《多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段》試題庫(kù)

《多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段》試題庫(kù)總分：17分考試時(shí)間：分鐘學(xué)校__________班別__________姓名__________分?jǐn)?shù)__________題號(hào)一總分得分一、單選類(lèi)（共0分）1.細(xì)胞增殖過(guò)程中DNA含量會(huì)發(fā)生變化。通過(guò)測(cè)定一定數(shù)量細(xì)胞的DNA含量，可分析其細(xì)胞周期。根據(jù)細(xì)胞DNA含量不同，將某種連續(xù)增殖的細(xì)胞株細(xì)胞分為三組，每組的細(xì)胞數(shù)如下圖。從圖中所示結(jié)果分析其細(xì)胞周期，不正確的是（）A.乙組細(xì)胞正在進(jìn)行DNA復(fù)制B.細(xì)胞分裂間期的時(shí)間比分裂期長(zhǎng)C.丙組中只有部分細(xì)胞的染色體數(shù)目加倍D.將周期阻斷在DNA復(fù)制前會(huì)導(dǎo)致甲組細(xì)胞數(shù)減少2.下圖是哪次循環(huán)的產(chǎn)物（）A.第一次循環(huán)B.第二次循環(huán)C.第三次循環(huán)D.第四次循環(huán)3.PCR具體操作時(shí)用（）A.微量離心管B.微量移液器C.玻璃試管D.塑料瓶4.DNA復(fù)制過(guò)程中第一步是（）A.獲得引物B.催化合成DNA子鏈C.解旋D.獲得4種脫氧核苷酸5.做PCR使用的微量離心管,總?cè)莘e為（）A.5dLB.5mLC.mLD.5μL6.PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是（）A.反復(fù)洗滌B.不怕外源DNA污染C.高壓滅菌D.在-20℃儲(chǔ)存7.PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)是（）A.原理簡(jiǎn)單B.原料易找C.Taq酶具有耐熱性D.快速、高效、靈活、易于操作8.DNA的合成方向總是從子鏈的哪一端向哪一端延伸（）A.3′端向5′端B.5′端向3′端C.3′端向3′端D.5′端向5′端9.下列描述中哪一項(xiàng)是正確的（）A.RNA兩條鏈?zhǔn)峭蚱叫械腂.RNA兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械腃.DNA兩條鏈?zhǔn)峭蚱叫械腄.DNA兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?0.關(guān)于DNA雙鏈的敘述錯(cuò)誤的是（）A.通常將DNA的羥基末端稱為5′端,而磷酸基團(tuán)的末端稱為3′端B.通常將DNA的羥基末端稱為3′端,而磷酸基團(tuán)的末端稱為5′端C.通常DNA只能從3′端延伸DNA鏈D.通常DNA不能從5′端延伸DNA鏈11.用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為20～30個(gè)核苷酸,是一小段（）A.DNAB.RNAC.DNA或RNAD.雙鏈DNA12.關(guān)于PCR技術(shù)的應(yīng)用,錯(cuò)誤的一項(xiàng)是（）A.古生物學(xué)、刑偵破案、DNA序列測(cè)定B.診斷遺傳疾病、基因克隆、古生物學(xué)C.DNA序列測(cè)定、基因克隆、刑偵破案D.診斷遺傳疾病、合成核苷酸、DNA序列測(cè)定13.PCR利用了DNA的原理，來(lái)控制DNA的解聚與結(jié)合（）A.特異性B.穩(wěn)定性C.熱變性D.多樣性14.從第二次循環(huán)開(kāi)始，復(fù)制的DNA片段呈擴(kuò)增（）A.直線B.指數(shù)C.對(duì)數(shù)D.不變15.PCR過(guò)程中DNA復(fù)性所需的溫度條件為（）A.90℃以上B.72℃左右C.80℃左右D.50℃左右16.DNA合成方向是（）A.從子鏈的3′端向5′端延伸B.從引物的5′端開(kāi)始延伸C.從子鏈的5′端向3′端延伸D.以上皆可17.引物的作用是（）A.打開(kāi)DNA雙鏈B.催化合成DNA子鏈C.使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始復(fù)制D.提供模板18.PCR操作中，從第二輪循環(huán)開(kāi)始擴(kuò)增的DNA片段（）A.固定長(zhǎng)度B.一端固定C.都不固定D.不能確定19.DNA復(fù)制過(guò)程中的前提是（）A.獲得引物B.催化合成DNA子鏈C.解旋D.4種脫氧核苷酸20.DNA的羥基（—OH）末端稱為（）A.3′端B.5′端C.1′端D.2′端21.關(guān)于DNA復(fù)制，下列敘述正確的是（）A.DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，只能從5′端延伸DNA鏈B.DNA復(fù)制不需要引物C.引物與DNA母鏈通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)進(jìn)行結(jié)合D.DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸22.標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程一般分為變性、復(fù)性、延伸三大步，這三大步需要的溫度依次是（）A.92℃、50℃、72℃B.72℃、50℃、92℃C.50℃、92℃、72℃D.80℃、50℃、72℃23.下列不屬于PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)的是（）A.簡(jiǎn)單，易于操作B.可以完全無(wú)限制擴(kuò)增C.