二氫楊梅素分離純化的研究進展

二氫楊梅素分離純化的研究進展摘要：二氫楊梅素是黃酮類化合物中重要的一員，具有消炎、止咳、祛疚、鎮(zhèn)痛、抑菌、抗高血壓脂及解乙醇中毒等理作用文將對二氫楊梅素的理化性質(zhì)及其分離純化進行闡述。關(guān)鍵字：二氫楊梅素；理化性質(zhì)；分離；純化TheprogressofdihydromyricetinseparateandpurifyAbstractDihydromyricetinoneoftheimportanthavepharmacologicaleffectsofanti-inflammatory,cough,dispelremorse,analgesic,antibacterial,antihypertensive,Cellulitesolutionethanolpoisoning;Thiswilldihydromyricetinphysicalandchemicalpropertiesanditspurificationdescribed.：·Chemicalproperties··Purification前言二氫楊梅素7374一六羥基3-氫黃酮醇DMY)又名雙氫楊梅樹皮素、福建茶素、蛇葡萄素等，是黃酮類化合物的重要一員。該化合物首次由otake和Kubota于1940從萄科蛇葡萄屬植物福建茶楝葉玉葡萄A.Meliaefolia的中分離到，命名為蛇葡萄素1]。DMY廣存在于松柏類植物和木材中，如松(pinus)和雪松(cedrus)樹中，也存在于木本被子植物，如杜娟花科植物餅砂杜娟(Rhodendron葉連香樹科植物連樹Cercidiphyllum木中種好的抗氧化劑物存在于楊梅科娟科、藤黃科、大戟科等植物中，有抗癌、利膽和抗炎作用。近十年來，隨著黃酮類化合物成為天然植物活性成分的研究熱點后DMY也到人們的重視和關(guān)注，但由于在以上植物中存在含量不高的因素直無法進行規(guī)模的應用和實驗到蛇葡萄科中發(fā)現(xiàn)并提取之后才引起人們極大的關(guān)注和重視。從目前研究情況表明DMY大存在于葡萄科植物中，尤其是在蛇葡萄屬植物中更是大量存在。有研究表明，藤茶幼嫩莖葉中含量達27％％，最高部位可達％以上粵蛇葡萄中幼嫩莖葉中含量可達25以DMY作黃酮類成分中的重要一員，在天然植物中單體含量如此之高，實屬罕見。二氫楊梅素的理化性質(zhì)DMY的分子中含有6個羥基，具有弱酸性，等電點在H=5左，因此其在酸性溶液中構(gòu)型穩(wěn)定中和堿性溶液中酚基易發(fā)生解離其是在強堿性條件下由于酚羥基大量的解離改了分子上的電子云分而使分子發(fā)生了徹底的構(gòu)型轉(zhuǎn)換C環(huán)氧原子處發(fā)生解環(huán)，生成了環(huán)的一個基，變成類似于查爾酮的結(jié)[。1.1、二氫楊梅素良好的熱穩(wěn)性林淑英等4]研發(fā)現(xiàn)在相中的熱穩(wěn)定性與時間關(guān)系密下加熱rain在水中仍能保持穩(wěn)定的構(gòu)型，加熱時間更長以后DMY發(fā)氧化，變成亞醌式結(jié)構(gòu)C環(huán)生斷裂。的DSC穩(wěn)定性分析發(fā)現(xiàn)其熔點為245℃左右。1.2、二氫楊梅素的生理作用5]1.2.1抗菌作用藥理實驗表明，二氫楊梅素對枯草芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門菌、大腸埃希菌、產(chǎn)氣桿菌、啤酒酵母、黏紅酵母、青霉、黑曲霉、黃曲霉、毛霉及根霉均有抑菌作尤其對革蘭陽性、革蘭陰性球菌或桿菌作用明顯。1.2.2對血糖、血脂的調(diào)節(jié)作用小鼠灌胃藥理實驗表明二氫楊梅素能明顯抑制由四氧嘧啶腺素脲霉素等誘導的小

