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目錄2016年廈門大學(xué)620分子細(xì)胞生物學(xué)考研真題(回憶版)(含部分答案)2015年廈門大學(xué)620分子細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2014年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2013年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2012年度門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2011年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2010年原門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2009年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2008年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2007年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2006年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2005年廈門大學(xué)480細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2004年廈門大學(xué)480細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2003年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2002年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解2001年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題2000年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題1999年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題1998年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題1997年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題2016年廈門大學(xué)620分子細(xì)胞生物學(xué)考研真題(回憶版)(含部分答案)廈門大學(xué)2016年研究生入學(xué)考試試題科目:分子細(xì)胞生物學(xué)招生專業(yè):生命科學(xué)學(xué)院、海洋與地球?qū)W院、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院、公共衛(wèi)生學(xué)院各相關(guān)專業(yè)一、選擇題(每題2分,共30分).脂蛋白進(jìn)入細(xì)胞的方式是( )A.噬作用B.協(xié)同轉(zhuǎn)運C.主動運輸D.受體介導(dǎo)的胞吞作用.纖毛運動的蛋白質(zhì)是( )A.驅(qū)動蛋白B.動力蛋白C.tau蛋白D.微管結(jié)合蛋白.下列蛋白質(zhì)中,單次跨膜的是()A.帶3蛋白B.血影蛋白C.血型糖蛋白D.細(xì)菌視紫紅質(zhì)蛋白.已知SV40DNA周長1400納米,約5.0kb,若以組蛋白結(jié)合將形成( )個核小體結(jié)構(gòu)34個左右30個左右25個左右D.不確定.轉(zhuǎn)錄因子同DNA結(jié)合主要是靠氨基酸同DNA各個部分相互作用,不包括下列哪種作用力()A.范德華力B.離子鍵C.氫鍵D.共價鍵.迅速判斷細(xì)胞是否死亡的方法是()A.形態(tài)學(xué)改變B.功能狀態(tài)檢測C.繁殖能力測定D.活體染色法.下列屬于凋亡抑制因子的是()bcl-2EB病毒p53基因Caspase3.下列參與啟動真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的蛋白因子是()eIF2EFGIF3RF.葉綠體中的磷酸化發(fā)生在()A.內(nèi)膜B.類囊體C.基質(zhì)D.膜間隙.熒光漂白恢復(fù)技術(shù)主要用于()A.特定蛋白質(zhì)等生物大分子定性定位B.直接觀察細(xì)胞器的動態(tài)變化C.分子運動以及在各種結(jié)構(gòu)上分子動態(tài)變化率D.檢測活細(xì)胞中大分子納米級距離及距離變化,研究分子間相互作用.小鼠骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本一般制備成細(xì)胞的()A.滴片B.切片C.涂片EP片12.下列( )不是整聯(lián)蛋白的功能A.整聯(lián)蛋白在細(xì)胞外基質(zhì)中形成水化凝膠B.整聯(lián)蛋白將細(xì)胞錨定在基質(zhì)上C.整聯(lián)蛋白將信號傳遞到胞外部分D.整聯(lián)蛋白有助于形成特化的細(xì)胞一細(xì)胞黏連結(jié)構(gòu)二、名詞解釋(每題6分,共每題30分).動粒.胞外基質(zhì)三、問答題(每題10分,共30分).質(zhì)膜的通透性有哪些特點?.異染色體有哪些結(jié)構(gòu)特點?四、英譯漢(每題10分,共30分)TheprokaryotictypeIICRISPRICASgenomeeditingtoolshavebeensuccessfullyappliedinmanyorganisms,includingmouseandhumancells.Thesystemofferssequence-specificdirecteditingofDNA;therefore,unlikeRNA-interferencebasedapproaches,thismethodcanachievecompleteloss-of-functionoftheencodedprotein.五、實驗題(每題15分,共30分).免疫共沉淀的實驗分析,給了immuneblot的凝膠結(jié)果圖,出了五道小題,第一個是immuneblot的原理,另外四個是對圖的分析.考免疫放射自顯影和免疫印跡的的凝膠結(jié)果圖的分析,三個小問,第一個忘記,貌似是原理,另外兩道讓根據(jù)圖,畫出,對,就是畫出,要按照題目要求畫出兩個圖部分答案解析一、選擇題(每題2分,共30分)DB【解析】纖毛結(jié)構(gòu)組分中包含微管,動力蛋白是依賴于微管的分子馬達(dá),纖毛的運動離不開動力蛋白。C【解析】帶3蛋白在質(zhì)膜中跨膜12-14次,為多次跨膜蛋白;血影蛋白是外周蛋白,不屬于跨膜蛋白;細(xì)菌視紫紅質(zhì)蛋白為7次跨膜蛋白。C【解析】200bpDNA為纏繞核小體的DNA的平均長度,故可形成25個左右的核小體。D【解析】轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸與DNA結(jié)合作用力主要依靠氫鍵、離子鍵、疏水作用、范德華力等非共價鍵。D【解析】活體染色法比如臺盼藍(lán)染色能迅速判斷細(xì)胞是否死亡,活細(xì)胞也有可能發(fā)生形態(tài)改變,因此不能作為判斷細(xì)胞是否死亡的依據(jù)。A【解析】P53基因是腫瘤抑制基因和促凋亡因子。A【解析】eIF2:eukaryoticinitiationfactor2,真核起始因子;EFG:延伸因子G;IF3:原核起始因子3;RF:蛋白質(zhì)合成釋放因子。B【解析】葉綠體的光合電子傳遞系統(tǒng)和ATP合酶,都位于內(nèi)囊體膜的基質(zhì)側(cè),所以葉綠體中的光合磷酸化發(fā)生在內(nèi)囊體膜上。C【解析】熒光漂白恢復(fù)技術(shù)是使用親脂性或親水性的熒光分子,如熒光素、綠色熒光蛋白等與蛋白或脂質(zhì)耦聯(lián),用于檢測所標(biāo)記分子在活體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部運動及其遷移速率。AA二、名詞解釋(每題10分,共30分).動粒:位于主縊痕染色單體外側(cè)表面,有蛋白質(zhì)構(gòu)成。是紡錘絲微管的附著部位,參與分裂后期染色體向兩級的遷移。.胞外基質(zhì):存在和分布于細(xì)胞外空間的蛋白和多糖纖維網(wǎng)絡(luò)交替結(jié)構(gòu)體系,其來自于細(xì)胞生命代謝的分泌產(chǎn)物,組成細(xì)胞的微環(huán)境。包括氨基聚糖和蛋白聚糖;膠原與彈性蛋白;纖連蛋白與層粘蛋白等成分。三、問答題(每題10分,共30分).答:脂溶性分子和小的不帶電荷的分子能以簡單擴(kuò)散的方式直接通過脂雙層,而大多數(shù)水溶性分子和離子不能通過脂雙層,因此質(zhì)膜對不同物質(zhì)具有選擇性。幾乎所有小的有機(jī)分子和帶電荷的無機(jī)離子的跨膜轉(zhuǎn)運都需要依賴于膜轉(zhuǎn)運蛋白。膜轉(zhuǎn)運蛋白分兩類:①載體蛋白②通道蛋白。兩者以不同的方式辨別溶質(zhì),通道蛋白根據(jù)溶質(zhì)大小和電荷進(jìn)行辨別;載體蛋白只容許與載體蛋白上結(jié)合部位相適合的溶質(zhì)分子通過,載體蛋白每次轉(zhuǎn)運都發(fā)生自身構(gòu)象的轉(zhuǎn)變。物質(zhì)的跨膜運輸可分為簡單擴(kuò)散、協(xié)助擴(kuò)散和主動運輸,各自特點如下:(1)簡單擴(kuò)散:順物質(zhì)電化學(xué)梯度,不需要膜運輸?shù)鞍?,利用自身的電化學(xué)梯度勢能,不耗細(xì)胞代謝能:(2)協(xié)助擴(kuò)散:順物質(zhì)電化學(xué)梯度,需要通道蛋白或載體蛋白,利用自身的電化學(xué)梯度勢能,不耗細(xì)胞代謝能:(3)主動運輸:逆物質(zhì)電化學(xué)梯度,需要載體蛋白,消耗細(xì)胞代謝能。.答:異染色體纖維折疊壓縮程度高,處于聚縮狀態(tài),用堿性染料染色時著色較深,又分結(jié)構(gòu)異染色體或組成型異染色體和兼性異染色體。(1)結(jié)構(gòu)異染色體特點:①在中期染色體上多定位于著絲粒區(qū)、端粒、次縊痕及染色體臂的某些節(jié)段;②由相對簡單、高度重復(fù)的DNA序列構(gòu)成,如衛(wèi)星DNA;③具有顯著的遺傳惰性,不轉(zhuǎn)錄也不編碼蛋白質(zhì);④在復(fù)制行為上與常染色體相比表現(xiàn)為晚復(fù)制早聚縮:⑤在功能上參與染色體高級結(jié)構(gòu)的形成,導(dǎo)致染色體區(qū)間性,作為核DNA的轉(zhuǎn)座元件,引起遺傳變異。(2)兼性異染色體特點:在某些細(xì)胞類型或一定的發(fā)育階段,原來的常染色體聚縮,并喪失基因轉(zhuǎn)錄活性,變?yōu)楫惾旧w,如X染色體隨機(jī)失活;異染色體化可能是關(guān)閉基因活性的一種途徑。2015年廈門大學(xué)620分子細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解廈門大學(xué)2015年招收攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)考試分子細(xì)胞生物學(xué)一、選擇題.病毒勺細(xì)胞在起源上的關(guān)系,下面()的觀點越來越有說服力A.生物大分子一病母一細(xì)胞 B.生物大分子一細(xì)胞一病毒C.細(xì)胞一生物大分子一病毒 D都不對.己克隆人的rDNA,用()確定rDXA分布在人的哪兒條染色體上A.單克隆抗體技術(shù) B.