中藥新藥臨床前毒理學評價pptppt課件醫(yī)學課件

毒理學定義毒理學：是研究毒性物質(zhì)對機體的有害作用及其發(fā)生、機制、結(jié)果以及危害因素的科學。主要用于對外源性物質(zhì)的安全性評價和危險性評估。早期毒理學：研究不同毒物的使用，著重毒物對機體的急性危害或致死作用現(xiàn)代毒理學：研究在特定情況下，生命有機體接觸化學、生物或物理物質(zhì)產(chǎn)生有害作用（毒性）的科學。藥物毒理學：是研究藥物對生命有機體有害作用的科學，用于新藥臨床前安全性評價、臨床試驗及臨床合理用藥。

2021/4/261任務(wù)及目的藥物毒理學的任務(wù)：包括臨床毒理學、新藥臨床試驗、藥物流行病學研究的任務(wù)。藥物毒理學的基本目的：?認識并掌握藥物的毒性作用，為臨床安全用藥提供科學依據(jù)；?以在用藥過程中避免或減輕這些有毒作用的發(fā)生。2021/4/262毒性作用類別藥物不良反應(yīng)（adversereaction)：凡是不符合用藥目的并為病人帶來不適或痛苦的有害反應(yīng)統(tǒng)稱為藥物不良反應(yīng)。包括：副反應(yīng)、后遺效應(yīng)、停藥反應(yīng)、毒性反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、特異質(zhì)反應(yīng)、致癌性、致畸性、致突變性；2021/4/263毒性作用類別藥物不良反應(yīng)副反應(yīng)后遺效應(yīng)停藥反應(yīng)毒性反應(yīng)變態(tài)反應(yīng)特異質(zhì)反應(yīng)毒性作用致癌性致畸性致突變性藥源性疾病2021/4/264毒性作用類別1、毒性反應(yīng)(toxicreaction)在治療劑量下不出現(xiàn)，僅在劑量過大、用藥時間過長或體內(nèi)藥物蓄積過多時才出現(xiàn)的反應(yīng)。2、變態(tài)反應(yīng)(allergicreaction)機體對藥物的不正常免疫反應(yīng)，非肽類藥物作為半抗原與機體蛋白結(jié)合后，經(jīng)過敏化過程而發(fā)生的反應(yīng)。

特點：因藥因人而異，與藥物效應(yīng)及劑量無關(guān)，用藥理拮抗藥解救無效。2021/4/265毒性作用類別3、特異質(zhì)反應(yīng)（idiosyncrasy）

用藥者有先天性遺傳異常，對某些藥物反應(yīng)特別敏感，出現(xiàn)的反應(yīng)性質(zhì)可能與常人不同。藥理遺傳異常所致。

特點：與藥物的固有藥理作用基本一致、嚴重程度與劑量成比例。4、致癌性（carcinogenesis）

屬于長期用藥產(chǎn)生的毒性，包括遺傳毒性致癌物、非遺傳毒性致癌物。（可以是遲發(fā)效應(yīng)）2021/4/266毒性作用類別5、生殖毒性和發(fā)育毒性（(reproductiveanddevelopmentaltoxicity）生殖毒性：針對育齡人群，用藥后對生殖系統(tǒng)及與生育相關(guān)的神經(jīng)或內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生的毒性。發(fā)育毒性：關(guān)注藥物對胚胎的影響，特別是藥物的致畸毒性。多代生殖毒性評價：涉及藥物對子代生殖系統(tǒng)的影響。2021/4/267毒性作用類別6、致突變與遺傳毒性(mutagenesisandgenetictoxicity)

