分析實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)知識(shí)

分析實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)主講人：北京蓋倫1中國(guó)環(huán)境檢測(cè)一：主要內(nèi)容1.分析實(shí)驗(yàn)的主要實(shí)驗(yàn)方法2.分析實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制方法3.分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則4.分析實(shí)驗(yàn)樣品的一般前處理方法5.光度法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解6.容量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解7.重量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解

2中國(guó)環(huán)境檢測(cè)一：主要內(nèi)容8.原子吸收實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解9.色譜實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解10.微生物實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解3中國(guó)環(huán)境檢測(cè)1：分析實(shí)驗(yàn)的主要實(shí)驗(yàn)方法分析實(shí)驗(yàn)（化學(xué)、生化、生物）的實(shí)驗(yàn)方法主要分為兩大類：實(shí)驗(yàn)分析和儀器分析。實(shí)驗(yàn)分析又可以歸類整理分成光度法實(shí)驗(yàn)，容量法實(shí)驗(yàn)，重量法實(shí)驗(yàn)。儀器分析所用的儀器設(shè)備主要有質(zhì)譜儀，氣相色譜儀，液相色譜儀，離子色譜，原子吸收，原子熒光。分析檢測(cè)指標(biāo)有含義式，譬如鐵離子濃度，總磷濃度，氨基氮濃度；有定義

式，譬如COD（化學(xué)需氧量），BOD（生化

需氧量）。4中國(guó)環(huán)境檢測(cè)2：分析實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制方法質(zhì)量控制手段主要通過(guò)對(duì)分析標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)確度來(lái)反映。常見的做法有：加標(biāo)回收率，標(biāo)準(zhǔn)樣品的相對(duì)誤差（俗稱質(zhì)控）。

我們可以對(duì)空白樣品做加標(biāo)回收率，也可以對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品做加標(biāo)回收率。但是，在實(shí)際分析工作中，基本不做空白加標(biāo)回收率。實(shí)際工作中應(yīng)用廣泛的是做樣品加標(biāo)回收率。所謂的樣品加標(biāo)回收率是指，取兩份相同的樣品，其中一份加入定量的目標(biāo)成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，兩份式樣按照相同的實(shí)驗(yàn)操作步驟完成實(shí)驗(yàn)，得出實(shí)驗(yàn)結(jié)果。加標(biāo)回

收率按如下公式計(jì)算。5中國(guó)環(huán)境檢測(cè)2：分析實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制方法

在上述計(jì)算公式中，樣品測(cè)定值稱為本底值，加標(biāo)樣品測(cè)定值稱為加標(biāo)值。我們加入的目標(biāo)成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量（加標(biāo)量，單位為μg）要控制在本底值的0.5-3倍之間。加標(biāo)量太小，不足以對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響；加標(biāo)量太大，本底值又體現(xiàn)不出來(lái)。6中國(guó)環(huán)境檢測(cè)2：分析實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制方法

質(zhì)控是指測(cè)定一個(gè)濃度已知的標(biāo)準(zhǔn)樣品，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)定值與標(biāo)準(zhǔn)樣品的真實(shí)值做比較。這兩個(gè)數(shù)值之間的差距可以反應(yīng)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程存在的系統(tǒng)誤差。不同的標(biāo)準(zhǔn)樣品化學(xué)成分的含量存在很大差距，所以不能簡(jiǎn)單通過(guò)兩個(gè)數(shù)值之間的絕對(duì)差值來(lái)衡量系統(tǒng)誤差。定義相對(duì)誤差則可以解決整個(gè)問(wèn)題。

7中國(guó)環(huán)境檢測(cè)2：分析實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制方法加標(biāo)回收率越接近100%，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程系統(tǒng)誤差越小，越偏離100%說(shuō)明實(shí)驗(yàn)過(guò)程系統(tǒng)誤差越大。實(shí)驗(yàn)室絕大多數(shù)加標(biāo)回收率可以控制在90%-110%之間。相對(duì)誤差越小說(shuō)明整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程系統(tǒng)誤差越小，相對(duì)誤差越大說(shuō)明整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程系統(tǒng)誤差越大。8中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則

每一個(gè)具體的實(shí)驗(yàn)結(jié)果都有確定的有效數(shù)字位數(shù)。一個(gè)分析結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)主要取決于原始數(shù)據(jù)的正確記錄和數(shù)值的正確計(jì)算。在記錄測(cè)量值的時(shí)候要考慮到計(jì)量器具的精密度和準(zhǔn)確度，以及測(cè)量?jī)x器本身的讀數(shù)誤差。對(duì)于檢定合格的計(jì)量器具，有效數(shù)字位數(shù)可以記錄到最小分度值，通常情況下估讀一位。雖然估讀的那一位數(shù)字是有效數(shù)字，但是這個(gè)數(shù)字是不準(zhǔn)確的。所以，我

