人體解剖生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基本操作-1016概述

人體解剖生理學(xué)試驗(yàn)基本操作常用的試驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物的捉持動(dòng)物的秤重試驗(yàn)動(dòng)物分組及編號(hào)的標(biāo)記方法動(dòng)物的麻醉試驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法試驗(yàn)動(dòng)物的取血方法試驗(yàn)動(dòng)物的處死方法常用的試驗(yàn)動(dòng)物小鼠在哺乳類(lèi)試驗(yàn)動(dòng)物中，由于小鼠體小，飼養(yǎng)管理便利，易于限制，生產(chǎn)繁殖快，探討最深，有明確的質(zhì)量限制標(biāo)準(zhǔn)，已擁有大量的近交系、突變系和封閉群，因此在各種試驗(yàn)探討中，用量最大，用途最多。常用的試驗(yàn)動(dòng)物大鼠白化型大鼠在生物醫(yī)學(xué)探討中占據(jù)著重要的地位，常用的大鼠近交品系有十幾個(gè)如ACI、BVF、F344、PA、M520、WAB、WAC、WKA、SD、RF等品系。常用的非近交的純種大鼠有7種，其中以Wistar大鼠用得最多，我國(guó)醫(yī)藥探討中應(yīng)用也比較廣泛。此種大鼠白色，相當(dāng)于小鼠的瑞士（Swiss）種。常用的試驗(yàn)動(dòng)物豚鼠豚鼠對(duì)某些藥物極為敏感，因此它是探討這些藥物的“特地動(dòng)物”。例如豚鼠對(duì)組織胺極敏感，所以很適合作平喘藥和抗組織胺藥的探討；豚鼠對(duì)人型結(jié)核桿菌具有高度的敏感性，因此常用作抗結(jié)核病藥物的藥理學(xué)探討。

常用的試驗(yàn)動(dòng)物家兔家兔體小力弱、膽小怕驚、怕熱、怕潮，寵愛(ài)安靜、清潔、干燥、涼快的環(huán)境，不能忍受污穢的條件。家兔對(duì)體溫變更特殊靈敏。最易產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)，而且發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定。小鼠、大鼠和豚鼠恒溫機(jī)能差。對(duì)發(fā)熱刺激的反應(yīng)低。有時(shí)熱原性物質(zhì)的刺激時(shí)。體溫反應(yīng)下降。

常用的試驗(yàn)動(dòng)物犬犬在各個(gè)方面的探討，如心血管外科、腦外廣泛用于試驗(yàn)外科科、斷肢再植、器官或組織移植等中都比較常用。犬是目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)探討和教學(xué)中最常用的動(dòng)物之一，尤其在生理、藥理、病理生理等試驗(yàn)探討中起著重要作用。動(dòng)物的麻醉?yè)]發(fā)性麻醉藥乙醚乙醚麻醉的優(yōu)點(diǎn)：深度易于駕馭，比較平安，麻醉后復(fù)原比較快。缺點(diǎn)：須要專(zhuān)人管理，麻醉初期出現(xiàn)猛烈的興奮現(xiàn)象，對(duì)呼吸道有較強(qiáng)的刺激性，需在麻醉前給確定量的嗎啡和阿托品（基礎(chǔ)麻醉）。非揮發(fā)性麻醉藥苯巴比妥鈉戊巴比妥鈉氨基甲酸乙酯水合氯醛試驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法皮下注射皮內(nèi)注射腹腔注射肌肉注射靜脈注射灌胃給藥法試驗(yàn)動(dòng)物的取血方法尾靜脈眼眶動(dòng)脈和靜脈后眼眶靜脈叢連續(xù)穿刺斷頭心臟頸靜脈耳緣靜脈大/小鼠解剖血液凝固【試驗(yàn)?zāi)康摹勘驹囼?yàn)接受兔頸總動(dòng)脈放血，通過(guò)測(cè)定各種條件下的血液凝固時(shí)間，了解影響血液凝固的一些因素?！驹囼?yàn)原理】血液凝固可分為內(nèi)源性凝血系統(tǒng)和外源性凝血系統(tǒng)。