免疫熒光技術(shù)C.免疫電鏡技術(shù) D.原位雜交技術(shù).關(guān)于彈性蛋白的描述,()是對的A.糖基化、高度不溶、很少羥基化、富含脯雙酸和甘氮酸B.非糖基化、高度不溶、羥基化、富含脯鋌酸和甘氨酸&非糖基化、可溶、很少羥基化、富含肺氨酸和甘氨酸口.非樁基化、高度不溶、很少羥基化、富含肺氨酸和tl?氨酸.乙酰膽堿受體屬「()系統(tǒng)A.通道耦聯(lián)受體B.G蛋白耦聯(lián)受體C.陋崩聯(lián)受體D.都不對皿內(nèi)質(zhì)網(wǎng)還含有(),可以識別不正確折費的蛋白或未裝配好的蛋白亞基,并促進(jìn)它們履新折拄和裝配A.DpB.BipC.SRPD.Hsp90.染色體骨架的主要成分是()A.綱蛋白 氏非組蛋白 C.DNAD.RNA.溶酶體內(nèi)所含有的萌為()A.堿性水解超 B.中性水解酶C.酸性水解陋D.乳化磷酸化陶TOC\o"1-5"\h\zX.用特異性藥物松弛素BHf以阻斷()的形成丸胞飲泡B.吞噬泡C.分泌小泡D.包被小泡9.白絲分裂中期最主要的特征是() \A.染色體排列在赤道面I: \.紡錘體形成 \C.核膜破裂D.姐妹染色單體各移向?極10.下列闕下組織特異性基因的是()A.微管蛋白基因B.糖蜉解朝系基囚C核檎體蛋白落閃 ,D.就昌素基因ILHaylick界限是指()A.細(xì)胞最大分裂次數(shù)民細(xì)胞最大分裂速度C.細(xì)胞最小分裂次數(shù)D.細(xì)胞最適分裂次數(shù)!2.細(xì)胞膜中的融與脂或蛋白質(zhì)結(jié)合通過()A.共價鍵也離子鍵C.氣鍵I).疏水鍵2014年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解機(jī)密*啟用前和使用過程中廈門大學(xué)2014年招收攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)考試試題科目代碼:620科目名稱:細(xì)胞生物學(xué)招生專業(yè):生命科學(xué)學(xué)院、海洋與地球?qū)W院、化學(xué)系、醫(yī)學(xué)院、藥學(xué)院、公共衛(wèi)生學(xué)院各相關(guān)專業(yè)考生須知:答題書寫須使用黑(藍(lán))色字跡鋼筆、簽字筆或圓珠筆:各類答案(包括選擇題、填空題)均必須寫在答題紙上規(guī)定處,不得直接再試卷(試題紙)或草稿紙上作答:凡未按上述規(guī)定作答均不予評閱、判分,后果考生自負(fù)。溫馨提示:本套試卷的最后一道題目(30分)有一定難度,請務(wù)必計劃好時間,以免沒有足夠時間做答,留下遺憾。一、名詞解釋(5小題,每小題6分,共30分).失巢凋亡(Anoikis).信號序列(Signalsequence).巴氏小體(Barrbody).表觀遺傳學(xué)改變(Epigeneticchange).核定位序列(Nuclearlocalizationsequence,NLS)二、是非判斷題(20小題,每題1分,共20分。請將答案按題目序號寫在答題紙上,答“是”寫答“非”寫"x”).支原體是最小最簡單的細(xì)胞,很多支原體能寄生在細(xì)胞內(nèi)繁殖。在細(xì)胞培養(yǎng)中可以通過細(xì)菌濾器過濾的辦法去除支原體污染。.Hela細(xì)胞系,BHK21細(xì)胞系與CHO細(xì)胞系是常用的永生細(xì)胞系,科學(xué)家們利用這些常用的細(xì)胞系做了大量卓有成效的研究工作。.熒光漂白技術(shù)是用來檢測活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞兩種蛋白質(zhì)分子是否直接相互作用的重要手段;熒光共振能量轉(zhuǎn)移則用于檢測活細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部的運動及其遷移率,這兩種技術(shù)都需要激光共聚焦顯微鏡。.水分子借助脂膜上的載體蛋白——水孔蛋白實現(xiàn)快速的擴(kuò)膜轉(zhuǎn)運。.吞噬作用發(fā)生于一些特化的吞噬細(xì)胞如巨噬細(xì)胞,胞飲作用幾乎發(fā)生于所有類型的真核細(xì)胞,對細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)只起到下調(diào)的作用。.輔酶或輔基與酶的共價結(jié)合是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中發(fā)生的蛋白質(zhì)修飾的類型之一。.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)重要的生物大分子,如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類的合成基地,因而同一細(xì)胞在不同的發(fā)育階段和不同的生理狀態(tài)下,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)和功能基本不變。.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中糖基化及寡糖加工有關(guān)的酶都是整合膜蛋白,其中O-連接的糖基化反應(yīng)起始發(fā)生在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),N-連接的糖基化反應(yīng)則在高爾基體中進(jìn)行。.細(xì)胞內(nèi)膜泡轉(zhuǎn)運需要多種轉(zhuǎn)運膜泡參與,其中COPI包被膜泡介導(dǎo)的是糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體順面膜囊的運輸,COPI1包被膜泡介導(dǎo)的是高爾基體順面膜囊到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的逆向運輸。.預(yù)分化形成神經(jīng)元的細(xì)胞通過膜結(jié)合的抑制性信號分子(Delta)與其相接觸的周邊細(xì)胞的膜受體(Notch)相互作用,阻止后者也分化成神經(jīng)元,這種通訊方式屬于接觸依賴性通訊。.在體外組裝的實驗中,可以檢測到在同一根微絲或微管的正極端因正組裝延長,而其負(fù)極端則因為去組裝而縮短,這一現(xiàn)象稱為“踏車行為.多囊腎的發(fā)病原因是定位于腎臟上皮細(xì)胞的原生纖毛的一類蛋白質(zhì)缺失,使得細(xì)胞內(nèi)的鈣信號通路無法啟動導(dǎo)致的。.蛋白質(zhì)編碼序列僅占人類細(xì)胞基因組中很小的比例,不到2%。.染色質(zhì)的乙?;癄顟B(tài)是一種動態(tài)過程。細(xì)胞內(nèi)既存在組蛋白乙?;拿讣唇M蛋白乙?;福泊嬖谑菇M蛋白去乙?;拿讣唇M蛋白去乙酰化酶。.真核細(xì)胞的核糖體附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜表面,稱為附著核糖體,它以內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形成復(fù)合細(xì)胞器,即糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。原核細(xì)胞的核糖體僅僅分布在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,稱為游離核糖體。.早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞周期和體細(xì)胞周期相比,周期時間大大縮短,因此其細(xì)胞周期的基本調(diào)控因子和一般體細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)周期是不一致的。.p53基因、Rb基因和Src基因突變導(dǎo)致了視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤。.性別由性染色體決定,環(huán)境對性別決定沒有影響。.僅有胞外信號分子和細(xì)胞間的相互作用可以影響細(xì)胞分化。.轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測定法可用來觀察單個凋亡細(xì)胞核或凋亡小體。三、選擇題(每題可能有多個答案,多選或漏選皆不得分;15小題,每題2分,共30分)1.下列蛋白中屬于馬達(dá)蛋白(motorprotein)的有( )TauActinmyosinkinesin.所有膜蛋白都具有方向性,其方向性在什么部位中確定()A.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)B.高爾基體C.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D.質(zhì)膜.線粒體基質(zhì)的標(biāo)志酶為( )A,單胺氧化酶B.細(xì)胞色素氧化酶C.腺昔酸激酶D.蘋果酸脫氫酶.間隙連接的通透性受下列哪些因素的調(diào)節(jié)()Ca離子濃度Na離子濃度pH值D.溫度.燈刷染色體存在于下列哪些物種()A.草魚卵母細(xì)胞B.雌蚊唾液腺細(xì)胞C.鱷魚卵母細(xì)胞D.爪蟾卵母細(xì)胞.細(xì)胞有絲分裂中紡錘體的主要作用為()A.使染色體排列在赤道面上B.使姐妹染色單體在后期時分離C.使染色體進(jìn)入分裂期后發(fā)生凝集D.使染色體進(jìn)入分裂末期后去凝集.用兩種不同的熒光素分子分別標(biāo)記兩個細(xì)胞質(zhì)膜中的脂類分子,再將兩個細(xì)胞融合,經(jīng)過一定時間后,會發(fā)現(xiàn)兩種熒光均勻分布在細(xì)胞質(zhì)膜上,這表明了組成質(zhì)膜的脂分子()A.在雙層之間做翻轉(zhuǎn)運動.做自旋運動C.尾部做搖擺運動D.沿膜平面做側(cè)向運動.質(zhì)膜中磷脂分子的分布是高度不對稱的,在紅細(xì)胞中()A.外層膜含磷脂酰乙醇胺較多,而內(nèi)層膜則含卵磷脂較多B.外層膜含磷酯酰絲氨酸較多,而內(nèi)層膜則含鞘磷脂較多C.外層膜含卵磷脂較多,而內(nèi)層膜則含磷脂酰乙醇胺較多D.外層膜含鞘磷脂較多,而內(nèi)層膜則含磷酯酰絲氨酸較多.流式細(xì)胞技術(shù)可用于測定( )A.細(xì)胞的大小和特定細(xì)胞類型的數(shù)量B.分選出特定細(xì)胞群C.細(xì)胞中DNA、RNA或蛋白質(zhì)的含量D.以上三種功能都有.肌動蛋白具有下列哪些核甘酸的結(jié)合位點()GDPADPGTPATP.核小體包含有( )H2A,H2B,H3,H4各兩個分子H2A,H2B各4個分子H3,H4各4個分子H2A,H2B,H3,H4各1個分子,以及4個非組蛋白分子.下列基因中是癌基因的有( )RbMycRasSrc.從體細(xì)胞克隆高等哺乳動物的成功說明了()A.體細(xì)胞的全能性B.體細(xì)胞去分化還原性C.體細(xì)胞核的全能性D.體細(xì)胞核的去分化還原性.同一系統(tǒng)中不同細(xì)胞,其細(xì)胞周期長短有差異,這種差異主要發(fā)生在()M期S期G1期G2期15.下列物質(zhì)中,抑制微管聚合的有()A.秋水仙素B.紫杉醇C.鬼筆環(huán)肽D.長春堿四、問答題(5小題,每題8分,共40分).為什么說紅細(xì)胞是研究膜結(jié)構(gòu)的最好材料?.簡述細(xì)胞信號分子的類型及特點?.Caspase的特點。.真核基因表達(dá)調(diào)控的環(huán)節(jié)有哪些,各有何作用?.簡述信號肽假說的內(nèi)容。五、活學(xué)活用:研究論文研讀與實驗分析(請用中文作答):(共計6小題,每題5分,共20分)(溫馨提示:科技文獻(xiàn)閱讀是伴隨著科學(xué)家的整個研究工作的,在文獻(xiàn)閱讀中培養(yǎng)起來的分析、總結(jié)、思考、質(zhì)疑和對科學(xué)思維的能力,對于科學(xué)研究工作的順利開展一定會有啟發(fā)、幫助和促進(jìn)。