考研專業(yè)課-藥物分析

第十四章中藥及其制劑分析概論第一節(jié)概述

中藥：傳統(tǒng)藥物（中草藥）

（TraditionalChineseMedicine，TCM）中藥制劑：中成藥（單方或復(fù)方）《中國藥典》（2005年版）一部：

1146種：中藥材572種中藥制劑574種

TLC：鑒別1523項(xiàng)，含量45項(xiàng)

HPLC：含量479種

GC：47種中藥現(xiàn)代化（modernizationoftraditionalChinesemedicine）

運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段，研制、開發(fā)現(xiàn)代中藥制劑，實(shí)現(xiàn)能用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)闡明其藥效物質(zhì)和作用機(jī)制，能進(jìn)行集團(tuán)化種植和大規(guī)模生產(chǎn)，并能為國際市場所接受，有國際競爭力的現(xiàn)代中藥制劑。

化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分難確定中藥制劑要首選君藥、貴重藥和毒劇藥分析中藥制劑分析應(yīng)考慮藥材來源與炮制等影響4.中藥制劑應(yīng)針對不同工藝、劑型和輔料選擇分析方法和項(xiàng)目中藥制劑雜質(zhì)來源途徑多，針對性控制應(yīng)檢測盡可能多的有效成分，綜合評價質(zhì)量

一、中藥及其制劑分析的特點(diǎn)中藥及其制劑的分類與質(zhì)量分析要點(diǎn)二、

中藥材及其炮制品（飲片或提取物）液體制劑半固體制劑固體制劑氣體制劑（一）中藥材及其炮制品

中藥制劑的生產(chǎn)原料國家標(biāo)準(zhǔn)自訂標(biāo)準(zhǔn)

1.合劑與口服液（二）液體制劑2.酒劑與酊劑３.注射劑１．煎膏劑(膏滋)（三）半固體制劑２．流浸膏劑與浸膏劑3．糖漿劑1、

丸劑藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的合劑或輔料制成的球形或類球形制劑分為：蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等（四）固體制劑檢查：水分：重（裝）量差異：溶散時限：(小)水丸、水蜜丸≤1h

濃縮丸、糊丸≤2h微生物限度：2、

散劑一種或多種藥材混合制成的粉末狀制劑，分內(nèi)服和外用散劑

檢查項(xiàng)目均勻度水分≤9.0%裝量差異微生物限度3、顆粒劑適宜輔料與藥材提取物或藥材細(xì)粉制成的顆粒狀制劑分為可溶性、混懸性、泡騰性顆粒劑

檢查粒度：水分：≤5%

溶化性：10g200ml熱水完全溶化或混懸＞1號篩＜4號篩≤8%4、

片劑藥材細(xì)粉或浸膏加輔料壓制而成的片狀制劑檢查重量差異崩解時限5、膠囊劑硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑

檢查項(xiàng)目水分≤9%

裝量差異崩解時限（一）提取方法1、萃取法

利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同，使物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，將測定組分提取出來的方法三、中藥及其制劑分析中待測成分的提取分離與純化方法正丁醇——用于皂苷類醋酸乙酯——用于黃酮類氯仿——用于生物堿類乙醚、石油醚——用于揮發(fā)油（1）萃取溶劑的選擇（2）水相pH的選擇酸性成分——

比其pKa低1~2個pH單位堿性成分——

比其pKa高1~2個pH單位（3）儀器和提取次數(shù)（4）酒劑和酊劑——先揮去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鑒別——1次含量測定——3~4次2、冷浸法

樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時間的提取方法特點(diǎn)：簡便、費(fèi)時適用范圍：固體制劑與熱不穩(wěn)定組分3、回流提取法

樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流提取加快溶出速度，省時適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜較難溶出的組分特點(diǎn)儀器普通回流裝置4、連續(xù)回流提取法樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方法節(jié)省溶劑提高提取效率無需過濾適宜受熱穩(wěn)定的藥物特點(diǎn)儀器索氏提取器5、水蒸氣蒸餾法適用于具揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測定揮發(fā)油小分子生物堿：麻黃堿、檳榔堿酚類：丹皮酚6、超聲提取法超聲波振蕩器（超聲波清洗器）

簡便省時提取率高

不需加熱

利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取固體制劑組分提取7、超臨界流體萃?。⊿FE法）當(dāng)壓力和溫度超過氣體的臨界點(diǎn)時所形成的單一相態(tài)超臨界流體

是一種處于超臨界點(diǎn)之上的流體，是介于氣體與液體之間的一種物相，兼有氣體與液體的一些特性氣體超臨界流體氣體T↓壓力↑T↑壓力↓SFE工藝流程

超臨界流體萃取優(yōu)點(diǎn)：（1）與液體相似的較強(qiáng)的溶解能力（2）溶質(zhì)在流體中的擴(kuò)散系數(shù)與氣體相似，傳質(zhì)快，提取時間短（3）超臨界流體的表面張力為零，易滲透到樣品中，帶走測定組分

