豬流行性腹瀉傳染性胃腸炎和輪狀病毒病防治技術(shù)

豬流行性腹瀉、傳染性胃腸炎和輪狀病毒病的防治技術(shù)豬流行性腹瀉(PED)、豬傳染性胃腸炎(TGE)和豬輪狀病毒病是我國豬群中危害最嚴(yán)重.的三種病毒性腹瀉病，發(fā)病后沒有有效的治療辦法，目前唯一的手段是用疫苗進(jìn)行預(yù)防接種。作者經(jīng)過多年的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)和臨床實(shí)踐，積累了防治的若干經(jīng)驗(yàn)，本文試圖從理論和實(shí)踐上對(duì)PED、TGE和豬輪狀病毒病三種疾病及其防制進(jìn)行初步的論述。1、 病原豬流行性腹瀉病毒(PEDV)和豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)都是冠狀病毒，呈多形的球形，外有像倒釘樣的纖突，直徑在60?190nm;在低溫下可以長期存活，糞便中的病毒在20°C干燥、腐敗狀況下10天內(nèi)死亡，在37C4天全部死亡。病毒對(duì)光很敏感。可被福爾馬林、氫氧化鈉、含氯或碘的消毒劑、季胺鹽類化合物等滅活。輪狀病毒病是一種人畜共患病，輪狀病毒(RV)呈車輪狀外觀，直徑在70nm左右。RV在環(huán)境中相當(dāng)穩(wěn)定，對(duì)溫度、pH、化學(xué)物質(zhì)和常用消毒劑有耐受性。在pH3?9時(shí)都穩(wěn)定，糞便中的RV在60C時(shí)可耐受30分鐘，在18C?20C時(shí)可耐受7?9個(gè)月。2、 發(fā)病機(jī)理經(jīng)人工發(fā)病試驗(yàn)，豬口服PEDV和TGEV后，潛伏期一般為20小時(shí)至3天。在實(shí)驗(yàn)室，新生仔豬最早有接種8小時(shí)后就開始發(fā)病的，病毒在小腸絨毛上皮細(xì)胞內(nèi)繁殖，在16?30小時(shí)達(dá)到最大量。由于病毒的侵襲，小腸上皮細(xì)胞變性、絨毛脫落，導(dǎo)致小腸內(nèi)酶活性明顯下降，擾亂了消化及細(xì)胞運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)和電解質(zhì)，引起急性吸收不良。對(duì)哺乳仔豬而言，就不能消化乳中的乳糖和蛋白質(zhì)，使腸內(nèi)產(chǎn)生高滲，液體在腸內(nèi)滯留，甚至從組織內(nèi)吸收液體，進(jìn)而導(dǎo)致腹瀉和脫水，酸中毒而死亡。新生仔豬接種RV后，也產(chǎn)生上述的情況，但14日齡以上的豬人工攻毒一般不會(huì)發(fā)病。3、流行病學(xué)3.1豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎PED和TGE有嚴(yán)格的季節(jié)性。主要在11月至下年4月間.尤其在農(nóng)歷春節(jié)前后是發(fā)病的高峰期;氣溫超過20°C一般不會(huì)流行，但也有在氣溫25C或更高時(shí)發(fā)生的情況。近年來，也有在夏季發(fā)生的病例。PED和TGE的暴發(fā)常常是在買進(jìn)豬只后的3?5天。病毒傳人的途徑可能是運(yùn)輸?shù)目ㄜ?、工具、衣服、鞋子等。狗、貓、飛鳥和老鼠的糞便也可以傳播該病毒。一個(gè)豬場(chǎng)第1次暴發(fā)PED或TGE時(shí)，幾乎沒有一頭豬可以幸免的，待發(fā)過病的母豬逐步淘汰，從未發(fā)過病的新母豬替代老母豬時(shí)，可能會(huì)有新一輪的暴發(fā)。