GB/T 26618-2011派琴蟲(chóng)病診斷操作規(guī)程

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T26618—2011

派琴蟲(chóng)病診斷操作規(guī)程

ProtocolofdiagnosisforPerkinsosis

2011-06-16發(fā)布2011-11-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T26618—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄為規(guī)范性附錄附錄和附錄為資料性附錄

A,BC。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院福建出入境檢驗(yàn)檢疫局黃島出入境檢驗(yàn)檢疫局國(guó)家

:、、、

海洋環(huán)境監(jiān)測(cè)中心深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局上海出入境檢驗(yàn)檢疫局

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人吳紹強(qiáng)林祥梅劉建鄭騰李西峰梁玉波劉葒?yán)罱n雪清賈廣樂(lè)梅琳

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T26618—2011

引言

派琴蟲(chóng)病是影響世界貝類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要寄生蟲(chóng)病為國(guó)際獸醫(yī)局規(guī)定的必報(bào)水生動(dòng)物

,(OIE)

疫病之一本病年首次報(bào)道當(dāng)時(shí)引起美國(guó)路易斯安那州的墨西哥海灣的大批牡蠣Crassostrea

。1946,,(

virinica死亡迄今為止已發(fā)現(xiàn)派琴蟲(chóng)存在于美洲歐洲澳洲亞洲和非洲五大洲的許多貝類(lèi)體內(nèi)

g)。,、、、,

包括牡蠣鮑魚(yú)蛤子扇貝珍珠牡蠣鳥(niǎo)蛤和貽貝等體內(nèi)并在許多地區(qū)造成了嚴(yán)重的危害死亡率高

、、、、、,,

達(dá)

95%。

年我國(guó)在櫛孔扇貝蝦夷扇貝皺紋盤(pán)鮑菲律賓蛤仔體內(nèi)檢測(cè)到派琴蟲(chóng)美國(guó)年也從

1997,、、、。2005

中國(guó)廣西北海進(jìn)口牡蠣中檢出派琴蟲(chóng)目前派琴蟲(chóng)已經(jīng)成為影響我國(guó)貝類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要病原之

。,

一據(jù)對(duì)黃海北部三個(gè)海域的菲律賓蛤仔的派琴蟲(chóng)感染狀況進(jìn)行調(diào)查的結(jié)果表明除月份和月份

。,36

的感染率分別為和之外其他月份感染率均為

95%90%,100%。

目前派琴蟲(chóng)感染的診斷通常依靠推薦的組織切片法組織培養(yǎng)法以及方法組

,OIE、FTMPCR。

織學(xué)方法可以通過(guò)顯微鏡下直接觀察蟲(chóng)體或觀察組織損傷來(lái)監(jiān)測(cè)感染的分布情況培養(yǎng)派琴蟲(chóng)

。FTM

休眠孢子的方法是將派琴蟲(chóng)滋養(yǎng)體進(jìn)行培養(yǎng)培養(yǎng)后蟲(chóng)體體積增大細(xì)胞壁增厚而且不繁殖是一種

,,、,,

傳統(tǒng)有效的定量檢測(cè)派琴蟲(chóng)的方法實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)貝類(lèi)派琴蟲(chóng)的方法敏感度較高而且特異性

。PCR,

強(qiáng)檢測(cè)可在一天之內(nèi)完成定量準(zhǔn)確全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)

,,、。

Ⅱ

GB/T26618—2011

派琴蟲(chóng)病診斷操作規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了派琴蟲(chóng)病診斷時(shí)的樣品采集蟲(chóng)體培養(yǎng)及顯微鏡檢查以及熒光檢測(cè)操作

,,PCRPCR

規(guī)程

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于蛤仔牡蠣等水生動(dòng)物及其產(chǎn)品中攜帶海洋派琴蟲(chóng)Perkinsusmarinus奧爾森派

、()、

琴蟲(chóng)Perkinsusolseni等派琴蟲(chóng)的診斷也可用于派琴蟲(chóng)病的監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查

(),。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內(nèi)容或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)然而鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。,。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

出入境動(dòng)物檢疫采樣

GB/T18088

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)

。

31

.

派琴蟲(chóng)病Perkinsosis

帕金蟲(chóng)病

由海洋派琴蟲(chóng)Pmarinus奧爾森派琴蟲(chóng)Polseni等在宿主血細(xì)胞內(nèi)寄生或者游離在結(jié)締組

(.)、(.)

織鰓內(nèi)臟或套膜上皮中而引起的水生動(dòng)物的一種嚴(yán)重的寄生蟲(chóng)病

、、。

注除PmarinusPolseni之外病原還包括PqugwadiPchesapeakiPandrewsi和Pmediterraneus

:.、.,.、.、..。

32

.

Ct值cyclethreshold

熒光反應(yīng)中熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

PCR,。

4材料

除另有規(guī)定外所用化學(xué)試劑均為分析純

,。

試驗(yàn)用水要求達(dá)到中一級(jí)水的要求

GB/T6682。

41液體巰基乙酸鹽培養(yǎng)基具體配制方法見(jiàn)附錄

.(fluidthioglycollatemedia,FTM):A。

42盧戈氏碘液配制方法見(jiàn)附錄

.(Lugol’siodine):A。

43氯霉素配制方法見(jiàn)附錄

.2.5%:A。

44制霉菌素配制方法見(jiàn)附錄

.1%: