標準解讀
《GB/T 17778-1999 預混料中D-生物素的測定 分光光度法》是一項由中國發(fā)布的國家標準,旨在規(guī)定一種通過分光光度法來測定預混合飼料中D-生物素(也稱為維生素H或生物素)含量的方法。該標準詳細說明了檢測流程、所需試劑、儀器設備、操作步驟以及計算方法,確保測試結果的準確性和可重復性。以下是該標準的主要內(nèi)容概述:
標準適用范圍
本標準適用于預混料中D-生物素含量的測定,預混料指的是為了補充動物飼料中營養(yǎng)成分而預先配制的、含有微量營養(yǎng)元素的混合物。
測定原理
測定基于D-生物素與某種顯色劑反應后形成的化合物在特定波長下的吸光度變化。通過建立D-生物素標準溶液的吸光度與其濃度之間的線性關系,可以計算出樣品中未知濃度的D-生物素含量。
試劑與材料
- D-生物素標準品:用于制備標準曲線。
- 顯色劑:與D-生物素反應產(chǎn)生有色化合物的化學試劑。
- 提取溶劑:用于從預混料中提取D-生物素。
- 緩沖液和其他輔助試劑,確保反應條件穩(wěn)定。
儀器設備
- 分光光度計:用于測量溶液的吸光度。
- 精確稱量設備:用于稱取樣品和標準品。
- 振蕩器/攪拌器:用于樣品的均勻處理。
- 容量瓶、移液管等實驗室玻璃器皿:用于溶液的準確配制和轉(zhuǎn)移。
操作步驟
- 樣品準備:準確稱取適量預混料樣品,使用提取溶劑進行處理,以釋放出D-生物素。
- 標準曲線制作:制備一系列已知濃度的D-生物素標準溶液,分別加入相同量的顯色劑后,測定各標準溶液的吸光度。
- 樣品測定:將處理后的樣品溶液同樣加入顯色劑,測定其吸光度。
- 計算:根據(jù)樣品的吸光度及標準曲線,計算出樣品中D-生物素的含量。
結果計算與表示
利用標準曲線得到的線性回歸方程,將樣品的吸光度值轉(zhuǎn)換為D-生物素的濃度,再根據(jù)樣品的處理體積和原始重量,計算出預混料中D-生物素的實際含量,通常結果以mg/kg(每千克預混料中的毫克數(shù))表示。
注意事項
- 實驗過程中需嚴格控制實驗條件,如溫度、反應時間等,以保證結果的準確性。
- 所有試劑應為分析純或以上級別,確保實驗無污染。
- 詳細記錄實驗數(shù)據(jù),包括空白試驗和重復試驗的結果,以評估實驗的精度和重復性。
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文檔簡介
ICS65.120B46中華人民共和國國家標準GB/T17778-1999預混料中d-生物素的測定分光光度法Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry1999-06-14發(fā)布2000-02-01實施國家質(zhì)量技術監(jiān)督局布
GB/T17778-1999本標準等效采用日本農(nóng)牧水產(chǎn)畜牧局發(fā)布并實施的飼料添加劑規(guī)格《d-生物素制劑》中的測定標準第1法。在技術內(nèi)容上對日本飼料漆加劑規(guī)格《d-生物素制劑》的測定方法作了部分改動,即添加了標準曲線的繪制。同時,按GB/T6379—1986《測試方法的精密度通過實驗室間試驗確定標準測試方法的重復性和再現(xiàn)性》的規(guī)定及4個質(zhì)量控制良好的實驗室協(xié)同實驗的結果,增設了“重復性”。本標準根據(jù)“質(zhì)技監(jiān)標函19997178號關于標準GB/T17778—1999復合預混料中d-生物素的測定第一號修改單的函"進行修改。本標準由全國飼料工業(yè)標準化技術委員會提出并歸口。本標準由國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試中心(武漢)負責起草。本標準主要起草人:錢方、錢沁、楊先奎。
中華人民共和國國家標準預混料中d-生物素的測定分光光;度法GB/T17778-1999Methodfordeterminationofd-biotininpremix-Spectrophotometry范圍本標準規(guī)定了用-二甲氨基肉桂醛分光光度法測定飼料添加劑d生物素和預混料(維生素預混料和復合預混料)中d生物素的方法。本標準適用于飼料添加劑生物素、維生素預混料和復合預混料中生物素的測定。2方法原理將試樣中d生物素用無水乙醇提取出來.在硫酸乙醇溶波中d-生物素和力-二甲氨基肉桂醛生成橙紅色化合物,在一定范圍內(nèi)顏色深淺與d-生物素含量成正比。3試劑和溶液本標準所用試劑,除特殊說明外,均為分析純。3.1無水乙醇(GB/T678-1990)。3.2硫酸無水乙醇溶液(2+98):量取2mL硫酸和98mL無水乙醇,混勺。3.3-二甲氨基肉桂醛無水乙醇溶波(2g/L):稱取0.28→-二甲氮基肉桂醛溶于無水乙醇,用無水乙醇稀釋至100mL,混勾。3.4d-生物素標準溶液3.4.1d-生物素標準儲備溶液:準確稱取0.1000gd-生物素溶解于無水乙醇,定量轉(zhuǎn)入100mL棕色溶量瓶中,用無水乙酵稀釋至刻度,混勺。此液1.00mL含d-生物素1.00mg.3.4.2d-生物素標準工作溶液:準確量取d-生物素標準儲備溶液1.00mL于100mL容量瓶中,加無水乙醇稀釋至刻度,混勾。此液1.00mL含d-生物素10.00g。4儀器、設備4.1分光光度計:1.0cm比色血,可在530nm處測定吸光度。4.2磨口平底燒瓶:200ml.。5試樣制備取具有代表性樣品至少2kg,用四分法縮分至250g,粉
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