們實(shí)驗(yàn)室測(cè)得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)都是近似值。

9中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則實(shí)驗(yàn)室常用的測(cè)量工具有移液管、量筒、比色管、天平、秒表、光度計(jì)等等。每個(gè)測(cè)量工具都有確定的靈敏度，它們能測(cè)得的有效數(shù)字位數(shù)都是確定的。下面就舉例說(shuō)明各測(cè)量工具的靈敏度。

3.1.1體積測(cè)量工具譬如：10mL單標(biāo)線移液管準(zhǔn)確容積為10.00mL，有效數(shù)字位數(shù)為4位。

20mL單標(biāo)線移液管準(zhǔn)確容積為20.00mL，有效數(shù)字位數(shù)為4位。

100mL單標(biāo)線移液管準(zhǔn)確容積為100.00mL，有效數(shù)字位數(shù)為5位。

5mL多刻度移液管準(zhǔn)確容積為5.00mL，我們可以量取5.00mL，也可以量取4.00mL，還可以量取4.50mL，有效數(shù)字位數(shù)為3位。

10中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則

3.1.1體積測(cè)量工具

10mL多刻度移液管準(zhǔn)確容積為10.00mL，我們可以量取10.00mL，有效數(shù)字位數(shù)為4位；也可以量取9.00mL，還可以量取7.50mL，有效數(shù)字位數(shù)為3位。

25mL比色管的準(zhǔn)確容積為25.00mL，有效數(shù)字為4位。

50mL比色管的準(zhǔn)確容積為50.00mL，有效數(shù)字為4位。

100mL比色管的準(zhǔn)確容積為100.00mL，有效數(shù)字位數(shù)為5位。11中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.1.1體積測(cè)量工具100mL量筒的準(zhǔn)確容積為100mL，我們可以量取100mL，也可以量取85.0mL，也可以量取92.0mL，有效數(shù)字位數(shù)為3位。50mL量筒的準(zhǔn)確容積為50.0mL，我們可以量取40.0mL，也可以量取36.0mL，有效數(shù)字位數(shù)為3位。25mL滴定管的準(zhǔn)確容積為25.00mL，我們可以讀取21.00mL，也可以讀取18.36mL，有效數(shù)字位數(shù)為4位。50mL滴定管的準(zhǔn)確容積為50.00mL，可以讀取25.00mL，也可以讀取18.31mL，有效數(shù)字位數(shù)為4位。

實(shí)驗(yàn)室的所有燒杯和三角瓶都不可以作為體積測(cè)量工具。

12中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則單刻度移液管多刻度移液管13中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則比色管具塞磨口比色管14中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則量筒滴定管15中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則三角瓶燒杯16中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.1.2質(zhì)量測(cè)量工具

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量測(cè)量工具主要有電子天平和物理天平?，F(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室稱量質(zhì)量基本上都用電子天平。物理天平不用來(lái)測(cè)量質(zhì)量，只是在調(diào)平離心機(jī)兩端轉(zhuǎn)子質(zhì)量的時(shí)候用到。不同型號(hào)的電子天平的靈敏度不一樣，有效數(shù)字位數(shù)也不一樣。按照靈敏度的不同，電子天平可以分為超微量電子天平，微量電子天平，半微量天平和常量電子天平。靈敏度越高的電子天平對(duì)環(huán)境的要求也越高，振動(dòng)、磁場(chǎng)、氣流、溫度、濕度、平穩(wěn)度都會(huì)對(duì)天子天平的工作造成影響。為了保證天平正常工作，天平室都要求遠(yuǎn)離振動(dòng)干擾，配置空調(diào)。并且天平稱量空間內(nèi)放置變色硅膠。實(shí)驗(yàn)室常用的是萬(wàn)分之一克電子天平和百分之一克電子天平。17中國(guó)環(huán)境檢測(cè)萬(wàn)分之一克電子天平1：該電子天平精度為0.1mg，可以讀數(shù)到小數(shù)點(diǎn)后四位。實(shí)際測(cè)得有效數(shù)字位數(shù)可以是2位、3位、4位、5位、6位。譬如：0.0018g0.0251g0.3156g1.2458g18.6591g18中國(guó)環(huán)境檢測(cè)百分之一克電子天平1：該電子天平精度為0.01g，可以讀數(shù)到小數(shù)點(diǎn)后兩位。實(shí)際測(cè)得有效數(shù)字位數(shù)可以是2位、3位、4位、5位。譬如：0.52g1.36g10.85g120.56g19中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.1.3時(shí)間測(cè)量工具時(shí)間測(cè)量工具可以是秒表、計(jì)時(shí)器、手機(jī)、鬧鐘等等。根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)對(duì)時(shí)間精確度的要求選擇適合的時(shí)間測(cè)量工具。通常情況下手機(jī)可以滿足要求。3.1.4物質(zhì)的量通過(guò)測(cè)定物質(zhì)的質(zhì)量（精確度在0.1mg以上），然后除以該物質(zhì)的摩爾質(zhì)量得出物質(zhì)的量。20中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則

