遺傳學(xué)診斷在遺傳性耳聾中的應(yīng)用,醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)論文

遺傳學(xué)診斷在遺傳性耳聾中的應(yīng)用,醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)論文內(nèi)容摘要：1990年運(yùn)用胚胎移植前遺傳學(xué)診斷技術(shù)(Pre-implantationGeneticDiagnosis,PGD)的首例女嬰的成功誕生[1],標(biāo)志著PGD正式從實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)化到臨床應(yīng)用。PGD是采用輔助生殖醫(yī)學(xué)方式方法,通過(guò)遺傳學(xué)的診斷技術(shù),挑選健康的胚胎進(jìn)行子宮移植,它能夠?qū)y帶遺傳性致病基因的夫婦或者患者夫婦進(jìn)行孕前診斷,進(jìn)而獲得表型正常的后代,且避免因產(chǎn)前診斷為致病胚胎而帶來(lái)的能否選擇終止妊娠的痛苦及反復(fù)流產(chǎn)對(duì)孕婦的心身傷害。當(dāng)前PGD已廣泛運(yùn)用于單基因遺傳性疾病和染色體異常性疾病。近20多年來(lái),隨著輔助生殖技術(shù)和胚胎檢測(cè)技術(shù)的飛躍發(fā)展,PGD已應(yīng)用于近200種單基因遺傳性病,包括一些特殊單基因遺傳性疾病的人類白細(xì)胞抗原配型,遺傳性癌癥和線粒體疾病等。遺傳性耳聾絕大部分為單基因變異,具有PGD適應(yīng)癥。隨著新一代測(cè)序技術(shù)廣泛應(yīng)用,胚胎診斷技術(shù)準(zhǔn)確性及效率均有很大提高。本文通過(guò)文獻(xiàn)溫習(xí),綜述PGD的新進(jìn)展以及其在遺傳性耳聾疾病的應(yīng)用。本文關(guān)鍵詞語(yǔ)：胚胎移植,遺傳學(xué)應(yīng)用,遺傳性耳聾,應(yīng)用1PGD應(yīng)用范疇1.1單基因遺傳性疾病單基因遺傳性疾病即孟德爾遺傳病,是根據(jù)孟德爾方式傳遞的疾病,一般由一對(duì)等位基因控制單個(gè)基因突變引起,牽涉單個(gè)核苷酸改變到整個(gè)基因改變。單基因遺傳性疾病致病單基因及致病突變點(diǎn)確實(shí)定,是PGD的基礎(chǔ)。根據(jù)歐洲人類生殖和胚胎學(xué)協(xié)會(huì)(theEuropeanSocietyofHumanReproductionandEmbryology,ESHRE)-PGD協(xié)作組2020年[2]發(fā)表的運(yùn)用于PGD的單基因遺傳性疾病譜:當(dāng)前有近200種單基因遺傳性疾病已采用PGD的方式方法來(lái)避免垂直傳遞,華而不實(shí)-地中海貧血(beta-thalassemia)、囊性纖維化(cysticfibrosis)、亨廷頓舞蹈病(Huntingtondis-ease)、強(qiáng)直性肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(myotonicdystrophy)、脆性X染色體綜合征(fragileXsyndrome)在臨床周期中排前5名;有耳聾表型的疾病中包括常染色體顯性遺傳的綜合征(Waardenburgsyndrome,Neurofibromatosistype2,TreacherCollinssyndrome,Branchio-oto-renalsyn-drome),常染色體隱性遺傳的綜合征(Ushersyndrome)以及非綜合征遺傳性耳聾(詳細(xì)基因型不詳)。由上可見(jiàn),盡管遺傳性耳聾十分是非綜合征遺傳性耳聾的致畸性在全世界的某些地區(qū)和某些社團(tuán)有爭(zhēng)議[3,4],但絕大部分人群希望在明確致病基因的基礎(chǔ)上,通過(guò)孕期或者產(chǎn)前的方式避免遺傳性耳聾疾病的垂直傳遞,孕育正常聽力后代[5,6,7,8]。