鼠血糖升高，同時升高血清胰島素水,胰組織中淋巴細胞浸潤明顯少、炎癥反應明顯減輕胰數(shù)目明顯增加。二氫楊梅素對鏈脲霉素誘導的高血糖大鼠血三酰甘TG)含量有降低作,對血清總膽固(、密度脂蛋白膽固HDL2C)含無明顯影響。1.2.3護肝作用二氫楊梅素對體外培養(yǎng)的大鼠肝細胞四氯化碳中毒性損傷半糖胺和脂多糖誘的小鼠肝損傷有顯著的保護作用。二氫楊梅素可以保護肝臟，加速乙醇代謝產(chǎn)物乙醛迅速分解，變成無毒物質(zhì)降對肝細胞的害此二楊梅素能夠改善肝細胞損傷引起的血清乳酸脫氫酶活力增加，抑制肝性M細胞膠原纖維的形成，從而起到保肝肝的作用，大幅度降低乙醇對肝臟的損傷，使肝臟正常狀態(tài)迅速得到恢復Microherb試證明，二氫楊梅素可以保護肝臟加乙醇代謝產(chǎn)乙醛迅速分解變成無毒物質(zhì)降對肝細胞的損害。二氫楊梅素起效迅速，并且作用持久，是保肝護肝，解酒醒酒的良品。1.2.4抗氧化作用純度為的氫楊梅素,能顯抑制大鼠心肌組織勻漿中丙二的成并隨二氫楊梅素濃度增加而抑制生的作用增加量99%的氫楊梅素對試驗系統(tǒng)中二苯三硝基苯肼DPPH)自基的清除率二楊梅素能明顯抑制油脂中MDA的成隨氫楊梅素純度%90%)增抗氧化作用增強對物油和植物油均有很強的抗氧化作用。1.2.5抗腫瘤作用近年的抗腫瘤藥效學研究發(fā)現(xiàn)其活性成分之一萄素小分子化合物具有較強的抗癌作用。體外內(nèi)抗腫瘤作用研究發(fā)現(xiàn)該化合物可以通過抑制腫瘤血管生長增強細胞免疫功能等作用達到提高腫瘤治療效果和改善病人生命體癥的目的血病和鼻咽癌等腫瘤模型試驗研究中都顯示有明顯的抑瘤作用。1.3、二氫楊梅素的合成反應分子中的酚羥基還能和一些酸、脂肪酰鹵、糖等反應生成新的化合物，這些性質(zhì)為DMY提供了更廣闊的應用潛力李等6]用月桂酰氯對的基進行酯化成DMY月酸酯。通過對DMY及DMY月酸酯在油中抗氧化性能的比較試驗，證實DMY月酸酯能夠持久、穩(wěn)定地在豬油中發(fā)揮抗氧化作用，而且抗氧化能力比MY還強Matsumo等[7]在驗中發(fā)lixsachalinensis提的對Cladosporium真具極強的抑制作用甲酯的抑菌能力為DMY的4倍正祥8]采黃酮糖酶催化合成了DMY葡萄糖苷。通過對158例尿病患者為期9個的治療發(fā)現(xiàn)DMY葡糖苷能使其血糖代謝基本回歸到正常水平。二氫楊梅素的分離純化方法2.1、吸附法通常利用吸附法除去體系的雜質(zhì)如色素等可以用吸附劑吸附有效成分用吸附劑有氧化鋁、活性炭、多孔樹脂，分子篩等等9]報道了利用萃取吸附技術(shù)從Hoveniadulcis中提取純化的法。將提取液經(jīng)活性粘土P-1吸附過濾，再經(jīng)硅藻土過濾吸附，甲醇洗提，洗液過硅膠柱后乙醚洗提，洗液經(jīng)濃縮蒸發(fā)可得到純度達％的DMY粗品。2.2、結(jié)晶法結(jié)晶法是分離和純化固體成分的重要方法之一用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同來達到分離的方法結(jié)晶時應擇合適的溶劑合適的溫度和時間等結(jié)晶法手所用的度依樣品必須是具有一定純度的樣品才能采用此法純化果粗液部分的純度很差很得到結(jié)晶者晶后的純?nèi)惠^低提出的粗黃酮進行預處理后再進行重結(jié)晶可得到較高純度產(chǎn)品。采用“增溫溶解，保溫過柱，溫水解法顯齒蛇葡萄中提純，此法后再重結(jié)晶的DMY可到較高純度要求。

高建華對齒蛇葡萄黃酮提取物的純及結(jié)晶態(tài)進行了初步探討作結(jié)晶溶劑進行多次重結(jié)晶效去除植物黃酮提取物的雜質(zhì)，總黃酮含量又原來的86％高至96．％DMY在相中的結(jié)晶態(tài)多為針狀結(jié)晶，水相保溫結(jié)晶呈放射性棒狀結(jié)晶。在pH4．的條件下，其溶解度最低可獲得較高的回收率。2.3、大孔樹脂吸附法大孔吸附樹脂具有物化穩(wěn)定性高、比表面積大、吸附選擇性好、不受無機物存在的影響、再生處理方便、吸附解吸條件溫和、使用周期長、節(jié)省費用等優(yōu)點應用于物質(zhì)的分離純化由吸附樹脂理化性質(zhì)不同同型號的樹脂對黃酮的精制效果有較大的差異志科等選用種同型號的樹脂對竹葉黃酮的吸附特性進行比較研究，弱極性的B一8樹脂適宜竹葉黃酮的提取。分離純化枸杞葉總黃酮時用HPDl00型大孔樹脂效果較好。