CDE注射劑無菌保證工藝研究與驗證常見技術問題解答匯總剖析

CDE常見技術問題解答匯總2008年度第一期講習班（術要求認真梳理、分析、總結(jié)后，現(xiàn)予以發(fā)布，并就相關問題進行討論與交流。1121℃，15F0≥81211210108F0≥8的情況。答：從微生物殺滅的數(shù)學模型可知，在初始污染相同的情況下，滅菌F0值越大，無菌保證水平越高。因此，顯然為降低產(chǎn)品殘留微生物的風險，盡量選擇高的F0值是順理成章的。2121℃，8哪個條件應該優(yōu)先選擇呢？F0F0F0的差F0值差異較小的滅菌工藝。3、申報資料中的滅菌條件為“101℃ ℃，滅菌30分鐘，這種表示法否規(guī)范？答暫不說滅菌條件“101℃ ℃滅菌30分鐘是否規(guī)范“101℃ ℃，滅菌30分鐘”本身不能稱為終端滅菌，因℃，滅菌30分鐘”幾乎不能計算F0值滅菌條件的表示可以參照中國藥典2005年版二部附錄168滅菌法121℃ 或。4、同品種10ml、20ml注射劑，采取相同的滅菌方式是否合適？答：10ml、20ml保證大體積產(chǎn)品的無菌保證水平。5水平高的劑型。6F0≥12F0≥8F0≥8即可？答：可參考歐盟滅菌工藝選擇的決策樹。7、決策樹中殘存概率法是否亦優(yōu)先選擇121℃的溫度條件？產(chǎn)品不能耐受121℃的高溫，則可以降低溫度，并保證微生物的殘存概率小于10-6。8、對熱不穩(wěn)定藥品（如蛋白質(zhì)類、生物制品等藝的驗證。答：對熱不穩(wěn)定藥品（如蛋白質(zhì)類、生物制品等藝進行研究，是采用除菌過濾+對無菌工藝進行驗證。9、是否在產(chǎn)品注冊申報時就已形成本產(chǎn)品的完整的工藝規(guī)程中規(guī)定的各項參數(shù)的驗證？1GMP要求。由此可見，申報產(chǎn)品注冊時，應對用于正式上市產(chǎn)品10的偏差？答：一般來說:a后對存在的偏差作修正；bc：驗證本身的作用之一是對滅菌器自帶的監(jiān)控探頭和記錄探頭進行修正，以便正常使用時達到較為準確的溫度值。目前沒有找到“只允許±0.5℃的偏差”的說法。格產(chǎn)品（250ml,100ml）以及不同滅菌參數(shù)產(chǎn)品（比如滅菌溫度和時間不同）答：一般來說，各種規(guī)格、各種滅菌條件均需分別進行驗證。1212163中可能不同，如果出現(xiàn)這種情況該如何處理？設備、壓力、空氣置換不完全、蒸汽質(zhì)量等原因引起。對于裝載熱穿透，大容量注射劑可辨別的冷點。如果裝載不變，容量相同，蒸汽穿透不存在阻隔等，冷點仍然無法重現(xiàn)，則應檢查設備、工藝、壓力、蒸汽質(zhì)量等方面可能存在的不確定性。13、滿載熱分布和空載熱分布對于滅菌效果上體現(xiàn)出的意義有何不同？14答：滿載熱分布試驗是用模擬樣品進行。15的是否需要驗證？滿載，從而確保生產(chǎn)時的裝載方式與驗證時一致。16、熱穿透試驗怎么做？10-6及各檢測點溫度與2.5℃。對于可能影響滅菌效果的操作情況的變更應（溶液2217、熱穿透試驗中的模擬樣品是什么概念，是指實驗室小批量樣品嗎？實驗室小批量樣品。182005版二部附錄169滅菌法。19、滅菌前微生物污染水平的測定方法？答：濾膜過濾法是最常用的方法。使用前應通過驗證。200CFUD值稍低的枯草芽孢桿菌作為生物指示劑進行驗證？答：1D指示劑之間不存在因果關系。2N04的滅菌前后微生物限度測試（若必需，對不同滅菌時間也要進行測試，尋找并6F08~12D值。21、請問滅菌前微生物污染水平和耐熱性（D值）的測試方法？（足量的過濾量（截留的微生物太多就沒法計數(shù)了D15分鐘或更長時間，對該藥液進行無菌檢查，如陰性則通過，呈陽性，說明污D值。99%以上的檢品是非耐熱菌。D值測定相當復雜，請參考《藥品生產(chǎn)驗證指南（藍皮書，國家藥監(jiān)局編第三篇第三章第一節(jié)，有詳細介紹。22D答：芽孢接種量的計算：Ni＝10Do(lgNo+6)/Di其中Ni為生物指示劑耐熱孢子接種數(shù)量No為預定產(chǎn)品中滅菌前污染微生物的限度Do為污染微生物允許的最大D值Di為生物指示劑耐熱孢子在產(chǎn)品中的D值23而微生物限度檢測時間為7272其檢測結(jié)果僅是對滅菌后產(chǎn)品無菌保證水平的參考嗎？