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文檔簡介
第四
章病毒目的要求:1、病毒粒子的結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生存的環(huán)境條件。2、毒性噬菌體的侵染循環(huán),溫和噬菌體和溶原細(xì)菌的特點。3、脊椎動物病毒、昆蟲病毒、植物病毒的主要特點及代表病毒所含核酸及侵染循環(huán)。4、亞病毒的基本知識。重點:
噬菌體的一步生長曲線及溶原性。難點:
1、DNA病毒的侵染循環(huán)。2、RNA病毒的侵染循環(huán)。3、溫和噬菌體及其溶原化。第一節(jié)病毒的概述病毒的基本概念和一般研究方法第二節(jié)毒粒的性質(zhì)病毒的基本結(jié)構(gòu)特點第三節(jié)病毒的復(fù)制病毒的復(fù)制(繁殖)的基本特點和過程第四節(jié)噬菌體溫和噬菌體的概念及生活周期√第五節(jié)植物病毒第六節(jié)脊椎動物病毒第七節(jié)昆蟲病毒第八節(jié)亞病毒第一節(jié)病毒的概述一、病毒的發(fā)現(xiàn)和研究歷史1886年,A.Mayer發(fā)現(xiàn)具有傳染性的煙草花葉病;1892年,D.Ivanovsky煙草花葉病病原體能通過細(xì)菌濾器:一種能通過細(xì)菌濾器的”細(xì)菌毒素”或極小的細(xì)菌1898年,MWBeijerinck對煙草花葉病病原體的研究結(jié)果:
能通過細(xì)菌濾器;可被乙醇沉淀而不失去其感染性,能在瓊脂凝膠中擴散;用培養(yǎng)細(xì)菌的方法不能被培養(yǎng)出來,推測只能在植物活細(xì)胞中生活;比細(xì)菌小的具有傳染性的活的流質(zhì)(contagium
vivum
fluidum)第一節(jié)概述1900年前后,包括口蹄疫(footandmouthdisease)在內(nèi)的多種動植物疾病病原體的濾過性特性被證明。filterableviruses(濾過性病毒)viruses(病毒)FWTwort(1915年)、Fd’Herelle(1917年),分別發(fā)現(xiàn)細(xì)菌(Shigella
dysenteriae)病毒bacteriophagesPhago:“toeat”噬菌體(phage)1935年,WMStanley首次提純并結(jié)晶了煙草花葉病毒;
Bawden等證明煙草花葉病毒的本質(zhì)為核蛋白;1940年,Kausche首先用電鏡觀察到煙草花葉病毒顆粒;第一節(jié)概述1、定義二、病毒的特點和定義迄今仍無一個科學(xué)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)亩x非細(xì)胞生物(真)病毒:至少含核酸和蛋白質(zhì)二種組分亞病毒類病毒:只含具侵染性的RNA組分衛(wèi)星RNA:只含有不具侵染性的RNA組分朊病毒:只含蛋白質(zhì)
病毒是沒有細(xì)胞構(gòu)造,活細(xì)胞內(nèi)專性寄生的實體,在寄主內(nèi)表現(xiàn)生命特性,在寄主外表現(xiàn)大分子特性。
無細(xì)胞結(jié)構(gòu),專性活細(xì)胞內(nèi)寄生;沒有酶或酶系統(tǒng)極不完全,不能進(jìn)行代謝活動;個體極小,多在10-300nm之間,能通過細(xì)菌濾器;對抗生素不敏感,對干擾素敏感。只有DNA或RNA一種核酸。病毒向寄主細(xì)胞提供自己的遺傳信息,通過寄主的轉(zhuǎn)錄、翻譯和合成系統(tǒng)來復(fù)制病毒。在宿主細(xì)胞協(xié)助下,通過核酸的復(fù)制和核酸蛋白裝配的形式進(jìn)行增殖,不存在個體生長和二均等分裂等細(xì)胞繁殖方式。