藥物損傷遺傳物質(zhì)而發(fā)生突變作用，產(chǎn)生對人類本身（致癌毒性）及后代的影響（致畸毒性）。2021/4/268相關(guān)測定數(shù)據(jù)量效關(guān)系：藥物的毒性效應(yīng)與劑量在一定范圍內(nèi)成比例，稱為量效關(guān)系。量反應(yīng)：毒性效應(yīng)的強弱呈連續(xù)增減的量變，稱為量反應(yīng)。例：心率快慢等。質(zhì)反應(yīng)：毒性效應(yīng)以全或無、陰性或陽性等表示，稱為質(zhì)反應(yīng)。例：死亡與生存、驚厥與不驚厥。2021/4/269相關(guān)測定數(shù)據(jù)最大無毒性反應(yīng)劑量（noobservedadverseeffectlevel,NOAEL)：指受試物在一定時間內(nèi)，按一定方式與機體接觸，用靈敏的現(xiàn)代檢測方法和觀察指標未發(fā)現(xiàn)損害作用的最高劑量最小毒性反應(yīng)劑量：出現(xiàn)毒性反應(yīng)的最小劑量最大耐受量（maximaltolerancedose，MTD）：不引起受試動物死亡的最高劑量2021/4/26109、人的價值，在招收誘惑的一瞬間被決定。2023/2/32023/2/3Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。2023/2/32023/2/32023/2/32/3/20235:07:45PM11、人總是珍惜為得到。2023/2/32023/2/32023/2/3Feb-2303-Feb-2312、人亂于心，不寬余請。2023/2/32023/2/32023/2/3Friday,February3,202313、生氣是拿別人做錯的事來懲罰自己。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/32/3/202314、抱最大的希望，作最大的努力。03二月20232023/2/32023/2/32023/2/315、一個人炫耀什么，說明他內(nèi)心缺少什么。。二月232023/2/32023/2/32023/2/32/3/202316、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。2023/2/32023/2/303February202317、一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。2023/2/32023/2/32023/2/32023/2/3相關(guān)測定數(shù)據(jù)最小致死劑量（minimallethaldose，MLD）：引起個別受試動物出現(xiàn)死亡的劑量半數(shù)有效量（medianeffectivedose,ED50）：能引起50%的動物或?qū)嶒灅吮井a(chǎn)生反應(yīng)的濃度或劑量。半數(shù)致死量（medianlethaldose,LD50）：能引起50%的動物死亡的濃度或劑量。2021/4/2612相關(guān)測定數(shù)據(jù)治療指數(shù)：TI=LD50/ED50藥物實驗動物的LD50和ED50的比值稱為治療指數(shù)（therapeuticindex,TI），用以表示藥物的安全性。安全范圍（marginofsafety）：ED99~LD1（或ED95~LD5）之間的距離。值越大越安全。有效量曲線和致死量曲線的斜率不一樣時，以TI評價藥物的安全性并不可靠。2021/4/2613新藥臨床前毒理學涉及全身毒性和局部毒性研究。是為新藥臨床用藥的安全性提供試驗依據(jù)，并為臨床毒副反應(yīng)監(jiān)測提供重要信息。2021/4/2614新藥臨床前毒理學