實(shí)驗(yàn)室常用的物理基本量有長(zhǎng)度（空間單位）、質(zhì)量、時(shí)間、物質(zhì)的量等等，這也是實(shí)驗(yàn)室能夠直接測(cè)定的分析數(shù)據(jù)。但是，實(shí)驗(yàn)室分析結(jié)果多以mg/L（μg/L）表示。這個(gè)單位是物理基本量的量綱積。這個(gè)量綱積的生成包含了各種數(shù)學(xué)運(yùn)算（加法、減法、乘法、除法）。我們實(shí)際測(cè)得的各基本量有效數(shù)字位數(shù)不盡相同，當(dāng)進(jìn)行數(shù)學(xué)運(yùn)算的時(shí)候，最終的運(yùn)算結(jié)果有效數(shù)字位數(shù)按以下規(guī)則確定。21中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.2物理基本量的數(shù)學(xué)運(yùn)算規(guī)則3.2.1加法和減法運(yùn)算能夠進(jìn)行加法和減法運(yùn)算的物理量必然具有相同的量綱。幾個(gè)近似值相加減的時(shí)候，最后的結(jié)果的有效數(shù)字自左起不超過(guò)各近似值中第一個(gè)出現(xiàn)的可疑數(shù)字。但是，在實(shí)際測(cè)量結(jié)果的運(yùn)算中，我們先把各近似值修約成比各近似值中小數(shù)點(diǎn)位數(shù)最少者多一位，然后進(jìn)行運(yùn)算，運(yùn)算結(jié)果修約成不超過(guò)各近似值中第一個(gè)出現(xiàn)的可疑數(shù)字。譬如：10mL多刻度移液管移取8.53mL蒸餾水，100mL量筒量取95.2mL蒸餾水，這兩份水樣混合后總體積可以計(jì)算成：8.53mL=8.53mL

95.2mL=95.20mL

總體積=8.53+95.2=103.73mL=103.7mL

我們實(shí)際工作中基本不用這條規(guī)則，實(shí)際工作中用的測(cè)量工具靈敏度一致，這樣直接運(yùn)算就可以。

22中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.2.2乘法和除法運(yùn)算近似值相乘除的時(shí)候，最后量綱積的有效數(shù)字位數(shù)與各近似值中有效數(shù)字位數(shù)最少者相同。但是，在實(shí)際測(cè)量結(jié)果的運(yùn)算中，我們先把各近似值修約成比有效數(shù)字位數(shù)最少者多一位，然后進(jìn)行運(yùn)算，運(yùn)算結(jié)束以后按下述規(guī)則修約。

譬如：COD的測(cè)定實(shí)驗(yàn)滴定液硫酸亞鐵銨的濃度為0.1025mol/L，四位有效數(shù)字；

中轉(zhuǎn)試劑重鉻酸鉀的濃度為0.250mol/L，三位有效數(shù)字；

樣品溶液滴定體積為12.53mL，試劑空白滴定體積為23.40mL，四位有效數(shù)字；

取樣體積為20.00mL，四位有效數(shù)字。

23中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則則化學(xué)需氧量COD=

=

=

=445.67=446

所以，COD的有效數(shù)字位數(shù)報(bào)三位。分析實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)測(cè)量工具都是固定的，實(shí)際上絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果都是報(bào)三位有效數(shù)字。24中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.3每一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)（量綱積）都有確定的檢出限。而檢出限是在確定的計(jì)量測(cè)量工具基礎(chǔ)上，數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。每個(gè)檢測(cè)指標(biāo)分析結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)不能超過(guò)檢出限所能達(dá)到的位數(shù)。譬如：某檢測(cè)指標(biāo)的檢出限為0.01mg/L，我們就不可以報(bào)數(shù)0.016mg/L，我們只可以報(bào)數(shù)0.02mg/L。25中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則3.4當(dāng)計(jì)算完成后，實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)超過(guò)了已確定的有效數(shù)字位數(shù)，就要遵守科學(xué)的數(shù)值修約規(guī)則。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的數(shù)值修約規(guī)則完全遵守GB/T8170-2008。數(shù)值修約規(guī)則主要遵守以下幾條：修約間隔規(guī)則，進(jìn)舍規(guī)則，不允許連續(xù)修約，0.5單位修約和0.2單位修約。實(shí)際工作中應(yīng)用最多的是進(jìn)舍規(guī)則。所謂的進(jìn)舍規(guī)則可以簡(jiǎn)單總結(jié)成：四舍六入五成雙。

26中國(guó)環(huán)境檢測(cè)3：分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效數(shù)字位數(shù)與數(shù)值修約規(guī)則所謂的四舍是指：≤4的時(shí)候舍去。