1.2染色體異常和胚胎植入前遺傳學(xué)篩查(preimplanta-tiongeneticscreening,PGS)在ESHRE歷年頒布的數(shù)據(jù)中,因染色體構(gòu)造異常而行PGD的病例數(shù)幾乎與單基因遺傳性疾病并重。染色體異?，F(xiàn)象在人類普遍存在,在新生兒中約占0.9%,在孕早期自然流產(chǎn)的人群中,染色體異常因素占50-60%[9]。攜帶平衡的染色體構(gòu)造重排的人群,如倒位和羅伯遜易位,這些平衡易位者表型正常,但她們可能面臨反復(fù)流產(chǎn)、不孕或者后代有先天性畸形和智力減退的高風(fēng)險(xiǎn)。這些問(wèn)題都可能歸結(jié)于在減數(shù)分裂經(jīng)過(guò)中染色體分離方式,最終導(dǎo)致配子染色體不平衡。一般來(lái)講,易位攜帶者精子多數(shù)為不平衡的,少數(shù)為正常的[10]。研究倒位攜帶者PGD的胚胎中,其染色體分離時(shí),發(fā)現(xiàn)不同的分離方式胚胎有很高頻率的染色體不平衡,80%的胚胎染色體異常[11]。羅伯遜易位攜帶者(無(wú)論男性或者女性)2/3的胚胎染色體不平衡[12]。固然胚胎有如此高的染色體異常,但是研究發(fā)現(xiàn)PGD能夠改善攜帶平衡染色體重排人群的妊娠結(jié)果,尤其是反復(fù)流產(chǎn)的人[13,14]。1995年,VerlinskyY發(fā)表文章[15],以為在輔助生殖經(jīng)過(guò)中,檢測(cè)胚胎的非整倍性,能夠提高妊娠率,從此引入一個(gè)新的概念-胚胎植入前遺傳學(xué)篩查(preimplantationgeneticscreeningPGS)。PGS所采用的技術(shù)和PGD大致一樣,但其定位是篩查,相對(duì)PGD來(lái)講,是屬于低危,由于不牽涉某一遺傳性疾病在一個(gè)家庭中的傳遞。PGS作為輔助生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)技術(shù),主要目的是提高妊娠率,適用于高齡,反復(fù)輔助生殖經(jīng)過(guò)中移植失敗和反復(fù)流產(chǎn)。PGS當(dāng)前仍有爭(zhēng)議,之前的報(bào)道多為非隨機(jī)的低水平的研究,當(dāng)前的隨機(jī)對(duì)照研究顯示并不能提高分娩率[16]。原因可能為:1)檢測(cè)標(biāo)本的不具有代表性,分裂體有較高嵌合體;2)FISH檢測(cè)技術(shù)的局限性。不同時(shí)期的胚胎活檢和arrayCGH技術(shù)檢測(cè)23對(duì)染色體的非整倍性的策略施行后,可通過(guò)輔助生殖分娩率的高低來(lái)證明PGS的有效性。1.3人類白細(xì)胞抗原配型PGD聯(lián)合人類白細(xì)胞抗原配型是PGD運(yùn)用于臨床的新領(lǐng)域。在一些家庭中,比方淋巴瘤或者-地中海貧血兒童患者后期,需要造血干細(xì)胞移植。這些患者在疾病晚期,最好的治療是進(jìn)行人類白細(xì)胞抗原配型成功的造血干細(xì)胞移植,但是臨床經(jīng)過(guò)中,供體非常有限。有的父母為給患病晚期的孩子提供適宜的供體,他們會(huì)選擇再次懷孕,但是這種自然懷孕只要1/4的時(shí)機(jī)與患兒的白細(xì)胞抗原配型成功,這就意味著為拯救疾病晚期的孩子需獲得完全配型的造血干細(xì)胞,父母親不得不反復(fù)懷孕,通常因胚胎與先證者不配型而終止妊娠。通過(guò)PGD-HLA配型后,挑選HLA配型的胚胎進(jìn)行移植,就能夠解決這個(gè)問(wèn)題。當(dāng)然,PGD-HLA配型本身也有局限性,經(jīng)白細(xì)胞抗原附件的標(biāo)記連鎖分析后與先證者完全配型的胚胎數(shù)目會(huì)比擬少。在概率上講,單基因隱性遺傳疾病在PGD中得到可移植胚胎(正常和攜帶)的幾率為75%(這是PGD的首要目的),得到與病兒HLA相配胚胎的幾率是25%,得到可送并與病兒HLA相配胚胎的幾率為75%25%=19%。