土壤中蛔蟲卵的檢查及活力測定法

土壤中蛔蟲卵的檢查及活力測定法第一頁，共二十四頁，2022年，8月28日檢驗土壤蛔蟲卵的原理，是先用堿性溶液和已經(jīng)處理過的土壤樣品充分混合，分離蛔蟲卵，繼用比重較蛔蟲卵比重大的溶液為漂浮液，使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面，從而收集檢驗之；或加入清水，因蛔蟲卵的比重大于水的比重，使蛔蟲卵沉在水底，從中吸取蛔蟲卵檢驗之。所用方法為改良飽和硝酸鈉漂浮監(jiān)察法。第二頁，共二十四頁，2022年，8月28日改良飽和硝酸鈉漂浮法(1)取回土樣，剔除菜葉、樹皮等大雜物，壓碎土樣中的大顆粒；(2)過篩先后用孔徑3mm的銅篩和孔徑為2mm的銅篩過篩，收集過篩后的土樣；(3)取2支50毫升大離心管，各放入過篩后的土樣10g，加5%氫氧化鈉溶液至40或45ml刻度線；第三頁，共二十四頁，2022年，8月28日改良飽和硝酸鈉漂浮法(4)充分混合，離心，每分鐘2,000轉(zhuǎn)，離4分鐘；(5)傾去上部的氫氧化鈉（即棄去上部堿性溶液）；(6)加入飽和硝酸鈉溶液攪拌混勻，每分鐘2000轉(zhuǎn)，離心4分鐘；(7)離心后，再加飽和硝酸鈉溶液滿至管口，覆上18mm×18mm蓋玻片；(8)靜置15min后，取下蓋玻片置于載玻片上鏡檢。第四頁，共二十四頁，2022年，8月28日第五頁，共二十四頁，2022年，8月28日受精豬蛔蟲卵大?。?0～87×40～60μm形狀：橢圓形或圓形，卵殼厚，外包有粗糙凹凸不平的蛋白膜，內(nèi)含尚未分裂呈顆粒的卵細(xì)胞。人蛔蟲卵大?。?5～75×35～50μm(平均60μm）形狀：短橢圓形或近圓形，卵殼厚，呈雙線層，其外包有一層厚而呈乳頭狀突起的蛋白膜土壤中的動物蛔蟲卵與人蛔蟲卵第六頁，共二十四頁，2022年，8月28日牛羊蛔蟲卵大小：69～95×60～77μm形狀：近球形，外有似蜂窩狀蛋白膜。人蛔蟲卵第七頁，共二十四頁，2022年，8月28日犬弓蛔蟲卵大?。?5×90μm形狀：近球形，也常有呈卵形，有粗糙凹凸不平卵殼，卵殼內(nèi)充滿黑褐色到黑色的尚未分裂，呈顆粒狀內(nèi)含物。人蛔蟲卵第八頁，共二十四頁，2022年，8月28日貓弓蛔蟲卵大?。?5×75μm形狀：同犬弓蛔蟲卵。人蛔蟲卵第九頁，共二十四頁，2022年，8月28日蛔蟲卵活力測定方法第十頁，共二十四頁，2022年，8月28日含一個卵細(xì)胞活受精蛔蟲卵，外包有乳頭狀突起的蛋白膜脫蛋白膜活受精蛔蟲卵外包蛋白膜的死受精蛔蟲卵，卵細(xì)胞移向一端脫蛋白膜的死受精蛔蟲卵，卵細(xì)胞移向一端一、直接鏡檢法（死活蛔蟲卵的形態(tài)比較）第十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日空泡化死受精蛔蟲卵外包蛋白膜死受精蛔蟲卵，卵內(nèi)脂肪變性，細(xì)胞質(zhì)形成空泡第十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日含幼蟲的活受精蛔蟲卵卵殼內(nèi)幼蟲變形的死受精蛔蟲卵第十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日人活蛔蟲卵形態(tài)

含一個卵細(xì)胞活受精蛔蟲卵，外包有乳頭狀突起的蛋白膜

脫蛋白膜活受精蛔蟲卵

含2個卵細(xì)胞活受精蛔蟲卵

含16個卵細(xì)胞活受精蛔蟲卵

第十四頁，共二十四頁，2022年，8月28日未受精蛔蟲卵外包鋸齒狀突起的蛋白膜

脫蛋白膜的未受精蛔蟲卵

含幼蟲的活受精蛔蟲卵

第十五頁，共二十四頁，2022年，8月28日死蛔蟲卵形態(tài)

外包蛋白膜的死受精蛔蟲卵，卵細(xì)胞移向一端

脫蛋白膜的死受精蛔蟲卵，卵細(xì)胞移向一端

桑椹期脫蛋白膜死蛔蟲卵

死受精蛔蟲卵，在卵細(xì)胞上部可見透明細(xì)胞質(zhì)

外包蛋白膜死受精蛔蟲卵，卵內(nèi)脂肪變性，細(xì)胞質(zhì)形成空泡

第十六頁，共二十四頁，2022年，8月28日死蛔蟲卵形態(tài)

脫蛋白膜死受精蛔蟲卵，在卵細(xì)胞上部形成空泡

卵細(xì)胞皺縮死受精蛔蟲卵

空泡化死受精蛔蟲卵

卵細(xì)胞崩解的死受精蛔蟲卵

卵細(xì)胞崩解的死受精蛔蟲卵

第十七頁，共二十四頁，2022年，8月28日死蛔蟲卵形態(tài)卵細(xì)胞不規(guī)則裂開的死受精蛔蟲卵

卵胚變形的死受精蛔蟲卵

內(nèi)含物變形死受精蛔蟲卵

卵殼內(nèi)幼蟲變形的死受精蛔蟲卵

第十八頁，共二十四頁，2022年，8月28日二、染色法鑒別蛔蟲卵死活第十九頁，共二十四頁，2022年，8月28日（一）原理美藍(lán)、伊紅、硼砂染液（簡稱M.E.B）溶于水呈堿性?；钕x卵可以還原堿性染料，降低著色力，不易被染色。死蟲卵不能還原堿性染料，容易著色。蛔蟲卵外層蛋白膜容易被著色，染色前需脫去蛋白膜。第二十頁，共二十四頁，2022年，8月28日（二）步驟1、脫蛋白膜將收集的蛔蟲卵加入30%次氯酸鈉，作用數(shù)分鐘，并經(jīng)常振蕩，再用蒸餾水洗2次，即可脫掉蛋白膜。第二十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日2、染色鏡檢吸取蟲卵沉淀物一滴置于載玻片上，加M.E.B染色液一滴，上覆蓋玻片，靜置3～5分鐘后鏡檢?；蛘撸∠x卵沉淀物1滴放入小試管內(nèi)，加入染色液染30分鐘，再用蒸餾水洗2～3次，吸取沉淀物鏡檢。3、注意：M.E.B的PH值應(yīng)在10左右，不宜太高；脫蛋白膜后，