這樣，這個(gè)豬場(chǎng)可以周而復(fù)始，延綿不斷地發(fā)生。有的豬場(chǎng)當(dāng)年發(fā)過病后，下半年由于發(fā)過病的肉豬已基本出售而沒有發(fā)過病的新苗豬一批批從外面購進(jìn)來，這些豬場(chǎng)可能年年會(huì)發(fā)生豬流行性腹瀉或豬傳染性胃腸炎，但病情比第1次大暴發(fā)時(shí)會(huì)輕些。對(duì)本病持續(xù)存在最令人信服的解釋是它以地方流行性方式存在于肥育豬和不斷有仔豬出生的豬場(chǎng)中，在溫暖的季節(jié)成為隱性感染，冬春季則傳播病毒。發(fā)病時(shí)，一般肥育豬首先出現(xiàn)，臨床癥狀，很快蔓延到斷奶豬、妊娠母豬、產(chǎn)仔母豬和哺乳仔豬。3.2豬輪狀病毒病無論何處，只要養(yǎng)豬，豬群中就會(huì)有輪狀病毒。在常規(guī)飼養(yǎng)條件下要使豬場(chǎng)沒有輪狀病毒是非常困難的。病毒經(jīng)糞/口途徑在豬群中傳播。病毒經(jīng)糞便排出，急性期排毒量最大。但成年豬一般不排毒。不潔的環(huán)境對(duì)輪狀病毒在豬群中存留起重要作用。病毒可在干燥的糞便、灰塵、產(chǎn)仔區(qū)的污水和斷奶舍中被檢出。在已清空的豬舍內(nèi)可存活3個(gè)月。4、臨床癥狀4.1豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎在抗原上它們是完全不同的疾病，臨床上PED和TGE很難區(qū)別，僅僅是TGE的臨床癥狀比PED還要重些。發(fā)病開始時(shí)厭食，以后腹瀉，并且以水樣的噴射狀腹瀉為特征，豬舍四周墻上和地面沾滿了水糞，有一股特別的臭味。體溫一般不升高。用任何藥品治療都無效。大豬一般7?10天自行康復(fù)，但抵抗力弱的豬、尤其有并發(fā)癥時(shí)會(huì)死亡，新生仔豬由于嚴(yán)重脫水，加上母豬發(fā)病時(shí)無奶，死亡率可達(dá)100%。10日齡以上仔豬死亡率較低?？偟囊?guī)律是豬只的日齡越小，越易死亡。病豬除腹瀉外，往往嘔吐，特別在吃奶后很快出現(xiàn)。有的母豬流產(chǎn)，有時(shí)流產(chǎn)率達(dá)25%。4.2豬輪狀病毒病是仔豬的一種疾病，在自然情況下，7日齡以下的新生仔豬很少發(fā)生，一般發(fā)生在13?39日齡的仔豬，平均20日齡，初產(chǎn)母豬產(chǎn)的仔豬較易感染病毒。潛伏期12?24小時(shí)，開始出現(xiàn)厭食、不安、偶爾有嘔吐。嚴(yán)重的在1?4小時(shí)后發(fā)生水樣腹瀉，糞便呈黃色到白色，含絮狀物。腹瀉可持續(xù)3?5天，在腹瀉2?5天后可能有死亡。隨著年齡的增大死亡率降低，14日齡以上的豬很少死亡。5、 病理解剖解剖這三種病毒性腹瀉的病豬，病變常局限在胃腸道。胃內(nèi)充滿凝乳塊，胃黏膜充血。小腸內(nèi)充滿黃色液體，并含有未消化的凝乳塊，腸壁變薄呈半透明。在普通顯微鏡下可以見到絨毛萎縮，腸淋巴結(jié)水腫，其他臟器看不到病變。但TGE可能在肺部有炎性反應(yīng)。6、 診斷引起豬腹瀉和嘔吐的疾病很多。如大腸桿菌病、沙門氏菌病、偽狂犬病、梭菌病、豬痢疾、血凝腦脊髓炎、豬瘟、球蟲病等，需仔細(xì)鑒別。根據(jù)流行病學(xué)，發(fā)病季節(jié).水瀉。嘔吐。所有豬發(fā)病，大豬一般不死，日齡越小死亡率越高.病變主要在腸道，傳播迅速，治療無效等基本上可以確定為病毒性疾病。