2、病毒的基本結(jié)構(gòu)特點3、宿主范圍(分布)及重要性幾乎所有的生物都可以感染相應(yīng)的病毒。根據(jù)宿主可以分三類:動物病毒植物病毒細(xì)菌病毒(或稱噬菌體)胚卵的病毒培養(yǎng)三、病毒的培養(yǎng)和純化第二節(jié)毒粒的性質(zhì)病毒的形狀有球形、卵圓形、磚形、桿狀、絲狀及蝌蚪狀等,但以近似球形的多面體和桿狀為主。動物病毒多呈球形、卵圓形或磚形。細(xì)菌病毒多為蝌蚪形,也有微球形和絲狀的。(一)病毒的形狀一、病毒的形態(tài)與大小(二)病毒的大小10-300nm。二.病毒的構(gòu)造1、典型病毒粒子的構(gòu)造基本成分核酸——位于中心,稱為核心蛋白質(zhì)——包圍在核心周圍,形成衣殼核心和衣殼合稱核衣殼或核殼體nucleo-capsid
,為病毒的基本結(jié)構(gòu)。有些復(fù)雜的病毒在衣殼的外面包裹著一層由脂類和多糖組成的包膜envelop
。有的包膜上還長有刺突spike
。2、病毒粒的殼體結(jié)構(gòu)病毒的對稱性①螺旋對稱的病毒粒子②二十面體對稱病毒粒子③復(fù)合對稱的病毒粒子(1)螺旋對稱殼體(多見于植物病毒,如TMV)亞基有規(guī)律地沿著中心軸(核酸)呈螺旋排列,進(jìn)而形成高度有序、對稱的穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。(2)二十面體對稱殼體蛋白質(zhì)亞基圍繞具立方對稱的正多面體的角或邊排列,進(jìn)而形成一個封閉的蛋白質(zhì)的鞘。(3)雙對稱結(jié)構(gòu)(復(fù)合對稱):具有雙對稱結(jié)構(gòu)的典型例子是有尾噬菌體(tailedphage),其殼體由頭部和尾部組成。包裝有病毒核酸的頭部通常呈二十面體對稱,尾部呈螺旋對稱。3、病毒的包膜結(jié)構(gòu)病毒包膜的基本結(jié)構(gòu)與生物膜相似,是脂雙層膜。在包膜形成時,細(xì)胞膜蛋白被病毒的包膜糖蛋白取代。刺突(spike):包膜或核衣殼上的突起。1、病毒的核酸核酸是病毒的遺傳物質(zhì),控制著病毒的增殖及對宿主的感染性。病毒核酸單鏈DNA(ssDNA)雙鏈DNA(dsDNA)單鏈RNA(ssRNA)雙鏈RNA(dsRNA)三、病毒的化學(xué)組成◆一種病毒只含有一種核酸(DNA或RNA)。
植物病毒絕大多數(shù)含RNA,少數(shù)含DNA;動物病毒有的含DNA,如天花病毒;有的含RNA,如流感病毒。
細(xì)菌病毒普遍含DNA,含RNA的極少?!舨《镜暮怂犷愋蜆O為多樣化,DNA與RNA均有單鏈和雙鏈:
▼病毒DNA分子有線狀和環(huán)狀之分。▼病毒核酸有正鏈(+)和負(fù)鏈(—)的區(qū)分:規(guī)定:將堿基序列與mRNA一致的核酸單鏈定位正鏈,將堿基序列與mRNA互補的核酸單鏈定位負(fù)鏈。因此,就病毒核酸鏈的單與雙以及正和負(fù)有以下6種類型:
(±)DNA——大部分DNA病毒
(±)RNA——動物呼腸孤病毒(+)DNA——大腸桿菌X174噬菌體(+)RNA——所有單鏈RNA病毒\大部分植物病毒(—)DNA——腺病毒(—)RNA——流感病毒2、病毒蛋白構(gòu)成病毒粒子外殼,保護病毒核酸免受核酸酶及其他理化 因子的破壞;決定病毒感染的特異性,與易感細(xì)胞表面存在的受體具特異性親和力,促使病毒粒子的吸附;決定病毒的抗原性,并能刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體;某些病毒蛋白質(zhì)是一些具有特殊功能的酶,如噬菌體中的溶菌酶,破壞宿主細(xì)胞壁與細(xì)胞膜。功能:主要在構(gòu)成病毒結(jié)構(gòu)、病毒的侵染與增殖過程中發(fā)揮作用:
3、脂類功能:與病毒的吸附和侵入有關(guān)。一些有包膜的病毒去掉包膜后失去感染性。
