GB/T 25165-2010明膠中牛、羊、豬源性成分的定性檢測方法實(shí)時(shí)熒光PCR法

ICS6502030

B43..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T25165—2010

明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測方法

、、

實(shí)時(shí)熒光PCR法

Protocolofidentificationofbovinecarineovineandorcinederived

,p,p

materialsingelatin—RealtimePCRmethod

2010-09-26發(fā)布2011-05-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國

國家標(biāo)準(zhǔn)

明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測方法

、、

實(shí)時(shí)熒光PCR法

GB/T25165—2010

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中國標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京復(fù)興門外三里河北街號

16

郵政編碼

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電話

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各地新華書店經(jīng)銷

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開本印張字?jǐn)?shù)千字

880×12301/160.57

年月第一版年月第一次印刷

201011201011

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書號

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:()

GB/T25165—2010

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人陳穎吳亞君袁飛王晶徐寶梁張舒亞楊海榮王斌趙勇勝

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T25165—2010

明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測方法

、、

實(shí)時(shí)熒光PCR法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了明膠中牛羊豬源性成分的實(shí)時(shí)熒光檢測方法

、、PCR。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測

、、。

該方法的檢出限為

0.1%。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內(nèi)容或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)然而鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。,。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

食品添加劑明膠

GB6783

飼料采樣

GB/T14699.1

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測

GB/T27403—2008

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。

31

.

實(shí)時(shí)熒光PCRrealtimePCR

在反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)利用熒光信號的積累實(shí)時(shí)監(jiān)控整個(gè)擴(kuò)增過程

PCR,PCR。

32

.

Ct值cyclethreshold

每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

。

4原理

利用實(shí)時(shí)熒光技術(shù)根據(jù)不同物種的特異性基因序列對牛羊豬源性成分進(jìn)行鑒定利用裂

PCR,、、。

解液破碎細(xì)胞酚三氯甲烷抽提蛋白質(zhì)異丙醇沉淀得到以提取的為模板進(jìn)行內(nèi)參照基

,、,DNA;DNA

因的實(shí)時(shí)熒光檢測以確定樣品的提取效率通過特異性引物和標(biāo)記熒光物質(zhì)探針進(jìn)行牛

PCR,DNA;、

羊豬源性成分的實(shí)時(shí)熒光擴(kuò)增根據(jù)擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的強(qiáng)弱判定實(shí)

、PCR,PCR,

現(xiàn)對明膠中牛羊豬源性成分的定性分析

、、