7日齡以下不發(fā)病在13?39日齡發(fā)病的仔豬一般為輪狀病毒病，7日齡以內(nèi)發(fā)病死亡的往往是TGE或PED。下面的輔助方法可幫助診斷：絨毛萎縮：在普通顯微鏡下觀察，絨毛縮短，這是特征性的病變。糞便酸性：細(xì)菌性腹瀉的糞便一般為堿性，病毒性腹瀉的糞便呈酸性：可用pH試紙測(cè)一下。最終的診斷還要靠實(shí)驗(yàn)室檢查。送檢發(fā)病未死乳豬的小腸，用熒光抗體技術(shù)可在2小時(shí)內(nèi)得出明確診斷。7、免疫7.1免疫機(jī)理在免疫學(xué)中起主要作用的免疫球蛋白（1gS）是IgG和IgA。IgG也叫循環(huán)抗體，它的主要作用是用來抵御全身感染，而IgA主要用來抵御黏膜感染。IgG的分子量較大，不容易穿過腸壁進(jìn)入腸腔，它們對(duì)胃酸和消化酶的抵抗力較差。IgA也叫分泌抗體，分子量較小，它們?cè)陴つっ庖咧衅鹬饕饔?，可以抵御胃酸和消化酶的消化，并且與腸黏膜有親和作用所以IgA在腸道中起重要的作用。PED、TGE和豬輪狀病毒病都是腸道病，都是通過消化道感染的。它們的靶細(xì)胞都是腸絨毛上皮細(xì)胞，引起腸絨毛的萎縮脫落，是導(dǎo)致動(dòng)物消化泛反亂、酸中毒和脫水的原因。在預(yù)防上，如果在腸腔內(nèi)經(jīng)常有抗體存在，就可以不斷地中和豬體攝人的病毒，從而起到保護(hù)作用。豬出生時(shí)體內(nèi)無免疫球蛋白，出生后通過初乳獲得免疫抗體。初乳中IgS主要是IgG，也有多量的IgA，新生仔豬吮吸初乳后通過腸上皮進(jìn)入循環(huán)，這樣為新生仔豬提供了像母豬那樣的血清抗體，這些體液抗體的功能主要是抵抗全身感染而非腸內(nèi)感染。所以，在仔豬哺乳期，進(jìn)入消化道的病毒是通過與母乳中的抗體在腸道中不斷中和而起主要保護(hù)作用的.而原先進(jìn)入體內(nèi)循環(huán)的抗體再通過腸腔與進(jìn)入消化道內(nèi)的病毒起作用就次要了，這種免疫機(jī)理就是被動(dòng)免疫，也稱為乳汁免疫。在主動(dòng)免疫中，當(dāng)豬體自然感染PEDV、TGE\和RV時(shí)，主要是腸黏膜的局部免疫，病毒對(duì)腸腔的刺激既可產(chǎn)生IgG，也可產(chǎn)生IgA，這是體液免疫，同時(shí)可產(chǎn)生細(xì)胞免疫。腸上皮細(xì)胞形成的IgA分泌片可有效地將IgA從黏膜固有層轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入腸腔。這就解釋了在自然發(fā)病后活下來的豬中，PED、TGE和豬輪狀病毒病的保護(hù)率很高，極少第2次發(fā)病。7.2疫苗在實(shí)驗(yàn)室中，用PEDV、TGEV和RV的強(qiáng)毒通過肌肉、靜脈、皮下、皮內(nèi)、氣管和腹腔等非口途徑攻擊敏感豬，經(jīng)多天的臨床觀察，未見動(dòng)物有腹瀉和嘔吐的臨床癥狀，再采集小腸進(jìn)行免疫熒光檢查也未證實(shí)在小腸絨毛上皮細(xì)胞的胞漿中有病毒存在而用PEDV、TGEV和RV的強(qiáng)毒通過口服時(shí)都能使陰性豬發(fā)病產(chǎn)生典型的臨床癥狀，用免疫熒光檢查也能證實(shí)小腸絨毛上皮細(xì)胞的胞漿中有病毒存在。這就從理論上啟示我們，PED、TGE和豬輪狀病毒病的最理想免疫途徑應(yīng)該是口服活毒，而這些活病毒應(yīng)該是既不能引起豬發(fā)病，又要有一定的毒力，使病毒進(jìn)入腸固有層以有足夠的刺激產(chǎn)生IgG和IgA;如果毒力太弱病毒進(jìn)入腸道不能增殖或有限增殖，對(duì)腸表層下IgA漿細(xì)胞的抗原刺激不足，相應(yīng)地IgA產(chǎn)生極少。