主要以脂質(zhì)雙分子層的形式存在于病毒的包膜中。病毒脂類磷脂膽固醇中性脂肪4、糖類
功能:1、與DNA堿基結(jié)合的葡萄糖殘基對核酸酶的降解有抵抗作用。2、與病毒的血清反應(yīng)有關(guān)。
龍膽二糖巖藻糖半乳糖葡萄糖主要有常以糖蛋白,糖脂的形式存在或者以糖苷鍵直接與堿基相連。四、群體形態(tài)包含體噬菌斑病斑和空斑枯斑(1)包涵體(inclusionbody)概念:感染病毒的宿主細(xì)胞內(nèi),出現(xiàn)在光學(xué)顯微鏡下可見的大小、 形態(tài)、數(shù)量不等的小體。形成部位:細(xì)胞核內(nèi)—如包疹病毒細(xì)胞質(zhì)內(nèi)—如狂犬病毒等核內(nèi)和胞質(zhì)都有—麻疹病毒
本質(zhì)—大多數(shù)是病毒粒子組成的,是病毒在寄主細(xì)胞中形成的聚集體,包含未裝配的病毒亞基、完整的病毒體和寄主編碼的蛋白質(zhì)。少數(shù)是細(xì)胞對病毒的反應(yīng)。實踐意義—-病毒鑒定,臨床診斷依據(jù)
在宿主細(xì)胞內(nèi)形成包涵體是病毒的特征,不同的病毒其形成的包涵體具有不同的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和特性,可用于分類鑒定。(2)噬菌斑(plaque)概念:噬菌斑是指在宿主細(xì)菌的菌苔上,噬菌體使菌體裂解而形成的空斑。應(yīng)用:1、噬菌體定量計數(shù)
2、噬菌體的鑒定只要噬菌體稀釋倍數(shù)足夠高,就可以保證每一個噬菌斑是由一個噬菌體粒子形成的。(3)病斑和空斑用于動物病毒粒子的計數(shù)也可以采用噬菌斑法類似的技術(shù),但這種斑點只能稱為空斑或病斑。人工培養(yǎng)的單層動物細(xì)胞感染病毒后,也會形成類似噬菌斑的動物病毒群體,稱為空斑。單層動物細(xì)胞受到腫瘤病毒的感染后,會使動物細(xì)胞惡性增生,形成類似細(xì)菌菌落的病灶,稱為病斑。(4)枯斑植物病毒在植物葉片上形成的一個個壞死的病灶稱為枯斑。
病毒的半數(shù)存活期:在60℃以秒計在37℃以分計在20℃以小時計在4℃以天計在-20℃以月計五、環(huán)境對病毒的影響:1、溫度:
病毒大都不耐熱,55—60℃幾分鐘就能殺死病毒,使病毒失去感染力。病毒對低溫不敏感,低溫下病毒停止復(fù)制,但仍能存活較長時間。2、pH
X射線、r射線和紫外線照射均可使病毒滅活。
適合病毒的pH是7.0左右,但不同的病毒對pH的容許范圍限不一樣。過酸過堿的溶液可使病毒裂解滅活或喪失其感染性。
煙草花葉病毒:pH2.0—8.0牛痘病毒:pH5.0—9.5
E.coli
噬菌體:pH6.0—9.03、輻射:有包膜的病毒因包膜中含有脂類,故對脂溶劑敏感。甲醛能使病毒滅活,所以常用甲醛來清洗污染了病毒的器具。
氯、碘對病毒有高度的滅活作用。
4、化學(xué)藥劑:五、病毒的分類分類依據(jù)包括病毒形態(tài)、毒粒結(jié)構(gòu)、基因組、復(fù)制、化學(xué)組成在內(nèi)的毒粒性質(zhì)、病毒的抗原性質(zhì)以及生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分類。
ICTV(InternationalCommitteeonTaxonomyofVirus)批準(zhǔn)的病毒分類系統(tǒng)3個目,
62個科,216個屬,另加亞病毒感染因子衛(wèi)星病毒、類病毒(下分2科7屬)和朊病毒,共約4000種。dsDNA
病毒:有尾噬菌體目(下分3科15個屬)未分目的科:17個科(下分47個屬)ssDNA
病毒:未分目的科:5個科(下分17個屬)RNA-DNA逆轉(zhuǎn)錄病毒: 未分目的科:5個科(下分19個屬)dsRNA
