生化大題及答案

中大歷屆試題+答案生化--遺傳篇30分復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的異同點DNADNA的酶；5”→3”堿基互配不同 復(fù)制 轉(zhuǎn)錄整個基因組 基因組中一局部基因模板 兩股鏈 單鏈原料 4種dNTP 4種NTP配對 A＝T、C≡G A＝T、C≡G、A＝U酶 DNA-pol校讀功能 RNA-pol無校讀功能引物 需要 不需要產(chǎn)物 子代DNA 各種RNA，轉(zhuǎn)錄初始產(chǎn)物是三種RNA前體特點 半保存復(fù)制 不對稱轉(zhuǎn)錄加工修飾 無 有；轉(zhuǎn)錄初始產(chǎn)物→成熟RNA將染色體的目的基因克隆到載體〔如質(zhì)?！尺M展表達，主要過程1、目的基因的獵?。夯瘜W(xué)合成、基因組DNA文庫、cDNA文庫、PCR2DNA而承受的一些DNA分子稱克隆載體，其中插入外源DNA可轉(zhuǎn)錄翻譯成多肽鏈的稱表達載體。常用的載體包括：質(zhì)粒DNA、DNADNA*3、外源基因與載體的連接：粘性末端連接、平端連接、同聚物加尾連接、人工接頭連接4DNA導(dǎo)入受體菌：轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、感染22分DNA序列并說明生物學(xué)功能DNAGC豐富的序列以及蛋白質(zhì)組成。作用：1〕維持染色體的穩(wěn)定性；2〕DNA復(fù)制的完整性。TTGGGG/AACCCCTTAGGG/AATCCC-35TTGACARNA-polσ亞基識別并結(jié)合的位點；-10TATAAT序列-PrinbowATDNARNA-pol發(fā)揮作用，為RNA-polDNA模板結(jié)合的部位。Hogness盒：真核生物轉(zhuǎn)錄起始上游保守序列5’TATA序列2023級五年制生化期末考試大題名詞解釋3分/題：1、HGP2、質(zhì)粒細菌中，獨立于染色體外的雙鏈閉環(huán)DNAbpDNA片段?；蚬こ坛Ｓ幂d體--DNA導(dǎo)入受體細胞，并能自我復(fù)制增至的工具；現(xiàn)常用的質(zhì)粒經(jīng)人工改造，有多種限制酶切點。5、cDNAmRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄，合成的互補cDNAcDNA6DNA二是模板鏈并不總在同一單鏈上。簡答題6分題：1、乳糖操縱子的構(gòu)造和功能。*乳糖操縱子〔Lacoperon〕構(gòu)造I-編碼阻遏蛋白，CAP結(jié)合位點，啟動序列P〔CAPRNA聚合酶結(jié)合位點上游〕和操縱基因O；I基因→阻遏蛋白→O序列→RNApol構(gòu)造基因：β-lacZ\lacY\乙?；D(zhuǎn)移酶-lacA。低乳糖時，lac操縱子處于阻遏狀態(tài)，機制：PI→I→阻遏蛋白→O→RNApol結(jié)合啟動序列P，從而抑制轉(zhuǎn)錄啟動；將染色體的目的基因克隆到載體〔如質(zhì)粒〕進展表達，主要過程1、目的基因的獵?。夯瘜W(xué)合成、基因組DNAcDNAPCR2DNA而承受的一些DNA分子稱克隆載體，其中插入外源DNA可轉(zhuǎn)錄翻譯成多肽鏈的稱表達載體。常用的載體包括：質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA、病毒DNA*3、外源基因與載體的連接：粘性末端連接、平端連接、同聚物加尾連接、人工接頭連接4、重組DNA22列舉三種特別DNA序列并說明生物學(xué)功能端粒：真核生物染色體DNA分子末端特別構(gòu)造，短GC豐富的序列以及蛋白質(zhì)組成。作用：1〕維持染色體的穩(wěn)定性；2〕DNA四膜蟲TTGGGG/AACCCC脊椎動物TTAGGG/AATCCC-35區(qū)TTGACA序列是RNA-pol中σ-10區(qū)有TATAAT-PrinbowATDNARNA-polRNA-polDNAHogness盒：真核生物轉(zhuǎn)錄起始上游保守序列5’TATA2023名詞解釋〔3/題〕：1、HGP2DNAbp外源DNA因工程常用載體--能將外源目的DNA現(xiàn)常用的質(zhì)粒經(jīng)人工改造，有多種限制酶切點。