但研制這恰到好處的中毒有一定的難度，同時(shí)口服的免疫方法的可操作性也不強(qiáng)行報(bào)道曾試用低代次細(xì)胞培養(yǎng)TGE強(qiáng)毒誘導(dǎo)被動(dòng)免疫，但結(jié)果表明口/鼻內(nèi)感染的母豬血清學(xué)轉(zhuǎn)化和仔豬的保護(hù)率不規(guī)律。如果母豬妊娠期間把TGE弱毒一次注射到腸腔。對(duì)其所產(chǎn)仔豬用強(qiáng)毒口服，結(jié)果保護(hù)性很差。然而在母豬妊娠期間連續(xù)腸內(nèi)注射弱毒，其仔豬攻毒后有較好的保護(hù)力，這提示了口服免疫需要多次才行。有報(bào)道(美國《豬病學(xué)》第八版)，各種不同的TGE試驗(yàn)疫苗和兩種商品疫苗給產(chǎn)前母豬注射，其結(jié)果是母豬所產(chǎn)仔豬的發(fā)病率和死亡率都有小幅度的下降，很不理想，原因可能是病毒通過注射進(jìn)入體內(nèi)后不能在體內(nèi)，尤其在腸黏膜的靶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制繁殖.病毒很快被機(jī)體消滅，不能持續(xù)地刺激機(jī)體，抗體效價(jià)就不高。鑒于PEDV、TGEV和RV以上的免疫特性，我們研制了豬流行性腹瀉、豬傳染性胃腸炎和豬輪狀病毒三聯(lián)滅活疫苗。這三種病毒分別在三種敏感的細(xì)胞上繁殖，其病毒效價(jià)(TCID50)均大于1075每毫升。以獸用白油為佐劑W/O/W的雙向苗。經(jīng)交巢穴注射后，病毒抗原在體內(nèi)緩慢釋放，可持續(xù)地刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，由于該疫苗是水包油包水，相對(duì)單純的油包水疫苗產(chǎn)生有效免疫的時(shí)間短些。實(shí)驗(yàn)室免疫試驗(yàn)表明，免疫母豬后其仔豬的被動(dòng)保護(hù)率在95%以上，肉豬的主動(dòng)免疫保護(hù)率在90%左右;大規(guī)模生產(chǎn)試用，免疫母豬后其仔豬的被動(dòng)保護(hù)率在85%?95%，肉豬的主動(dòng)免疫保護(hù)率在70%?90%。7.3三聯(lián)滅活疫苗的免疫途徑肌肉注射基于PED、TGE和豬輪狀病毒病亡述的免疫機(jī)理，肌肉注射有如下缺點(diǎn)。接種豬主要產(chǎn)生全身免疫，很少或不產(chǎn)生腸道免疫，當(dāng)感染PEDV、TGEV和RV時(shí)保護(hù)率很低。如果是母豬，因乳汁內(nèi)主要是IgG，而IgA的滴度很低，不能給乳豬提供理想的被動(dòng)免疫所以哺乳仔豬的保護(hù)率也不高。乳腺內(nèi)注射乳腺內(nèi)注射可以在血清和乳汁中產(chǎn)生很好的IgG和IgA滴度，并且不注射疫苗的對(duì)側(cè)和其他乳腺也同樣產(chǎn)生抗體。所以，從理想的角度考慮，疫苗應(yīng)該用乳腺途徑注射，但是乳腺注射在操作上有一定的難度，極易發(fā)生乳腺炎。交巢穴注射在尾根與肛門間凹陷中的一個(gè)穴位，此處的淋巴分布密集。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室和多年的臨床應(yīng)用說明在母豬交巢穴注射后，乳汁內(nèi)能產(chǎn)生較高的抗體。