自2001年YuryVerlinsky[17]報(bào)道首例范可尼貧血癥PGD-HLA配型成功,PGD已發(fā)展到可在一次PGD經(jīng)過(guò)中完成HLA配型鑒定,不但能夠得到無(wú)此遺傳性疾病的胎兒,還能夠得到與有此病的兄姐的HLA相配的無(wú)病嬰兒,在其出生時(shí)保存其臍帶血(干細(xì)胞)用來(lái)患病兄姐的治療。當(dāng)前PGD-HLA配型已經(jīng)在-地中海貧血,鐮狀細(xì)胞性貧血,急性淋巴細(xì)胞性白血病,骨髓異常增生癥,Wiskott-Aldrich綜合征(濕疹血小板減少伴免疫缺陷綜合征),骨硬化癥,X連鎖的慢性肉芽腫疾病等疾病中應(yīng)用。隨著遺傳性耳聾干細(xì)胞治療研究的深切進(jìn)入,希望在不久的將來(lái),能通過(guò)PGD-HLA應(yīng)用于遺傳性耳聾疾病,不僅能治療先證者,而且讓父母同時(shí)擁有一個(gè)正常聽力兒。1.4有遺傳性傾向癌癥盡管當(dāng)前PGD應(yīng)用于成人遲發(fā)性疾病倫理學(xué)有爭(zhēng)議,但是臨床方面一直在探尋求索,自YuryVerlin-sky2001年[18]首例Li-FranmenisyndromePGD成功后,乳腺癌,遺傳性乳頭狀腎癌,視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤,家族性腺瘤性息肉病等有遺傳傾向的腫瘤疾病已經(jīng)采用PGD的方式方法來(lái)避免在家庭中的垂直傳遞。1.5線粒體疾病PGD是某些線粒體疾病避免在家庭中傳遞最好的選擇,由于mtDNA遵循嚴(yán)密的母系遺傳方式,決定突變垂直傳代的類型,即由母親傳給男女后代,而且女兒會(huì)繼續(xù)傳給下代,類似于孟德爾的常顯及伴性(X)連鎖類型。華而不實(shí)比擬典型的是線粒體腦肌病伴高乳酸血癥和卒中樣發(fā)作(MitochondrialEncephalomyopa-thy,LacticAcidosisandStroke-likeEpisodes,MELAS):近80%病例為A3243G(線粒體編碼亮氨酸t(yī)RNA)突變,在ESHRE2020年頒布的數(shù)據(jù)中,曾在2018年做2個(gè)周期的此病[2]。線粒體遺傳性耳聾中,m1555AG和m1494CT突變可因氨基糖甙類藥物誘導(dǎo)感音神經(jīng)性耳聾。一旦發(fā)病當(dāng)前尚無(wú)有效藥物治療,發(fā)現(xiàn)有此基因突變的患者終身禁用氨基糖甙類藥物。高危家庭中為避免患有線粒體疾病的嬰兒出生最佳途徑是檢查囊胚細(xì)胞,評(píng)估線粒體突變的幾率,將患病幾率最小的胚胎進(jìn)行移植,這是傳統(tǒng)的PGD途徑。英國(guó)議會(huì)下院于2021年2月5日投票通過(guò)一項(xiàng)歷史性的法案,同意英國(guó)研究人員繼續(xù)開展通過(guò)醫(yī)學(xué)方式方法防止線粒體遺傳性疾病垂直傳遞的研究。亦稱為線粒體DNA替代療法。即采用輔助生殖的方式方法,將來(lái)自攜帶缺陷線粒體卵細(xì)胞的細(xì)胞核轉(zhuǎn)移到健康線粒體的捐獻(xiàn)者卵子內(nèi),由此構(gòu)成的胚胎將擁有父母親的細(xì)胞核的DNA和卵子捐獻(xiàn)者的線粒體DNA。由于引入的線粒體基因只占嬰兒總基因的0.1%,可能不會(huì)影響嬰兒的相貌等其他特征。這是PGD技術(shù)新的延伸。當(dāng)前該技術(shù)還需上議院獲批。固然英國(guó)的倫理及科學(xué)審查及民意征詢均支持該技術(shù)在人類開展實(shí)驗(yàn)性應(yīng)用,但美國(guó)相關(guān)部門還在考慮能否使用該技術(shù)。2活檢材料2.1傳統(tǒng)活檢材料PGD經(jīng)過(guò)需要DNA進(jìn)行遺傳學(xué)檢測(cè),當(dāng)前主要有3種途徑獲得DNA:1)卵子第一極體和第二極體活檢,獲取第一極體或者第二極體;2)培養(yǎng)至第3天胚胎卵裂期對(duì)卵裂球活檢,一般取1-2個(gè)卵裂球細(xì)胞;3)培養(yǎng)第5天囊胚期對(duì)外胚層滋養(yǎng)細(xì)胞活檢,一般取5-15個(gè)外胚層滋養(yǎng)細(xì)胞。