所謂的六入是指：6≥的時(shí)候進(jìn)上位一點(diǎn)。

所謂的五成雙是指：數(shù)字5的進(jìn)舍根據(jù)5前面和后面的數(shù)字來(lái)確定。當(dāng)5后面有數(shù)的時(shí)候，進(jìn)上位一點(diǎn)；當(dāng)5后面沒(méi)有數(shù)的時(shí)候，若5的前一位數(shù)字為奇數(shù)，則進(jìn)上位一點(diǎn)；當(dāng)5后面沒(méi)有數(shù)的時(shí)候，若5的前一位數(shù)字為偶數(shù)，則舍掉5。通過(guò)以下實(shí)例來(lái)深入理解數(shù)值修約規(guī)則。

保留3位有效數(shù)字，下面的結(jié)果分別等于：6.051=6.056.054=6.056.056=6.066.057=6.066.055=6.066.045=6.046.0551=6.066.0552=6.0627中國(guó)環(huán)境檢測(cè)4：分析實(shí)驗(yàn)樣品的一般前處理方法

我們分析實(shí)驗(yàn)的樣品物理性狀，化學(xué)成分通常非常復(fù)雜。這對(duì)我們檢測(cè)分析指標(biāo)有極大干擾。常用的祛除干擾方法有添加掩蔽劑，萃取，過(guò)濾，沉淀，蒸餾。

譬如：總硬度GB7477-87

當(dāng)鐵離子濃度大于30mg/L對(duì)顯色有干擾時(shí)，用幾毫升三乙醇胺掩蔽。

中國(guó)環(huán)境檢測(cè)285：光度法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解4.1光度法實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理

分光光度法實(shí)驗(yàn)是以朗伯比爾定律為基礎(chǔ)，通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處的吸光度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性定量的分析方法。朗伯比爾定律是指，吸光度=吸光系數(shù)×液層厚度×溶液的濃度。即：A=abc。在這個(gè)公式中：A：表示吸光值，也叫吸光度。a：表示吸光系數(shù)，吸光系數(shù)與目標(biāo)物質(zhì)溶液特性、溶液溫度、入射光波長(zhǎng)相關(guān)。b：表示液層厚度。液層厚度等于比色杯的大小，常見的比色杯有10mm（1cm），30mm（3cm），50（5cm）mm。c：表示溶液的濃度，濃度單位為mg/L或者μg/mL。

29中國(guó)環(huán)境檢測(cè)5：光度法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解

從這個(gè)公式可以看出，當(dāng)吸光系數(shù)、液層厚度都固定的時(shí)候，吸光值與溶液的濃度正相關(guān)。在實(shí)際定量分析的時(shí)候，測(cè)定目標(biāo)物質(zhì)溶液的最大吸收波長(zhǎng)，以此固定波長(zhǎng)為光源，測(cè)定一系列已知濃度溶液的吸光值，繪制出A-C校準(zhǔn)曲線。該校準(zhǔn)曲線是一條斜率固定的直線。在測(cè)定未知濃度溶液的時(shí)候，根據(jù)測(cè)定的吸光值，查A-C校準(zhǔn)曲線就可以得出相應(yīng)的濃度。用A-C校準(zhǔn)曲線查得待測(cè)物質(zhì)濃度時(shí)，待測(cè)物質(zhì)的定容體積一定要和校準(zhǔn)曲線的定容體積相等。30中國(guó)環(huán)境檢測(cè)5：光度法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解4.2光度法實(shí)驗(yàn)的實(shí)際工作要求

在實(shí)際工作中，我們發(fā)現(xiàn)吸光值和溶液的濃度并不是一直呈現(xiàn)正比例關(guān)系。隨著溶液濃度的增大，吸光值的增加率越來(lái)越低于溶液濃度的增加率。當(dāng)吸光值超過(guò)校準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)的時(shí)候，再通過(guò)該校準(zhǔn)曲線計(jì)算溶液的濃度會(huì)與實(shí)際真實(shí)結(jié)果存在差距。還有其他一些原因，所以，為了減少誤差，光度法實(shí)驗(yàn)要滿足以下幾點(diǎn)要求。31中國(guó)環(huán)境檢測(cè)5：光度法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解

1：分光光度計(jì)要在測(cè)定之前預(yù)熱15-30min以穩(wěn)定入射光波長(zhǎng)。2：比色杯要保持光學(xué)活性和清潔程度。（經(jīng)常放置在蒸餾水中保存，每天換水。）3：空白實(shí)驗(yàn)的吸光值，校準(zhǔn)曲線的線性回歸系數(shù)r均要在實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制要求之內(nèi)。