實(shí)用性強(qiáng)，靈敏度高D.快速、高效，并可自動(dòng)化24.在的溫度范圍內(nèi)，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)（）A.10～20℃B.80～100℃C.20～30℃D.40～60℃題號(hào)一總分得分二、綜合類(lèi)（共17分）1.在遺傳病診斷及刑偵破案中常需要對(duì)樣品DNA進(jìn)行分析，PCR技術(shù)能快速擴(kuò)增DNA片段，在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝，有效地解決了因?yàn)闃悠稤NA含量太低而難以對(duì)樣品進(jìn)行分析研究的問(wèn)題。參照下圖，完成相關(guān)問(wèn)題：(3分)1).在相應(yīng)的空格內(nèi)寫(xiě)出引物2，并在復(fù)性這一步驟中將引物2置于合適的位置。_________(1分)2).在相應(yīng)的空格內(nèi)寫(xiě)出循環(huán)一次后生成的DNA分子。_________(1分)3).若將作為原料的四種脫氧核苷酸用32P標(biāo)記，請(qǐng)分析循環(huán)一次后生成的DNA分子的_________特點(diǎn)。(1分)2.近10年來(lái)，PCR技術(shù)（多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制（如下圖），在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。(8分)1).加熱使DNA雙鏈打開(kāi)，這一步是打開(kāi)_________鍵，稱為_(kāi)________，在細(xì)胞中是在_________酶的作用下進(jìn)行的。(3分)2).當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板末端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成2條DNA分子，此過(guò)程中原料是_________，遵循的原則是_________。(2分)3).PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的_________和_________。(2分)4).通過(guò)PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，若將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制4次以后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA總數(shù)的比例為_(kāi)________。(1分)3.TaqDNA聚合酶是從一種嗜熱細(xì)菌中分離提取的，該菌是1966年從美國(guó)黃石國(guó)家森林公園的一個(gè)熱泉中發(fā)現(xiàn)的。實(shí)驗(yàn)表明，PCR反應(yīng)時(shí)變性溫度為95℃，50個(gè)循環(huán)后，TaqDNA聚合酶仍有65%的活性。TaqDNA聚合酶的熱穩(wěn)定性是該酶用于PCR的前提條件，也是PCR技術(shù)能迅速發(fā)展和廣泛應(yīng)用的原因。TaqDNA聚合酶還具有逆轉(zhuǎn)靈活性，其作用類(lèi)似于逆轉(zhuǎn)錄酶。TaqDNA聚合酶表現(xiàn)為Mg2+依賴，該酶的催化活性對(duì)Mg2+濃度非常敏感。測(cè)定結(jié)果為MgCl2濃度在mmol/L時(shí)該酶催化活性最高，此濃度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+過(guò)高就抑制酶活性，因而MgCl2的濃度在不同的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)調(diào)整，優(yōu)化濃度。TaqDNA聚合酶具有5′→3′聚合酶活性和5′→3′外切酶活性，而無(wú)3′→5′外切酶活性，它不具有校對(duì)活性。因而在PCR中如發(fā)生某些堿基的錯(cuò)配，該酶是沒(méi)有校正功能的。TaqDNA聚合酶的堿基錯(cuò)配幾率為×10-4。(6分)1).TaqDNA聚合酶在高溫下仍保持活性，因此在PCR擴(kuò)增時(shí)可以_________加入，_________（填“需要”或“不需要”）再添加。(2分)2).影響PCR反應(yīng)的影響因素除引物、反應(yīng)溫度、時(shí)間和TaqDNA聚合酶濃度外，從材料中可知，還應(yīng)有_________。(1分)3).這種嗜熱細(xì)菌能夠在熱泉中生存，這是_________的結(jié)果。(1分)4).PCR中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于_________。假設(shè)對(duì)一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測(cè)所有DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占_________。(2分)題號(hào)一總分得分三、填空類(lèi)（共0分）1.從第二輪循環(huán)開(kāi)始,DNA聚合酶只能特異地復(fù)制_________的DNA序列,使這段_________的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。2.PCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中提供_________、分別與兩條模板鏈結(jié)合的_________、_________種脫氧核苷酸、_________的DNA聚合酶。