以上3種方式都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。2.1.1極體活檢女性性成熟后每個(gè)月經(jīng)周期有部分卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂,排出第一極體后完成第一次減數(shù)分裂;排卵后,卵母細(xì)胞休止于第二次減數(shù)分裂中期,此時(shí)的卵母細(xì)胞一旦與精子相遇,就排出第二極體,完成第二次減數(shù)分裂。極體是單倍體細(xì)胞,與卵細(xì)胞的染色體核型互相對(duì)應(yīng)。極體的活檢已經(jīng)成功應(yīng)用于母源性單基因遺傳性疾病和染色體疾病,極體是減數(shù)分裂的排泄物,能保存胚胎的完好性。有些國(guó)家禁止對(duì)合子進(jìn)行活檢取材,極體恰好能避免此類倫理沖突。但是極體不能對(duì)父源性,卵裂后的異常進(jìn)行檢測(cè),且固定極體需要較高的技術(shù)性。2.1.2分裂體期活檢分裂體期對(duì)分裂球活檢,即受精后第3天6-8細(xì)胞期吸出1個(gè)或者2個(gè)細(xì)胞。分裂球的DNA來(lái)自父母雙方。而且在活檢后即便在不冷凍的情況下能夠繼續(xù)培養(yǎng)第2天至第5天的囊胚期,這為遺傳學(xué)檢測(cè)留有48小時(shí)時(shí)間。分裂體期活檢當(dāng)前仍在被廣泛應(yīng)用。但是取1個(gè)細(xì)胞因單一DNA量可能會(huì)對(duì)診斷造成困擾,十分是嵌合體的存在。而當(dāng)前有研究以為取2個(gè)細(xì)胞又會(huì)造成活胎率的降低[19]。隨著新型配方簡(jiǎn)化的胚胎培養(yǎng)基的引入,體外培養(yǎng)胚胎的發(fā)育率得到極大的提高,胚胎體外培養(yǎng)的時(shí)間可延長(zhǎng)至體外受精后第5天的囊胚期。囊胚培養(yǎng)技術(shù)的出現(xiàn)提供了新的獲取DNA樣本的途徑。囊胚外胚層滋養(yǎng)層細(xì)胞最終發(fā)育成胚外組織如胎盤等,同時(shí)能夠代表整個(gè)胚胎的遺傳學(xué)狀況,新方式方法利用激光切開囊胚的透明帶,獲取5-15個(gè)左右的外胚層滋養(yǎng)細(xì)胞用于遺傳學(xué)檢測(cè)。采用外胚層滋養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行PGD的優(yōu)勢(shì)總結(jié)如下:1)細(xì)胞數(shù)量?jī)?yōu)勢(shì)即DNA優(yōu)勢(shì)提高診斷的準(zhǔn)確性,因囊胚活檢可得到5-15個(gè)細(xì)胞,與一般只能獲取單細(xì)胞或者2個(gè)細(xì)胞的分裂體期活檢相比,等位基因的脫扣(alleledropout,ADO)更少,嵌合體導(dǎo)致的誤診率更低。2)提高臨床的單胎妊娠率和出生率。某些原因可能會(huì)導(dǎo)致從D3培養(yǎng)至D5的一部分可能有缺陷的分裂體的淘汰(盡管此觀點(diǎn)當(dāng)前尚有爭(zhēng)議)。而囊胚活檢經(jīng)過(guò)中的透明帶打孔和人工皺縮囊胚腔等操作對(duì)胚胎的發(fā)育有利[20]。另外隨著玻璃化凍存技術(shù)推廣,為囊胚活檢后遺傳性檢測(cè)提供大量時(shí)間,臨床醫(yī)生能夠選擇在下一自然月經(jīng)周期排卵后子宮內(nèi)膜同步化增厚,更合適囊胚的著床。而且囊胚經(jīng)玻璃化凍存后,不影響移植的妊娠率和出生率,甚至比鮮胚移植結(jié)果更好。綜上所述,通過(guò)囊胚活檢,同時(shí)選擇優(yōu)勢(shì)囊胚進(jìn)行移植,可提高單胎的妊娠率和出生率。盡管囊胚的活檢比分裂體更復(fù)雜,隨著此項(xiàng)技術(shù)的普及,已經(jīng)成為各生殖中心的常規(guī)操作。