GB/T 23385-2009飼料中氨芐青霉素的測(cè)定高效液相色譜法

犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２３３８５—２００９

飼料中氨芐青霉素的測(cè)定

高效液相色譜法

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２００９０３２６發(fā)布２００９０７０１實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

犌犅／犜２３３８５—２００９

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（ＳＡＣ／ＴＣ７６）提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：黑龍江省獸藥飼料監(jiān)察所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：金慧然、葉建敏、范錫龍、郭文欣、陶婭、江淼、李春輝。

Ⅰ

書

犌犅／犜２３３８５—２００９

飼料中氨芐青霉素的測(cè)定

高效液相色譜法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用高效液相色譜（ＨＰＬＣ）法測(cè)定飼料中氨芐青霉素的含量。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預(yù)混合飼料中氨芐青霉素含量的測(cè)定。

本標(biāo)準(zhǔn)檢出限為１．０ｍｇ／ｋｇ，定量限為５．０ｍｇ／ｋｇ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法（ＧＢ／Ｔ６６８２—２００８，ＩＳＯ３６９６：１９８７，ＭＯＤ）

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣（ＧＢ／Ｔ１４６９９．１—２００５，ＩＳＯ６４９７：２００２，ＩＤＴ）

ＧＢ／Ｔ２０１９５動(dòng)物飼料試樣的制備（ＧＢ／Ｔ２０１９５—２００６，ＩＳＯ６４９８：１９９８，ＩＤＴ）

３原理

用磷酸鹽緩沖液提取試樣中的氨芐青霉素，高效液相色譜儀反相色譜系統(tǒng)分離，紫外檢測(cè)器或二極

管矩陣檢測(cè)器在波長２２０ｎｍ處進(jìn)行定性、定量測(cè)定。

４試劑和溶液

除非另有規(guī)定，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純?cè)噭┖头希牵拢裕叮叮福惨?guī)定的一級(jí)水。

４．１乙腈：色譜純。

４．２磷酸二氫鉀溶液，犮（ＫＨ２ＰＯ４）＝０．０２ｍｏｌ／Ｌ：準(zhǔn)確稱?。玻罚玻缌姿岫溻浻冢保埃埃埃恚倘萘科恐?，

加水溶解稀釋至刻度。

４．３提取液：磷酸二氫鉀溶液（４．２）＋乙腈（４．１）＝１９＋１。

４．４ＨＰＬＣ流動(dòng)相：?。梗玻埃恚塘姿岫溻浫芤海ǎ矗玻┖停福埃恚桃译妫ǎ矗保?，混合均勻，通過０．４５μｍ的

溶劑微孔過濾膜過濾，使用前用超聲波脫氣。

４．５氨芐青霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液：準(zhǔn)確稱取氨芐青霉素標(biāo)準(zhǔn)品（含量不少于８６．５％）５０ｍｇ（精確至０．００００１ｇ），

于５０ｍＬ容量瓶中，用超純水溶解并定容至刻度，搖勻。其溶液濃度為１．０ｍｇ／ｍＬ，貯于４℃～６℃冰

箱中，有效期２ｄ。

４．６氨芐青霉素標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確移取氨芐青霉素標(biāo)準(zhǔn)貯備液（４．５）適量，用水稀釋成濃度分別為

１．０μｇ／ｍＬ、５．０μｇ／ｍＬ、１０．０μｇ／ｍＬ、２５．