（4）選擇性強(qiáng)，改變溫度、壓力等條件，可選擇性萃取某些組分（5）超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體，萃取后溶劑可立即變成氣體而逸出，易達(dá)到濃集的目的常用的超臨界流體：CO2

臨界溫度和臨界壓力低、惰性、無毒、純凈、價格低廉。改性劑：甲醇、氯仿（二）純化方法1、萃取法

利用藥物與雜質(zhì)溶解性能的不同進(jìn)行分離例生物堿鹽氨水H2O2、柱色譜法（1）保留測定組分在柱上，洗去雜質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分（2）保留雜質(zhì)于柱上常用固定相硅膠氧化鋁大孔吸附樹脂第二節(jié)中藥及其制劑的分析方法取樣鑒別含量測定檢查提取純化檢驗(yàn)記錄一、取樣

注意：（1）取樣要有代表性：均勻、合理（基本原則）（2）按規(guī)定取樣方法取樣

（3）中藥制劑取樣量至少夠3次檢驗(yàn)量二、中藥及其制劑的鑒別

性狀鑒別：外觀形狀、顏色、氣味等特征

顯微鑒別：顯微組織（原粉入藥）

理化鑒別：顯微化學(xué)反應(yīng)法微量升華法顏色反應(yīng)與沉淀反應(yīng)法

熒光法與分光光度法

色譜鑒別郁金—糊化淀粉團(tuán)塊梔子—種皮石細(xì)胞黃芩—纖維黃連—纖維朱砂—不規(guī)則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色萬氏牛黃清心丸色譜法鑒別TLC：最常用(中藥制劑)GC：HPLC：陰、陽對照法陽性對照對照品或?qū)φ账幉?/p>

陰性對照把制劑中要鑒別的藥材除去，用剩下的各味藥按制劑工藝處理，再按鑒別方法提取的溶液

人工牛黃供試品牛黃空白豬去氧膽酸膽酸三、中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查水分總灰分和酸不溶性灰分重金屬砷鹽殘留農(nóng)藥主要項(xiàng)目雜質(zhì)來源及檢查意義水分——結(jié)塊、霉變或有效成分水解灰分——控制藥物本身及泥土、沙石等無機(jī)雜質(zhì)砷鹽——劇毒，常由除草劑、殺蟲劑或化肥引入重金屬——環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入

殘留農(nóng)藥——有毒水分測定法烘干法：不含或少含揮發(fā)性成分甲苯法：含揮發(fā)性成分減壓干燥法：含揮發(fā)性成分貴重藥氣相色譜法：四、中藥及其制劑的含量測定1、有效成分含量測定2、有效部位含量測定3、有效成分不明確的中藥及中成藥測定4、貴重藥材或含劇毒成分的中藥測定含量測定項(xiàng)目的選定原則1單方制劑首選有效成分復(fù)方制劑首選君藥及貴重藥，其次臣藥及其他味藥3含毒性藥物，必須含量測定首選測有效成分或指標(biāo)成分；成分類別清楚的，測某一類總成分含量5檢測成分應(yīng)與功能主治相近6測定成分需考慮與生產(chǎn)工藝關(guān)系7測定成分應(yīng)歸屬某單一藥味無法含量測定的，可測浸出物量

化學(xué)分析法氣相色譜法薄層掃描法常用定量方法分光光度法高效液相色譜法HPLC注意：1、分析柱前加預(yù)柱2、分析完畢后，用水或低濃度醇水洗去糖等水溶性雜質(zhì)，再用甲醇將色譜柱沖洗干凈中藥及其制劑含量測定的首選方法GC：---揮發(fā)油及其他揮發(fā)性組分---含水量

---含醇量

薄層掃描法（TLCS）

用一定波長的光照射在薄層板上，對有紫外光和可見光吸收的斑點(diǎn)或有熒光的斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，將掃描得到的圖譜或積分?jǐn)?shù)據(jù)用于藥品的鑒別、檢查和含量測定的方法。

準(zhǔn)確度和精密度不如HPLC

××××××××××××

樣樣對對樣樣對對樣樣對對

低高

低高

低高

外標(biāo)法（兩點(diǎn)校正法）第三節(jié)中藥指紋圖譜研究技術(shù)

中藥指紋圖譜（traditionalChinesemedicinefingerprint）

---指紋圖譜技術(shù)是現(xiàn)有技術(shù)條件下對中藥、中成藥進(jìn)行質(zhì)量控制最好的解決辦法

一、中藥指紋圖譜的定義及基本屬性

1、定義中藥材、提取物或中藥制劑等經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到能夠標(biāo)示該中藥材、提取物或中藥制劑特性的共有峰的圖譜，即運(yùn)用現(xiàn)代分析技術(shù)對中藥化學(xué)信息以圖形（圖像）的方式進(jìn)行表征并加以描述。2.中藥指紋圖譜的基本屬性