2.2囊胚胚液診斷SPalini2020[21]報(bào)道初次通過(guò)實(shí)時(shí)PCR方式方法,發(fā)如今玻璃化冷凍經(jīng)過(guò)中收集的囊胚胚液中90%存在基因組DNA。并且通過(guò)擴(kuò)增Y染色體上的TSPY1基因鑒定囊胚的性別,這為攜帶X-連鎖疾病的夫婦鑒定男性胚胎提供可能,而對(duì)胚液進(jìn)行全基因組擴(kuò)增為更進(jìn)一步基因檢測(cè)奠定基礎(chǔ)。此途徑最大的優(yōu)勢(shì)是胚液不牽涉到細(xì)胞的丟失,相對(duì)分裂體和囊胚活檢來(lái)講,是一種無(wú)創(chuàng)的活檢方式方法。J.Cohen[22]在SPalini同年發(fā)表的文章稱贊其為無(wú)侵襲性活檢PGD的開場(chǎng)。盡管如此,當(dāng)前的研究還需確定下面問(wèn)題:1)囊胚胚液的DNA能否完全能代表囊胚的DNA;2)胚液DNA能否含有來(lái)自從胚胎排出的不正?；蛘呓到饧?xì)胞的DNA;3)此方式方法能否真的是無(wú)創(chuàng),固然提取胚液的經(jīng)過(guò)無(wú)細(xì)胞的吸出,但是在操作經(jīng)過(guò)中能否會(huì)影響囊胚的發(fā)育。等待囊胚胚液的深切進(jìn)入研究,為需行PGD/PGS家庭帶來(lái)更安全有效的活檢方式。3診斷技術(shù)3.1FISHFISH應(yīng)用于臨床約20年,主要檢測(cè)染色體異常和性別選擇。根據(jù)不同的情況,選擇特定帶有熒光標(biāo)記的探針與相應(yīng)需檢測(cè)的染色體結(jié)合后在顯微鏡下觀察熒光的信號(hào)做出結(jié)果的判定。但是FISH技術(shù)的局限性,如信號(hào)不清楚明晰,分析染色體數(shù)目限制等,導(dǎo)致其在PGD/PGS中應(yīng)用有所限制。3.2單細(xì)胞PCR單細(xì)胞PCR當(dāng)前主要用于單基因遺傳性疾病診斷。單細(xì)胞PCR與普通PCR相比因模板量少,可能面臨擴(kuò)增失敗、污染、等位基因脫扣等問(wèn)題。臨床檢測(cè)中多采用多重巢式熒光PCR的策略:多重是同時(shí)使用多個(gè)(一般為3個(gè)以上)目的基因附近的短串聯(lián)重復(fù)序列(shorttandemrepeat,STR)進(jìn)行連鎖分析以防止等位基因脫扣;采用巢式PCR能夠擴(kuò)增出更多目的產(chǎn)物;第二輪一端引物帶熒光,擴(kuò)增的帶熒光的產(chǎn)物可用毛細(xì)管電泳分析產(chǎn)物片段大小。此方式方法固然需要大量時(shí)間來(lái)優(yōu)化PCR條件,但是由于檢測(cè)周期短,花費(fèi)較低,準(zhǔn)確性較高,仍在單基因遺傳性疾病PGD中廣泛使用。3.3新技術(shù)應(yīng)用3.3.1單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增(wholegenomeamplifica-tion,WGA)技術(shù)因單細(xì)胞直接進(jìn)行PCR只要一次擴(kuò)增時(shí)機(jī),DNA產(chǎn)物量有限,進(jìn)行檢測(cè)的位點(diǎn)遭到限制。近年來(lái),WGA技術(shù)得到發(fā)展,能將單拷貝DNA進(jìn)行全基因組擴(kuò)增,為后續(xù)的遺傳學(xué)檢測(cè)提供足量的DNA。當(dāng)前常用技術(shù)有依靠PCR原理的簡(jiǎn)并寡核苷酸引物PCR(degenerateoligonucleotideprimedPCR,DOP-PCR),擴(kuò)增前引物延伸反響(primerextensionpreamplifica-tion,PEP);亦有不依靠PCR原理的基于酶促反響的多重替代擴(kuò)增(multipledisplacementamplification,MDA)。