內(nèi)源性凝血系統(tǒng)是指參與凝血過(guò)程的因子全部存在于血漿中，外源性凝血系統(tǒng)是指在組織因子參與的凝血過(guò)程?！驹囼?yàn)材料】家兔兔手術(shù)臺(tái)、哺乳動(dòng)物手術(shù)器、動(dòng)脈夾、細(xì)塑料管、20毫升注射器、25%烏拉坦、試管8支、小燒杯2個(gè)，竹簽1支、冰塊、棉花，石蠟、肝素、草酸鉀、生理鹽水、肺組織浸液。【試驗(yàn)方法】1、用烏拉坦將兔麻醉，仰臥固定于兔手術(shù)臺(tái)上，分別一側(cè)頸總動(dòng)脈，上端用線結(jié)扎阻斷血液，下端夾上動(dòng)脈夾，在動(dòng)脈當(dāng)中剪一小口，插入細(xì)塑料管，結(jié)扎插管備取備用。2、將下列試管準(zhǔn)備好試驗(yàn)用品后，每管加入血液2毫升。試管1內(nèi)放少許棉花；試管2用石蠟油潤(rùn)滑整個(gè)內(nèi)表面試管3不加任何處理試管4置于有冰塊的小燒杯中試管5內(nèi)加肝素8單位試管6內(nèi)加草酸鉀1-2毫克將多余的血盛于小燒杯中，不斷用竹簽攪動(dòng)直至纖維蛋白形成3、記錄凝血時(shí)間：每個(gè)試管加血2毫升后，即可起先計(jì)時(shí)，每隔15秒，將試管傾斜一次，視察血液是否凝固。至血液成為凝膠狀不再流淌為止，幾下所經(jīng)時(shí)間即凝血時(shí)。另一燒杯內(nèi)加入血液后立刻用竹簽攪動(dòng)，去除纖維蛋白。5、6號(hào)試管，加入血液后，用拇指蓋住試管口將管顛倒兩次。將結(jié)果及在各條件下的凝血時(shí)間按表1填寫(xiě)，并進(jìn)行說(shuō)明

表1各條件下凝血時(shí)間實(shí)驗(yàn)儀器編號(hào)實(shí)驗(yàn)條件結(jié)果及凝血時(shí)間解釋試管（放血2毫升）12粗糙面的影響預(yù)先在試管內(nèi)放入少許棉花預(yù)先用石蠟油潤(rùn)滑整個(gè)使館內(nèi)表面34溫度的影響預(yù)先置于室溫中試管置有冰塊的小燒杯中56試管內(nèi)先加肝素8單位試管里先加草酸鉀1-2毫克小燒杯（放血10毫升）放血于燒杯時(shí)用竹簽不斷攪動(dòng)，約2-3分鐘后取出竹簽，用水洗凈竹簽上的血液，觀察纖維蛋白，燒杯內(nèi)為去除纖維蛋白血，觀察其是否會(huì)發(fā)生凝血。血紅蛋白含量的測(cè)定【試驗(yàn)?zāi)康摹狂{馭比色法測(cè)定血紅蛋白含量的方法?！驹囼?yàn)原理】測(cè)定血紅蛋白含量的方法很多，試驗(yàn)常用比色法。其原理是在確定量的血液中，血紅蛋白經(jīng)少量鹽酸的作用，使亞鐵血紅素變成高鐵血紅素，呈現(xiàn)較穩(wěn)定的棕色。用水稀釋后與標(biāo)準(zhǔn)色比較，求出每100ml血液中所含的血紅蛋白克數(shù)。正常成年男子每100ml血液平均含14.4g，女子為13.1?！驹囼?yàn)材料】兔血，沙利氏血紅蛋白計(jì)一套，采血針，玻璃棒，滴管，75%酒精，95%酒精，棉球，蒸餾水，乙醚，0.1N鹽酸【試驗(yàn)方法】1．血紅蛋白計(jì)包括①標(biāo)準(zhǔn)比色架，架的兩側(cè)鑲有兩個(gè)棕色標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱。②血紅蛋白稀釋管，有方形也有圓形的。兩側(cè)有刻度，一側(cè)以g為計(jì)數(shù)單位，對(duì)側(cè)以百分率計(jì)。2．用滴管加0.1mol/LHCl于血紅蛋白稀釋管內(nèi)，到刻度10處。3．用血紅蛋白吸管的尖端吸上個(gè)試驗(yàn)中燒杯中的血，吸血至刻度20mm3處（0.02ml）。4．用濾紙片或棉球擦凈吸管口四周的血液，將吸管插入血紅蛋白稀釋管的鹽酸內(nèi)，輕輕吹出血液至管底部，反復(fù)吸入并吹出稀釋管內(nèi)上層的鹽酸，洗滌吸管多次，使吸管內(nèi)的血液完全洗入稀釋管內(nèi)。搖勻或用小玻璃棒攪勻后，放置10min，使鹽酸與血紅蛋白充分作用。5．