生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定課件

生物組織中

還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定

講解教師：徐飛霞、張丹娜、輔導(dǎo)教師：劉紫軒、劉凱寧、王云霄、韓文婕一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)，能闡明實(shí)驗(yàn)原理—顏色反應(yīng)；

識(shí)記和區(qū)分用于可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色，掌握鑒定方法，學(xué)會(huì)描述實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。二、實(shí)驗(yàn)原理呈色反應(yīng)脂肪+蘇丹Ⅲ染液橘黃色蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色反應(yīng)

還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀2、蛋白質(zhì)的鑒定原理在堿性溶液（NaOH）中，雙縮脲（H2NCO—NH—CONH2）能與Cu2+作用，可形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物，這一反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因此，蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色（紫色或紫紅色）反應(yīng)。3、脂肪的鑒定原理：蘇丹染料在脂肪中的溶解度大于酒精中的溶解度，用含蘇丹染料的酒精處理含有脂肪的生物組織時(shí)，酒精中的蘇丹進(jìn)入脂肪中，在脂肪中溶解、積累，并吸附在脂肪顆粒結(jié)構(gòu)上，呈現(xiàn)出橘黃色（蘇丹Ⅲ）或紅色（蘇丹Ⅳ）。三、實(shí)驗(yàn)器材

實(shí)驗(yàn)材料：梨、花生、雞蛋清；實(shí)驗(yàn)器械：雙面刀片、試管（最好用刻度試管）、試管夾、試管架、大小燒杯、小量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙、顯微鏡；實(shí)驗(yàn)試劑1．斐林試劑（現(xiàn)配現(xiàn)用---甲液：乙液=1:1）

甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液

乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/mLCuSO4溶液2．雙縮脲試劑

A液：質(zhì)量濃度為0.1g/mLNaOH溶液

B液：質(zhì)量濃度為0.01g/mLCuSO4溶液3．蘇丹Ⅲ染液4．體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液

組織樣液2ml剛配制斐林試劑2ml加熱2min無色藍(lán)色可溶性還原糖的鑒定組織樣液（蛋白稀釋液）2ml雙縮脲試劑A液2ml雙縮脲試劑B液4–5滴無顏色變化紫色蛋白質(zhì)的鑒定五、注意事項(xiàng)

1、注意實(shí)驗(yàn)安全。食用酒精燈時(shí)小心燒到自己或他人；使用雙面刀片時(shí)小心割傷手。2、還原糖鑒定中所用的斐林試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用。3、雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑A（造成堿性的反應(yīng)環(huán)境后)，再加試劑B。試劑B加3—4滴，千萬不要加多。4、制作切片過程中，染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色。觀察時(shí)要找最薄處，最好只有1～2層細(xì)胞。1、可溶性還原糖的鑒定

制備生物組織樣液

（取材，研磨，過濾）

取樣

（取2ml組織樣液注入試管

）

注入試劑

（向試管中加入2ml剛配置的斐林試劑

）

加熱（2分鐘左右），觀察2、蛋白質(zhì)的鑒定

制備組織樣液（蛋白稀釋液）

（2ml

）

注入試劑A（

加入2ml雙縮脲試劑A

）

注入試劑B

（滴入3～4滴雙縮脲試劑B，搖勻）

觀察顏色變化3、脂肪的鑒定

制備生物組織實(shí)驗(yàn)材料

(去種皮，削平面，切片）

染色

（滴2～3滴蘇丹Ⅲ染液染色1分鐘）

去浮色

（濾紙吸去多余染液，在在玻片上滴1～2滴體積分?jǐn)?shù)為50%酒精溶液，洗去浮色

）

制作臨時(shí)裝片，放在顯微鏡下觀察（先低倍鏡后高倍鏡）六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)生物組織中的還原糖六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)生物組織中的蛋白質(zhì)六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果檢測(cè)生物組織中的脂肪10×40×高考鏈接（2010年皖南模擬）下列表示一組有機(jī)物的鑒定試驗(yàn)，表格中的數(shù)字是尚未確定的待檢測(cè)物質(zhì)、試劑和顏色反應(yīng)的結(jié)果，請(qǐng)按數(shù)字順序選出正確的對(duì)應(yīng)內(nèi)容（）D你的困惑謝謝大家雙縮脲反應(yīng)H2NCO—NH—CONH2紫色絡(luò)合物2、雙縮脲試劑A和B在實(shí)驗(yàn)過程中加入的順序是否可以改變？雙縮脲試劑A和B加入的先后順序是可以改變的。但是先加入B以后得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顏色會(huì)比按正常順序做的結(jié)果紫色要淺，這樣會(huì)影響我們的實(shí)驗(yàn)觀察。3