，再是掌部，最后是掌腕面。切記不要加壓過重，手掌與白紙間不能滑動，以免皮紋重疊或模糊不清。④取指紋印用滾動法。將手指由一側(cè)向另一側(cè)輕輕滾動1次，要印出手指兩側(cè)的皮紋，切記不要來回滾動，以免指紋重疊。一般在對應(yīng)的掌紋下方，由左至右依次印取手指的指紋，并現(xiàn)場標注，以免混淆。.苗三酮一氨基酸顏色反應(yīng)法①配1.5%苗三酮溶液，倒在搪瓷盤中，將印圖紙（繪圖紙）浸人盤內(nèi)，立即用鐐子取出。晾干備用。注意不能直接與手接觸。②任選一種氨基酸（組氨酸、谷氨酸或精氨酸等均可）配成1.5%溶液，倒入盛有海綿塊的搪瓷盤中作為印盒。使用時，受檢者將手在浸有氨基酸溶液的海綿上輕輕按一下，使藥液在手部均勻分布，待手部不濕不干時，捺在已晾干的苗三酮印圖紙上。注意紙下應(yīng)墊一平整且有彈性的物品，約30min即可顯現(xiàn)出暗紅色的皮紋圖形。.普魯士藍顏色反應(yīng)法①配2.5%亞鐵氧化鉀溶液，將印圖紙浸濕，晾干各用。②配2%三氯化鐵溶液，制成印盒。③印圖方法同上，立刻便顯現(xiàn)出藍色的皮紋圖形。二、指紋分析指紋為手指端的紋理，根據(jù)指端外側(cè)三叉點（triradius）的有無及其數(shù)目，分為弓形紋、箕形紋、斗形紋3種類型（圖2）。三叉點為膚紋中有3組不同走向的崎紋匯聚在一處呈Y或人字形者。圖2指紋的3種基本類型(1)弓形紋(arch,A):由若干條弓形崎紋平行排列從一側(cè)走向另一側(cè)，途中崎線弓背向上彎曲，形如弓狀而得名。其特點是沒有構(gòu)成三叉點，由于弓形崎線隆起程度不同，可將其分為簡單弓形紋和帳幕弓形紋。①簡單弓形紋(simplearch,As):也稱簡弓，其皮紋崎線彎曲較平緩，即中間膨隆程度小，呈圓弧狀 (圖3a)。②帳幕弓形紋(tentedarch,At)：其皮紋崎線中間彎曲較大，呈帳篷狀(圖3b),簡稱帳弓。a.簡單弓形紋 b.帳幕弓形紋圖3指端弓形紋(2)箕形紋(loop,L):俗稱簸箕。崎紋從一側(cè)發(fā)出后斜向上彎曲，再繞回止于同側(cè)，形似簸箕狀，箕頭的側(cè)下方有一個三叉點。①尺箕（ulner1oop,Lu）：箕口朝向手的尺側(cè) （本手小指側(cè)），也稱正箕。左手印出的指紋開口向著左方，右手印出的指紋開口向著右方（圖4a）。②棱箕（radialloop,Lr）：箕口朝向手的梯側(cè)（本手拇指側(cè)），也稱反箕。左手印出的指紋開口向著右方，右手印出的指紋開口向著左方（圖4b）。林正箕（左手） h反箕（左4）圖4指端箕形紋（3）斗形紋（whorl,W）:其最大特點是紋形兩側(cè)有2~3個三叉點，依崎紋走向可分為：①環(huán)形紋（circularwhorl,Wc）:崎紋從腹中心開始，大環(huán)套小環(huán)，層層互不相連，崎線呈同心圓狀，其兩側(cè)各有一個三叉點（圖5a）。②螺形紋（spiralwhorl,Ws）:崎紋從腹中心開始，呈螺旋狀或旋渦狀，向外旋轉(zhuǎn)延長，在其兩側(cè)各有一個三叉點（圖5b）。③囊形紋(pocketwhorl,Wp)：崎線呈囊袋狀或橢圓形結(jié)構(gòu)向外延伸，其兩側(cè)下方各有一個三叉點(圖5c)。④雙箕斗形紋(doubleloopwhorl,Wdl)：指兩個箕形紋從不同方向交織而成的一種紋，包括：絞形斗紋和偏形斗紋。