于對當批產(chǎn)品的中間控制。24方法進行；微生物的種類即鑒別可以從以下幾方面依次展開：1）通過肉眼觀察菌落形態(tài)；2）3）一般生化試驗：革蘭氏染色或3％KOH試驗；4）生化鑒定（API試驗）鑒別到種。沸試驗（100℃，15分鐘）和微生物計數(shù)。。有條件的實驗室還可開展以下工作：微生物的鑒別試驗（建議企業(yè)集團的中心實驗室開展API鑒定（D25.對于過度殺滅法是否需要進行滅菌工藝驗證？殘存概率法的產(chǎn)品研發(fā)工藝研究與實際生產(chǎn)中驗證有何區(qū)別？CGMP83條:殘存概率法是滅菌工藝的設計，本身就需要驗證確認。26、過度殺滅法是否確定不需進行微生物挑戰(zhàn)試驗？12是證明微生物的殘存概率不大于10-6，故過度殺滅法可以不進行微生物挑戰(zhàn)試驗。27證資料中，只作為存檔備查？驗證；針對品種滅菌條件的設備驗證資料也應附在品種的驗證資料中。28F0SAL嗎？具體規(guī)定是多少？F0SAL，具體可參考歐盟滅菌工藝選擇的決策樹。29、關于培養(yǎng)基灌裝試驗，是針對生產(chǎn)線驗證的，還是針對申報產(chǎn)品進行的（每個產(chǎn)品都要灌裝三批驗證（1）生產(chǎn)線驗證能否代替申報產(chǎn)品的灌裝試驗（同類品種）？（2）采用何種培養(yǎng)基，硫乙醇酸鹽和改良馬丁兩種培養(yǎng)檢查中不同包裝規(guī)格是否都需要進行三批次的灌裝試驗？（1）培養(yǎng)基模擬灌裝試驗應根據(jù)產(chǎn)品、包裝規(guī)格、包裝形式的不同而分如PEG無菌粉2ml5ml10ml幾，因采用不同生產(chǎn)線需要分別進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。一般采用廣譜的培養(yǎng)基，能促進革蘭氏陽性、陰性、酵母菌和霉菌的生長，如大豆胰蛋白胨培養(yǎng)基，厭氧培養(yǎng)基只在特殊情況下使用。321批次培養(yǎng)基模擬灌裝試驗即可。30、培養(yǎng)基灌裝試驗中，培養(yǎng)基滅菌后、灌裝前，再經(jīng)濾膜除菌過濾，以觀察濾器在消毒安裝過程中的無菌效果，是否可行？意防止不溶性顆粒堵塞濾器。31、培養(yǎng)基灌裝試驗年度再驗證每年兩次，每次幾批？驗，每次一批。32200514個溫度的培養(yǎng)試驗是否也需延長？14天，可以分成兩個溫度32.5度）7天，也可以一個溫度（22.5度）直接培養(yǎng)。3395%0.1%一下使用哪個統(tǒng)計方法，如何計算查表得出。（2003（版社）258頁。有兩種計算方法。一種是采用泊松分布的近似值計算公式，即P（X>0）=1－e-Np>0.95其中，P為置信限，N為模擬分裝瓶數(shù)或批量，p＝0.1％（污染概率）另一種計算方法是更為精確的二項式計算公式，即P(X>0)=1－（1－X）N其中，P為置信限，N為模擬分裝瓶數(shù)或批量，X=0.1％（污染概率）25995%347259里，從哪里開始到哪里結(jié)束？程度。35、如何進行容器密封性驗證？如靈敏度較高、使用方便、檢測迅速及低成本等。在產(chǎn)品有效期內(nèi)，均可使用物3637、密封性驗證中，如鋁桶的驗證，用培養(yǎng)基驗證無法觀察結(jié)果，是否有其他方法？答：對于無菌原料的容器，建議嘗試物理的方法，如鹽水滲入法。38、密封性驗證一般每次取樣量是多少，再驗證的周期是多少？10證應考察有效期內(nèi)不同時間的密閉性，再驗證一般一年可進行一次。39產(chǎn)品無要求，是否不需進行密封性驗證？答：對大容量注射劑、小容量注射劑、粉針劑均應進行容器密封性驗證。40、容器密封性測試是否在安瓿、西林瓶等所有注射劑型中都必須完成？測方法。41、無菌過濾驗證目前國內(nèi)廠家能夠做到什么水平？哪種水平是國家認可的？2008110（二）制備工藝第4點有關凍干粉針劑的要求，除菌過必要時尚需要進行濾膜的微生物截留量測試。出的階段性的要求，還將隨著對此問題的認知而不斷完善。