化妝品中10種著色劑的檢測方法

化妝品中10種著色劑的檢測方法1適用范圍本方法規(guī)定了化妝品中CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380、CI15510、CI59040、橙黃I、CI15985、CI10316著色劑含量的高效液相色譜測定方法和橙黃I的陽性結果確證方法。本方法適用于胭脂、口紅、粉底、指甲油、睫毛膏、眼影等修飾類化妝品中CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380、CI15510、CI59040、橙黃I、CI15985、CI10316含量的測定。2方法提要試樣經(jīng)甲醇超聲提取后，過0.45gm濾膜，采用高效液相色譜系統(tǒng)分離，二極管陣列檢測器進行檢測，外標法定量。本方法的檢出限、定量下限和取樣品5.0g時的檢出濃度、定量濃度見表1。表1各種著色劑的檢出限和檢出濃度著色劑著色劑索引CAS號檢出限定量下限檢出濃度定量濃度索引號通用中文名（gg）（gg）（gg/g）（gg/g）CI16185食品紅9915-67-30.31.00.060.20CI16255食品紅71390-65-40.31.00.060.20CI16035食品紅1725956-17-60.31.00.060.20CI14700食品紅14548-53-20.31.00.060.20CI45380酸性紅87548-26-50.31.00.060.20CI15510酸性橙7633-96-50.31.00.060.20CI59040溶劑綠76358-69-65.016.51.03.3——橙黃I523-44-45.016.51.03.3CI15985食品黃32783-94-015.050.03.010.0CI10316酸性黃1846-70-815.050.03.010.03試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為色譜純，水為一級水。甲醇。四氫呋喃。乙酸銨：分析純。乙酸銨溶液（0.02mol/L）：稱取1.54g乙酸銨，加水至1000mL,溶解，經(jīng)0.45gm濾膜過濾。著色劑：CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380、CI15510、CI59040、橙黃I、CI15985、CI10316,含量純度均大于等于90%。著色劑混合標準儲備液（1.0mg/mL）：分別稱取著色劑標準物質（3.5）0.1g（精確至0.1mg）于100mL容量瓶中，甲醇（3.1）稀釋定容。著色劑混合標準系列溶液：分別移取一定量的著色劑標準儲備液（3.6）,用甲醇配制成濃度為5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0、100.0gg/mL的系列標準溶液。4儀器與設備高效液相色譜儀：配二極管陣列檢測器。液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質譜儀：配電噴霧離子源。分析天平：感量分別為0.1mg和1.0mg。超聲波清洗器。渦旋混勻器。有機微孔濾膜：0.45gm。5分析步驟樣品預處理準確稱取試樣5.0g（精確至1mg）于25mL比色管中，加入1.0ml四氫呋喃（3.2）,加入20.0mL甲醇（3.1）,在渦旋混勻器上高速振蕩5min,在超聲提取30min后，放置至室溫，用甲醇（3.1）定容，搖勻，過0.45gm濾膜，待測。色譜參考條件色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，250mmx4.6mm（內徑），5gm；或相當者；流動相：A相（甲醇）+B相（0.02mol/L乙酸銨（用乙酸調節(jié)pH=4.0））,梯度洗脫程序見表2；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進樣量：10匹；檢測器：二極管陣列檢測器；檢測波長：CI59040為245nm；CI16185、CI16255、CI16035、CI14700、CI45380為520nm；CI15985、CI10316、橙黃I、CI15510為480nm。表2梯度洗脫程序時間，min流動相A(%)流動相B(%)05957.5307015307025802030802030.159536595測定本方法采用外標校準曲線法定量測定。以標準系列溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，作標準曲線線性回歸方程，以試樣的峰面積與標準曲線比較定量。計算試樣中各種著色劑的含量⑺g/g)，按式(1)計算：CxVw=m式中：w試樣中著色劑的含量，gg/g；C——試樣溶液中著色劑的含量，gg/mL;V——提取溶液體積，mL；m樣品質量，g?；厥章屎途芏榷嗉覍嶒炇因炞C的平均回收率為84.7%?104.6%,相對標準偏差小于6%(n=6)。8質譜確證如檢出橙黃I陽性樣品，需經(jīng)液相色譜-三重四級桿質譜法進行陽性確證。前處理過程見5.1色譜參考條件色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，100mmx2.1mm（內徑），1.7|im,或相當者;流動相：A相：乙腈+B相20mmol/L乙酸銨水溶液（用氨水調節(jié)pH=8.0）；梯度洗脫程序見表3；表3梯度洗脫程序時間，min流動相A（%）流動相B（%）05953595630706.015958595流速：0.3mL/min；柱溫：30℃；進樣量：2匹。質譜參考條件離子源：電噴霧離子源（ESI）;掃描方式：負離子掃描；監(jiān)測方式：多反應監(jiān)測模式（MRM）;干燥氣：n2；碰撞氣：Ar；霧化器溫度：250℃；霧化器氣流：3.0L/min；干燥氣氣流：15L/min；離子化電壓：3.5kv；脫溶劑氣溫度：250℃；加熱塊溫度：400℃；碰撞氣電壓：230KPa。

表4母離子、特征碎片離子、裂解電壓及碰撞能待測物/母離子（m/z）碎片離子（m/z）碰撞能（V）碎片離子豐度比17121橙黃I/3271563227.8%定性用液相色譜－三重四級桿串聯(lián)質譜儀進行樣品定性測定，進行樣品測定時，如果樣品中橙黃I的色譜峰保留時間與濃度相近標準工作溶液相一致（變化范圍在±2.5%之內），并且在扣除背景后樣品的質譜圖中，所選擇的檢測離子均出現(xiàn)，而且樣品中所選擇的的離子對相對豐度與標準樣品的離子對相對豐度相一致（離子相對豐度比見表4），相對豐度偏差符合表5要求，則可以判斷樣品中存在橙黃I。表5相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度>50%20%?50%10%?20%<10%允許相對偏差±20%±25%±30%±50%檢出限本方法對橙黃I的檢出濃度為1.0%/g。9色譜圖

o'ah"圖21o'ah"圖21(CI16185)：9.222min；2(CI16255)：12.364min；3(CI16035):21.280min；4(CI14700):24.863min；5(CI45380)：26.674min圖3混合標準溶液在480nm下的高效液相色譜圖1(C110316)：13.610min；2(C115985):16.066min；3(橙黃I)：25.217min；4(CI15510)：5.02.50.00.51.01.52.02.53.03.54.04.55.05.02.50