新生仔豬通過不斷的吮吸母乳，乳中的抗體能很好地中和攝入的病毒.故新生仔豬有較好的被動(dòng)保護(hù)率、所以推薦豬流行性腹瀉、豬傳染性胃腸炎和豬輪狀病毒三聯(lián)滅活疫苗交巢穴注射。肉豬的主動(dòng)免疫仔豬的交巢穴注射方法是將仔豬向下倒提.在尾根與肛門間凹陷中垂直或稍向上刺入。在肉豬后海穴注射疫苗后，也能產(chǎn)生較高的血清抗體效價(jià)，但由于血中的IgG不容易轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入腸腔，腸黏膜的免疫作用不夠堅(jiān)強(qiáng)，因此有必要對(duì)肉豬免疫2次。7.4三聯(lián)滅活疫苗的使用方法母豬在后備母豬階段必須先免疫1次，在初產(chǎn)前1個(gè)月左右時(shí)再免疫1次。以后每胎免疫1次（即1年2次免疫），免疫時(shí)間也是產(chǎn)前1個(gè)月。每次4毫升。肉豬由于各豬場(chǎng)的斷奶時(shí)間不一，可以根據(jù)豬場(chǎng)斷奶的時(shí)間安排在斷奶前免疫1次，斷奶后再免疫1次，2次免疫的時(shí)間相隔20天。初生仔豬每頭0.5毫升.5?25千克仔豬每頭1毫升，25千克以上豬每頭2毫升。其他免疫期：接種本疫苗后10?15天開始產(chǎn)生免疫力，1個(gè)月時(shí)達(dá)高峰，至少可以維持6個(gè)月。貯藏：本疫苗在4C?10°C暗處保存，有效期為1年。注意事項(xiàng)：①本疫苗避免日光直射。②當(dāng)?shù)貞?yīng)無疾病流行。體炙瘦弱、患有其他疾病，特別患有藍(lán)耳病和圓環(huán)病毒病時(shí)使用效果較差。③疫苗啟封后1次用完。使用前應(yīng)仔細(xì)檢查.如發(fā)現(xiàn)有異物、變質(zhì)等現(xiàn)象均不能使用。④注射器、針頭等用具，用前需經(jīng)煮沸消毒30分鐘。注射部位用酒精消毒。⑤早期診斷，早期隔離發(fā)病豬，及時(shí)消除傳染源，并定期進(jìn)行帶豬消毒和轉(zhuǎn)群消毒。8、防制雖然國內(nèi)外對(duì)病毒病尚無有效的治療方法，但下面的綜合防制措施如果認(rèn)真執(zhí)行了，會(huì)大幅度降低發(fā)病率和死亡率，使豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)損失減小到最低限度。8.1加強(qiáng)管理豬場(chǎng)堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，不從外面購豬。加強(qiáng)冬季的飼養(yǎng)管理;特別要注意提高飼料中能量飼料的供給，加強(qiáng)防寒保暖，提高豬群整體抵抗力;嚴(yán)格管理，制定規(guī)章制度。搞好豬舍的清潔衛(wèi)生和消毒工作，圈舍糞尿及垃圾要夭夭清除，并堅(jiān)持每半月用石灰乳消毒圈舍1次，每周用2%?5%來蘇兒消毒食具1次;豬群感染該病后，要及時(shí)將病豬隔離治療，并對(duì)豬舍用2%氫氧化鈉或5%?10%石灰乳迅速徹底消毒，有較好作用的消毒藥有氫氧化鈉、石灰水、漂白粉、百毒威、二氧化氯、福爾馬林和季胺鹽類消毒藥。8.2保溫冠狀病毒怕熱不怕冷，所以集中在冬春季發(fā)生。因此在冬春季時(shí)提高室溫，防止賊風(fēng)，局部環(huán)境加溫尤其重要。實(shí)踐證明保溫對(duì)降低仔豬發(fā)病率和