42的檢測報告是有效的？不同，應該對分別進行微生物挑戰(zhàn)試驗，反之則不需要。才能判定供應商檢測報告的有效性。計，這也有助于增強判斷的準確性。43何解決？濾芯是不同生產(chǎn)批號的，就更好。質(zhì)的濾膜，使其對主藥成分沒有影響。44確定的壓力，專用儀器會自動打印出測試結(jié)果，表明試驗通過還是不通過。45、過濾器驗證哪些是生產(chǎn)企業(yè)必須進行的？哪些是供應商提供的？如何理解？如何進行此項試驗更能保證驗證的科學價值？答：兩者并不矛盾。過濾器生產(chǎn)廠家都應有自己的實驗室，如Pall和Millipore，可以利用藥品生產(chǎn)企業(yè)提供的藥液，選擇合適的過濾器并確定實際生產(chǎn)中的過濾參數(shù)，并在這些參數(shù)范圍內(nèi)進行微生物挑戰(zhàn)試驗。46、過濾器使用前后起泡點測試中，使用以后是用注射用水沖洗后測試好，還是直接測試好？定潤濕的介質(zhì)。47還是必須兩種都作？標準進行。48、如何補救吐溫使濾膜孔徑變大，以保證藥品的安全性？根據(jù)產(chǎn)品特性選擇合適的過濾材質(zhì)并進行無菌過濾驗證。494－5定是否可以進入下道工序。終方行，如中間產(chǎn)品的檢驗結(jié)果不合格，則產(chǎn)品不能放行。50、生產(chǎn)環(huán)境的控制（1）應在所用操作開始前完成？（2）沉降碟需要暴露多長時間？（3）在講義60（4）動態(tài)沉降菌檢2-3（5）壓縮空氣的微生物檢測如何很好的進行？（1）（2）歐盟、FDA的要求是不超430GMP修訂時可能會考慮采用國際（3）微生物狀態(tài)，一般采用接觸碟或棉拭子的方法，相關的標準請參照歐盟GMP附1FDA（4）由于微生物培養(yǎng)的特點，批生產(chǎn)時2-3天的時間，一旦發(fā)生超標，需要現(xiàn)已有商品化的壓縮氣體浮游菌采樣儀。51、請問如何建立警戒限或糾偏限？有無相關的計算公式或技術要求？23為行動限度，限度設定以后，應定期回顧評價，如每年一次。52能的原因是什么？監(jiān)測結(jié)果作出綜合的分析判斷。53的重點，方法和標準需要根據(jù)自己產(chǎn)品的工藝特點確定。54下的局百，是指在凍干過程中嗎？答：局部保護就是在軋蓋機的正上方有高效空氣過濾器，提供單向流保護，這里所說的萬級實際是歐盟無菌藥品附錄中的C級。98GMP產(chǎn)品。55、凍干機的濕熱滅菌怎么進行？臭氧或甲醛熏蒸不行嗎？56（98版批號如何確定？98GM5條第3）劑以同一批藥液使用同一臺凍干設備在同一生產(chǎn)周期內(nèi)生產(chǎn)的均質(zhì)產(chǎn)品為一的生產(chǎn)批號。57QC測定？所用方法與檢測設備？線和離線（實驗室）OrbispherePBI－Dansensor和離線的型號。58好？品特性，應通過試驗比較、確定。59法有隱患嗎（與環(huán)氧乙烷消毒比較）？答：新潔爾滅對空間消毒是無效的，而且殘留固體微粒，并不可取。生產(chǎn)空（福爾馬林兩種方法的效果取決于空氣中活性成分的濃度和存留的時間。60藝驗證資料，若考察后可以終端滅菌，是否需更改工藝？八月十日國食藥監(jiān)辦[2007]504工作的通知”的要求。61應的驗證？制。62、現(xiàn)有的大部分小容量注射劑的滅菌工藝的F0值均不能達到8，對此中心有何措施或規(guī)定？答：國食藥監(jiān)[2008]71：化學藥品注射劑基本技術要求（試行F08的小容量注射劑提出了相應的技術要求，可參照執(zhí)行。63（瓶凍）CDE對這類工藝變更的審評要求？4CDE對這類工藝變更的審評與其他變更申請對無菌產(chǎn)品還應關注無菌保證水平不能降低。64階段對滅菌工藝的驗證的要求是否不同？報臨床階段不需進行滅菌工藝驗證，但需進行滅菌工藝研究，并在GMP要求進行滅菌工藝驗證，提交相應的驗證資料。65、如整個生產(chǎn)系統(tǒng)的無菌驗證已通過GMP答：生產(chǎn)系統(tǒng)的GMP668號資料重新附上，還是可以單獨報驗證資料？8號資料的工藝研究內(nèi)容可以不以及工藝驗證資料，包括生