5、cDNA以mRNAcDNA，在復(fù)制成雙鏈cDNA6DNA二是模板鏈并不總在同一單鏈上。簡答題〔6/題〕：1、乳糖操縱子的構(gòu)造和功能。*乳糖操縱子〔Lacoperon〕構(gòu)造掌握區(qū)：調(diào)整基因I-編碼阻遏蛋白，CAP結(jié)合位點，啟動序列P〔CAP結(jié)合位點位于RNA聚合酶結(jié)合位點上游〕和操縱基因O；I→ORNApol構(gòu)造基因：β-半乳糖苷酶基因lacZ\通透酶基因lacY\乙?；D(zhuǎn)移酶-lacA。低乳糖時，lac啟動序列PI→調(diào)整基因I→阻遏蛋白→操縱序列O→阻遏RNApol結(jié)合啟動序列P，從而抑制轉(zhuǎn)錄啟動；4、半保存復(fù)制的試驗證明。N15DNA15NH4Cl的培育基中培育假設(shè)干代后，DNA15N14N-DNA；N15DNA14NH4Cl中培育，分代提取，覺察第一代只位于重帶；其次~5、原核啟動子的特點如何？有什么應(yīng)用？？？？何謂啟動子，原核生物啟動子中有哪些特征序列，作用如何？啟動子：RNADNA序列，是掌握轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵部位。原核生物需σ因子識別轉(zhuǎn)錄起始位點原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控特點：1、σRNA-pol識別特異性。2、操縱子機制在原核基因調(diào)控中具普遍意義。3、特異的阻遏蛋白與阻遏機制具普遍性。CAP正性調(diào)整作用、協(xié)調(diào)調(diào)整〔CAP〕論述題1分題：1DNA重組體的宿主細菌？*重組體篩選和克隆基因的表達/*重組體陽性菌株的篩選DNA分子帶有目的基因的過程稱~直接篩選法：1.藥物抗性檢測；用于細菌,真菌,植物和動物細胞的各種抗生素抗性基因--生素的培育板上形成菌落；2〕標志補救：轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染的外源基因表達產(chǎn)物可彌補基因缺陷,DNARNA雜交法證明：DNA克隆片段進展雜交，直接選擇鑒定。記的基因2DNADNA超螺旋構(gòu)造的EDNA拓撲學(xué)構(gòu)象；兼內(nèi)切酶、連接酶作用DNADNA片段連接，磷酸二酯鍵；條件：13’-末端有游離羥基-OH5’-末端有磷酸基團-P2NAD+ATP3DNA分子作用：復(fù)制終止結(jié)合缺口DNA修復(fù)、重組、剪接縫合缺口基因工程的常用酶DNA-polA。5’-3’聚合磷酸二酯鍵;填補空隙B。5’-3’外切酶切除引物、突變片段C。３`-5`外切酶-校讀**DNA復(fù)制的根本過程1．復(fù)制的起始1〕解旋：DnaABCDnaA蛋白識別、結(jié)合到復(fù)制起始點上。DnaB〔解螺旋酶〕在DnaC幫助下結(jié)合于初步翻開的雙鏈，并且逐步置換出DnaA。2〕復(fù)制叉：拓撲異構(gòu)酶、解旋酶、SSBSSBDNA保持開鏈狀態(tài)。DnaGDnaB、DnaCDNA起始復(fù)制區(qū)，形成引發(fā)體。ATP供給能量。當引發(fā)體到達適當位置，模板的配對序列，引物酶催化NTP聚RNA引物。同時拓撲酶Ⅱ消結(jié)或松弛螺旋。復(fù)制延長DNA：DNADNA5”→3”DNA鏈。⑵引發(fā)體移動：移動，解旋，形成的復(fù)制叉；隨從鏈重合成RNA引物。復(fù)制的終止RNA被水解，填補缺口；⑵連接岡崎片段：DNA連接酶連接岡崎片段；⑶真核生物端粒的形成：線性DNA復(fù)制完成后，其末端由于引物RNA的水解可能縮短。需在端粒酶催化下延長。端粒酶是一種RNA-RNA為模板，通DNA鏈進展延長。104級生化也重復(fù).2、 請列舉三種基因沉默技術(shù).基因沉默：1、指基因組中的基因，由于內(nèi)在遺傳因素或外源基因，而表達降低或完全不表達。