目的意義局限性申報資料評價程序2021/4/2615新藥臨床前毒理學研究目的毒性劑量ToxicDose安全劑量范圍Safetymargin毒性反應(yīng)Toxicreaction:性質(zhì)、程度、量毒關(guān)系、產(chǎn)生、達峰、持續(xù)時間及反復產(chǎn)生毒性反應(yīng)時間、遲發(fā)性、蓄積性、耐受性尋找毒性反應(yīng)靶器官TargetOrgan毒性反應(yīng)是否可逆Reversibility解毒或解救措施Antidote確保臨床用藥安全(重點監(jiān)測指標)2021/4/2616新藥臨床前毒理學研究意義（1）通過動物實驗以確立：出現(xiàn)毒性反應(yīng)的癥狀、程度、劑量、時間、靶器官以及損傷的可逆性；安全劑量及安全范圍。（2）通過上述資料的獲得，達到預(yù)測人類臨床用藥的可能毒性，并制定防治措施；同時推算臨床研究的安全參考劑量和安全范圍的目的。2021/4/2617新藥臨床前評價局限性1、種屬差異：假陽性或假陰性2、實驗動物數(shù)量有限3、健康狀態(tài)不同4、研究方法的局限2021/4/2618藥理毒理研究申報資料藥理毒理研究資料綜述，主要藥效學試驗，一般藥理試驗，急性毒性試驗，長期毒性試驗，過敏性、溶血性、刺激性等特殊安全性研究，復方制劑中多成分的相互影響試驗、致突變試驗，生殖毒性試驗，致癌試驗，依賴性試驗，動物藥代動力學試驗。2021/4/2619藥物毒性臨床前評價程序1、急性毒性試驗(acute)2、長期毒性試驗(chronic)3、特殊毒性試驗(遺傳、生殖、致癌)4、其它毒性試驗(過敏、刺激etc.)2021/4/2620急性毒性試驗1、闡明藥物毒性作用及強度、計算相對毒性參數(shù)相對毒性參數(shù)：治療指數(shù)TI=LD50/ED50越小越有效安全系數(shù)SF=LD5/ED95可靠或確實安全系數(shù)CSF=LD1/ED99安全范圍SM=(LD1/ED99-1)X100%越大越安全LD5基本無害量ED95基本有效量LD1肯定無害量ED99肯定有效量2021/4/2621急性毒性試驗2、了解毒性靶器官3、為長毒、特殊毒性試驗劑量設(shè)計：很多實驗參考LD50,主要藥效學劑量限度、一般藥理學和藥動學劑量設(shè)計也要參考急性毒性的LD50;短期致癌試驗高劑量=MTD4、為Ⅰ期臨床試驗起始劑量選擇：細胞毒類抗癌藥，I期臨床起始劑量=1/10LD505、為臨床毒副反應(yīng)監(jiān)護提供參考：中毒癥狀,起始、持續(xù)、恢復時間；中毒靶器官；對抗試驗為臨床急救提供依據(jù)

2021/4/2622急性毒性試驗基本原則:執(zhí)行GLP具體問題具體分析隨機、對照、重復動物:獲得盡量多信息前提下，使用盡量少動物嚙齒類---小鼠或大鼠非嚙齒類---犬或猴二種動物(嚙齒類及非嚙齒類)小鼠18-22g;大鼠120-150g;犬用成年犬初始體重不應(yīng)超過或低于平均體重的20%♀♂各半2021/4/2623急性毒性試驗受試物:工藝穩(wěn)定、符合臨床用質(zhì)量標準標明名稱、來源、批號、含量（或規(guī)格）、保存條件及配制方法等，附質(zhì)檢報告輔料、溶劑、試劑等應(yīng)標明批號、規(guī)格和生產(chǎn)廠家，符合試驗要求