在平時注意養(yǎng)成廣泛閱讀第一手的研究論文的習(xí)慣,這將對你期盼中研究生期間的科研工作大有裨益!如果你在本科學(xué)習(xí)階段已經(jīng)認(rèn)真地研讀過超過10篇細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的研究論文,那么下列題目對于你來說應(yīng)該是可以輕松愉快地應(yīng)對的。)下面內(nèi)容摘自于發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊“Genes&Development”2008年9月的一期中的論文:“Anewmechanismcontrollingkinetochore-microtoubuleinteractionsrevealedbycomparisonoftwodynein-targetingcomponents:SPDL-1andRod/Zwilch/Zw10complex.^^該論文的研究背景介紹(Introduction):在細(xì)胞分裂過程中,染色體的分離要求紡錘體微管與動粒體的穩(wěn)定連接。在高等真核生物中,動粒體(kinetochore)與紡錘體微管的聯(lián)系發(fā)生在前期末核膜被裂后。真核生物進(jìn)化出一套完備的紡錘體檢驗點機(jī)制來確保在這一環(huán)節(jié),沒有建立正確動粒體-紡錘體微管連接的細(xì)胞不能進(jìn)入細(xì)胞周期的下一時期。在本篇論文中,科學(xué)家利用秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditiselegans,為一種模式生物)為實驗材料,通過分析Rod/Zwilch/ZwlO(RZZ)complex和coiled-coilproteinSPDL-1的特性,研究了能夠瞬時定位在動粒體上的dynein在染色體的分離過程中的功能。該論文的結(jié)果與分析(ResultsandAnalyses):請用中文簡要回答下列問題:(1)在A圖中,GFP:histoneH2B和GFPytubulin分別標(biāo)記的是細(xì)胞內(nèi)的什么結(jié)構(gòu)?為什么?(5分)(2)本實驗中采用的RNAi技術(shù)的目的是什么?請簡要說明其作用原理。(5分)(3)B圖顯示的實驗結(jié)果能夠說什么?為什么要檢測beta-actin(p-actin)?(5分)(4)請根據(jù)C圖顯示的結(jié)果,概括一下在整個細(xì)胞周期過程中SPDL-1蛋白的細(xì)胞內(nèi)定位特點。(5分)
請用中文簡要回答下列問題:(5)A圖顯示的實驗結(jié)果能夠說明什么?請根據(jù)A圖顯示的immunoblot/Westemblot結(jié)果,粗略估計一下在線蟲細(xì)胞的裂解液中,有大約百分之多少的SPDL-1蛋白能夠與ZWL-1蛋白結(jié)合?(5分)(6)根據(jù)B圖顯示的結(jié)果,可以得出什么結(jié)論?其他研究者已有的研究結(jié)果顯示,RZZ(Rod/Zwilch/Zw10)complex中的3種蛋白之間存在緊密相互作用,并且在細(xì)胞內(nèi)定位是相互依賴的。那么,如果在線蟲的細(xì)胞中做ZwlO的RNAi的話,請預(yù)測對于SPDL-1蛋白定位的影響?(5分)2014年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解一、名詞解釋(5小題,每小題6分,共30分).失巢凋亡(Anoikis)答:失巢凋亡是一種特殊的細(xì)胞程序死亡,是由于細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)或相鄰細(xì)胞脫離接觸而誘發(fā)的。失巢凋亡作為一種特殊的程序化細(xì)胞死亡形式,在機(jī)體發(fā)育、組織自身平衡、疾病發(fā)生和腫瘤轉(zhuǎn)移中起重要作用。.信號序列(signalsequence)答:信號序列是指引導(dǎo)蛋白質(zhì)定向轉(zhuǎn)移的線性序列,通常有16?26個氨基酸殘基,對所引導(dǎo)的蛋白質(zhì)沒有特異性要求。信號序列在N末端附近除有堿性氨基酸外,還主要含疏水性氨基酸,特別是在其中部沒有帶電荷的氨基酸。在合成過程中前體物質(zhì)多肽靠此序列與膜結(jié)合,接著形成膜結(jié)合型多核糖體,多肽鏈與其合成相平行地通過膜,并在通過膜時,由在存在膜上的肽酶將信號序列切斷而除掉。.巴氏小體(Barrbody)答:在哺乳動物體細(xì)胞核中,除一條X染色體外,其余的X染色體常濃縮成染色較深的染色質(zhì)體,此即為巴氏小體。又稱X小體,通常位于間期核膜邊緣,巴氏小體就是性染色體異固縮(細(xì)胞分裂周期中與大部分染色質(zhì)不同步的螺旋化現(xiàn)象)的結(jié)果。在人類,男性細(xì)胞核中很少或根本沒有巴氏小體,而女性則有1個。.表觀遺傳學(xué)改變(Epigeneticchange)答:表觀遺傳學(xué)(epigenetics)則是指非DNA序列改變所引起的、可遺傳的基因表達(dá)水平的變化,是受某種機(jī)制調(diào)控的基因表達(dá)模式改變。即基因的核昔酸序列沒有發(fā)生變化,而是通過DNA甲基化、組蛋白的乙?;图谆?、染色質(zhì)構(gòu)型變化等導(dǎo)致了基本表達(dá)水平的改變。表觀遺傳學(xué)是機(jī)體調(diào)控基因表達(dá)的另一種途徑。研究顯示,表觀遺傳學(xué)的改變特別是DNA甲基化水平的異常幾乎參與了各種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。.核定位序列(Nuclearlocalizationsequence,NLS)答:核定位序列是蛋白質(zhì)的一個結(jié)構(gòu)域,通常為一短的氨基酸序列,它能與入核載體相互作用,使蛋白能被運進(jìn)細(xì)胞核。親核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列,這些內(nèi)含子的特殊短肽保證了整個蛋白質(zhì)能夠通過核孔復(fù)合體被轉(zhuǎn)運到細(xì)胞核內(nèi)。二、是非判斷題(20小題,每題1分,共20分。).支原體是最小最簡單的細(xì)胞,很多支原體能寄生在細(xì)胞內(nèi)繁殖。在細(xì)胞培養(yǎng)中可以通過細(xì)菌濾器過濾的辦法去除支原體污染?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】支原體是目前所知最小最簡單的細(xì)胞,很多支原體能寄生在細(xì)胞內(nèi),實驗室很多細(xì)胞系都有支原體污染,無法通過細(xì)菌濾器過濾的方法去除支原體污染。.Hela細(xì)胞系,BHK21細(xì)胞系與CHO細(xì)胞系是常用的永生細(xì)胞系,科學(xué)家們利用這些常用的細(xì)胞系做了大量卓有成效的研究工作。【答案】對查看答案.熒光漂白技術(shù)是用來檢測活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞兩種蛋白質(zhì)分子是否直接相互作用的重要手段;熒光共振能量轉(zhuǎn)移則用于檢測活細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部的運動及其遷移率,這兩種技術(shù)都需要激光共聚焦顯微鏡?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】熒光共振能量轉(zhuǎn)移是用來檢測活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞兩種蛋白質(zhì)分子是否直接相互作用的重要手段;熒光漂白技術(shù)則用于檢測活細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部的運動及其遷移率,這兩種技術(shù)都需要激光共聚焦顯微鏡。.水分子借助脂膜上的載體蛋白——水孔蛋白實現(xiàn)快速的擴(kuò)膜轉(zhuǎn)運?!敬鸢浮垮e查看答案.吞噬作用發(fā)生于一些特化的吞噬細(xì)胞如巨噬細(xì)胞,胞飲作用幾乎發(fā)生于所有類型的真核細(xì)胞,對細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)只起到下調(diào)的作用。【答案】對查看答案.輔酶或輔基與酶的共價結(jié)合是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中發(fā)生的蛋白質(zhì)修飾的類型之一?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】輔酶與酶蛋白結(jié)合疏松,可以用透析方法除去;輔基與酶蛋白結(jié)合緊密,不能通過透析將其除去,所以輔酶肯定不與酶共價結(jié)合。蛋白質(zhì)的修飾類型有甲基化、乙?;⒎刍?、磷酸化等。.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)重要的生物大分子,如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類的合成基地,因而同一細(xì)胞在不同的發(fā)育階段和不同的生理狀態(tài)下,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)和功能基本不變。【答案】錯查看答案【解析】在不同類型的細(xì)胞中,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的數(shù)量、類型與形態(tài)差異很大,同一細(xì)胞在不同發(fā)育階段和不同的生理狀態(tài)下,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)與功能也隨之顯著變化。.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中糖基化及寡糖加工有關(guān)的酶都是整合膜蛋白,其中O-連接的糖基化反應(yīng)起始發(fā)生在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),N-連接的糖基化反應(yīng)則在高爾基體中進(jìn)行?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】O-連接的糖基化反應(yīng)發(fā)生在高爾基體,N-連接的糖基化反應(yīng)則在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中進(jìn)行。.細(xì)胞內(nèi)膜泡轉(zhuǎn)運需要多種轉(zhuǎn)運膜泡參與,其中COPI包被膜泡介導(dǎo)的是糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體順面膜囊的運輸,COPII包被膜泡介導(dǎo)的是高爾基體順面膜囊到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的逆向運輸?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】COPn包被膜泡介導(dǎo)的是糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體順面膜囊的運輸,COPI包被膜泡介導(dǎo)的是高爾基體順面膜囊到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的逆向運輸。.