標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 17778-1999 預(yù)混料中D-生物素的測定 分光光度法》是一項由中國發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)，旨在規(guī)定一種通過分光光度法來測定預(yù)混合飼料中D-生物素（也稱為維生素H或生物素）含量的方法。該標(biāo)準(zhǔn)詳細說明了檢測流程、所需試劑、儀器設(shè)備、操作步驟以及計算方法，確保測試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概述：

標(biāo)準(zhǔn)適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于預(yù)混料中D-生物素含量的測定，預(yù)混料指的是為了補充動物飼料中營養(yǎng)成分而預(yù)先配制的、含有微量營養(yǎng)元素的混合物。

測定原理

測定基于D-生物素與某種顯色劑反應(yīng)后形成的化合物在特定波長下的吸光度變化。通過建立D-生物素標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度與其濃度之間的線性關(guān)系，可以計算出樣品中未知濃度的D-生物素含量。

試劑與材料

  • D-生物素標(biāo)準(zhǔn)品：用于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  • 顯色劑：與D-生物素反應(yīng)產(chǎn)生有色化合物的化學(xué)試劑。
  • 提取溶劑：用于從預(yù)混料中提取D-生物素。
  • 緩沖液和其他輔助試劑，確保反應(yīng)條件穩(wěn)定。

儀器設(shè)備

  • 分光光度計：用于測量溶液的吸光度。
  • 精確稱量設(shè)備：用于稱取樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。
  • 振蕩器/攪拌器：用于樣品的均勻處理。
  • 容量瓶、移液管等實驗室玻璃器皿：用于溶液的準(zhǔn)確配制和轉(zhuǎn)移。

操作步驟

  1. 樣品準(zhǔn)備：準(zhǔn)確稱取適量預(yù)混料樣品，使用提取溶劑進行處理，以釋放出D-生物素。
  2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：制備一系列已知濃度的D-生物素標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入相同量的顯色劑后，測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。
  3. 樣品測定：將處理后的樣品溶液同樣加入顯色劑，測定其吸光度。
  4. 計算：根據(jù)樣品的吸光度及標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出樣品中D-生物素的含量。

結(jié)果計算與表示

利用標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的線性回歸方程，將樣品的吸光度值轉(zhuǎn)換為D-生物素的濃度，再根據(jù)樣品的處理體積和原始重量，計算出預(yù)混料中D-生物素的實際含量，通常結(jié)果以mg/kg（每千克預(yù)混料中的毫克數(shù)）表示。

注意事項

  • 實驗過程中需嚴格控制實驗條件，如溫度、反應(yīng)時間等，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
  • 所有試劑應(yīng)為分析純或以上級別，確保實驗無污染。
  • 詳細記錄實驗數(shù)據(jù)，包括空白試驗和重復(fù)試驗的結(jié)果，以評估實驗的精度和重復(fù)性。


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  • 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替，建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17778-2005
  • 1999-06-14 頒布
  • 2000-02-01 實施
?正版授權(quán)
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文檔簡介

ICS65.120B46中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17778-1999預(yù)混料中d-生物素的測定分光光度法Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry1999-06-14發(fā)布2000-02-01實施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局布

GB/T17778-1999本標(biāo)準(zhǔn)等效采用日本農(nóng)牧水產(chǎn)畜牧局發(fā)布并實施的飼料添加劑規(guī)格《d-生物素制劑》中的測定標(biāo)準(zhǔn)第1法。在技術(shù)內(nèi)容上對日本飼料漆加劑規(guī)格《d-生物素制劑》的測定方法作了部分改動,即添加了標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。同時，按GB/T6379—1986《測試方法的精密度通過實驗室間試驗確定標(biāo)準(zhǔn)測試方法的重復(fù)性和再現(xiàn)性》的規(guī)定及4個質(zhì)量控制良好的實驗室協(xié)同實驗的結(jié)果，增設(shè)了“重復(fù)性”。本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)“質(zhì)技監(jiān)標(biāo)函19997178號關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)GB/T17778—1999復(fù)合預(yù)混料中d-生物素的測定第一號修改單的函"進行修改。本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)由國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(武漢)負責(zé)起草。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：錢方、錢沁、楊先奎。

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)預(yù)混料中d-生物素的測定分光光；度法GB/T17778-1999Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用-二甲氨基肉桂醛分光光度法測定飼料添加劑d生物素和預(yù)混料(維生素預(yù)混料和復(fù)合預(yù)混料)中d生物素的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料添加劑生物素、維生素預(yù)混料和復(fù)合預(yù)混料中生物素的測定。2方法原理將試樣中d生物素用無水乙醇提取出來.在硫酸乙醇溶波中d-生物素和力-二甲氨基肉桂醛生成橙紅色化合物，在一定范圍內(nèi)顏色深淺與d-生物素含量成正比。3試劑和溶液本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑，除特殊說明外，均為分析純。3.1無水乙醇(GB/T678-1990)。3.2硫酸無水乙醇溶液(2+98):量取2mL硫酸和98mL無水乙醇，混勺。3.3-二甲氨基肉桂醛無水乙醇溶波(2g/L):稱取0.28→-二甲氮基肉桂醛溶于無水乙醇，用無水乙醇稀釋至100mL,混勾。3.4d-生物素標(biāo)準(zhǔn)溶液3.4.1d-生物素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液：準(zhǔn)確稱取0.1000gd-生物素溶解于無水乙醇,定量轉(zhuǎn)入100mL棕色溶量瓶中,用無水乙酵稀釋至刻度,混勺。此液1.00mL含d-生物素1.00mg.3.4.2d-生物素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：準(zhǔn)確量取d-生物素標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液1.00mL于100mL容量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,混勾。此液1.00mL含d-生物素10.00g。4儀器、設(shè)備4.1分光光度計：1.0cm比色血，可在530nm處測定吸光度。4.2磨口平底燒瓶：200ml.。5試樣制備取具有代表性樣品至少2kg,用四分法縮分至250g,粉

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