薄層色譜法內(nèi)容

文件編號(hào)薄層色譜法頒發(fā)部門(mén)XXXXXXX/X總頁(yè)數(shù)執(zhí)行日期編制者審核者批準(zhǔn)者編制日期審核日期批準(zhǔn)日期目的：建立薄層色譜法的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。范圍：QC化驗(yàn)室。責(zé)任：QC化驗(yàn)員。內(nèi)容：本程序適用于各種藥品的鑒別、限度檢查和含量測(cè)定。4.1定義與原則：4.1.l吸附或載體（固體相）涂布在玻璃板或塑料板上，使成為一均勻薄層，以適當(dāng)溶劑系統(tǒng)為流動(dòng)相（展開(kāi)劑），依靠毛細(xì)管作用，使展開(kāi)劑從點(diǎn)有試樣的薄層板一端自然展開(kāi)一定距離。利用試樣各組分在固定相和流動(dòng)相之間反復(fù)吸附、分配、平衡的過(guò)程達(dá)到分離的目的。4.1.2除另有規(guī)定者外，應(yīng)按《中國(guó)藥典（1995年版）》附錄要求測(cè)定。4.1.3各樣品均應(yīng)與對(duì)照物質(zhì)同時(shí)對(duì)照測(cè)定。4.1.4含量測(cè)定試驗(yàn)，應(yīng)嚴(yán)格定量操作。4.1.5各樣品的層析流動(dòng)相、顯色劑定于中國(guó)藥典各品種或有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下。4.2儀器與材料4.2.1玻板：供涂布薄層用。要求清潔、光滑、平整、按測(cè)定要求選擇大小適宜的玻板。4.2.2吸附劑或載體：硅膠（G：含石膏；H：無(wú)粘合劑；F：254、365nm波長(zhǎng)處激發(fā)生成螢光物質(zhì)）、氧化鋁（分中、酸、堿性）、硅藻土等。4.2.3粘合劑：煅石膏（10-15%），羥甲基纖維素（CMC-Na）水溶液（0.5-1.0%）或2.0%貯備液。4.2.4涂布器：應(yīng)能使吸附劑或載體在玻璃板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。4.2.5點(diǎn)樣器：微量注射器或定量毛細(xì)管。4.2.6展開(kāi)室：底平、雙槽、封密的玻璃缸或合適的玻璃標(biāo)本缸。4.3操作方法：4.3.1薄層制備：除另有規(guī)定外，將一份吸附劑和三份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.2-0.3mm），制得的薄層板置水平臺(tái)上，于室溫下晾干，在110℃烘30分鐘，即置干燥器中備用。亦可使用前活化。4.3.2點(diǎn)樣：供試品和對(duì)照品以適當(dāng)溶劑配制成一定濃度的溶液，用微量注射器或毛細(xì)管吸取一定體積溶液定量點(diǎn)于薄層板上。供試品溶液以分次點(diǎn)加，每次點(diǎn)加后，待其自然干燥，低溫烘干或經(jīng)濕熱氣流吹干。點(diǎn)樣直徑一般為2-4mm，通常為圓點(diǎn)。條形點(diǎn)樣寬約3mm，長(zhǎng)1-10cm不等，點(diǎn)樣基線(xiàn)距底為2.0cm，點(diǎn)樣間距為1.5-2.0cm。4.3.3展開(kāi)：按規(guī)定比例配制展開(kāi)劑，展開(kāi)室如需預(yù)先用展開(kāi)劑飽和，可在室中加入足夠量的展開(kāi)劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端侵入展開(kāi)劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按有關(guān)規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品薄層板放入展開(kāi)室的展開(kāi)劑中，浸入展開(kāi)劑的深度為距離層板底邊0.5-1.0cm（切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中），密封室蓋，待展開(kāi)至規(guī)定距離（一般為7-15cm）取出薄層板，晾干，按該品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。4.4檢測(cè)、記錄與報(bào)告4.4.1檢測(cè)：按該品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)。有顏色或螢光的色譜斑點(diǎn)直接在日光或紫外光燈下檢視，無(wú)色的薄層譜板可噴以各種適當(dāng)顯色劑顯色，或以試劑蒸汽熏后觀察或在薄層色譜中用加有熒光物質(zhì)的薄層硅膠，采用熒光熄滅法檢視。鑒別、限度檢查可比較供試品和對(duì)照品的主斑點(diǎn)RT值，面積及顏色強(qiáng)度。含量測(cè)定將主斑點(diǎn)洗脫后用適當(dāng)方法測(cè)定，或直接用薄層掃描儀在薄層板上掃描測(cè)定。4.4.2記錄：按薄層色譜法原始記錄要求逐項(xiàng)記錄。4.4.3報(bào)告：對(duì)外出報(bào)告時(shí)采用下列形式：鑒別符合規(guī)定（指單一成分或多種成分）供試品