分子生物學(xué)簡(jiǎn)答題

分子史上的經(jīng)典事件和crick提出的DNA分子生物學(xué)的理論基礎(chǔ)是主要的研究策略有（第一章）答：1958年，克里克提出兩個(gè)學(xué)說，奠定了分子生物學(xué)的理論基礎(chǔ)。第一個(gè)學(xué)說是“序列學(xué)說，它認(rèn)為一段核酸的特殊性完全由它的堿基序列決定，堿基序列編碼一個(gè)特定蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列決定了蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)第二個(gè)學(xué)說“中心法則遺傳信息只能從核酸傳遞給核酸或核酸傳遞給蛋白質(zhì)而不能從蛋白質(zhì)傳遞給蛋白質(zhì)或是從蛋白質(zhì)傳回核酸。 研究策略：體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)合將遺傳和DNA聯(lián)系起來。體內(nèi)（Invivo）實(shí)驗(yàn)：在活體內(nèi)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，包括在培養(yǎng)的細(xì)胞或組織。 體外實(shí)驗(yàn)：在細(xì)胞提取物中，或者是人工合成的細(xì)胞成分混合物中。分子與其他學(xué)科關(guān)系生物學(xué)離不開生物學(xué)技術(shù)答：分子生物學(xué)是由生物化學(xué)、生物物理學(xué)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、以至信息科學(xué)等多學(xué)科相互滲透、綜合融會(huì)而產(chǎn)生并發(fā)展起來的。現(xiàn)代生物學(xué)的發(fā)展越來越多的應(yīng)用分子生物學(xué)的理論和方法進(jìn)行研究。什么是分子生物學(xué)律性和相互關(guān)系的科學(xué)。狹義的概念：從分子水平研究生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能從而闡明生命現(xiàn)象本質(zhì)的科學(xué)，主要指遺傳信息的傳遞（復(fù)制、保持（損傷和修復(fù)、基因的表達(dá)（轉(zhuǎn)錄和翻譯）DNA分子在結(jié)構(gòu)上為什么最適合作為遺傳信息載體（第二章第一節(jié)）化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，DNA復(fù)制時(shí)嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，且為半保留復(fù)制；四種脫氧核糖核苷酸可以組成不同的長(zhǎng)鏈，可以攜帶大量遺傳信息。DNA提取操作要點(diǎn)是（第二章第一節(jié)）提取原則：保持一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性，將其他生物大分子的污染降到最低。沉淀，DNADNA提取和鑒定的相關(guān)操作中需要注意什么DNA要滅活DNA酶，采用的EDTA或者檸檬酸鈉處理，或者用去垢劑SD、蛋白變性劑（酚、氯仿等）℃處理也經(jīng)常用于滅活殘余的DNA除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)時(shí)酚抽提要徹底，上清要去盡，吸取上清時(shí)不要帶有沉淀。簡(jiǎn)述RNA的功能。RNA在功能mRNARNA（核酶）26srRNAP中的RNA組分在體外能對(duì)tRNARNA可以通過多種途徑調(diào)節(jié)基因表達(dá)。調(diào)解途徑包括不同的RNA折疊，核糖開關(guān)，與非編碼RNARNAX獲得高質(zhì)量RNA的操作應(yīng)注意什么RNARNA的活性，防止RNARNARNase菌產(chǎn)生外源性RNA）玻璃和塑料器皿處理。20℃干烤4小時(shí)塑料器皿（離心管、槍頭等DEPC水常溫浸%DEPCDEPC。RNase簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)的功能和活性調(diào)控主要層次。1）構(gòu)成組織與修補(bǔ)組織。蛋白質(zhì)是構(gòu)成組織細(xì)胞的主要材料。2）構(gòu)成酶和某些激素的成分。3增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，構(gòu)成抗體調(diào)節(jié)滲透壓供給熱能。