預(yù)分化形成神經(jīng)元的細(xì)胞通過膜結(jié)合的抑制性信號分子(Delta)與其相接觸的周邊細(xì)胞的膜受體(Notch)相互作用,阻止后者也分化成神經(jīng)元,這種通訊方式屬于接觸依賴性通訊?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢?在體外組裝的實驗中,可以檢測到在同一根微絲或微管的正極端因正組裝延長,而其負(fù)極端則因為去組裝而縮短,這一現(xiàn)象稱為“踏車行為【答案】對查看答案.多囊腎的發(fā)病原因是定位于腎臟上皮細(xì)胞的原生纖毛的一類蛋白質(zhì)缺失,使得細(xì)胞內(nèi)的鈣信號通路無法啟動導(dǎo)致的?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢?蛋白質(zhì)編碼序列僅占人類細(xì)胞基因組中很小的比例,不到2%?!究键c】蛋白質(zhì)編碼序列僅占人類細(xì)胞基因組中很小的比例,約在1.8%?1.9%之間?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢?染色質(zhì)的乙?;癄顟B(tài)是一種動態(tài)過程。細(xì)胞內(nèi)既存在組蛋白乙?;拿讣唇M蛋白乙?;?,也存在使組蛋白去乙?;拿讣唇M蛋白去乙?;??!敬鸢浮繉Σ榭创鸢?真核細(xì)胞的核糖體附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜表面,稱為附著核糖體,它以內(nèi)質(zhì)網(wǎng)形成復(fù)合細(xì)胞器,即糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng).原核細(xì)胞的核糖體僅僅分布在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,稱為游離核糖體?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢?早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞周期和體細(xì)胞周期相比,周期時間大大縮短,因此其細(xì)胞周期的基本調(diào)控因子和一般體細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)周期是不一致的?!究键c】早期胚胎細(xì)胞細(xì)胞周期時間縮短是由于Gi和G2期較短,這是因為相關(guān)蛋白及mRNA在卵細(xì)胞時已合成,但其基本調(diào)控因子與一般體細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)周期相同。【答案】錯查看答案.p53基因、Rb基因和Src基因突變導(dǎo)致了視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢浮窘馕觥縫53和Rb基因是抑癌基因,Src是癌基因,視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤是由于Rb基因發(fā)生突變失活而導(dǎo)致的。.性別由性染色體決定,環(huán)境對性別決定沒有影響。【答案】錯查看答案【解析】有些爬行類的性別是由受精卵發(fā)育時的溫度高低決定的。.僅有胞外信號分子和細(xì)胞間的相互作用可以影響細(xì)胞分化?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】影響細(xì)胞分化的因素也包括遺傳信息的參與調(diào)控。.轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記測定法可用來觀察單個凋亡細(xì)胞核或凋亡小體。【答案】對查看答案三、選擇題(每題可能有多個答案,多選或漏選皆不得分;15小題,每題2分,共30分)1.下列蛋白中屬于馬達(dá)蛋白(motorprotein)的有( )TauActinmyosinkinesin【答案】CD查看答案【解析】馬達(dá)蛋白包括與微絲結(jié)合的肌球蛋白(myosin)和與微管結(jié)合的驅(qū)動蛋白(kinesin)和動力蛋白(kinesin),而Tau是微管結(jié)合蛋白,Actin是肌動蛋白單體。.所有膜蛋白都具有方向性,其方向性在什么部位中確定( )A.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)B.高爾基體C.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D.質(zhì)膜【答案】C查看答案【解析】膜蛋白的方向性在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成時就已經(jīng)確定。.線粒體基質(zhì)的標(biāo)志酶為( )A,單胺氧化酶B.細(xì)胞色素氧化酶C.腺甘酸激酶D.蘋果酸脫氫酶【答案】D查看答案【解析】單胺氧化酶是線粒體外膜的標(biāo)志酶,細(xì)胞色素氧化酶是線粒體內(nèi)膜的標(biāo)志酶,腺背酸激酶是膜間隙的標(biāo)志酶,蘋果酸脫氫酶是膜基質(zhì)的標(biāo)志酶。.間隙連接的通透性受下列哪些因素的調(diào)節(jié)()Ca離子濃度Na離子濃度pH值D.溫度【答案】AC查看答案【解析】鈣離子、pH及胞外化學(xué)信號(激素)對間隙連接的通透性起著調(diào)節(jié)作用。.燈刷染色體存在于下列哪些物種( )A.草魚卵母細(xì)胞B.雌蚊唾液腺細(xì)胞C.鱷魚卵母細(xì)胞D.爪蟾卵母細(xì)胞【答案】ACD查看答案【解析】燈刷染色體普遍存在于動物界的卵母細(xì)胞中,其中以兩棲類卵母細(xì)胞的燈刷染色體最典型。雌蚊唾液腺細(xì)胞中存在多線染色體。.細(xì)胞有絲分裂中紡錘體的主要作用為( )A.使染色體排列在赤道面上B.使姐妹染色單體在后期時分離C.使染色體進(jìn)入分裂期后發(fā)生凝集D.使染色體進(jìn)入分裂末期后去凝集【答案】A查看答案【解析】紡錘體主要確保細(xì)胞分裂過程中的對稱性和雙極性。.用兩種不同的熒光素分子分別標(biāo)記兩個細(xì)胞質(zhì)膜中的脂類分子,再將兩個細(xì)胞融合,經(jīng)過一定時間后,會發(fā)現(xiàn)兩種熒光均勻分布在細(xì)胞質(zhì)膜上,這表明了組成質(zhì)膜的脂分子()A.在雙層之間做翻轉(zhuǎn)運動.做自旋運動C.尾部做搖擺運動D.沿膜平面做側(cè)向運動【答案】D查看答案【解析】熒光抗體標(biāo)記實驗說明組成質(zhì)膜的脂分子沿膜平面做側(cè)向運動。.質(zhì)膜中磷脂分子的分布是高度不對稱的,在紅細(xì)胞中( )A.外層膜含磷脂酰乙醇胺較多,而內(nèi)層膜則含卵磷脂較多B.外層膜含磷酯酰絲氨酸較多,而內(nèi)層膜則含鞘磷脂較多C.外層膜含卵磷脂較多,而內(nèi)層膜則含磷脂酰乙醇胺較多D.外層膜含鞘磷脂較多,而內(nèi)層膜則含磷酯酰絲氨酸較多【答案】CD查看答案【解析】鞘磷脂和卵磷脂分布在質(zhì)膜外小葉,磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和磷酯酰絲氨酸分布在質(zhì)膜內(nèi)小葉。.流式細(xì)胞技術(shù)可用于測定( )A,細(xì)胞的大小和特定細(xì)胞類型的數(shù)量B.分選出特定細(xì)胞群C.細(xì)胞中DNA、RNA或蛋白質(zhì)的含量D.以上三種功能都有【答案】D查看答案【解析】流式細(xì)胞技術(shù)可用來測定細(xì)胞的大小和特定細(xì)胞類型的數(shù)量、分選出特定細(xì)胞群及檢測細(xì)胞中DNA、RNA或某種蛋白質(zhì)的含量。.肌動蛋白具有下列哪些核甘酸的結(jié)合位點( )GDPADPGTPATP【答案】BD查看答案【解析】肌動蛋白結(jié)構(gòu)的裂縫內(nèi)部有一個核甘酸(ATP或ADP)和一個二價陽離子(鎂離子或鈣離子)的結(jié)合位點。.核小體包含有( )H2A,H2B,H3,H4各兩個分子H2A,H2B各4個分子H3,H4各4個分子H2A,H2B,H3,H4各1個分子,以及4個非組蛋白分子【答案】A查看答案【解析】組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的核心顆粒,由4個異二聚體組成,包括兩個H2AH2B和兩個H3-H4。.下列基因中是癌基因的有( )RbMycRasSrc【答案】BCD查看答案【解析】Rb是抑癌基因,Myc、Ras>Src為癌基因。.從體細(xì)胞克隆高等哺乳動物的成功說明了( )A.體細(xì)胞的全能性B.體細(xì)胞去分化還原性C.體細(xì)胞核的全能性D.體細(xì)胞核的去分化還原性【答案】C查看答案【解析】高等哺乳細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性,卵細(xì)胞具有去分化還原性。.同一系統(tǒng)中不同細(xì)胞,其細(xì)胞周期長短有差異,這種差異主要發(fā)生在( )M期S期Gi期G2期【答案】C查看答案【解析】細(xì)胞周期長短的差異主要發(fā)生在Gi期。.下列物質(zhì)中,抑制微管聚合的有( )A.秋水仙素B.紫杉醇C.鬼筆環(huán)肽D.長春堿【答案】AD查看答案【解析】秋水仙素和長春堿都抑制微管的裝配,紫杉醇影響微管的去組裝,鬼筆環(huán)肽阻止微絲解聚。四、問答題(5小題,每題8分,共40分).為什么說紅細(xì)胞是研究膜結(jié)構(gòu)的最好材料?答:紅細(xì)胞是研究膜結(jié)構(gòu)的最好材料的原因是:(1)數(shù)量大,取材容易,并極少有其他的細(xì)胞污染。(2)成熟的哺乳動物的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和線粒體等膜相細(xì)胞器,細(xì)胞質(zhì)膜是其唯一的膜結(jié)構(gòu),所以分離后不存在其他膜污染的問題。(3)紅細(xì)胞血影將紅細(xì)胞分離后放入低滲溶液中,水很快滲入到細(xì)胞內(nèi)部,使紅細(xì)胞膨脹、破裂,從而釋放出血紅蛋白(是紅細(xì)胞中惟一一種非膜蛋白),此時的紅細(xì)胞就變成了沒有內(nèi)容物的空殼,由于紅細(xì)胞膜具有很大的變形性、柔韌性和可塑性,當(dāng)紅細(xì)胞的內(nèi)容物滲漏之后,它的膜可以重新封閉起來,此時的紅細(xì)胞被稱為血影(ghost)。用血影研究膜結(jié)構(gòu)十分方便。.簡述細(xì)胞信號分子的類型及特點?答:細(xì)胞信號分子的類型包括:短肽、蛋白質(zhì)、氣體分子(NO、CO)以及氨基酸、核甘酸、脂類的膽固醇衍生物等,其共同特點是:①特異性,只能與特定的受體結(jié)合:②高效性,幾個分子即可發(fā)生明顯的生物學(xué)效應(yīng),這一特性有賴于細(xì)胞的信號逐級放大系統(tǒng);③可被滅活,完成信息傳遞后可被降解或修飾而失去活性,保證信息傳遞的完整性和細(xì)胞免于疲勞。.Caspase的特點。答:Caspase是一種具有特異天冬氨酸的半胱氨酸蛋白醐,是一組在細(xì)胞凋亡過程中起著關(guān)鍵作用的酶,且具有以下特點:⑴和ICE即caspase-1有同源性;(2)以半胱氨酸作為裂解底物的親核基團(tuán);(3)對催化底物的天冬氨酸有特異性,即催化時底物的天冬氨酸瑾基端肽鍵斷裂;(4)有高度保守的QACXG(X為R、Q或G)五肽序列;(5)通常以無活性的酶原形式存在,須通過水解其氨基端一段序列而激活;(6)活化的Caspase可水解底物,并通過級聯(lián)放大誘發(fā)凋亡;(7)通常具有抑制劑,防止Caspase酶原被偶然激活而對正常細(xì)胞造成損傷。