把稀釋管插入標(biāo)準(zhǔn)比色架兩色柱中心的空格中，使無(wú)刻度的兩側(cè)面位于空格的前后方，便于透光和比色。6．用滴管向稀釋管內(nèi)逐滴加入蒸餾水（每加一滴要攪拌），邊滴邊視察顏色，直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃色柱相同為止。稀釋管上液面的刻度讀數(shù)即為每100ml血液血紅蛋白的克數(shù)。家兔動(dòng)脈血壓的神經(jīng)、體液調(diào)整【試驗(yàn)?zāi)康摹?．駕馭測(cè)定動(dòng)脈血壓干脆法及動(dòng)脈插管方法。2．了解溫血?jiǎng)游锏穆樽怼⒐潭笆中g(shù)方法。3．視察心血管活動(dòng)的某些影響因素?！驹囼?yàn)原理】心臟受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)支配。心交感神經(jīng)興奮，對(duì)心臟產(chǎn)生正性變時(shí)、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量增加。心迷走神經(jīng)興奮，對(duì)心臟產(chǎn)生負(fù)性變時(shí)、變力、變傳導(dǎo)作用，從而使心輸出量削減。支配血管的植物神經(jīng)主要是交感縮血管神經(jīng)，其興奮時(shí)主要引起縮血管效應(yīng)，外周阻力增加。中樞通過(guò)反射活動(dòng)調(diào)整心血管的活動(dòng)，變更心輸出量及外周阻力，從而調(diào)整動(dòng)脈血壓。心血管活動(dòng)尚受體液因素的調(diào)整。其中主要有腎上腺素和去甲腎上腺素。本試驗(yàn)是以動(dòng)脈血壓為指標(biāo)，在整體條件下，施加某些因素，視察神經(jīng)、體液因素對(duì)心、血管的調(diào)整作用?！驹囼?yàn)材料】家兔多道生理記錄儀、血壓換能器、動(dòng)脈插管、三通管。兔手術(shù)臺(tái)、哺乳類(lèi)手術(shù)器破、注射器、有色絲線、紗布、棉花。25％氨基甲酸乙酯、1％肝素。生理鹽水、l／萬(wàn)去甲腎上腺素。【試驗(yàn)方法】1.麻醉和動(dòng)物固定：兔稱(chēng)重后，按1g／kg體重的劑量由兔耳緣靜脈緩慢注入25％氨基甲酸乙酯溶液將動(dòng)物麻醉。注射過(guò)程中留意視察動(dòng)物的肌張力、呼吸頻率及角膜反射的變更，防止麻醉過(guò)深。麻醉好的動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上，留意頸部必需放正拉直。2.分別頸部血管和神經(jīng)：用彎剪刀剪去頸部的毛，作長(zhǎng)5—7厘米的正中切口，鈍性分別皮下組織和肌肉，即可見(jiàn)到氣管，將氣管兩旁的肌肉拉開(kāi)，便可在氣管兩側(cè)的深部找到頸動(dòng)脈鞘，內(nèi)有頸總動(dòng)脈、迷走神經(jīng)、減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)。細(xì)致辨別并當(dāng)心分別，在左側(cè)減壓神經(jīng)和交感神經(jīng)下穿不同顏色濕絲線備用．然后分別雙側(cè)的迷走神經(jīng)和頸總動(dòng)脈，穿線備用。3.動(dòng)脈插管：分別右側(cè)頸總動(dòng)脈3厘米左右，近心端用動(dòng)脈夾夾閉，遠(yuǎn)心端用線結(jié)扎．耳緣靜脈注入肝素1ml，然后在結(jié)扎的近端剪一斜口，向心臟方向插入動(dòng)脈插管，用線將插管與動(dòng)脈扎緊，防止滑脫。放開(kāi)動(dòng)脈夾，記錄動(dòng)脈血壓。視察項(xiàng)目1、視察正常血壓曲線。2、用動(dòng)脈夾夾閉左側(cè)頸總動(dòng)脈5—10秒，視察血壓變更。3、刺激減壓神經(jīng)：以中等強(qiáng)度，頻率為10-15次/秒，波寬2毫米的連續(xù)電脈沖。刺激一次減壓神經(jīng)，視察血壓有何變更？然后用兩根絲線在該神經(jīng)中部?jī)商幗釉?