轉(zhuǎn)錄水平翻譯水平翻譯后水平什么是蛋白質(zhì)組學(xué)簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)組學(xué)研究的一般流程。沿著雙向電泳—質(zhì)譜—蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫檢索這一典型的蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)路線。蛋白質(zhì)組學(xué)是應(yīng)用各種技術(shù)手段研究蛋白質(zhì)組的一門新興科學(xué)。整體角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)2.比較以下概念：外顯子和內(nèi)含子(extron)：成熟的mRNA（DNAmRNA列）內(nèi)含子(intron)：在DNA上存在，而在mRNA（或cDNA）中不存在的序列，初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工成成熟mRNA時(shí)被切除的間隔序列。cDNA編碼區(qū)只是TATAboxmRNA初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是由DNAmRNAmRNA就是初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物切去內(nèi)含子對(duì)應(yīng)部分的序列，最終編碼蛋白質(zhì)的序列。如何理解DNA復(fù)制是一個(gè)復(fù)雜的過程與DNA復(fù)制有關(guān)的蛋白質(zhì)（包括酶）主要有哪些，有什么作用DNA分子是反向平行的兩條互補(bǔ)鏈；DNA雙鏈解旋需要能量和；解旋形成的DNA單鏈有形成鏈內(nèi)堿基配對(duì)的趨勢(shì)，需要單鏈結(jié)合蛋白的參與；DNA復(fù)制需要多種酶參與，如：引物酶，DNA聚合酶，解旋酶，拓?fù)洚悩?gòu)酶等；復(fù)制中偶爾出錯(cuò)，需要校正機(jī)制；無論環(huán)狀DNA還是大分子量的DNA對(duì)復(fù)制系統(tǒng)都有物理限制拓?fù)洚悩?gòu)酶：去除DNA解旋時(shí)在復(fù)制叉部分產(chǎn)生的超螺旋解旋酶：解開DNA雙鏈。引物酶：在單鏈DNA處合成引物，形成引物模版接頭。DNA聚合酶：合成DNA，修復(fù)DNA。單鏈結(jié)合蛋白：與單鏈DNA結(jié)合，防止DNA復(fù)性滑動(dòng)夾蛋白：增強(qiáng)DNA聚合酶的延伸能力DNA連接酶：連接相鄰DNA鏈RNA酶：去除RNA引物。DNA復(fù)制的半保留特性和半不連續(xù)特性是怎樣發(fā)現(xiàn)的DNAMatthewMeselsonFranklinW.Stahl的實(shí)驗(yàn)確定了DNA15N15N14NCsClDNADNA260nmOkazakiDNAT43H分離大小不同的DNA，進(jìn)行密度梯度離心，離心管底部和上部均有放射性，表明復(fù)制過程中形成的有大片段也有小片段。證明了復(fù)制的半不連續(xù)性。分子生物學(xué)中的工具酶在使用時(shí)需要注意什么請(qǐng)舉例說明。要注意溫度和緩沖液用量，例如T4DNA1μl,緩沖液用量℃1.線性DNA1：蛋白質(zhì)代替RNA以蛋白質(zhì)代替RNA-O。途經(jīng)：端粒酶：染色體3‘端都突出成為單鏈DNA，可以募集端粒酶進(jìn)行末端復(fù)制。端粒結(jié)合蛋白在線性染色體的復(fù)制和結(jié)構(gòu)的維持上有什么作用‘端；當(dāng)DNAt-loop3’DNA末端向端粒的雙鏈DNADNA成。原核和真核DNA復(fù)制過程有哪些共同點(diǎn)與原核相比，真核DNA復(fù)制有哪些特殊之處。DNARNA引物合成的模板。原核細(xì)胞DNA胞DNADNA的復(fù)制有多個(gè)起點(diǎn)。復(fù)制調(diào)節(jié)中，細(xì)菌是DnaA起始蛋白與DNA的結(jié)合；真核生物是MCM解旋酶和DNADNA修復(fù)的聚合酶為什么比參與DNA維DNA分子的序列在遺傳過程中必需保持高度的精確性和完整性，因此細(xì)胞中含有大量用于修復(fù)DNADNADNADNADNA轉(zhuǎn)錄和DNA的復(fù)制在化學(xué)和酶學(xué)上有哪些相似性，有哪些重要差別參與的酶不同：轉(zhuǎn)錄是RNADNA轉(zhuǎn)錄過程不需要引物，復(fù)制過程需要引物；轉(zhuǎn)錄出來的RNADNA轉(zhuǎn)錄