目前已發(fā)現(xiàn)的Caspase已有14種,對于每個該家族成員按被發(fā)現(xiàn)的先后,以阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)記,如:Caspase-1Caspase-2?.真核基因表達(dá)調(diào)控的環(huán)節(jié)有哪些,各有何作用?答:真核生物的基因表達(dá)調(diào)控很復(fù)雜,涉及的層次也很多,包括轉(zhuǎn)錄前調(diào)控,轉(zhuǎn)錄過程中的調(diào)控,轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,翻譯前調(diào)控,翻譯調(diào)控,翻譯后調(diào)控,還有細(xì)胞水平的調(diào)控等。具體為:(1)轉(zhuǎn)錄前:包括染色體的解聚成染色體,組蛋白的調(diào)控,也就是染色體改組。(2)轉(zhuǎn)錄中:順式調(diào)控元件與反式作用因子的調(diào)控。(3)轉(zhuǎn)錄后:mRNA的剪接,拼接,特有堿基的修飾等等。(4)翻譯前:mRNA的降解機(jī)制調(diào)控等。后面還涉及到蛋白的加工,修飾,運輸,折疊,定位,穩(wěn)定性及降解等。.簡述信號肽假說的內(nèi)容。答:信號肽假說是由Blobel和Sabatini提出的,根據(jù)這一假說,在細(xì)胞質(zhì)中,編碼分泌蛋白的信使核糖核酸(mRNA)與游離的核糖體大小亞基結(jié)合而形成翻譯復(fù)合體。從起始密碼子開始,首先翻譯產(chǎn)生信號肽,當(dāng)翻譯進(jìn)行到大約50?70個氨基酸之后,信號肽開始從核糖體的大亞基上露出,露出的信號肽立即被細(xì)胞質(zhì)中的信號肽識別體(SRP)識別并與之相結(jié)合。此時,翻譯暫時停止,SRP牽引這條帶核糖體的mRNA到達(dá)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的表面,并與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)表面上的信號肽識別體受體(或稱停泊蛋白)作用,這時,暫時被抑制的翻譯過程恢復(fù)進(jìn)行,同時,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上某種特定的核糖體受體蛋白聚集(易位子),使膜雙脂層產(chǎn)生孔道,帶mRNA的核糖體與其受體蛋白結(jié)合,翻譯出的肽鏈便通過孔道進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)。信號序列的兩個基本作用是:①通過與SRP的識別和結(jié)合,引導(dǎo)核糖體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)合;②通過信號序列的疏水性,引導(dǎo)新生肽跨膜轉(zhuǎn)運。五、活學(xué)活用研究論文研讀與實驗分析(請用中文作答):(共計6小題,每題5分,共20分)該論文的研究背景介紹(Introduction):在細(xì)胞分裂過程中,染色體的分離要求紡錘體微管與動粒體的穩(wěn)定連接。在高等真核生物中,動粒體(kinetochore)與紡錘體微管的聯(lián)系發(fā)生在前期末核膜被裂后。真核生物進(jìn)化出一套完備的紡錘體檢驗點機(jī)制來確保在這一環(huán)節(jié),沒有建立正確動粒體-紡錘體微管連接的細(xì)胞不能進(jìn)入細(xì)胞周期的下一時期。在本篇論文中,科學(xué)家利用秀麗隱桿線蟲(Caenorhabdiliselegans,為一種模式生物)為實驗材料,通過分析Rod/Zwilch/ZwlO(RZZ)complex^0coiled-coilproteinSPDL-1的特性,研究了能夠瞬時定位在動粒體上的dynein在染色體的分離過程中的功能。該論文的結(jié)果與分析(ResultsandAnalyses):I.實黔一:線蟲中SpindlyEm仙的分離頭口口整分析.在戰(zhàn)士九例加十于乘也依公嗇至■關(guān)1至6點自司吁也立必族£才后必領(lǐng)的?為了發(fā)見為基先參與雜色休止成分甭榭蜿泉降木為文作者未同,RNAi(RNA干兒)也向50個功能的衰因.迄上人回內(nèi)于展清義必用禮樂心套系婚F,一力他力T因時A達(dá)GFP:hi$um救f自)H2B和GFPyl血網(wǎng)做十田白明&史M/N
年選.發(fā)現(xiàn)了一個土危沒:方植入財咒過句吳閂,序包化核分外發(fā)式它3切物齊曾一圣白為網(wǎng)R受白.其?中包括/“csw/MiAr."w/a,",#aM"|X版_呆統(tǒng))中的受日Sp.ndh浙以,普行狩透-,力女”,”少所發(fā)區(qū)妁皆自前次力S9DL-I.實驗一■示:(A)注小討理.如和:W,(KXAi)失轎生的.若體孤船標(biāo)電連線拍嚷舄的國微些卻鮑中用酎求.,&了GFPrhistoncf^n#-I白>H2MGrP:7-iubulin《擔(dān)管委■白).這些買時肺赧的圖片埼以NEBD(nucleare/ivck?|'cbreakdewn)力息右計何.農(nóng)(0secoru?).1(B)A/HWestern.bbt好瀏吟瑯盤扣;ipdM(RNAi)^.^:期的隹麴加.地中!的SPDI.-I蚤⑨.一用T親我能化后ft^anu-SPDI.-lMt有事抗體.令一個i辭匯上方住上;從E*t的鼓蟲fc5穩(wěn)裂罅液上科堂.(C)工示了處于不同分取時期的2m底把.始經(jīng)過先我案巴行我得力運貨位田片.,這些施馳J!分別WCENPO'SPDL-l4”再收it停向W遺行T生技弟包.工,中,CENP-CJt一個已化的MQ(kinetochorc)不■白.它左殳個同胞閭期都定位占動t*ix.>frzi.AB制嶷和巴統(tǒng)苑法入的史尚力的男同開不知尚.請用中文簡要回答下列問題:(1)在A圖中,GFP:histoneH2B和GFP:y-tubulin分別標(biāo)記的是細(xì)胞內(nèi)的什么結(jié)構(gòu)?為什么?(5分)(2)本實驗中采用的RNAi技術(shù)的目的是什么?請簡要說明其作用原理。(5分)(3)B圖顯示的實驗結(jié)果能夠說什么?為什么要檢測beta-actin(p-actin)?(5分)(4)請根據(jù)C圖顯示的結(jié)果,概括一下在整個細(xì)胞周期過程中SPDL-1蛋白的細(xì)胞內(nèi)定位特點。(5分)(5)A圖顯示的實驗結(jié)果能夠說明什么?請根據(jù)A圖顯示的immunoblot/Westemblot結(jié)果,粗略估計一下在線蟲細(xì)胞的裂解液中,有大約百分之多少的SPDL-1蛋白能夠與ZWL-1蛋白結(jié)合?(5分)(6)根據(jù)B圖顯示的結(jié)果,可以得出什么結(jié)論?其他研究者已有的研究結(jié)果顯示,RZZ(Rod/Zwilch/ZwlO)complex中的3種蛋白之間存在緊密相互作用,并且在細(xì)胞內(nèi)定位是相互依賴的。那么,如果在線蟲的細(xì)胞中做ZwlO的RNAi的話,請預(yù)測對于SPDL-1蛋白定位的影響?(5分)答:(1)在A圖中,GFP:histoneH2B和GFPry-tubulin分別標(biāo)記的是細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞核中的染色體和細(xì)胞質(zhì)中的微管組織中心(中心體或分裂時的紡錘體)。histoneH2B是染色體組蛋白核心蛋白八聚體的組分,被GFP標(biāo)記的histoneH2B會組裝到染色體中,從而顯示出細(xì)胞核中的染色體結(jié)構(gòu);y-tubulin在細(xì)胞內(nèi)含量極微,定位于細(xì)胞中心體的無定形致密周質(zhì)中,微管組裝時,游離的出爐微管蛋白二聚體有序的加到Y(jié)-微管蛋白構(gòu)成的換上,實驗中主要顯示分裂的紡錘體.(2)①本實驗中采用的RNAi技術(shù)的目的是基因沉默掉(基因敲除(敲低))spdl-1的蛋白表達(dá),使細(xì)胞內(nèi)的SPDL-1蛋白不表達(dá)。②RNA干擾(RNAinterference,RNAi)是一種可以在細(xì)胞內(nèi)抑制特定基因表達(dá)的現(xiàn)象。它由雙鏈RNA產(chǎn)生,可以特異性地降解具有相同或者相似序列的RNA(包括mRNA)。它是一種比反義技術(shù)更為有效的方法,具有更高的特異性。植物、動物、人類都存在RNA干擾現(xiàn)象,這對于基因表達(dá)的管理、參與對病毒感染的防護(hù)、控制活躍基因具有重要意義。RNA干擾已經(jīng)作為一種強(qiáng)大的“基因沉默”技術(shù)而作為研究基因運行的一種研究方法已被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)科學(xué)。其原理是:RNasein核酶家族的Dicer,與雙鏈RNA結(jié)合,將其剪切成21-25nt及3"端突出的小干擾RNA(siRNA),隨后siRNA與RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物(RISC)結(jié)合,解旋成單鏈,活化的RISC受已成單鏈的siRNA引導(dǎo),序列特異性地結(jié)合在靶mRNA上并將其切斷,引發(fā)靶mRNA的特異性分解,從而阻斷相應(yīng)基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后基因沉默機(jī)制。(3)①B圖顯示的實驗結(jié)果說明SPDL-1蛋白的表達(dá)量隨線蟲細(xì)胞上樣量的減少而減少,表明純化得到的SPDL-1抗體符合實驗要求;RNAi過的線蟲細(xì)胞裂解液雖然上樣量是100%,但檢測不到SPDL-1蛋白的表達(dá),說明RNAi實驗成功,spdl-1基因被沉默。②beta-actin(p-actin)是微絲蛋白單體,即肌動蛋白。由于0-actin是管家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量恒定(當(dāng)然表達(dá)量也不是很低),基本不受很多外界改變而影響蛋白表達(dá)量,所以常作為Westemblot的標(biāo)準(zhǔn)量蛋白,即比較某一蛋白表達(dá)量變化的前提是兩者檢測到的p-actin量相同,消除由于蛋白上樣量不同導(dǎo)致檢測的蛋白量有差異。(4)由C圖可知,SPDL-1在前圖僅在AB細(xì)胞內(nèi)檢測到熒光,中圖AB細(xì)胞和P1細(xì)胞中均沒有檢測到,后圖在P1細(xì)胞內(nèi)檢測到熒光;而CENP-C作為陽性對照,顯示其作為動粒蛋白在整個細(xì)胞分裂過程中可正常檢測到。右側(cè)細(xì)胞分裂的模式圖說明:前圖AB細(xì)胞處于前中期,而P1細(xì)胞處于前期;中圖AB細(xì)胞處于早后期,而P1細(xì)胞處于晚前期;后圖AB細(xì)胞處于晚后期,而P1細(xì)胞處于前中期;綜上說明SPDL-1蛋白僅在分裂的前中期可以檢測到,結(jié)合研究背景可以得出在分裂前中期SPDL-1募集動粒蛋白到染色體,但過渡到后期后SPDL-1就消失了,說明SPDL-1蛋白在染色體分離中起著至關(guān)重要的作用。(5)①A圖顯示的實驗結(jié)果說明ZWL-1蛋白與SPDL-1蛋白在細(xì)胞內(nèi)有相互作用。②由圖中IP:a-ZWL-1中S和P中SPDL-1蛋白量基本相同,所以估測有50%的SPDL-1蛋白能夠與ZWL-1蛋白結(jié)合。(6)①B圖顯示的結(jié)果說明rod-1和zwl-1基因被沉默掉后,SPDL-1蛋白不能正常定位到動粒結(jié)構(gòu)上。②由于RZZ(Rod/Zwilch/Zw10)complex中的3種蛋白之間存在緊密相互作用,并且在細(xì)胞內(nèi)定位是相互依賴的,所以如果在線蟲的細(xì)胞中做ZwlO的RNAi,SPDL-1蛋白也不能正常定位到動粒結(jié)構(gòu)上。2013年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解廈門大學(xué)2013年招收攻讀碩士學(xué)位研究生