3.PCR通過(guò)控制_________來(lái)控制雙鏈的_________與_________。4._________的發(fā)現(xiàn)和使用大大增加了PCR的效率,使PCR技術(shù)趨向_________。5.PCR利用了DNA_________原理,在_________的溫度范圍內(nèi),DNA的_________解體,_________分開(kāi),這個(gè)過(guò)程稱為_(kāi)________。題號(hào)一總分得分四、多選類(lèi)（共0分）1.PCR具體操作時(shí)用（）A.微量離心管B.微量移液管C.玻璃試管D.塑料瓶參考答案:一、單選類(lèi)（共0分）1.D2.A3.B4.C5.C6.C7.D8.B9.D10.A11.C12.D13.C14.B15.D16.C17.C18.A19.C20.A21.C22.A23.B24.B二、綜合類(lèi)（共17分）1.本題答案如下1)5′—G—A—OH HO—A—G—5′ 5′—G—G┄┄┄T—C—3′ 2)3′—C—C┄┄┄A—G—5′5′—G—G┄┄┄T—C—3′ 5′—G—G┄┄┄T—C—3′3′—C—C┄┄┄A—G—5′ 3)每個(gè)DNA分子各有一條鏈帶32P標(biāo)記 2.本題答案如下1)(1)氫 (2)解旋 (3)解旋 2)(1)4種脫氧核苷酸 (2)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 3)(1)溫度 (2)酸堿度 4)1/8 3.本題答案如下1)(1)一次性 (2)不需要 2)Mg2+濃度 3)長(zhǎng)期自然選擇 4)(1)基因突變 (2)1/2 三、填空類(lèi)（共0分）1.(1)處于兩個(gè)引物之間 (2)固定長(zhǎng)度 2.(1)DNA模板 (2)兩種引物 (3)四 (4)耐熱 3.(1)溫度 (2)解聚 (3)結(jié)合 4.(1)Taq聚合酶 (2)自動(dòng)化 5.(1)熱變性 (2)80～100℃ (3)雙螺旋 (4)雙鏈 (5)變性 四、多選類(lèi)（共0分）1.A,B解析:一、單選類(lèi)（共0分）1.根據(jù)題意，該生物細(xì)胞中DNA含量的變化范圍為2C&4C，復(fù)制前DNA含量為2C，復(fù)制后DNA含量為4C，所以乙組細(xì)胞正在進(jìn)行DNA復(fù)制。DNA復(fù)制發(fā)生在分裂間期，圖中甲和乙所代表的細(xì)胞處于分裂間期，數(shù)量遠(yuǎn)多于分裂期細(xì)胞，所以細(xì)胞分裂間期的時(shí)間比分裂期長(zhǎng)。丙組細(xì)胞已經(jīng)完成DNA復(fù)制，而染色體數(shù)目加倍只發(fā)生在有絲分裂后期，所以丙組中只有部分細(xì)胞處于分裂后期。將周期阻斷在DNA復(fù)制將會(huì)導(dǎo)致甲組細(xì)胞數(shù)增加。2.根據(jù)引物的特點(diǎn)，可以確定為第一次循環(huán)。3.無(wú)解析4.無(wú)解析5.無(wú)解析6.無(wú)解析7.無(wú)解析8.無(wú)解析9.無(wú)解析10.無(wú)解析11.無(wú)解析12.無(wú)解析13.PCR利用了DNA的熱變性原理，通過(guò)控制溫度來(lái)控制雙鏈的解聚與結(jié)合。14.從第二輪循環(huán)開(kāi)始，復(fù)制的DNA片段呈指數(shù)擴(kuò)增。15.在80～100℃的溫度范圍內(nèi)DNA變性；在溫度下降到50℃左右時(shí)復(fù)性。16.DNA聚合酶能從引物的3′端開(kāi)始延伸DNA鏈，DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。17.DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，而只能從3′端延伸DNA鏈，引物的作用就在于此。18.從第二輪循環(huán)開(kāi)始，由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會(huì)與引物Ⅱ結(jié)合，進(jìn)行DNA的延伸，這樣，DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列。19.在DNA的復(fù)制過(guò)程中，雙鏈的解開(kāi)是進(jìn)行DNA復(fù)制的前提。20.DNA的兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械?，為了明確地表示DNA的方向，通常將DNA的羥基（—OH）末端稱為3′端。21.由于DNA聚合酶不能從頭開(kāi)始合成DNA，只能從引物的3′端延伸DNA鏈。因此，DNA復(fù)制需要引物。首先復(fù)制的是3′端、即復(fù)制方向?yàn)?′→5′；由于DNA分子是反向平行的，子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向從子鏈5′→3′。22.當(dāng)溫度上升到90℃（90～96℃）以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，稱之為變性；當(dāng)溫度下降到50℃（40～60℃）左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合；當(dāng)溫度上升到72℃（70～75℃）時(shí)，溶液中的四種脫氧核苷酸（A、T、C、G）在TaqDNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，稱為延伸。23.PCR技術(shù)要設(shè)計(jì)引物，因此擴(kuò)增具有特異性，靈敏度很高。而應(yīng)用TaqDNA聚合酶的PCR儀可自動(dòng)化，操作簡(jiǎn)單。PCR技術(shù)能在體外迅速擴(kuò)增DNA片段，快速高效，往往被誤認(rèn)為可以無(wú)限制擴(kuò)增，其實(shí)PCR的循環(huán)次數(shù)一般以