4：具體實(shí)驗(yàn)加完顯色劑之后，根據(jù)具體國(guó)標(biāo)要求顯色穩(wěn)定一定時(shí)間再測(cè)定吸光值。

5：樣品的吸光值要在校準(zhǔn)曲線的控制范圍之內(nèi)。

6：對(duì)于測(cè)定波長(zhǎng)在紫外光（400nm）以內(nèi)的的實(shí)驗(yàn)，只允許用石英

比色杯。對(duì)于測(cè)定波長(zhǎng)在紫外光以外的實(shí)驗(yàn)，所用比色杯

要與校準(zhǔn)曲線所用比色杯保持一致。32中國(guó)環(huán)境檢測(cè)5：光度法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解4.3光度法實(shí)驗(yàn)的校準(zhǔn)曲線要求4.3.1光度法的校準(zhǔn)曲線橫坐標(biāo)可以是物質(zhì)含量，單位為μg。也可以是物質(zhì)濃度，單位為mg/L。最常用的是物質(zhì)含量。校準(zhǔn)曲線的縱坐標(biāo)是物質(zhì)的吸光值。校準(zhǔn)曲線用一元線性回歸方程y=bx+a計(jì)算。其中斜率b的有效數(shù)字位數(shù)與橫坐標(biāo)的有效數(shù)字位數(shù)相等，截距a的小數(shù)點(diǎn)位數(shù)與縱坐標(biāo)數(shù)值的小數(shù)點(diǎn)位數(shù)相等。4.3.2光度法校準(zhǔn)曲線的線性回歸系數(shù)要在0.999以上。33中國(guó)環(huán)境檢測(cè)紫外可見分光光度計(jì)1：分光光度計(jì)可以讀數(shù)到小數(shù)點(diǎn)后三位，分光光度計(jì)的最小分度值為0.005。34中國(guó)環(huán)境檢測(cè)紅外分光測(cè)油儀1：紅外分光測(cè)油儀的入射光波長(zhǎng)主要有2930nm，2960nm，3030nm。35中國(guó)環(huán)境檢測(cè)水質(zhì)磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線

分光光度法校準(zhǔn)曲線線性要好，絕對(duì)吸光值要準(zhǔn)確。36中國(guó)環(huán)境檢測(cè)6：容量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解5.1容量法實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理

容量法也叫滴定法，常見做法是人工滴定。它是根據(jù)指示劑的顏色變化指示滴定終點(diǎn)，然后讀取滴定液的消耗體積，計(jì)算分析結(jié)果。常見的滴定實(shí)驗(yàn)有酸堿滴定，氧化還原滴定，絡(luò)合滴定，配位滴定。酸堿滴定實(shí)驗(yàn)通常是為了標(biāo)定酸溶液或者堿溶液的溶液濃度。應(yīng)用最廣泛的是氧化還原滴定和絡(luò)合滴定。譬如：COD，BOD，總硬度，總堿度，總酸度。37中國(guó)環(huán)境檢測(cè)6：容量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解5.2容量法實(shí)驗(yàn)的基本要求5.2.1酸堿滴定和絡(luò)合滴定相對(duì)比較簡(jiǎn)單，移取定量的樣品溶液、添加指示劑之后直接與滴定液發(fā)生反應(yīng)。滴定終點(diǎn)通常以顏色變化的突躍點(diǎn)為準(zhǔn)。氧化還原滴定實(shí)驗(yàn)用一次或者兩次、能夠與滴定溶液發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、含量已知、能夠與待測(cè)物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)且過(guò)量的中轉(zhuǎn)物質(zhì)作為定量的基礎(chǔ)。如果不能保證中轉(zhuǎn)物質(zhì)與待測(cè)物質(zhì)反應(yīng)過(guò)量，我們就沒(méi)有辦法通過(guò)滴定來(lái)實(shí)現(xiàn)測(cè)定物質(zhì)含量。5.2.2滴定實(shí)驗(yàn)的顏色背景通常為白色，顏色變化的突躍也是從淺色到深色（因?yàn)槿藢?duì)色彩的觀察有視覺暫留），光照不許太強(qiáng)也不許太暗。5.2.3滴定實(shí)驗(yàn)開始之前，調(diào)零之后，要用濾紙輕拭滴定管

尖端，保證滴定管尖端不會(huì)有殘余滴定液進(jìn)入反應(yīng)三角瓶

造成誤差。

38中國(guó)環(huán)境檢測(cè)6：容量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解5.2.4滴定實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，集中注意力觀察反應(yīng)三角瓶的顏色變化。5.2.5滴定實(shí)驗(yàn)臨近終點(diǎn)的時(shí)候，要一滴一滴乃至于半滴半滴去添加滴定液。5.2.6滴定完成之前，要用三角瓶?jī)?nèi)壁拭去滴定管尖端的半滴滴定液，并用洗瓶沖洗三角瓶?jī)?nèi)壁，混勻之后觀察是否達(dá)到終點(diǎn)顏色。5.2.7最終的滴定體積要和空白對(duì)照的滴定體積有相對(duì)較大的明顯差別，否則認(rèn)為無(wú)效滴定。39中國(guó)環(huán)境檢測(cè)滴定實(shí)驗(yàn)操作示意圖酸堿滴定40中國(guó)環(huán)境檢測(cè)7：重量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解6.1重量法實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理