入學(xué)考試試題科目代碼:620科目名稱:細(xì)胞生物學(xué)招收專業(yè):生命科學(xué)學(xué)院、化學(xué)系、海洋與地球?qū)W院、環(huán)境與生態(tài)學(xué)院、藥學(xué)院各相關(guān)專業(yè)考生須知:答題書寫須使用黑(藍(lán))色字跡鋼筆、簽字筆或圓珠筆:各類答案(包括選擇題、填空題)均必須寫在答題紙上規(guī)定處,不得直接在試卷(試卷紙)或草稿紙上作答:凡未按上述規(guī)定作答均不予評閱、判分,后果考生自負(fù)。一、名詞解釋(5題,每題6分,共30分}端粒(Telomere)答:端粒是線狀染色體末端的DM由攵序列,是其核染色體兩怦末端由特定的DWMIZ序列構(gòu)成的結(jié)構(gòu).使正常染色體端部間不發(fā)生融合,保證每條染色體的完整性.端粒有許多重要的生物學(xué)功能:穩(wěn)定染色體末端結(jié)構(gòu),防止染色體間末端連接,并可補(bǔ)償滯后鏈5'末端在消除引物后造成的空缺,維持染色體的完整性和獨立性:端粒的長度與細(xì)胞及生物個體珞命相關(guān)等等.紡錘體組裝監(jiān)控點(Spindleassemblycheckpoint)答:在細(xì)胞有絲分裂過程中,紡律體組裝檢控點監(jiān)控者染色體在赤道板的隊列和向紡律體兩極的分離,確保動粒-微管的黏附和有絲分裂器的完整,使所干j的染色體都置于赤道板并雙極定向后才進(jìn)入后期,保證遺傳物質(zhì)均等地分配給兩個子代細(xì)胞,若紡缽體組裝完成.動粒全部被紡律體微管捕捉,Mad2從動粒上消失,解除對cdc20抑制,促使APC活化,降解M期周期蛋臼,從而介導(dǎo)細(xì)胞周期從中期向后期推進(jìn).胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcell)答:肺后干細(xì)胞是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞,它具體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性.無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境,ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型.胚胎干?細(xì)胞具有萬能分化性功能,特點是可以細(xì)胞分化成多種組織的能力,但無法獨1*1發(fā)仃成一個個體。它可以轉(zhuǎn)化成為外胚層、中胚層及內(nèi)胚層三種胚層的成員,然后再轉(zhuǎn)化成為人體的220多種細(xì)胞種類.粘著斑(Focaladhesion)答:“粘若肉”是一種細(xì)胞器,是細(xì)胞外鹿痂與一個細(xì)胞的肌動蛋臼細(xì)胞葉架之間的物理聯(lián)系,“粘籽斑”通過“整聯(lián)蛋白”(或稱第合素)發(fā)揮作用.它們在人體生理中具行根本性的雙要性,因為它們調(diào)控細(xì)胞粘附、機(jī)械傳出和控制細(xì)胞生長及分化的信號.現(xiàn)在.“粘者斑”的分子架構(gòu)己通過利用三維超分辨率熒光顯微鏡在納米尺度上觀測蛋白組織方式而被確定.細(xì)胞衰老(cellsenescence)答:細(xì)胞衰老是指由「正常體細(xì)胞中DM端粒長度前復(fù)制次數(shù)增加而縮短,以及氧化損傷等原因.使正常細(xì)胞經(jīng)有限次數(shù)分裂后,停止分裂,細(xì)胞形態(tài)和生理代謝活動發(fā)生顯著改變的現(xiàn)象.例如:(D細(xì)胞內(nèi)水分減少,體積變小,新陳代謝速度讖慢:(2)細(xì)胞內(nèi)萌的活性降低:(3〉細(xì)胞內(nèi)的色素會積累:(4)細(xì)胞內(nèi)呼吸速度觥慢,細(xì)胞核體枳增大,核膜內(nèi)折,染色質(zhì)收縮,顏色加深.線粒體數(shù)及減少,體積增大:(5)細(xì)胞膜通透性功能改變,使物質(zhì)運輸功能降低等等。二、是非題(20題,每題1分,共20分.請將答案按題目序號寫在答題紙上,答“是”寫“V”,答“非”寫“X”).氯毒縈抑菌是因其可抑制原核70S核就體肽酰轉(zhuǎn)移曲?!敬鸢浮空_.線拉體通過ATP合成藺參與細(xì)胞凋亡.【答案】錯誤.前體rRNA甲加化的由要性在于防止前體rRNA被加工.【答案】錯誤?1.催化三用酸循環(huán)、脂肪酸和內(nèi)陽酸氧化等仃關(guān)的主要曲類存在于線粒體的脊E.【答案】錯誤.在自然條件K有遺傳效應(yīng)的染色體交換發(fā)生在非同源染色體的姊妹染色體之間.【答案】錯誤.啤酒腓母的交配型轉(zhuǎn)變(Mating-typeinterconversion)機(jī)制屬于轉(zhuǎn)求后水平調(diào)控.【答案】正確.哺乳類動物體內(nèi)唯能產(chǎn)生抗體免疫球蛋白分子的細(xì)胞是Tc細(xì)胞?!敬鸢浮垮e誤.除核細(xì)胞的呼吸的定位在類核區(qū)內(nèi)。【答案】錯誤.真核細(xì)胞染色體的每個細(xì)胞周期中僅亞制一次因為S期時間很短。【答案】錯誤.Insituhybridization是將基因定位于染色體上的研究手?段.【答案】正確.痛細(xì)胞通常由正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來,與原來的細(xì)胞相比,癌細(xì)胞的分化程度通常表現(xiàn)為分化程度高.【答案】錯誤.白細(xì)胞衣面抗原CD45是?種受體酪瑟酸磷酸脂的.【答案】正確.推動細(xì)胞周斷由G2相向Y相過渡的驅(qū)動器為CDK1.【答案】正確.細(xì)胞中具有催化功能的成份是蛋臼質(zhì)與核酸.【答案】正確.與真核細(xì)胞相比,原核細(xì)胞在DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯上具仃時空連續(xù)性的特點.【答案】正確.溶陶體在動物、植物、原生動物和細(xì)菌中均有存在.【答案】錯誤.特異顯示DXA在細(xì)胞中分布的方法是PAS反應(yīng).【答案】錯誤.染色質(zhì)纖維上非組蛋白的主要功能是調(diào)控基因表達(dá).【答案】正確19.突變后的Ras蛋白不能結(jié)合GTP,從而使Ras蛋白維持f?活化狀態(tài),不斷激活靶分子,導(dǎo)致細(xì)胞大代增殖,而發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化.【答案】錯誤20.冰凍蝕刻技術(shù)主要用于隧道顯微鏡.【答案】錯誤三、選擇題(卷題可能多個答案,多遠(yuǎn)或漏選皆不得分:每題2分,共30分).流式細(xì)胞術(shù)可用于測定:A,細(xì)胞的大小和特定細(xì)胞類群的數(shù)幅B,分選出特定的細(xì)胞類群C、細(xì)胞中DNA、R\A或某種蛋白的含俄I)、以上三種功能都有【答案】D.在粗而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的蛋白喊包括:A、線粒體中的蛋白質(zhì)B、分泌蛋白C、膜蛋白D、涪酗體中的蛋白【答案】ABCD.能抑制CDK活性的酶是:A、Weel B、CAK C、cdc25 D,p21【答案】AD. 所仃膜蛋臼都具有方向性,其方向性在什么部位中確定:A、細(xì)胞偵基質(zhì) B、高爾基體C、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)D、陵膜【答案】C. 蛋白酪宏酸激酶類型的受體是:A、EGF受體B、PDGF受體C、TGI-p受體D、1GF-1受體【答案】ABD. 卜列技術(shù)中能用戶研究膜蛋白流動性的方法是:A、熒光抗體免疫標(biāo)記B、熒光能量共振轉(zhuǎn)移C、光脫色熒光恢復(fù)D、熒光標(biāo)記細(xì)胞融合【答案】ACD. 中心粒和鞭毛的基粒:A、都是9+2結(jié)構(gòu) B、嗣者是9+2結(jié)構(gòu),后者是9+0結(jié)構(gòu)C、都是9+0結(jié)構(gòu) D、前者是9+0結(jié)構(gòu),后者是9+2結(jié)構(gòu)【答案】C. 下列結(jié)構(gòu)中屬于細(xì)胞膜上的結(jié)構(gòu)有:A、內(nèi)吞小泡B、有被小窩C、脂質(zhì)位D、微囊【答案】ABC. 煤氨霉素是一種可動離子載體.運輸:A.Na,IkK'C,Ca2D、【答案】B.線粒體參與細(xì)胞凋亡通過:A、釋放細(xì)胞色素C B、擇放AchEC、合成的ATPD、SOD【答案】A.關(guān)廣第一次減數(shù)分裂下列觀點中哪些是錯誤的?A、同源染色體不分裂B、著色粒不分裂3染色單體分離D、不出現(xiàn)交叉【答案】ACI).關(guān)r?核孔復(fù)合體正確的論述有:A、有核定位侑號的蛋門進(jìn)入細(xì)胞核不需要核孔夏令體B、介導(dǎo)蛋白質(zhì)入核轉(zhuǎn)運,介導(dǎo)RNA、核精核蛋白顆粒出核轉(zhuǎn)運C、核蛋白通過核孔發(fā)合體由細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運到核內(nèi)需要能依D、生物分子通過被動擴(kuò)散和主動運輸進(jìn)出核孔復(fù)合體【答案】CD.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中含有的可以識別不正確折槌的蛋門并促使其用新折型:A、Bip蛋白B、Sec61蛋白C、鈣結(jié)合蛋白D、蛋白二旋鍵異構(gòu)府【答案】AD.存在了真核細(xì)胞的細(xì)胞膜上質(zhì)子柒是:A、P型質(zhì)子泵B、V型質(zhì)子泵C,H-ATPiWD、三種都有【答案】A.活性染色質(zhì)具有如卜哪些特性:A、甲基化程度高B、H2B的低磷酸化C、很少有組蛋白H1與其結(jié)合D、組蛋臼乙觥化程度高【答案】BCD四、問答題(4題,每題10分,共40分).試述膜流動性的生物學(xué)意義.答:(I)生物膜的流動性是指膜脂與膜蛋門處「不斷的運動狀態(tài),它是保證正常膜功能的乖要條件。在生理狀態(tài)卜.,生物膜既不是島態(tài),也不足液態(tài),而是液晶態(tài),即介于晶態(tài)與液態(tài)之間的過渡狀態(tài).在這種狀態(tài)卜?,其既具彳i液態(tài)分子的流動性,又具有固態(tài)分子的有序排列.當(dāng)溫度下降至某一點時,液晶態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榫B(tài):若溫度上升,則品態(tài)又可溶解為液晶態(tài).這種狀態(tài)的相互轉(zhuǎn)化稱為相變,引起相變的溫度稱相變溫度。在相變溫度以匕液晶態(tài)的膜脂總是處于可流動狀態(tài).股脂分子有以卜幾種運動方式:①側(cè)向移動;②旋轉(zhuǎn)運動;③左右擺動:④翻轉(zhuǎn)運動.膜蛋白分子的運動形式有側(cè)向運動和旋轉(zhuǎn)運動二種.(2)生物膜的流動性有利于物質(zhì)運輸和交換,如礦腦離子的主動運輸,內(nèi)存外推作用等等:(3)有助于能心流動和信息傳遞:(4)有助于自我修復(fù):(5)它是細(xì)胞融合技術(shù)的廟礎(chǔ)。.請根據(jù)溶醉體的形成過程,說明溶酶體不同階段及其功能的特點.答:溶的體是動物細(xì)胞中的一種膜結(jié)合細(xì)胞器,含有多種水解價類,在細(xì)胞內(nèi)起消化和保護(hù)作用.在與吞噬泡或者胞飲泡結(jié)合,消化和利用其中的物質(zhì)。