謝曉亮院士課題組于2020年在(Science〕[23]發(fā)表了一種全新的單細(xì)胞WGA的方式方法屢次退火環(huán)狀循環(huán)擴(kuò)增技術(shù)(multipleannealingandloopingbasedamplificationcycles,MALBAC),該技術(shù)起始模板量降到皮克級(jí),具有基因覆蓋度更廣,擴(kuò)增的均勻性提高,等位基因脫扣率大大降低等特點(diǎn),而且可成功應(yīng)用于單精子細(xì)胞[24],分裂球的非整倍性檢測(cè)[25]。等待此方式方法在臨床進(jìn)行擴(kuò)大范圍的驗(yàn)證,為單基因遺傳性疾病診斷提供更準(zhǔn)確的診斷。3.3.2新一代測(cè)序技術(shù)基因單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增技術(shù)的進(jìn)步,使得擁有足夠的DNA用于下游的遺傳學(xué)檢測(cè)。2005年Roche公司454測(cè)序儀的出現(xiàn),標(biāo)志著新一代測(cè)序技術(shù)(nextgenerationsequencingtechnology,NGS)問(wèn)世。目的區(qū)域捕獲聯(lián)合NGS是利用定制的探針與基因組DNA進(jìn)行雜交或者PCR捕獲目的基因組區(qū)域,隨后采用高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行測(cè)序的方式方法。對(duì)于明確致病基因的家庭,使用PGD方式方法避免致病基因垂直傳遞經(jīng)過(guò)中必然要挑選健康胚胎進(jìn)行移植。傳統(tǒng)的PCR需聯(lián)合STR位點(diǎn)監(jiān)測(cè)等位基因的脫扣,但是對(duì)于某些基因假如其上下游沒(méi)有足夠的STR位點(diǎn)或者一些由于種族關(guān)系等原因STR位點(diǎn)不是雜合造成此檢測(cè)方式方法的局限性。然而目的區(qū)域捕獲能包含目的基因區(qū)域和及其上下游高度嚴(yán)密連鎖的SNP,即采用SNP第3代遺傳標(biāo)記進(jìn)行監(jiān)測(cè),然后進(jìn)行高通量測(cè)序,通過(guò)家族的單體型連鎖分析,確定胎兒基因型的方式方法來(lái)進(jìn)行健康胚胎的挑選。G.Altarescu等在患CharcotMarieTooth1A(CMT1A)疾病的夫婦挑選胚胎經(jīng)過(guò)中[26],同時(shí)采用傳統(tǒng)的多重巢式PCR方式方法和SNP微陣列分析,結(jié)果提示SNP微陣列分析的結(jié)果具有準(zhǔn)確、可行、耗時(shí)短特點(diǎn)。4PGD在遺傳性耳聾中應(yīng)用4.1遺傳性耳聾大概情況及PGD應(yīng)用耳聾是人類最常見(jiàn)的感覺(jué)系統(tǒng)疾病,可分為綜合征和非綜合征性耳聾,世界上大約有3.6億患病。根據(jù)2006年第二次全國(guó)殘疾人抽樣調(diào)查報(bào)告,我們國(guó)家聽力殘疾人群有2780萬(wàn),華而不實(shí)0-6歲聽障兒童13.9萬(wàn),每年新生2-3萬(wàn)。遺傳因素在神經(jīng)性耳聾中超過(guò)50%。當(dāng)前已經(jīng)在非綜合征性耳聾中發(fā)現(xiàn)80多個(gè)相關(guān)基因)。GJB2是導(dǎo)致遺傳性非綜合征型耳聾最常見(jiàn)的基因。對(duì)于日益增大的耳聾人群,耳聾的早期診斷和干涉已成為防聾控聾的重中之中。在聾病的三級(jí)預(yù)防中,我們可通過(guò)高危家庭的有創(chuàng)產(chǎn)前診斷以及新生兒聽力與基因聯(lián)合篩查來(lái)減少聾兒的出生和早期診斷及干涉聽障兒童。但是對(duì)于有生育遺傳性耳聾的高危人群來(lái)講,假如經(jīng)歷1次以上有創(chuàng)產(chǎn)前診斷后且沒(méi)有能順利生育聽力正常的后代,PGD是理想而又可行的方式方法。