重量法是采用不同的分離方法分離出樣品中的被測(cè)成分，稱量或計(jì)算出其重量之后，得出其含量的一種分析方法。根據(jù)分離方法的不同，重量法可以分為沉淀重量法、揮發(fā)重量法、提取重量法。重量法稱量的時(shí)候最核心的要求是恒重。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求對(duì)恒重的標(biāo)準(zhǔn)略有不同。國(guó)標(biāo)要求恒重是指前后兩次稱量質(zhì)量差在0.2mg以內(nèi)。中國(guó)藥典2010年版恒重要求前后兩次稱量質(zhì)量差在0.3mg以內(nèi)。41中國(guó)環(huán)境檢測(cè)7：重量法實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解6.2重量法實(shí)驗(yàn)過(guò)程基本要求

以含水率為例說(shuō)明整個(gè)實(shí)驗(yàn)的基本要求。

在測(cè)定樣品含水率的時(shí)候，分析天平在校準(zhǔn)保證日期之內(nèi)，分析天平稱量空間內(nèi)要保證空氣濕度恒定且不超過(guò)實(shí)驗(yàn)室控制范圍（實(shí)際工作以變色硅膠保持藍(lán)色為基準(zhǔn)）。42中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9.色譜實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解9.1色譜分析實(shí)驗(yàn)的發(fā)展色譜分析法是一種分離技術(shù)，它是由俄國(guó)物理學(xué)家茨維特(Tswett)在1906年創(chuàng)立的。他在研究植物葉中的色素時(shí),先用石油醚浸提植物中的色素,然后將浸提液注入到一根填充CaCO3的直立玻璃管的頂端(如下圖a),再加入純石油醚進(jìn)行淋洗,淋洗結(jié)果使玻璃管內(nèi)植物色素被分離成具有不同顏色的譜帶(如下圖b),他把這種分離方法稱為色譜法，玻璃管稱為色譜柱，管內(nèi)填充物(CaCO3)是固定不動(dòng)的,稱

為固定相，淋洗劑(石油醚)是攜帶混合物流過(guò)固

定相的流體,稱為流動(dòng)相。43中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9：色譜實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解圖a：色譜柱原型圖b：色譜圖原型（這個(gè)填充柱顯示出色彩不同的譜帶，譜帶在填充柱上的寬度、橫截面積可以作為定量依據(jù)，在填充柱上的上下位置可以作為定性依據(jù)，這也是該分析方法命名為色譜法的緣由）44中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.2色譜分析實(shí)驗(yàn)的原理

色譜分析是一種分離技術(shù)，它利用不同物質(zhì)與固定相和流動(dòng)相之間作用力的差別，兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)的時(shí)候，不同物質(zhì)在兩相之間進(jìn)行分配平衡，從而實(shí)現(xiàn)分離。當(dāng)在分離出口配置檢測(cè)器進(jìn)行即時(shí)定性檢測(cè)的時(shí)候，我們可以實(shí)現(xiàn)定性定量檢測(cè)的目的。根據(jù)兩相的狀態(tài)可以把色譜分為氣相色譜和液相色譜，根據(jù)樣品在兩相中的分離原理可以把色譜分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、離子色譜、凝膠色譜、超臨界流體色譜等等。色譜的分類方法多種多樣，常見的就是上述兩種。色譜分析發(fā)展初期都是以色譜峰峰高作為定量依據(jù)，現(xiàn)在色譜分析以色譜峰峰面積做為定量依據(jù)。色譜檢測(cè)器的檢測(cè)原理各有不同，主要有45中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解濃度型檢測(cè)器，譬如：熱導(dǎo)檢測(cè)器，紫外檢測(cè)器。濃度型檢測(cè)器對(duì)濃度敏感，響應(yīng)的信號(hào)強(qiáng)度與進(jìn)入檢測(cè)器的流動(dòng)相中各成分的濃度相關(guān)。這類檢測(cè)器要求更加穩(wěn)定和恒定的流動(dòng)相流速。質(zhì)量型檢測(cè)器，譬如：氫火焰離子化檢測(cè)器。這類檢測(cè)器是流量敏感型檢測(cè)器，響應(yīng)的信號(hào)強(qiáng)度不隨流動(dòng)相流速而變化。

色譜分析以保留時(shí)間作為定性依據(jù)，以色譜峰峰面積作為定量依據(jù)。常用的定量方法有外標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)法，面積歸一法。46中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.2.1外標(biāo)法

外標(biāo)法定量有兩種方法：校準(zhǔn)曲線法和單因子校準(zhǔn)法。應(yīng)用最多的是校準(zhǔn)曲線法。所謂校準(zhǔn)曲線法是先用待測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)樣品配制成不同濃度梯度的溶液，測(cè)定出不同濃度梯度的樣品溶液對(duì)應(yīng)的色譜峰峰高或者峰面積

，然后繪制成峰面積-濃度校準(zhǔn)曲線。實(shí)際工作中，測(cè)定出目標(biāo)

成分的色譜峰峰面積，查峰面積-濃度校

準(zhǔn)曲線就可以得出該成分的濃度。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)479：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.2.1外標(biāo)法