整體性

將指紋圖譜作為一個整體進(jìn)行考察避免孤立化

模糊性

--樣品本身存在差異，難以精確測量

--不能保證圖譜包含樣品所有特征

--不同實(shí)驗(yàn)條件下圖譜會有很大差異

色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量評價中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥的全貌。不需要清楚每一個組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)；不需要對每一組分都進(jìn)行定量；只要求不同批號同一種藥品的指紋圖譜保持一致。

制訂指紋圖譜的目的與意義

--定性鑒別

--定量分析

--有利于控制中間體、成品的一致性減少批間差異指紋圖譜是對中藥質(zhì)量控制的補(bǔ)充與提高IIIIII訶子小訶子大訶子絨毛訶子4.建立中藥指紋圖譜的原則系統(tǒng)性--

反映中藥所含大多數(shù)組分的類別或指標(biāo)成分的全部特征性--反映的化學(xué)信息有高度選擇性

能特征區(qū)分中藥真?zhèn)闻c優(yōu)劣重現(xiàn)性--

保證指紋圖譜的通用性和實(shí)用性二、中藥指紋圖譜的類型按測定手段分類中藥化學(xué)（成分）指紋圖譜

--光譜法（IR）

--色譜法（HPLC、GC、TLCS、HPLC-MS）中藥生物指紋圖譜

--中藥材DNA指紋圖譜

--中藥基因組學(xué)指紋圖譜

--中藥蛋白組學(xué)指紋圖譜2.按應(yīng)用對象分類

--中藥材指紋圖譜

--中藥原料藥（飲片）指紋圖譜

--中間體或提取物指紋圖譜

--中藥制劑（中成藥）指紋圖譜三、中藥色譜指紋圖譜研究的技術(shù)關(guān)鍵（一）研究思路與內(nèi)容1、研究對象的確定：有效成分2、研究內(nèi)容：中藥材指紋圖譜中藥注射劑有效部位或中間體指紋圖譜注射劑指紋圖譜（二）研究方案1、樣品選擇與收集：藥材2、供試品的制備：主要化學(xué)成分在圖譜中再現(xiàn)注射劑～直接分析檢測3、參照物的制備：對照品或內(nèi)標(biāo)物4、研究方法的選擇：優(yōu)先考慮色譜法

HPLC或GC～圖譜記錄1h5、色譜條件的選擇：6、指紋特征的選擇與技術(shù)參數(shù)：（1）共有指紋峰的標(biāo)定：10批次以上，tR（2）共有指紋峰面積的比值（3）非共有指紋峰峰面積

四、中藥指紋圖譜研究示例（一）藥材指紋圖譜研究

10批道地藥材：生成對照指紋圖譜不同產(chǎn)地藥材：相似度分析（SPSS軟件）歐式距離相關(guān)系數(shù)夾角余弦不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜（二）注射液指紋圖譜研究藥材各10批中間體注射劑～結(jié)果均值作為共有模式各樣品圖譜與共有模式比較

各批樣品相似度（批間一致性）

藥材、中間體、注射劑特征峰可追蹤性

第十四章復(fù)習(xí)內(nèi)容1、了解中藥制劑分類及分析特點(diǎn)2、熟悉中藥制劑分析的一般程序；雜質(zhì)檢查及一般質(zhì)量控制方法3、掌握中藥及其制劑定性鑒別方法；待測成分的提取分離與純化方法；含量測定對象的選定原則及常用的定量分析方法第十四章復(fù)習(xí)內(nèi)容4、掌握中藥指紋圖譜的概念、基本屬性、建立的原則、指紋特征的選擇與技術(shù)參數(shù)；熟悉中藥指紋圖譜的類型和常用測定方法，制訂指紋圖譜的目的和意義。1、中藥制劑分析中，常用提取方法有A、回流提取B、冷浸法C、超聲提取法D、過濾法E、萃取法2、中藥及其制劑純化方法一般包括A、萃取法B、柱色譜法C、水蒸氣蒸餾法D、A+BE、A+B+C3、中藥制劑的鑒別方法一般包括A、性狀鑒別B、顯微鑒別C、理化鑒別D、A+BE、A+B+C4、薄層色譜鑒別中使用最多的是A、硅膠G板B、聚酰胺板C、纖維素板D、氧化鋁板E、以上都不是5、

中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查項(xiàng)目常包括A、水分檢查B、總灰分和酸不溶性灰分C、重金屬D、砷鹽E、殘留農(nóng)藥6、中藥制劑分析中農(nóng)藥殘留量定性

定量分析的最常用方法為A、HPLC法B、UV法C、TLC法D、GC法E、IR法7、中藥制劑含量測定項(xiàng)目