(1)溶陶體的發(fā)生過程:溶腫體的是在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成并經(jīng)過鏈接的糖基化修飾,然后轉(zhuǎn)至高爾基體,在高爾基體順面膜囊中募糖鏈上的甘露糖殘格發(fā)生磷酸化形成M6P.在高爾基體反面膠囊和TNG股囊上存在M6p受體,這樣溶附體的觸與其他蛋向區(qū)分開,并得以濃縮,最后以出芽的形式轉(zhuǎn)運至溶陶體中.(2)溶版體是一種多樣性和異版性的細(xì)胞器,根據(jù)溶的體所處生理功能的不同階段,可以區(qū)分為:①初級溶筋體,內(nèi)容物均一,含行許多水解陶類,包括蛋白的、核酸機(jī)、睛背曲等:②次級港筋體,是初級溶解體與細(xì)胞內(nèi)的自噬泡、胞飲泡、吞噬泡融合形成的立合體:③殘余小體,這些小體已經(jīng)失去的,僅剩下未消化的殘渣.乂稱殘體。(3)溶解體的功能:①防御供能;②作為細(xì)胞內(nèi)的消化器官為細(xì)胞提供營養(yǎng):③在分泌細(xì)胞中.溶筋體常常含有投入的分泌顆粒,參與分泌過程的調(diào)節(jié):④兩類發(fā)仃過程中蝌蚪尾巴的退化,哺乳動物斷奶后乳腺的退行性變化等都涉及某些特定細(xì)胞編程性死亡及周圍活細(xì)胞對其的消除,這些過程都與溶筋體行關(guān):⑤在受精過程中,精子的頂體相當(dāng)于特化的溶陶體,其中含行多種水解酶類,例如透明質(zhì)酸陶,它能溶解卵細(xì)胞的外被及濾泡細(xì)胞,產(chǎn)生孔道,使精子進(jìn)入卵細(xì)胞。.請說明免疫熒光細(xì)胞化學(xué)中熒光抗體示蹤(免疫熒光細(xì)胞化學(xué))的技術(shù)原理、方法與實驗步驟及其在細(xì)胞生物學(xué)研究中的應(yīng)用.答:(1)技術(shù)原理:免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將己知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢代細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體).在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體乂合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本.熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色).可以公見熒光所在的細(xì)胞或組織.從而確定抗原或抗體的性痂、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量.(2)方法:免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng).由于抗原抗體反應(yīng)具有四度的特異性.所以巧抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時,只要知道其中的個因素,就可以傷出另一個因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色索標(biāo)記在抗體(或抗原)匕叮其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)(3)實驗步驟:①細(xì)胞爬片:②4%多聚甲醛固定10分鐘(固定細(xì)胞器用預(yù)冷的70%甲解+30%丙陽):③PBS漂洗:④0.5%Triton通透穿孔:⑤PBS漂洗⑥惟BSA封閉:⑦加入l%BSA稀粒的一抗,于37度雜交:⑧PBS漂洗:⑨加入1%BSA稀ff的二抗,于37度雜交:⑩PBS潦洗:5Pg/mlDAPI染色;抗猝火封片劑封片13.觀察.(I)應(yīng)用:①免搜細(xì)胞化學(xué)技術(shù)Lj親和化學(xué)技術(shù)如就曲球菌A蛋自、生物素、與卵門索、植物血凝索相結(jié)合?拓寬r領(lǐng)域:②與激光技術(shù)、電子計駕機(jī)和掃描電鏡等技術(shù)結(jié)合發(fā)展為定肽免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù):③熒光激活細(xì)胞分類器(FACS)的應(yīng)用是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)發(fā)展到更高的階段,開創(chuàng)了免疫熒光技術(shù)的新領(lǐng)域.細(xì)胞顯微分光光度計與圖像分析儀的結(jié)合使免疫熒光組織化學(xué)的定盤檢測更加準(zhǔn)確.在免疫熒光細(xì)胞化學(xué)中應(yīng)用單克隆抗體[|益增多,將會不斷提高特異性、敏感性和應(yīng)用范陽。激光掃描等聚焦北微鏡的應(yīng)用乂開創(chuàng)了新的發(fā)展時代,由「免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的特異性、快速件和在細(xì)胞和分廣水平定位的敏盛性與準(zhǔn)確性,在免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞和組織學(xué)、病理學(xué)、腫瘤學(xué)、以及臨床檢驗學(xué)等生物學(xué)和醫(yī)學(xué)許多方面得到廣泛應(yīng)用,日益發(fā)揮1R要作用.. 2012年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予英國發(fā)育生物學(xué)家約翰、戈登(JohnGurdon)
與日本京都大學(xué)教授山中伸彌(ShinyaYamanaka).兩位科學(xué)家取得的成果都與誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞(iPS)相關(guān).試論述iPS的在生物醫(yī)學(xué)科學(xué)領(lǐng)域中的理論與實踐意義.答:2006年日本京都大學(xué)ShinyaYamanaka在世界著名學(xué)術(shù)雜志《細(xì)胞》上率先報道了誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的研究.他們把0ct3/4,Sox2、c-Myc和KIN這四種轉(zhuǎn)錄因子獲因克隆入病年我體,然后弓I入小鼠成纖維細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)可透導(dǎo)其發(fā)生轉(zhuǎn)化,產(chǎn)生的iPS細(xì)胞在形態(tài)、堪因和蛋臼發(fā)達(dá)、我觀遺傳修飾狀態(tài)、細(xì)胞倍增能力、類胚體和畸形瘤生成能力、分化能力等方面都與胚胎干細(xì)胞相似.iPS細(xì)胞的出現(xiàn),在干細(xì)胞研究領(lǐng)域、表觀遺傳學(xué)研究領(lǐng)域以及生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域都引起了強(qiáng)烈的反響,這不僅是因為它在基礎(chǔ)研究方面的吹要性,更是因為它為人們帶來的光明的應(yīng)用前景。(D在基礎(chǔ)研究方面,它的出現(xiàn),已經(jīng)讓人們對多能性的調(diào)控機(jī)制行了突破性的新認(rèn)識細(xì)胞戊編程是一個女雜的過程,除了受細(xì)胞內(nèi)因子調(diào)控外,還受到細(xì)胞外信號通路的調(diào)控.對于0ct4,Sox2和\anog等維持于細(xì)胞自我新能力的轉(zhuǎn)錄因子的研究正在逐漸地展開;利用iPS細(xì)胞作為實驗?zāi)P?,只操縱幾個因子的表達(dá),這更會大大加速對多能性調(diào)控機(jī)理的深入研究.(2)在實際應(yīng)用方面,iPS細(xì)胞的獲仔方法相對簡總和穩(wěn)定,不輻要使用卵細(xì)胞或者胚胎.這在技術(shù)上和倫理上都比其他方法更有優(yōu)勢,iPS細(xì)胞的建立進(jìn)一步拉近廣干細(xì)胞和臨床疾病治療的距離.iPS細(xì)胞在細(xì)胞普代性治療以及發(fā)病機(jī)理的研究、新藥的選方面具仃巨大的潛在價值。此外,iPS細(xì)胞在神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病等方面的作用也日益呈現(xiàn).iPS細(xì)胞在體外已成功地被分化為神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)膠腦細(xì)胞、心血管細(xì)胞和原始生殖細(xì)胞等.在臨床疾扁治療中具有巨大應(yīng)用價值.五、實驗與分析題(3題,每題10分,共30分)1.細(xì)胞劃痕實驗是指將細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)皿或平板上,待細(xì)胞融合后用細(xì)胞刮在中央?yún)^(qū)域畫一條線,這條線內(nèi)的細(xì)胞被機(jī)械力去除掉了,然后將細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),觀察細(xì)胞向無細(xì)胞的劃痕區(qū)域遷移的情況,來判斷細(xì)胞的遷移能力.某課題組,為研究mTOR基因?qū)δ[瘤遷移能力的影響,以敲減細(xì)胞中mTOR基因為實驗組,對照正常細(xì)胞進(jìn)行劃痕實驗,結(jié)果如下圖:
依據(jù)上述信息后,請作答:(1)何為基因敲減(geneknock-down)?mTOR在腫瘤細(xì)胞的遷移能力上有何影響,依照該影響請預(yù)期初期腫痛患者與晚期患者的腫瘤細(xì)胞中mTOR基因表達(dá)的高地情況。(3)已知雷帕霉素為mTOR的抑制劑,請對加入雷帕霉素處理的細(xì)胞進(jìn)行劃痕實驗的結(jié)果進(jìn)行預(yù)期,并試述原因.答:(1)妹因敲她,即基因敲除.就是通過同源?。航M將外源心因定點整合入靶細(xì)胞任囚組上某一確定的位點,以達(dá)到定點修飾改造染色體上某?基因的目的的一種技術(shù).此法可產(chǎn)生精確的基因突變,也可正確糾正機(jī)體的基因突變.(2)從圖中可以看出,當(dāng)一減mTOR基因48小時之后,實驗組相對與對照組,腫而細(xì)胞遷移能力明顯降低,這說明mTOR屆因能否促進(jìn)腫瘤的遷移。由于腫痛轉(zhuǎn)移能力的是惡性腫痛相對「良性腫端的最吹要的特征,因此可以初步推斷初期腫瘤患者mTOR&達(dá)ht低廣晚期腫痛患者。(3)由于雷帕毒索為mTOR抑制劑,因此當(dāng)給兩組同時加入由帕再索,4小時之后觀察,可能會看到對照組腫痛細(xì)胞由于受到抑制遷移數(shù)U大坦戰(zhàn)少,而實臉組由「敲除mTOR基因,抑制劑對其作用不大,因此對照組細(xì)胞遷移數(shù)目接近于實驗組..細(xì)胞的分化是由于組織專一性的關(guān)鍵基因表達(dá)的結(jié)果.某人通過DNAarray發(fā)現(xiàn)三個在肌肉分化中表達(dá)的基因.為了研究它們的功能,他分別做了基因剔除小鼠實驗,發(fā)現(xiàn):①當(dāng)A基因剔除時,小鼠肌肉特別發(fā)達(dá):②當(dāng)B基因剔除時,小鼠在胚胎肌肉發(fā)育前死亡:③當(dāng)C基因剔除時,小鼠出生后三周開始肌肉萎縮,請根據(jù)以上結(jié)果分析,A、B、C三個基因在肌肉發(fā)育中的功能.答:在肌細(xì)胞,由于肌動蛋白纖維組成的微絲參勺形成肌原纖維的細(xì)肌絲和肌肉收縮。A基因為微絲抑制蛋門的基因,對微稅起到負(fù)調(diào)控作用:B基因為控制微線分化的基因,缺少B基因微絲無法形成:C基因為控制微絲代謝的基因,缺少C基因微絲代謝不正常,肌肉簍縮..細(xì)胞內(nèi)的一些膜細(xì)胞器,如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶解體、內(nèi)吞體等組成了一個動態(tài)的體系.