銀杏葉黃酮的分離純化采用一130型脂具有較好的效果樹脂的類型外劑的種類及濃度對純化的效果也具有很大的影響，有研究表明．、．樹脂吸附銀杏葉黃酮后，用80％醇洗脫效果最好，而D一254、．113則95％乙醇洗脫效果最好。2.4、聚酰胺凝膠柱法對分離黃酮類化合物來說酰是較理想的吸附劑吸附強度主要取決于黃酮類化合物分子中羥基的數(shù)目與位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小。柱層析分離黃酮類物質(zhì)樣品容量大效好性極相似的類似物得到分離。苷元相同洗脫先后順序一般是糖苷糖苷苷苷多數(shù)黃酮苷在10％一％的乙醇液中就可以洗脫下來，而苷元在50—％乙醇液中才能洗脫下來。由于純聚酰胺用于柱層析固定相存在濾水性差位質(zhì)量吸附量小有小分子夾帶的問題王怡紅等對聚酰胺柱進行了改進將酰胺涂在硅藻土上，制成的改性聚酰胺柱善濾水性提了單位質(zhì)量聚酰胺的吸附量，消除分夾帶問題。此外王怡紅等通過實驗還得出聚酰胺在該層析柱上的吸附為單分子層吸附的結(jié)論華等用聚酰胺柱層析法從藤茶的乙酸乙酯萃取部位分離得到3個化合物等經(jīng)理化常數(shù)測定和光譜分析定蛇葡萄素楊梅素和楊梅苷。其中楊梅素和楊梅苷是首次從該植物中分[11]。2.5、超臨界萃法超臨界CO2萃作為一種有效的化上分離手段，集精物揮發(fā)度的差異和液一液萃物溶解度的差)特于一體，由于溶劑回收不需要潛熱，因此比傳統(tǒng)的方法能更有效地節(jié)省能量由于超臨界具有氣體和液體之間的性質(zhì)所以提取分離的速度遠比液體溶劑快進行高效分離在酮類化合物的提取黃酮類化合物廣泛存在于植物中，主要存在于蕓香科、唇型科、豆科、傘型科、銀杏科與菌科等。該類化合物不但分布范圍廣，種類多，而且生物活性廣泛，毒性小，因此很多制劑可長期使用，如水飛薊有保肝作用，葛根素有明顯的擴冠作用，已用于臨床。超臨界CO2萃取對于黃酮類化合物是一種非常有效的提取方法，與傳統(tǒng)的溶劑法相比，其流程短，萃取分離一步完成，萃取得率高，而操作時間比傳統(tǒng)方法大大縮短。沈露在用超臨界CO2萃DMY時通過正交實驗確定二氫楊梅素的最佳操作條件:萃取壓力，取溫度為℃，萃取時間為1.5hC02流量控制在20L/h，在該條件萃取得率為，度85.5%[12]。二氫楊梅素的應用二氫楊梅素廣泛應用于治療呼吸道感染、酒精中毒的中成藥制劑，如片劑、膠囊、沖劑。近年的抗腫瘤藥效學研究發(fā)現(xiàn)其活性成分之一，蛇葡萄素小分子化合物具有較強的抗癌作用。二氫楊梅素的研究已在制備抗白血病及鼻咽癌藥物的應用領(lǐng)域取得了發(fā)明專利授權(quán)為一類新藥準備進入臨床試驗階段藥新藥蛇葡萄素注射液的開發(fā)有望為廣大的白血病咽癌患者提供一種新的治療藥物。Microherb完成了藤茶提?。@齒蛇萄總黃酮和氫楊梅素提取及其純化技術(shù)，且完成了相關(guān)的毒理性實驗和功效研究并二氫楊梅素為功

效添加成分研制了的速溶茶齒蛇葡萄總黃酮含片氫楊梅素解酒保肝膠囊等保健食品[13]。參考文獻：[1]周天達雪藤茶中雙氫黃酮醇的分離構(gòu)定及其藥理活J]國藥學雜學，，1(8)：[2]張友勝，林淑英．高速逆流色譜法純化二氫楊梅[J]．然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003b15(5)：[3]郭清泉，林淑英，李大光，等．二氫楊梅素抗氧機制探討．食品科學，2006b(5)：121-123[4]林淑英友勝然氧化劑二氫楊梅素的熱穩(wěn)性及抗氧化性質(zhì)研代工，，：[5]ChemicalcomponentsofAmpelopsis．[6]李衛(wèi)，鄭成月酰酯在豬油中的抗氧化性研食科學200526(9)73-75[7]Matsumo，．Ampelopsin,amajorantitungalconstituentfromSalixsachalinensismethylJpnSocBiosciBiotechn．667[8]寧正祥宇氫梅素葡萄糖苷的合成及對糖尿病