，并在兩結(jié)扎間將神經(jīng)切斷，分別刺激切斷后的神經(jīng)中樞端和外周端，視察對(duì)血壓影響有何不同？4、刺激迷走神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷雙側(cè)迷走神經(jīng)，視察血壓變更．刺激右側(cè)外周端，視察血壓變更。5、靜脈注射去甲腎上腺素：由耳緣靜脈注入1／萬(wàn)去甲腎上腺素0.3ml，視察血壓變更。6、刺激交感神經(jīng)：結(jié)扎并剪斷左側(cè)交感神經(jīng)，視察左側(cè)耳都血管的變更，然后用中等強(qiáng)度電流連續(xù)刺激其頭端，視察左側(cè)耳部血管變更。尿生成的影響因素【試驗(yàn)?zāi)康摹?．學(xué)習(xí)輸尿管插管技術(shù)。2．視察影響尿量的幾種因素?！驹囼?yàn)原理】尿的生成過(guò)程包括：腎小球的過(guò)濾作用；腎小管與集合管的重吸取作用；腎小管與集合管的分泌作用。在整體內(nèi)，這3個(gè)過(guò)程往往受到生理性的調(diào)整。凡影響這些過(guò)程的因素，都可影響尿的生成而引起尿量的變更?！驹囼?yàn)材料】家兔、手術(shù)臺(tái)、常用手術(shù)器械、或細(xì)塑料管、、刻度試管、2ml及20ml注射器、25%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、生理鹽水、垂體后葉素（5單位/ml）【試驗(yàn)方法】1.麻醉：家兔一只，用25%氨基甲酸乙酯（1g/kg）耳緣靜脈注射，麻醉后，仰位固定于手術(shù)臺(tái)上。2.插管：導(dǎo)尿管干脆由試驗(yàn)動(dòng)物的尿道插入，試驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)選擇雄性，插導(dǎo)尿管時(shí)用液體石蠟浸潤(rùn)后順尿道輕輕插入膀胱。插管是若遇阻力，不行強(qiáng)插，應(yīng)拔出重插。依次進(jìn)行下列項(xiàng)目試驗(yàn)。留意：每項(xiàng)試驗(yàn)前都要記錄尿量作為比照。試驗(yàn)視察待尿流量穩(wěn)定后，即可進(jìn)行下列各項(xiàng)試驗(yàn)視察。每項(xiàng)試驗(yàn)起先時(shí)，都應(yīng)先記錄一段尿量曲線作為比照；然后進(jìn)行注射或刺激，并連續(xù)記錄和視察至效應(yīng)明顯和復(fù)原過(guò)程。（組間比照、自身前后比照）（1）自耳緣靜脈注射的生理鹽水20ml，視察尿量的變更。（2）自耳緣靜脈注射20%葡萄糖液15ml，視察其變更。（3）自耳緣靜脈注射垂體后葉素0.2ml，視察和記錄其變更20min。(4)自耳緣靜脈注射呋塞米0.2ml，視察和記錄其變更20min。結(jié)果：記錄兔尿量并視察其變更。小白鼠破壞小腦引起的共濟(jì)失調(diào)【試驗(yàn)?zāi)康摹恳粋?cè)小腦損傷后的動(dòng)物，軀體運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)異樣，通過(guò)對(duì)異樣運(yùn)動(dòng)的視察，了解小腦的機(jī)能?！驹囼?yàn)原理】小腦具有維持身體平衡，調(diào)整肌驚惶和協(xié)調(diào)肌肉運(yùn)動(dòng)等機(jī)能。當(dāng)小腦損傷后，隨著破壞程度的不同，可表現(xiàn)出不同程度的肌驚惶失調(diào)及平衡失調(diào)。絨球小結(jié)葉——古小腦——前庭小腦——調(diào)整肌驚惶，維持身體平衡小腦前葉——舊小腦——脊髓小腦——限制肌肉的張力和協(xié)調(diào)小腦后葉——新小腦——大腦小腦——影響運(yùn)動(dòng)的起始、支配和協(xié)調(diào)，包括確定運(yùn)動(dòng)的力氣、方向和范圍【試驗(yàn)材料】小白鼠4只、探針?！驹囼?yàn)方法】1.視察正常小鼠的活動(dòng)狀況。2.用探針破壞某一側(cè)小腦，切勿損傷中腦，然后快速取出探針。3.放開(kāi)縛線視察小白鼠的活動(dòng)狀