病毒: 未分目的科:6個科(下分22個屬)裸露RNA病毒: 未分目的科:1個科(下分2個屬)-ssRNA
病毒: 單分子負(fù)鏈RNA病毒目(下分4個科,14個屬) 未分目的科:3個科(下分13個屬)+ssRNA
病毒: 未分目的科:16個科(下分73個屬)套病毒目(下分2個科,3個屬)第三節(jié)病毒的復(fù)制病毒生長繁殖的特點:嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生物,只能在活細(xì)胞內(nèi)繁殖。毒粒宿主細(xì)胞有繁殖性的病毒基因組具有感染性的毒粒消失病毒基因組復(fù)制、表達(dá)病毒核酸和蛋白質(zhì)裝配形成具有感染性的毒粒釋放至細(xì)胞外原料;能量;生物合成場所;一、病毒的復(fù)制周期1、一步生長曲線(onestepgrowthcurve)1939年,MaxDelbruck
&EmoryEllis,E.coli/bacteriopage,該實驗標(biāo)志著分子病毒學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立。MaxDelbruck因此榮獲1969年NobelPrize1、用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細(xì)胞;2、數(shù)分鐘后,加入抗噬菌體的抗血清(中和未吸附的噬菌體);3、將上述混合物大量稀釋,終止抗血清的作用和防止新釋放的噬菌體感染其它細(xì)胞;4、保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價(對噬菌體含量進(jìn)行計數(shù));5、以感染時間為橫坐標(biāo),病毒的感染效價為縱坐標(biāo),繪出病毒特征性的繁殖曲線。噬菌體復(fù)制(繁殖):(一步生長曲線)1、吸附期;游離的噬菌體吸附到宿主細(xì)胞2、潛伏期;從噬菌體吸附到細(xì)胞到釋放出新噬菌體的最短時期3、裂解期;隨著菌體不斷破裂,新噬菌體數(shù)目增加,直到最高值1、一步生長曲線(onestepgrowthcurve)裂解量:每個受染細(xì)胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。一步生長曲線one-stepgrowthcurve
一步生長曲線是指能定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實驗曲線。通過測定噬菌體侵染和成熟病毒體釋放的時間間隔,用以估計每個被侵染的細(xì)胞釋放出來的新的噬菌體粒子的數(shù)量。
將高濃度的敏感菌培養(yǎng)物與適量相應(yīng)的噬菌體懸液相混合一定時間。以離心或加入抗病毒血清除去過量的游離噬菌體,把經(jīng)過上述處理的菌懸液進(jìn)行高倍稀釋,以免發(fā)生第二次吸附和感染,致使每個菌體只含有一噬菌體,培養(yǎng)后每隔一定時間取樣,接種于敏感菌培養(yǎng)物中培養(yǎng),通過固體培養(yǎng)物表面噬菌斑的多少,就可測知每個噬菌體感染細(xì)菌后釋放的新的噬菌體數(shù)目,再以培養(yǎng)時間為橫座標(biāo),以噬菌斑數(shù)為縱座標(biāo)作圖,繪成的曲線即為噬菌體的一步生長曲線。2侵入3脫殼4mRNA的轉(zhuǎn)錄5早期蛋白質(zhì)翻譯6DNA的復(fù)制7mRNA的轉(zhuǎn)錄8晚期蛋白質(zhì)的翻譯9毒粒的裝配10釋放1吸附2、病毒的復(fù)制周期吸附侵入早期:病毒特異性酶的合成病毒核酸復(fù)制病毒結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)合成裝配釋放病毒大分子合成以噬菌體代表,介紹各種病毒(動植病毒、噬菌體)復(fù)制周期各個階段的特點。