例如：原料藥

臨床擬用劑型復方制劑：復方+拆方(增毒？新毒？)易降解：含降解產(chǎn)物量最高的受試物進行急毒試驗，并與臨床樣品的急毒試驗結(jié)果比較2021/4/2624急性毒性試驗給藥途徑：臨床擬用途徑+原型藥物較完全進入循環(huán)途徑（如靜脈注射）嚙齒類ig給藥前應(yīng)禁食12h，不禁水劑量和分組給藥劑量：未見毒性量嚴重毒性量設(shè)空白和/或溶媒（輔料）對照小動物4-6個劑量組,組距0.65-0.85,求LD50大動物可用50%等量遞升法(近似致死劑量法),求出ALD和MTD，不必達到致死量2021/4/2625急性毒性試驗給藥容積：不等濃度等容量給藥動物給藥途徑給藥量小鼠ig0.2-1.0ml/10giv、ip、sc0.1-0.5ml/10g大鼠ig1.0-2.0ml/100giv、ip、sc0.5-1.0ml/100g靜脈注射(iv)；腹腔注射(ip)；口服(po)；皮下注射(sc)；灌胃(ig)2021/4/2626急性毒性試驗觀察指標及時間藥后4h內(nèi)詳觀,后每天上下午各一,觀察≥14d記錄毒性反應(yīng)、死亡情況,中毒癥狀、發(fā)生時間、持續(xù)時間、嚴重程度、恢復期及動物最短、最長死亡時間其它指標：一般指標、體重變化等2021/4/2627急性毒性試驗急性毒性研究的一般觀察和指征觀察可能涉及的器官、組織、系統(tǒng)Ⅰ.鼻孔呼吸阻塞，呼吸頻率和深度改變，體表顏色改變CNS，感官，神經(jīng)肌肉等Ⅱ.運動功能：運動頻率和特點的改變CNS，感官，神經(jīng)肌肉等Ⅲ.驚厥(抽搐)：隨意肌明顯的無意識收縮或驚厥性收縮CNS,呼吸衰竭,神經(jīng)肌肉,自主神經(jīng)Ⅳ.反射感官，神經(jīng)肌肉Ⅴ.眼檢指征自主神經(jīng)；出血，感染Ⅵ.心血管指征自主神經(jīng),CNS,心輸出量降低等Ⅶ.唾液分泌自主神經(jīng)Ⅷ.豎毛自主神經(jīng)Ⅸ.痛覺喪失感官，CNSⅩ.肌張力自主神經(jīng)等Ⅺ.胃腸指征自主神經(jīng)，胃腸動力等Ⅻ.皮膚刺激性，炎癥，過敏等2021/4/2628急性毒性試驗結(jié)果處理：實驗資料用Bliss法計算LD50。必要時求不同性別LD50劑量－反應(yīng)、時間－反應(yīng)關(guān)系反應(yīng)可能涉及組織、器官或系統(tǒng)肉眼病變和組織病檢，初步判斷毒性靶器官病檢報告應(yīng)附：病檢者簽名+單位蓋章+病理照片確定NOAEL、MTD、ALDetc，初步判斷受試物的安全范圍2021/4/2629急性毒性試驗綜合評價判斷反應(yīng)與藥物作用相關(guān)性：時間、發(fā)生率、劑量-反應(yīng)關(guān)系動物種屬及背景數(shù)據(jù)病理學檢查結(jié)果同類藥物特點安全范圍、毒性嚴重程度及可恢復性毒性作用靶器官毒性可能涉及部位大體解剖和組織病理學檢查結(jié)果2021/4/2630長期毒性試驗第一階段（1）兩種品系、35天染毒、毒性量效曲線，推薦臨床使用途徑；（2）器官毒性試驗、死亡情況、體重變化、血液學、臨床生化學、組織學檢查；（3）致突變活性第二階段篩選；（4）生殖毒性試驗；（5）受試動物的藥代動力學研究；（6）行為試驗；（7）協(xié)同、增效、拮抗作用。2021/4/2631長期毒性試驗第二階段（1）動物長期毒性試驗（半年以上）；（2）哺乳類動物致突變試驗；（3）嚙齒類動物2年至癌試驗；（4）人類藥代動力學試驗；（5）人類臨床試驗；（6）短期和長期用藥的流行病學資料。