2、基因沉默是基因表達調(diào)控的一種重要方式，是生物體的本能反響；生物體在基因調(diào)控水平上，通過基因沉默限制外源核酸入侵；3、基因沉默還與個體生長發(fā)育有關(guān)--通過掌握內(nèi)源基因的表達來調(diào)控生長發(fā)育?；虺聊瑧?yīng)用：1.在基因工程中抑制基因沉默，使外源基因更好表達2.利用基因沉默抑制某3.有選擇地使某些基因沉默，可測知其功能4.通過抑制生物代謝過程中的某個環(huán)節(jié),以獲得特定代謝產(chǎn)物RNA技術(shù)、核酶技術(shù)、三鏈DNA技術(shù)、肽核酸技術(shù)、基因敲除技術(shù)、RNA干擾技術(shù)名詞解釋1.S-D序列〔核蛋白體結(jié)合位點〕原核mRNAAUG上游富含嘌呤-AGGA-序列，可與16SrRNA3’mRNA上定位。外顯子斷裂基因及初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物消滅并表達為成熟RNA的核酸序列KLENOW片段操縱子原核生物一個轉(zhuǎn)錄區(qū)段，轉(zhuǎn)錄單位，包括假設(shè)干個構(gòu)造基因及其上游調(diào)控序列。管家基因(housekeepinggene)在一個生物個體生命全過程所必需，幾乎全部細胞中持續(xù)表達，維持細胞根本生存需要，又稱根本基因表達；其表達只受啟動子、RNApol作用，不受其他機制調(diào)整，無時空特異性。如rRNAtRNA基因、三羧酸循環(huán)酶基因PCR聚合酶鏈反響-polymerasechainreactionDNA序列的方法DntpDNADNA、Mg2+反響過程：變性→復(fù)性/退火→延長引物優(yōu)點：敏感、特異性強、操作簡潔PCR的應(yīng)用：1、目的基因克?。嚎焖俦憷孬@得目的基因2、基因體外誘變：隨便設(shè)計包含突變序列引物，在體外進展基因的嵌合、缺失、點突變等改造3、DNA微量分析：快速敏感地擴增被測試的目的基因，廣泛應(yīng)用于病原微生物基因檢測、遺傳病、癌基因的基因診斷、法醫(yī)學(xué)鑒定、DNA序列分析。*PCR衍生技術(shù)：1PCR--RNA2PCR--3、PCR--參加熒光標記探針，為實時定量蛋白質(zhì)組學(xué)生命現(xiàn)象表達者是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)有自身的特定活動規(guī)律，~是一門從整體水平上爭論細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成、活動規(guī)律的興學(xué)科。簡答題簡述DNA復(fù)制保真機制①嚴格堿基互補配對②復(fù)制過程DNA-pol對堿基的選擇力量③DNA-pol校讀作用〔DNA-pol３`-5`外切酶活性〕簡述基因治療的根本程序向有功能缺陷的細胞，導(dǎo)入安康外源基因，以訂正、補償基因缺陷。廣義：利用基因工程方法，訂正、治療特別基因分類：體細胞~、生殖系統(tǒng)~、增加基因工程、優(yōu)生基因工程方法：修復(fù)、替換、添加、直接基因治療、基因藥物、轉(zhuǎn)基因動物臨床應(yīng)用：腫瘤的~、艾滋病~、遺傳病~；Ⅸ，能有效地用于乙型血友病的治4.簡述白喉毒素的作用機制論述題依據(jù)基因工程技術(shù),如何利用大腸桿菌提取具活性的重組蛋白質(zhì).舉一個例子,RNA和蛋白質(zhì)結(jié)合的酶,論述其構(gòu)造和功能,具有酶活性的RNA；具有錘頭構(gòu)造，四膜蟲rRNA可自我剪接。有催化部份和底物部份，共同組成錘頭構(gòu)造rRNA外，tRNA、mRNA也可自我剪接。*核酶爭論的意義*核酶的覺察是對傳統(tǒng)酶學(xué)的挑戰(zhàn)；*設(shè)計合成人工核酶—RNA—siRNA生化期末名解中心法則基因組學(xué)：對全部基因進展基因組作圖，包括遺傳圖譜、物理圖譜、轉(zhuǎn)錄本圖譜，核苷酸序列分析、基因定位、基因功能分析的學(xué)科38TFⅡD酵母雜交技術(shù)的作用A篩選相互作用的DNA分子BC篩選可能相互作用的蛋白質(zhì)D