感染真核細(xì)胞的DNA病毒的復(fù)制過程①吸附②侵入③脫殼,脫出的DNA向核內(nèi)移動④轉(zhuǎn)錄早期mRNA⑤翻譯“早期蛋白質(zhì)”,(主要是一些酶)⑥復(fù)制子代DNA,以子代DNA為模板轉(zhuǎn)錄后期mRNA⑦帶有遺傳信息的后期mRNA在細(xì)胞質(zhì)中移動并轉(zhuǎn)譯病毒蛋白質(zhì)(結(jié)構(gòu)蛋白)⑧合成的病毒蛋白質(zhì)向核內(nèi)移動⑨病毒DNA和蛋白質(zhì)在細(xì)胞核中組裝成成熟的病毒粒子⑩宿主細(xì)胞崩解,病毒釋放感染真核細(xì)胞的RNA病毒的復(fù)制過程①吸附;②侵入;③脫殼;④初期轉(zhuǎn)譯RNA多聚酶,合成細(xì)胞代謝的抑制物;⑤形成復(fù)制型;⑥形成復(fù)制中間型;⑦形成子代RNA;⑧轉(zhuǎn)譯后期蛋白質(zhì)(合成病毒蛋白質(zhì));⑨子代RNA與病毒蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中組裝成病毒粒子:⑩釋放。1、吸附
吸附是病毒表面蛋白與細(xì)胞受體特異性的結(jié)合,導(dǎo)致病毒附著與細(xì)胞表面,這是病毒感染的第一步。(1)病毒吸附蛋白(viralattachmentprotein,VAP)
能夠特異性地識別細(xì)胞受體并與之結(jié)合的毒粒表面的結(jié)構(gòu)蛋白分子。
(2)細(xì)胞受體(receptor)指能被病毒吸附蛋白特異性地識別并與之結(jié)合,介導(dǎo)病毒進(jìn)入細(xì)胞,啟動感染發(fā)生的細(xì)胞表面組分病毒吸附蛋白與細(xì)胞受體間的結(jié)合力來源于空間結(jié)構(gòu)的互補性,相互間的電荷、氫鍵、疏水性相互作用及范得華力。2、侵入動物病毒的侵入機制:完整病毒穿過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,如呼腸孤病毒。利用細(xì)胞的內(nèi)吞功能進(jìn)入細(xì)胞,又稱病毒入胞,如痘病毒毒粒包膜與細(xì)胞質(zhì)膜融合,病毒的內(nèi)部組分釋放到細(xì)胞質(zhì)中,如流感病毒。毒粒與宿主細(xì)胞結(jié)合后,殼體蛋白發(fā)生重排,核酸浸入細(xì)胞,如脊髓灰質(zhì)炎病毒。植物病毒的侵入機制:從植物傷口侵入和通過帶病毒昆蟲刺吸式口器感染噬菌體的侵入機制:尾鞘收縮,將病毒核酸注入細(xì)胞,或從細(xì)菌菌毛進(jìn)入3、脫殼病毒侵入后,病毒的包膜和/或殼體除去而釋放出病毒核酸靠胞飲方式進(jìn)入的病毒,靠細(xì)胞內(nèi)的溶酶體分泌的將殼體和包膜降解去掉。尾鞘收縮注入核酸進(jìn)入寄主細(xì)胞的病毒在吸附和侵入時殼體就已破損,留在寄主細(xì)胞外。不存在侵入后的脫殼問題。還有的病毒靠寄主細(xì)胞在病毒感染后合成的脫殼酶幫助脫殼。4、生物合成生物合成包括:核酸的復(fù)制、mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成早期轉(zhuǎn)錄:發(fā)生在核酸復(fù)制以前的轉(zhuǎn)錄為早期轉(zhuǎn)錄,所轉(zhuǎn)錄的基因為早期基因。晚期轉(zhuǎn)錄:病毒核酸復(fù)制開始或復(fù)制以后進(jìn)行的轉(zhuǎn)錄為晚期轉(zhuǎn)錄,所轉(zhuǎn)錄的基因為晚期基因。不同核酸類型的病毒轉(zhuǎn)錄mRNA的方式A(+)RNAcanbetranslatedintoviralprotein.(+)and(-)strandsarecomplementary.
