血清成分分析教學(xué)提綱

血清成分分析實驗數(shù)據(jù)編號01234吸光度值00.1770.4050.6040.745對照家雞血清對照烏雞血清吸光度值00.03700.053實驗結(jié)果

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0019x

家雞的血清總膽固醇含量：19.47mg/100ml

烏雞的血清總膽固醇含量：27.89mg/ml

查資料得：雞的血清膽固醇含量在51—196mg/100ml之間是在可信范圍。分析與討論

實驗所得的數(shù)據(jù)偏低，可能的原因：1.試管未干燥，沾有較多的水分，使得標(biāo)準(zhǔn)膽固醇應(yīng)用液被稀釋，濃度偏低。2.此次所用的血清本身膽固醇含量比一般的個體偏低。3.取血清的過程中，有些殘留在試管壁上。血清清蛋白與γ-球蛋白的鹽析、透析與濃縮↗上清液（主要是清蛋白）→離心→血清離心取沉淀↘沉淀（主要是γ-球蛋白）→離心→取沉淀

將得到的樣品裝入透析袋中，置于燒杯中，用流水沖刷一小時。血清清蛋白與γ-球蛋白的鑒定（醋酸纖維素薄膜電泳法）

醋酸纖維素薄膜是用二乙酸纖維素制成的，它具有均一的泡沫樣的結(jié)構(gòu)，厚度僅為120μm，有強(qiáng)滲透性，對分子移動無阻力。浸泡→點樣→電泳→染色→漂洗實驗結(jié)果（家雞血清電泳圖譜）分析與討論

查資料得：電泳圖譜中，清蛋白與點樣線的距離比γ—球蛋白遠(yuǎn)。

1.條帶的顏色較深，是因為漂洗不夠徹底。

2.全血清條帶有多條重疊，是因為血清中有多種蛋白。

3.血清清蛋白條帶出現(xiàn)兩條線，可能是因為鹽析時，γ—球蛋白中摻有其它蛋白。谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的鑒定

觀察肝臟中谷丙轉(zhuǎn)氨酶所催化的氨基移換反應(yīng)。通過紙層析法檢查底物谷氨酸的減少和產(chǎn)物丙氨酸的生成。實驗結(jié)果（家雞肝臟）分析與討論

酶液處有兩個條帶，離圓心較近的為谷氨酸，較遠(yuǎn)的為丙氨酸，而且與另一端的谷氨酸相比，量較少。煮沸的酶液只有一個條帶，是因為谷丙轉(zhuǎn)氨酶已失活，無法將谷氨酸轉(zhuǎn)換為丙氨酸。條帶附近還是有淺色的痕跡，可能是因為點樣時，不小心碰到了別處。血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力單位測定

本實驗用丙氨酸和α-酮戊二酸為底物，經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用生成谷氨酸和丙酮酸。丙酮酸與2，4-二硝基苯肼作用生成2，4-二硝基苯腙，此物質(zhì)堿性條件下呈棕紅色，其顏色的深淺與丙酮酸的含量成正比，可用比色法進(jìn)行定量測定。通過與標(biāo)準(zhǔn)溶液的比較，即可計算出酶的活力單位數(shù)。實驗數(shù)據(jù)012345吸光度值00.4250.6510.6220.7170.866家雞對照管烏雞對照管吸光度值0.01900.0300實驗結(jié)果

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0019x

家雞的GPT活力單位數(shù)：10

烏雞的GPT活力單位數(shù)：30

分析與討論

查資料知道實驗所得的數(shù)據(jù)偏低，

可能的原因：1.試管未干燥，導(dǎo)致待測液濃度降低。2.靜置前，未將待測液充分搖勻，導(dǎo)致待測