單因子校準(zhǔn)法是指通過(guò)多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，得到一確定的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度對(duì)應(yīng)的色譜峰峰面積。當(dāng)測(cè)定目標(biāo)成分濃度的時(shí)候，通過(guò)該峰面積-標(biāo)樣濃度比例系數(shù)得出物質(zhì)濃度?，F(xiàn)在這個(gè)方法應(yīng)用很少，少量老國(guó)標(biāo)用該方法。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)489：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.2.2內(nèi)標(biāo)法

如果我們分析的某一目標(biāo)成分沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不穩(wěn)定，或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)極難得到，我們就無(wú)法用外標(biāo)法進(jìn)行定量。這個(gè)時(shí)候就要用到內(nèi)標(biāo)法。所謂內(nèi)標(biāo)法是將一定量（含量已知）的內(nèi)標(biāo)物加入到待測(cè)樣品中，混合均勻后測(cè)定該混合物中各成分的色譜峰峰面積。然后通過(guò)內(nèi)標(biāo)物的峰面積-含量校

正系數(shù)計(jì)算各成分的濃度。內(nèi)標(biāo)法，面積

歸一法應(yīng)用較少。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)499：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.3色譜實(shí)驗(yàn)分析操作流程

以氣相色譜為例說(shuō)明色譜實(shí)驗(yàn)操作。氣相色譜有氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、控溫系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)組成。

50中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9：色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.3.1氣路系統(tǒng)：氣路系統(tǒng)是指流動(dòng)相--載氣連續(xù)運(yùn)行的密閉系統(tǒng),它包括氣源鋼瓶（氣體發(fā)生器）、凈化器、氣體流速控制和測(cè)量裝置。通過(guò)該系統(tǒng)，可以獲得純度極高、流速穩(wěn)定的載氣。氣路系統(tǒng)的氣密性、載氣流速的穩(wěn)定性以及測(cè)量流量的準(zhǔn)確性，對(duì)色譜結(jié)果均有很大的影響，因此必須注意控制。常用的載氣有氮?dú)夂蜌錃?，也有用氦氣、氬氣。載氣的凈化，需經(jīng)過(guò)裝有活性炭、分子篩或硅膠的凈化器，以除去載氣中的水、氧、油等不利的雜質(zhì)。51中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.3.2進(jìn)樣系統(tǒng)：進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣裝置和汽化室兩部分。它是將液體或固體試樣，在進(jìn)入色譜柱之前瞬間氣化，然后快速定量地轉(zhuǎn)入到色譜柱中。進(jìn)樣的多少，進(jìn)樣時(shí)間的長(zhǎng)短，試樣的氣化速度等都會(huì)影響色譜的分離效果和分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。進(jìn)樣方式有手動(dòng)進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣。由于手動(dòng)進(jìn)樣會(huì)影響保留時(shí)間定性。高端或進(jìn)口設(shè)備都采用自動(dòng)進(jìn)樣。氣相色譜自動(dòng)進(jìn)樣方式有頂空進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣、吹掃捕集進(jìn)樣等。52中國(guó)環(huán)境檢測(cè)手動(dòng)進(jìn)樣工具1：常用的微量注射器規(guī)格有1μL，5μL，10μL。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)53頂空進(jìn)樣器1：頂空進(jìn)樣是一種氣相萃取，它將待測(cè)樣品置于一密閉容器中，加熱之后各組分揮發(fā)出來(lái)，在密閉容器中形成氣-液兩相平衡，抽取上層混合氣體中的一部分進(jìn)行檢測(cè)。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)549.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.3.2氣化室是一塊被加熱的恒溫金屬空間，待測(cè)樣品在該空間內(nèi)瞬間氣化。由于氣化室會(huì)存在一定空間的死體積，該死體積內(nèi)氣化的樣品不能隨著流動(dòng)相進(jìn)入分離系統(tǒng)。并且分離系統(tǒng)（色譜柱）的空間是有限的。針對(duì)具體的實(shí)驗(yàn)要求，氣化后的樣品可以以一定的分流比進(jìn)入分離系統(tǒng)。

分流比==中國(guó)環(huán)境檢測(cè)55分流示意圖1：采用分流模式只有一部分氣化樣品進(jìn)入分離系統(tǒng)。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)56不分流示意圖1：采用不分流模式所有氣化樣品全部進(jìn)入分離系統(tǒng)。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)579.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.3.2進(jìn)樣系統(tǒng)的典型問(wèn)題

進(jìn)樣系統(tǒng)會(huì)經(jīng)常有污染問(wèn)題和泄露問(wèn)題。由于進(jìn)樣針?lè)磸?fù)多次扎透隔墊，長(zhǎng)時(shí)間以后會(huì)不斷累積雜質(zhì)和隔墊碎屑。所以，需要我們定期更換隔墊，定期清洗或更換石英襯管，定期老化色譜柱，定期用酒精或肥皂水檢漏。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)589.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.3分離系統(tǒng)