5、裝配在病毒感染的細(xì)胞內(nèi),新合成的毒粒結(jié)構(gòu)組分以一定的方式結(jié)合,組裝成完整的新的病毒粒子的過程為裝配。大多數(shù)DNA病毒核酸在寄主核內(nèi)復(fù)制,蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中合成。合成好的蛋白質(zhì)再運到核中組裝.大多數(shù)RNA病毒,核酸的復(fù)制,蛋白質(zhì)的合成,病毒的裝配均在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行.6、釋放成熟病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的過程稱為釋放。
動物病毒的釋放:
a.通過細(xì)胞溶解或局部破裂釋放。
b.通過“出芽”釋放,一些有包膜的病毒靠此方式獲得包膜。
c.沿核周與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相通部位從細(xì)胞內(nèi)逐漸釋放。
d.通過細(xì)胞間的接觸擴散。
植物病毒的釋放:
a.靠細(xì)胞破裂。
b.靠胞間連絲在細(xì)胞間傳播。
細(xì)菌病毒(噬菌體):
a.細(xì)胞裂解。
b.靠性菌毛從一個細(xì)菌傳到另一個細(xì)菌。
第四節(jié)噬菌體寄生在細(xì)菌和放線菌上的病毒稱為噬菌體或者叫細(xì)菌病毒,其所含核酸多數(shù)為DNA,少數(shù)為RNA。
寄生在真菌上的病毒叫噬真菌體或叫真菌病毒,為雙鏈RNA病毒。
寄生在藍(lán)細(xì)菌上的病毒叫噬藍(lán)藻體。都是雙鏈DNA病毒。
噬菌體的發(fā)現(xiàn):1915陶爾特;1917第赫蘭爾陶爾特—第赫蘭爾現(xiàn)象一、噬菌體的形態(tài)蝌蚪形、球形、和絲狀類型形態(tài)特征核酸類型
噬菌體舉例
寄主種類
1具六角形頭部及伸縮性長尾
ds—DNA
T2,T4,T6
E.coli.,Pseudomonas,
Bacillus,
粘球菌,沙門氏菌2具六角形頭部及不伸縮的長尾
ds—DNA
λT1,T5
E.coli,Pseudomonas,棒桿菌,鏈霉菌
3具六角形頭部及不伸縮短尾
ds—DNA
T3,T7,P22
E.coli,PseudomonasBacillus,土壤桿菌,沙門氏菌
4無尾,六角形頭部的頂點殼粒大
ss—DNA
φX174,S13
E.coli,沙門氏菌等
5無尾,六角形頭部頂點殼粒小
ss—RNA
R17,f2,MS2,Qβ
E.coli,Pseudomonas.柄細(xì)菌等
6無頭尾之分,病毒粒子線狀
ss—DNA
Fd,M13,f1,Vb
E.coli,Pseudomonas
蛋白質(zhì)外殼核酸頭部頸圈尾髓尾鞘尾釘尾板尾絲尾部二、噬菌體的結(jié)構(gòu):★T-系噬菌體——研究得最廣泛而又深入的噬菌體,按發(fā)現(xiàn)的先后順序從T1T7編號,后來發(fā)現(xiàn)其中偶數(shù)者的形態(tài)都相同(蝌蚪形收縮性長尾),故統(tǒng)稱T偶數(shù)噬菌體?!锪倚允删w、溫和噬菌體溫和噬菌體(temperatephrage
orlysogenicphages)——某些噬菌體感染宿主細(xì)胞后,將其核酸或整合到宿主細(xì)胞染色體上,或游離在宿主細(xì)胞質(zhì)中并隨宿主細(xì)胞的分裂把噬菌體的核酸傳給子細(xì)胞。這種感染宿主細(xì)胞后不引起宿主細(xì)胞迅速裂解的噬菌體稱為溫和噬菌體。烈性噬菌體(virulentphage)——感染細(xì)胞后,能在寄主細(xì)胞內(nèi)增殖,產(chǎn)生大量子代噬菌體并引起細(xì)菌裂解的噬菌體。溶原細(xì)胞(lysogeniccells)