2021/4/2632長期毒性試驗基本原則執(zhí)行GLP整體性研究結(jié)果與其它藥理毒理試驗互為印證、說明和補充具體問題具體分析隨機、對照、重復2021/4/2633長期毒性試驗動物invitro體系篩選實驗動物種屬或品系理想動物對受試物生物轉(zhuǎn)化與人體相近對受試物敏感已有大量歷史對照數(shù)據(jù)二種動物，嚙齒類首選大鼠，非嚙齒類用Beagle犬,必要時用猴、豬等符合等級要求來源、品系、遺傳背景清楚，有動物質(zhì)量合格證大鼠6-9w，Beagle犬6-12m,體重CV≤20％♂♀各半必要時，可用疾病模型動物進行試驗Duration≥6m,naturaldeath(rat:1y-15%,1.5y-50%,2y-70-80%)2021/4/2634長期毒性試驗給藥途徑與臨床用藥途徑一致臨床iv,大鼠給藥＞1月，ip代替im或sc應(yīng)變換注射部位必要時改變給藥途徑但應(yīng)說明原因分組三個給藥組,單位：mg(ml,IU)/kg或/m2不等濃度等容量給藥低劑量組－高于有效劑量，不出現(xiàn)毒性中劑量組－輕微或中等度毒性高劑量組－明顯/嚴重毒性，或個別動物死亡空白對照－溶媒或賦形劑溶媒或賦形劑有毒性時則增加正常對照組陽性對照2021/4/2635長期毒性試驗測試次數(shù)能反映動態(tài)變化一般行為、食量每天觀察記錄大鼠體重每周一次大動物生理指標每半月一次大動物ECGⅡ?qū)?lián)，給藥前、給藥期間、停藥及恢復期均要檢測發(fā)現(xiàn)有陽性指標應(yīng)加大觀察密度綜合評價長毒結(jié)果結(jié)合藥學，藥理學、PK、TK和其它毒理學研究(+臨床研究)，綜合評價找到：不良反應(yīng)(T&D&R)、毒性靶器官(O)、安全范圍(S)、臨床需重點檢測指標()及臨床監(jiān)護或解救措施(A)2021/4/2636特殊毒性試驗研究是否會引起畸胎、腫瘤，對遺傳物質(zhì)是否有損傷等；特殊毒性試驗存在著種屬差異性致突變試驗(遺傳毒性試驗)生殖毒性試驗致癌試驗2021/4/2637特殊毒性試驗致突變試驗微生物回復試驗(Ames試驗）哺乳動物培養(yǎng)細胞基因突變試驗果蠅伴性隱性致死試驗染色體畸變試驗嚙齒動物顯性致死試驗精原細胞染色體畸變試驗動物微核試驗程序外DNA合成(UDS)試驗SOS顯色試驗2021/4/2638特殊毒性試驗生殖毒性試驗一般生殖毒性試驗致畸敏感期毒性試驗圍產(chǎn)期毒性試驗致癌試驗短期致癌試驗哺乳動物培養(yǎng)細胞惡性轉(zhuǎn)化試驗小鼠肺腫瘤誘發(fā)短期試驗長期致癌試驗2021/4/2639特殊毒性試驗其他試驗皮膚給藥毒性試驗皮膚給藥的急性毒性試驗皮膚給藥的長期毒性試驗皮膚刺激試驗皮膚過敏試驗皮膚光敏性試驗2021/4/2640特殊毒性試驗腔道用藥毒性試驗眼刺激試驗滴鼻劑和吸入劑急性毒性試驗滴鼻劑和吸入劑刺激試驗直腸、陰道用藥急性毒性試驗直腸、陰道用藥刺激試驗藥物依賴性試驗身體依賴性試驗自然戒斷試驗替代試驗催促試驗誘導試驗精神依賴性試驗2021/4/2641特殊毒性試驗過敏性試驗皮膚過敏試驗豚鼠：GPMT(GuineaPigMaximizationTest,用佐劑)

BT(BuehlerTest)小鼠：MEST（Mouseearswellingtest）

LLNA（Locallymphnodeassay）注射給藥過敏試驗全身主動過敏試驗(activesystemicanaphylaxisASA,豚鼠)被動皮膚過敏試驗(passivecutaneousanaphylaxisPCA,大鼠)2021/4/2642特殊毒性試驗溶血性試驗制備2%紅細胞懸液(兔/羊/犬/人)加入不同量臨床濃度受試物，溫育≥1h觀察有無溶血或凝集反應(yīng)區(qū)分鑒別真凝聚或假凝聚受試物管3h內(nèi)無溶血和凝聚，為合格依賴性試驗身體依賴性試驗自然戒斷試驗替代試驗催促試驗誘導試驗精神依賴性試驗自身給藥試驗條件性位置偏愛試驗水迷宮試驗2021/4/26439、人的價值，在招收誘惑的一瞬間被決定。03-2月-2303-2月-23Friday,February3,202310、低頭要有勇氣，抬頭要有低氣。***2/3/20235:07:45PM11、人總是珍惜為得到。03-2月-23**Feb-2303-Feb-2312、