分離系統(tǒng)是指把混合樣品中各組分分離的裝置，它由色譜柱，溫箱組成。色譜柱的分類：

（1）填充柱由不銹鋼、玻璃和聚四氟乙烯等材料制成，常用的為不銹鋼柱，柱管內(nèi)徑為2-６mm，柱長(zhǎng)1-５m。柱形有U型和螺旋型二種。

（2）毛細(xì)管柱

毛細(xì)管柱柱效高，分離效果好，是應(yīng)用最廣泛的一種色譜柱。常用的毛細(xì)管柱有填充毛細(xì)管柱，

空心柱，微填充柱等。內(nèi)徑為0.2mm-0.5mm，長(zhǎng)

度為25m左右。

59中國(guó)環(huán)境檢測(cè)填充柱填充柱制備簡(jiǎn)單，可供選用的載體、固定液、吸附劑種類很多，有廣泛的選擇性。但是，柱效低。中國(guó)環(huán)境檢測(cè)60常見毛細(xì)管柱毛細(xì)管柱是用熔融二氧化硅拉制的空心管，也叫彈性石英毛細(xì)管。柱內(nèi)徑通常為0.1~0.5mm，柱長(zhǎng)30~50m，繞成直徑20cm左右的環(huán)狀。61中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.5控溫系統(tǒng)溫控系統(tǒng)是指對(duì)氣相色譜的汽化室、色譜柱和檢測(cè)器進(jìn)行溫度控制的裝置，由于汽化室、色譜柱和檢測(cè)器要求的適合溫度各有不同，所以要求配有三種不同的溫控裝置，以便設(shè)定控制和測(cè)定各處的溫度，為滿足分析要求，除可以恒溫外，還可采用程序升溫。一般情況下，汽化室的溫度比柱溫高，以保證試樣能瞬間汽化而不分解，而檢測(cè)器溫度是三者之間最高的，以防止樣品在檢測(cè)室冷凝。62中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.6檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)器的種類很多，據(jù)檢測(cè)原理的不同可分為濃度型檢測(cè)器和質(zhì)量型檢測(cè)器兩大類。濃度型檢測(cè)器常用的有熱導(dǎo)池檢測(cè)器（ＴＣＤ），電子捕獲檢測(cè)器（ＥＣＤ），紫外檢測(cè)器；質(zhì)量型檢測(cè)器常見的有氫火焰離子化檢測(cè)器（ＦＩＤ）和火焰光度檢測(cè)器（ＦＰＤ）。不同的檢測(cè)器靈敏度各不相同。63中國(guó)環(huán)境檢測(cè)9.色譜實(shí)驗(yàn)重難點(diǎn)詳解9.7記錄系統(tǒng)

色譜實(shí)驗(yàn)的記錄系統(tǒng)具體指信號(hào)轉(zhuǎn)換器和色譜工作站。信號(hào)轉(zhuǎn)換器是把檢測(cè)器檢測(cè)到的樣品信號(hào)轉(zhuǎn)換成電壓值（mV），然后反饋到電腦上。信號(hào)強(qiáng)度的不同，反應(yīng)在色譜工作站上為電壓的高低。色譜工作站有在線色譜工作站和離線色譜工作站。在線色譜工作站是把即時(shí)電壓信號(hào)記錄下來(lái)，繪制成圖譜。離線色譜工作站則是存檔圖譜生成的電子文件。64中國(guó)環(huán)境檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

標(biāo)準(zhǔn)色譜圖的特點(diǎn)有：基線平穩(wěn)、各色譜峰分離度高、色譜峰無(wú)前延無(wú)拖尾、峰寬小、峰形對(duì)稱。65中國(guó)環(huán)境檢測(cè)10.微生物實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解

微生物實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)資質(zhì)的取得以現(xiàn)場(chǎng)見證實(shí)驗(yàn)和現(xiàn)場(chǎng)答辯為準(zhǔn)。所以微生物檢驗(yàn)培訓(xùn)以無(wú)菌操作技術(shù)為主，理論知識(shí)為輔。微生物檢驗(yàn)方法有平皿計(jì)數(shù)法，濾膜法，多管發(fā)酵法。平皿計(jì)數(shù)法和濾膜法是定量檢驗(yàn)法，多管發(fā)酵法是統(tǒng)計(jì)分析檢驗(yàn)法。環(huán)境微生物檢驗(yàn)的對(duì)象主要有土壤，污泥，水體，空氣。

檢驗(yàn)的微生物指標(biāo)主要有糞大腸菌群菌值、糞大腸菌群、總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希氏菌、菌落總數(shù)、

細(xì)菌總數(shù)、嗜肺軍團(tuán)菌、蛔蟲卵數(shù)、孢子蟲數(shù)等等。66中國(guó)環(huán)境檢測(cè)10.微生物實(shí)驗(yàn)的重難點(diǎn)詳解

微生物是指，形體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、代謝速度快、肉眼看不見的的一類生物。它包括原核生