含有溫和噬菌體的細(xì)胞稱為溶原細(xì)菌(或溶原細(xì)胞)。整合在宿主染色體上的噬菌體DNA稱為前噬菌體。溶源性感染對細(xì)胞的影響:其它同類噬菌體可以再次感染該細(xì)胞,但不增殖,也不導(dǎo)致溶源性細(xì)菌裂解。原噬菌體引起的溶源性細(xì)菌除免疫性外的其他的表形改變,包括溶源菌細(xì)胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變被稱為溶源轉(zhuǎn)變(lysogenicconversion)。溶源菌中的溫和噬菌體基因組:不影響細(xì)胞的繁殖功能,但可能引起其他的細(xì)胞變化。(1)免疫性(2)溶源轉(zhuǎn)變白喉桿菌只有在含有特定類型的原噬菌體時才能產(chǎn)生白喉毒素,引起被感染機體發(fā)病。λ噬菌體的溶源性循環(huán)裂解循環(huán)溶源性循環(huán)細(xì)菌染色體噬菌體DNA噬菌體吸附、侵入噬菌體DNA環(huán)化、進(jìn)入循環(huán)細(xì)胞裂解,噬菌體釋放新的噬菌體復(fù)制、組裝噬菌體DNA整合到細(xì)菌染色體中成為原噬菌體原噬菌體溶源細(xì)菌正常復(fù)制偶爾,原噬菌體從細(xì)菌染色體上脫落下來從新進(jìn)入循環(huán)溶源細(xì)菌的基本特性:(1)自發(fā)消除(2)自發(fā)、誘發(fā)裂解(3)可復(fù)愈性(4)免疫性(5)溶源轉(zhuǎn)變①可以自發(fā)地消除噬菌體DNA②可以自發(fā)或人工誘發(fā)變?yōu)榱倚允删wvirulentphage③溶原細(xì)胞可失去噬菌體的核酸后復(fù)愈④溶原細(xì)菌對同源噬菌體的感染具有免疫性⑤某些溶原細(xì)菌可以合成特殊的代謝產(chǎn)物,如白喉桿菌只有在被噬菌體感染形成溶原細(xì)菌后才能產(chǎn)生白喉毒素。λ噬菌體DNA通常整合到宿主染色體上,并有特定位點,在bio和gal基因之間。PI噬菌體感染宿主后主要游離在細(xì)胞質(zhì)中,如果整合到宿主染色體上也是隨機插入,沒有特定位點。真菌病毒Mycoviruses:dsRNA藻類病毒Phycoviruses:dsDNA原生動物病毒噬菌體的應(yīng)用用于鑒定未知細(xì)菌用于治療某些傳染性疾病利用噬菌體可以檢驗由種子攜帶的植物病原菌測定輻射劑量在分子生物學(xué)研究方面的應(yīng)用通過對大腸桿菌噬菌體侵染過程的研究,闡明了遺傳學(xué)的基本問題。是基因工程的重要載體。噬菌體的防治選育抗噬菌體的突變株第五節(jié)植物病毒定義:感染植物的病毒。引起的癥狀:
①葉綠體受到破壞而引起的花葉、黃化、紅化等②植株矮化、從簇、畸形等③形成枯斑、壞死等。特點①粒子形態(tài)多為桿狀②核酸主要為單鏈RNA③感染的?;圆粡?一種病毒可感染不同科、屬的植物④混合感染常見,即一種植物可被多種病毒感染⑤在感染宿主細(xì)胞內(nèi)由病毒粒子堆疊成結(jié)晶性內(nèi)含體或者是由病毒粒子與細(xì)胞組分形成非結(jié)晶性內(nèi)含體。第六節(jié)脊椎動物病毒單鏈或雙鏈,DNA(天花)或RNA(流感)。有的具有包膜,有的不具有包膜。多為球狀,大小變化很大。有的動物病毒參與了正常動物細(xì)胞轉(zhuǎn)化成癌細(xì)胞的過程。人類疾?。?0%的傳染病由病毒引起。如:天花,流感,肝炎,麻疹,脊髓灰質(zhì)炎,愛滋病等畜禽疾?。嚎谔阋?,狂犬病,瘋牛病,豬瘟,雞新城疫等,其中前三種為人畜共患。動物病毒的侵入AIDS(acquiredimmunedeficiencysyndrome)最早分離到HIV的人是法國的盧克蒙塔博士。1983年,他在《Science》報道從同性戀人血清中分離到新的逆轉(zhuǎn)錄病毒。1986年,WHO定名為HIV(humanimmunodeficiencyvirus)HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒,感染并殺死T4淋巴細(xì)胞。