將利用特異性抗體來標(biāo)記不同的細(xì)胞器時,在熒光顯微鏡下發(fā)現(xiàn)除內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)均勻分布外,其他幾種細(xì)胞器主要以大量囊泡狀結(jié)構(gòu)集中在細(xì)胞核附近的一個區(qū)域.而且,這種集中方式在處于有絲分裂的細(xì)胞中看不到.問:(1)你推測這些聚集在一起的細(xì)胞器與胞內(nèi)的什么結(jié)構(gòu)相關(guān)?如何用實驗來證明?(2)你認(rèn)為它們?yōu)楹螘霈F(xiàn)這樣的組織方式?如何用實驗來證明?(3)你認(rèn)為這種組織方式會有什么意義?答:已知高爾基體分布在微管的負(fù)極區(qū),而且行絲分裂過程中染色體的行為依賴廣微管的動態(tài)組裝和去組裝,在彳j統(tǒng)分裂過程中看不到,說明細(xì)胞器的分布位置。細(xì)胞竹架行關(guān),因此可推測:(I)細(xì)胞器聚集F細(xì)胞件架組織仃關(guān).用特異性藥物處理,例如秋水仙兼,使細(xì)胞竹架部分崩解,如果細(xì)胞淵分散而不能聚集,則可以證明細(xì)胞得與細(xì)胞骨架有關(guān).(2)這些細(xì)胞器的聚集仃利于物質(zhì)信息能域的仃效迅速的傳遞.實驗證明:用特異性藥去處理實臉組,使其竹架破壞但能正常生活,比較它們與正常組在物痂運輸、信息交流和能量傳遞上的區(qū)別,如果仃M別則證明是正確的.(3)這是一種門然選擇的結(jié)果,細(xì)胞器這種組織方式不僅對細(xì)胞門分有普優(yōu)化的意義而且對維持整個生命體活動也有幣:要意義。2012年廈門大學(xué)620細(xì)胞生物學(xué)考研真題及詳解10?小腸上皮吸收葡萄慚以及各種氨基酸時,通過與K+相伴運輸.H.長春花就是促進(jìn)微竹聚合的弱物..異染色質(zhì)是高度凝集和轉(zhuǎn)錄不活躍的..真核細(xì)胞中RNA聚合物I所轉(zhuǎn)錄的基因此tRNA和5SrRNA..細(xì)胞調(diào)亡的一個乖要特點挺DNA隨機(jī)斷裂..減數(shù)分裂過程中同源染色體配對和聯(lián)會笈合體形成發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期的雙線期..其核細(xì)胞中不同染色質(zhì)的DNA與組蛋白的組成比例總是|:2..細(xì)胞分化方向已決定的細(xì)胞與干細(xì)胞相比沒有發(fā)生形態(tài)特征的變化..用抗纖連蛋白的抗體注射胚體,發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中神經(jīng)靖細(xì)胞的移動受到抑制,這個實驗說明胚胎中的神經(jīng)元在移動過程中必須與纖連蛋白暫時結(jié)合..抑癌基因的作用是編碼細(xì)胞生長負(fù)調(diào)控因子..CDK激陶至少含有兩個亞單位,其中周期蛋白為其催化亞基,CDK蛋白為調(diào)節(jié)亞基.三、選擇題:(每題可能多個答案,多選或漏選皆不得分;15S,每題2分,共30分).在翻蛋白的糖基化過程中,連接在多肽鏈的第一個糖基通常是A.N-乙酰氨基半乳械B.N-乙酹氨基葡翎械C.N-乙酰氨基甘露糖D.N-乙酰氮基木糖.高爾基體分類加工的蛋白質(zhì)的去向是:A.細(xì)胞核B線粒體C.溶愜體D.細(xì)胞放膜3,下列哪種反應(yīng)時發(fā)生在線粒體基質(zhì)中A,精醉解 B.三枚酸循環(huán) C.輒化磷酸化 D.蛋白糖基化.掃描電子顯微鏡用于觀察A.活細(xì)胞圖像 B.細(xì)胞中化學(xué)成分的分析C,細(xì)胞不同切面圖像 仇細(xì)胞表面立體圖像.“多利羊”&
A.體細(xì)克隆成功的產(chǎn)物 及轉(zhuǎn)基因動物成功的產(chǎn)物C.性細(xì)胞克隆成功的產(chǎn)物蟲動物組織培養(yǎng)成功的產(chǎn)物.可清除體內(nèi)氧自由基的物質(zhì)為A.超翅化物歧化睥區(qū)踴素C.谷胱甘肽D.維生素C.下列蛋白中屬于衣被蛋白的有:D.ClathrinD.Clathrin.不依賴鈣離子的細(xì)胞表面黏著因子是:A.鈣耕素A.鈣耕素B.選擇素 C.免疫蛋白超家族 D.整合蛋白.肌質(zhì)網(wǎng)是一種特化的內(nèi)放網(wǎng),可貯存A.鎂離子B.銅離子C.鐵離子D.鈣離子.植物細(xì)胞和細(xì)菌的協(xié)同運輸常利用哪一種的濃度梯度來驅(qū)動A.鈣離子B.質(zhì)子C.鈉離子D.鉀離子.其核細(xì)胞質(zhì)膜的主要功能是:A.負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)外的物質(zhì)運輸B.為細(xì)胞活動提供相對稔定的內(nèi)環(huán)境C.進(jìn)行氧化磷酸化的場所 D.介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間的連接.植物細(xì)胞有絲分裂與動物細(xì)胞相比其主要特點為:A.組成紡鋌體微管的基本成份不同 B.紡鎮(zhèn)體不是由中心體產(chǎn)生的C.細(xì)胞質(zhì)分裂是通過在赤道面處形成細(xì)胞板 D.核仁不消失.細(xì)胞中核獨體存在的部位為:A.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)B,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C.細(xì)胞核外膜 D.溶酹.離子通道一般都具有選擇性,I通道允許:A.K.通過,Na\Ca”不通過 B.K\Na?通過,Ca”不通過C.I、Ca??通過,N不通過 D.K\Na\Ca”通過,C「不通過15,下列分子中參與調(diào)控細(xì)胞凋亡的有四、問答題:(4題,每題10分,共40分)A.CaspaseB.CytochromeCC.RB fas四、問答題:(4題,每題10分,共40分)I.請畫出下列四種股蛋白在內(nèi)耐上的排列方式;?明贛c器器喋內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔一例的相對位置并說明理由,(2:N末端:方塊:招股肽段:倘頭濃示信號肽切除位點〉2012年廈門大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)考研真題答案及解析一、名詞解釋.上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)分化(EMT):在機(jī)體正常發(fā)育過程中以及各種生理、病理條件刺激作用下,上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能均會發(fā)生向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的現(xiàn)象:即細(xì)胞從具有緊密連接、極性和缺乏動力的上皮細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化為細(xì)胞間作用松散、無極性、活動力強(qiáng)和能產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)的間質(zhì)細(xì)胞..腫瘤干細(xì)胞:是指腫瘤組織中存在的類似于成體干細(xì)胞的一小部分細(xì)胞,具備高度增殖能力與自我更新能力,也具備多向分化潛能.細(xì)胞骨架:真核細(xì)胞中的蛋白質(zhì)纖維網(wǎng)架體系,包括微絲、微管和中間絲。廣義的細(xì)胞骨架包括細(xì)胞核骨架、細(xì)胞質(zhì)骨架、細(xì)胞膜骨架和細(xì)胞外基質(zhì);狹義的細(xì)胞骨架指細(xì)胞質(zhì)骨架,由微絲、微管和中間纖維組成。.細(xì)胞分化:由一種相同的細(xì)胞類型經(jīng)細(xì)胞分裂后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上形成穩(wěn)定性差異,產(chǎn)生各不相同的細(xì)胞類群的過程。.核孔復(fù)合體:鑲嵌在內(nèi)外核膜上的籃狀復(fù)合體結(jié)構(gòu),主要由胞質(zhì)環(huán)、核質(zhì)環(huán)、核籃等結(jié)構(gòu)域組成。是物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞核的通道。二、是非題【答案】對查看答案【解析】流式細(xì)胞術(shù)可定量地測定某一細(xì)胞中的DNA.RNA或某一特異蛋白的含量,以及細(xì)胞群體中上述成分含量不同的細(xì)胞的數(shù)量。【答案】對查看答案【解析】Caspase2、8、9、10參與凋亡的起始;Caspase3、6,7參與凋亡的執(zhí)行,活化后負(fù)責(zé)切割細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白和調(diào)節(jié)蛋白?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢浮窘馕觥刻瞧べ|(zhì)激素是一類箱體激素,所以通常為細(xì)胞內(nèi)受體?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】細(xì)胞都有獨立性、有序的自控代謝體系?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢浮窘馕觥咳旧w外擴(kuò)增是指存在于魚類、昆蟲和軟體動物的卵母細(xì)胞中的rRNA基因擴(kuò)增現(xiàn)象,以兩棲類卵母細(xì)胞最為明顯?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】HBV是乙肝病毒,dsDNAo【答案】對查看答案【解析】有絲分裂末期,兩個即將分裂的子細(xì)胞之間產(chǎn)生一個收縮環(huán)。收縮環(huán)是由大量反向平行的微絲組成,由分裂末期胞質(zhì)中的肌動蛋白裝配而成?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】非組蛋白能識別特異的DNA序列,參與基因表達(dá)的調(diào)控和染色質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的形成?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢浮窘馕觥緽cl2是一種凋亡基因。該基因?qū)儆诰€蟲ced9基因在哺乳類動物中的同源物,能延長細(xì)胞生存,抑制細(xì)胞凋亡。【答案】錯查看答案【解析】小腸細(xì)胞對葡萄糖的吸收伴隨著Na卡的進(jìn)入?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】長春花堿能抑制微管的裝配?!敬鸢浮繉Σ榭创鸢浮窘馕觥慨惾旧w,由于該染色體全部或部分染色體異常固縮而得名,具有轉(zhuǎn)錄不活躍性?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】RNA聚合醐I轉(zhuǎn)錄的rRNA分子;RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄的hnRNA:RNA聚合前III轉(zhuǎn)錄的5srRNA與tRNA?!敬鸢浮垮e查看答案【解析】細(xì)胞凋亡程序啟動后,活化的Caspase-3將降解ICAD,使CAD釋放出來并在核
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