在國(guó)際上,歐洲[2](波蘭的病例在文獻(xiàn)發(fā)表時(shí)為妊娠狀態(tài)[27]),以色列[28],沙特阿拉伯[5],中國(guó)臺(tái)灣[29]都有PGD應(yīng)用于遺傳性耳聾的成功案例。中國(guó)的科學(xué)家已經(jīng)在耳聾基因研究和臨床基因診斷方面獲得豐富的成果,隨著我們國(guó)家輔助生殖技術(shù)已與國(guó)際接軌,我們有能力將PGD技術(shù)成功應(yīng)用于遺傳性耳聾疾病,能使生育遺傳性耳聾患兒風(fēng)險(xiǎn)的高危家庭孕育聽力正常后代。4.2將PGD應(yīng)用于中國(guó)遺傳性耳聾疾病的意義中國(guó)人口基數(shù)大,每年的都有3萬(wàn)新增聾兒。因聾致啞導(dǎo)致的家庭和社會(huì)問(wèn)題尤為突出,聾人家庭承受宏大痛苦及沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。而且因聾致啞會(huì)嚴(yán)重影響我們國(guó)家的人口素質(zhì),增加我們國(guó)家的財(cái)政負(fù)擔(dān)。當(dāng)前通過(guò)遺傳咨詢,耳聾基因產(chǎn)前診斷和新生兒聽力聯(lián)合基因篩查策略來(lái)減少耳聾出生缺陷已經(jīng)獲得很大的成效。但是對(duì)于明確已經(jīng)知道致聾基因的家庭,渴望擁有正常聽力后代,然而通過(guò)傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷的方式方法只能判定胎兒的基因型。2018年,Klitzman在美國(guó)曾通過(guò)調(diào)查問(wèn)卷的形式對(duì)220名內(nèi)科醫(yī)生針對(duì)PGD應(yīng)用進(jìn)行了調(diào)查:僅7.1%內(nèi)科醫(yī)生覺(jué)得自個(gè)有資質(zhì)回答病人有關(guān)PGD的問(wèn)題,華而不實(shí)僅4.9%的內(nèi)科醫(yī)生將PGD技術(shù)介紹給病人選擇,而且也是針對(duì)最熟悉的囊性纖維變性[30]。上述調(diào)研結(jié)果講明PGD技術(shù)在全世界醫(yī)生中可能存在認(rèn)識(shí)缺乏。隨著更多的遺傳性耳聾家族中致聾基因的發(fā)現(xiàn),中國(guó)的耳鼻喉科醫(yī)生需深切進(jìn)入了解此技術(shù)。在確定致病基因及致病突變點(diǎn)的遺傳性耳聾家族中,假如家屬迫切希望擁有一個(gè)健康的聽力正常的后代,一旦傳統(tǒng)的產(chǎn)前診斷技術(shù)(包括絨毛膜和羊水穿刺)不能被接受或者反復(fù)的產(chǎn)前診斷確定為致病胎兒已經(jīng)深深地影響孕婦及家屬的心理及生理,PGD技術(shù)是理想而能接受的選擇。從衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)角度出發(fā),PGD費(fèi)用要低于人工耳蝸植入,十分是雙耳的人工耳蝸植入費(fèi),且無(wú)需終身維護(hù)和無(wú)身體終身殘疾。從孕婦角度考慮,因當(dāng)前的輔助生殖技術(shù)和遺傳學(xué)分子診斷技術(shù)已特別成熟,挑選健康胚胎植入子宮已完全可能,避免反復(fù)流產(chǎn)造成心理,生理傷害和倫理沖突。如成功將PGD技術(shù)廣泛運(yùn)用于遺傳性耳聾疾病,能阻斷大量耳聾基因的垂直傳遞,進(jìn)而減少人群耳聾基因突變的攜帶率。結(jié)束語(yǔ)PGD是輔助生殖領(lǐng)域的新技術(shù),通過(guò)它能夠在基因水平預(yù)防單基因遺傳性疾病的垂直傳遞。從心理和倫理上考慮,PGD比有創(chuàng)的絨毛或羊水活檢更易于被育齡婦女接受。綜述所述,PGD具有廣泛的應(yīng)用前景。但是PGD費(fèi)用較昂貴,而且花費(fèi)時(shí)間比擬長(zhǎng)。在應(yīng)用于成人遲發(fā)性疾病方面當(dāng)前仍有爭(zhēng)議。在PGD技