球形,直徑約100nm,有包膜與刺突。全球:500萬感染者,4000萬攜帶者,非洲比例最高,博茨瓦那,10%。中國:20萬感染者,100萬攜帶者。傳播途徑輸血與血制品母乳傳播性生活傳播防治潔身自好,嚴(yán)格控制血制品雞尾酒療法(何大一),死亡率減半口蹄疫(FMD:footandmouthdisease)病毒特點烈性傳染性RNA病毒。主要感染牛、羊、豬等偶蹄動物,人畜共患,春季最勝,使仔豬大批死亡,成年動物感染較少,不致死,掉膘、少奶、少毛。對日光、熱、酸、堿敏感。癥狀體溫升高,精神不振,食欲降低,口腔、鼻吻部、蹄部產(chǎn)生水皰和潰爛。傳播呼出氣體、排泄物。預(yù)防檢疫、封鎖消毒:1-2%火堿、3-5%福爾馬林、0.2-0.3%過氧乙酸注射疫苗危害無食品安全問題,人感染<40例,較輕。對畜牧業(yè)危害遠(yuǎn)大于瘋牛病。英國:至2001.4屠宰220萬頭牛、羊、豬。中國:只進(jìn)口魚粉一種動物性蛋白原料。瘋牛?。∕CD:madcowdisease)是牛海綿狀腦病的俗稱,瘋牛病的病因是朊病毒,朊病毒(Prion
Protein,PrPcs)是一種糖蛋白,分子量27-30kd,極端耐熱,抵抗對各種射線及消毒劑,1320C3小時或2mol/L的NaOH12小時才失活。傳染性:人畜共患,人庫魯病、克雅病、羊癢病等。癥狀:癡呆、震顫不穩(wěn)、智力減退,腦海綿狀病變,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損。危害:1985.4英國首先報道,已有18萬頭牛發(fā)病。100多人吃牛肉感染新型克雅病。傳播:吃病牛肉,主要方式自然界中存活草羊人防治對策:進(jìn)口檢疫,封、殺。禁止以反芻動物蛋白的飼料喂養(yǎng)反芻動物。發(fā)現(xiàn)與研究1950年DanielCarletonGajdusek調(diào)查大洋州巴布亞新幾內(nèi)亞的福爾族(Fore),婦女多發(fā)Kuru病,步不穩(wěn),陣攣,1-2年死亡。1956年,腦組織切片,海綿狀病變,腦漿內(nèi)空泡。隨后轉(zhuǎn)接其他靈長類動物,證實病原相同1976年D.C.Gajdusek獲得Nobelprize1982年,美國神經(jīng)生物學(xué)家Stanley
Prusiner提出朊病毒是病原,是一種蛋白(朊蛋白);1997年,獲得Nobelprize。Seriousactuerespiratorysyndrome(SARS)Caninecoronavirus(Coronaviridae)Atypicalpneumonias
H5N1病毒與人類流感病毒的4500個氨基酸只有19個不同,一旦差異性降到10個氨基酸,禽流感就會突變。世界衛(wèi)生組織指出,目前的H5N1型病毒株僅能通過禽類傳染給人體,但是這種病毒很容易變種,必須防范它與人類的流行性感冒病毒株接觸進(jìn)行基因重組,突變出“人傳人”的禽流感病毒。禽流感一旦在人際傳播,數(shù)億人生命將受到威脅。第七節(jié)昆蟲病毒
昆蟲病毒寄生在昆蟲體內(nèi)的病毒特點病毒粒子與宿主細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)形成包含體,包含體有一定的立體形狀,故又稱多角體。昆蟲病毒可分為: ①核型多角體病毒 ②質(zhì)型多角體病毒 ③顆粒體病毒 ④無包含體病毒核形多角體病毒(NPV):多個桿狀病毒粒子封閉在一個多角形包函體中,這種包函體存在于宿主細(xì)胞核中,NPV所含的核酸為dsDNA。
質(zhì)形多角體病毒(CPV):近球形的多個病毒粒子封閉在一個多角形的包含體中,這種包含體存在于宿主細(xì)胞質(zhì)中,CPV
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